不同底質(zhì)環(huán)境對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺生長、殼色及抗氧化性能的影響

梁 晶，於 鋒,2，劉子嶺，臧 戰(zhàn)，VASQUEZ Hebert Ely,2，唐賢明，邢詒炫，鄭 興,2，顧志峰,2

1.海南大學(xué) 海洋學(xué)院，海南 ?？?570228

2.海南大學(xué) 三亞南繁研究院，海南 三亞 572000

3.海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院，海南 海口 571126

方斑東風(fēng)螺 (Babyloniaareolata)，隸屬于軟體動(dòng)物門、腹足綱、新腹足目、蛾螺科、東風(fēng)螺屬，是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的淺海底棲貝類，主要分布于東南亞、日本以及我國東南沿海地區(qū)[1-3]。方斑東風(fēng)螺因貝殼上具有漂亮的方形斑紋又被稱為“花螺”，其味道鮮甜、肉質(zhì)緊實(shí)有嚼勁，被譽(yù)為21世紀(jì)最具開發(fā)前景的養(yǎng)殖良種之一[4-5]。近年來，東風(fēng)螺養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，養(yǎng)殖規(guī)模進(jìn)一步擴(kuò)大[6]。隨著人們生活水平的不斷提高，在追求產(chǎn)量的同時(shí)，對(duì)螺的品質(zhì)和外觀也提出了更高的要求，清晰而明艷的方形斑紋更受消費(fèi)者青睞。

在水產(chǎn)動(dòng)物健康養(yǎng)殖過程中，為水產(chǎn)動(dòng)物提供適宜的棲息環(huán)境，不僅可以減少環(huán)境應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)提高養(yǎng)殖成活率、增加養(yǎng)殖效益也具有重要意義[7]。環(huán)境與生物是相互適應(yīng)的，底質(zhì)類型往往對(duì)潛沙型生物的生長、存活和生理狀態(tài)產(chǎn)生更強(qiáng)的影響[8]。已有研究表明，雙殼貝類Mysellavitrea、Telline deltoidalis和Timocleascabra在砂質(zhì)環(huán)境中的生長情況更好[9-10]；管角螺 (HemifusustubaGemlin) 在泥沙質(zhì)或無底質(zhì)環(huán)境中的生長率較高，而在沙質(zhì)中較差[11]；縊蟶 (Sinonovaculaconstricta) 稚貝在砂或摻有貝殼的泥質(zhì)砂中的成活率較高[12]；青蛤 (Cyclinasinensis) 在泥沙質(zhì)中生長較好[13]。而對(duì)于水泥池養(yǎng)殖的東風(fēng)螺，相較于無砂環(huán)境，鋪砂更利于其存活，且底質(zhì)中含泥量在10%以內(nèi)對(duì)東風(fēng)螺無顯著影響[14]。除了不同的底質(zhì)材質(zhì)，水環(huán)境的顏色對(duì)水生生物生長也有顯著影響。三疣梭子蟹 (Portunustrituberculatus) 在紅色或黃色環(huán)境下，成活率較高，生長較快[15]；而河鱸(Percafluviatilis) 則是在淺色環(huán)境下生長較快[16]；紅螯螯蝦 (Cherax quadricarinatus) 在人工調(diào)配的藍(lán)色水體中，成活率較高，生長較快，體色有較高的觀賞價(jià)值[17]?？梢?，底質(zhì)環(huán)境對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的影響是多方面的[18-19]，可以通過改變養(yǎng)殖底質(zhì)環(huán)境達(dá)到促進(jìn)生長和改善外觀的目的。

當(dāng)前方斑東風(fēng)螺的養(yǎng)殖底質(zhì)多為砂礫[3]，在養(yǎng)殖過程中需要經(jīng)常洗砂和換砂，不僅導(dǎo)致生產(chǎn)效率低下，還增加了養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。陶粒為目前工廠化養(yǎng)殖的常用人工材料，由陶土燒制而成，具有質(zhì)量輕、多氣孔、比表面積及孔隙率大、含氧量高、可培育硝化細(xì)菌等特點(diǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景[20-22]。本文以河砂為對(duì)照組，選擇4 種不同顏色的陶粒底質(zhì)(棕色、黑色、黃色和白色) 開展為期30 d 的養(yǎng)殖對(duì)比實(shí)驗(yàn)，研究不同底質(zhì)類型及顏色對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺生長、殼色及抗氧化能力的影響，探討其較適宜的養(yǎng)殖底質(zhì)，以期篩選出傳統(tǒng)河砂的替代物，為新型工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖模式探索、東風(fēng)螺健康養(yǎng)殖和殼色調(diào)控提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)于2022 年1—2 月在海南省瓊海市海洋與漁業(yè)科學(xué)院科研基地進(jìn)行，方斑東風(fēng)螺稚螺由海南省文昌市坤田水產(chǎn)有限公司提供，在養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)7 d 后，選取大小均勻、潛沙正常、活力較好的稚螺作為實(shí)驗(yàn)材料，其平均殼高、殼寬和體質(zhì)量分別為 (10.40 ± 0.39) mm、(6.90±0.27) mm 和 (0.231±0.020) g。

河砂購自淘寶城固山貨特產(chǎn)店，棕色、黑色、黃色、白色陶粒均購自淘寶靈壽縣磊誠礦產(chǎn)品加工廠，粒徑均為1 mm。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與養(yǎng)殖管理

實(shí)驗(yàn)設(shè)置河砂、棕色陶粒、黑色陶粒、黃色陶粒、白色陶粒共5 個(gè)實(shí)驗(yàn)組，各實(shí)驗(yàn)組分別設(shè)置3 個(gè)平行組，每個(gè)平行組放置100 粒實(shí)驗(yàn)稚螺，底質(zhì)厚度控制為2.5 cm，實(shí)驗(yàn)周期為30 d。

實(shí)驗(yàn)采用微流水養(yǎng)殖系統(tǒng)[23]，使用經(jīng)沉淀、沙濾及濾袋過濾后的新鮮海水 (鹽度29‰)，控制水位高度30 cm，水溫在 (24.3±1.6) ℃，鹽度穩(wěn)定在29‰，pH 介于8～8.1，養(yǎng)殖系統(tǒng)24 h 連續(xù)充氧并保證水體溶解氧質(zhì)量濃度＞7.0 mg·L-1，每個(gè)處理組養(yǎng)殖水體的面積為0.48 m2，流速為70 L·h-1。每天早上 (8:00) 投喂剪碎的新鮮牡蠣肉，日投喂量為體質(zhì)量的25%，每天投喂1 次。

1.3 樣品的采集與處理

1.3.1 動(dòng)物組織樣品處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從每個(gè)處理組3 個(gè)重復(fù)中各取15 粒螺，稱量后去殼取完整軟體組織，混合后按質(zhì)量 (g)∶體積 (mL) 為 1∶9 加入生理鹽水，機(jī)械勻漿，3 000 r·min-1離心10 min，取上清液于-80℃冰箱儲(chǔ)藏，用于后續(xù)抗氧化酶活性測定。

1.3.2 底質(zhì)樣品處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，在每個(gè)處理組3 個(gè)重復(fù)中各稱取新鮮底質(zhì)10 g (精確至0.1 g)，混合后放入三角瓶中，加入100 mL 2 mol· L-1氯化鉀 (KCl) 溶液，放入搖床常溫下振蕩30 min，立即過濾至水樣瓶中用于底質(zhì)氨氮 (NH+4-N) 含量的測定。每組3 個(gè)重復(fù)中各稱取新鮮底質(zhì)10 g，混合后放入三角瓶中，加入0.1 g 硫酸鈣 (CaSO4) 和50 mL 水，放入搖床常溫下振蕩10 min，靜置5 min 后，上清液過濾用于底砂亞硝酸鹽 (NO-2-N) 含量的測定。

1.4 檢測指標(biāo)與計(jì)算

1.4.1 底質(zhì)指標(biāo)的檢測

對(duì)底質(zhì)樣品進(jìn)行 NH+4-N 和 NO2--N 含量分析(SmartChem-140 化學(xué)分析儀)。NH4+-N 和 NO2--N的測定分別采用靛酚藍(lán)法和重氮耦合法。

1.4.2 生長指標(biāo)及成活率

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)處理組的3 個(gè)重復(fù)各隨機(jī)挑選30 粒螺用于生長指標(biāo)的測定。使用游標(biāo)卡尺對(duì)樣品進(jìn)行殼高 (SH) 和殼寬 (SW) 的測量 (圖1)，用分析天平進(jìn)行體質(zhì)量的稱量。

圖1 方斑東風(fēng)螺外殼形態(tài)指標(biāo)測量模式圖Fig.1 Measurement of shell morphology indicators of juvenile B.areolata

成活率按下列公式計(jì)算：

式中：Rs為成活率(%)；N1和Nt分別為實(shí)驗(yàn)開始時(shí)和結(jié)束后的成活個(gè)數(shù)。

1.4.3 外殼顏色指標(biāo)檢測

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，在每個(gè)處理組3 個(gè)重復(fù)中各挑選30 粒螺進(jìn)行拍照，用于后期殼色分析。殼色測定采用圖片分析法[17]，在攝影箱 (22 cm×22 cm×22 cm) 上方8 cm 處對(duì)稚螺進(jìn)行拍攝，隨后采用Adobe Photoshop CS3 軟件測量不同實(shí)驗(yàn)組稚螺整個(gè)殼部的CIE (1976)-Lab表色系參數(shù)。顏色參數(shù)換算公式如下：

式中：L、a、b是通過Adobe Photoshop CS3 軟件獲得的圖片顏色參數(shù)直接數(shù)值。L*代表明度；a*表示紅度，表示從綠到紅的變化，數(shù)值介于-120～120；b*代表黃度，表示從藍(lán)到黃的變化，數(shù)值介于-120～120。

1.4.4 組織抗氧化能力及膜脂過氧化物含量的檢測

采用南京建成生物科技有限公司的生化試劑盒進(jìn)行總抗氧化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶 (CAT) 活性及丙二醛 (MDA)含量的測定，操作方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差 ()”表示，所有數(shù)據(jù)采用DPS 14.5 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用單因素方差分析 (One-way ANOVA) 對(duì)各實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),利用Turkey 法進(jìn)行多重比較，以0.05 為顯著性閾值。

2 結(jié)果

2.1 不同底質(zhì)的氨氮和亞硝酸鹽含量分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，不同底質(zhì)下的NH4+-N 和NO2--N質(zhì)量濃度存在差異 (圖2)。黃色和白色陶粒組的NH4+-N、NO2--N 質(zhì)量濃度分別為 (0.234±0.008)、(0.029±0.000) mg·L-1和 (0.225±0.014)、(0.029±0.001) mg·L-1，均顯著低于其他實(shí)驗(yàn)組 (P＜0.05)；河砂組中NH+4-N 質(zhì)量濃度最高 [(0.382±0.010)mg·L-1]，顯著高于4 種顏色的陶粒組 (P＜0.05)；黃色和白色陶粒組間無顯著性差異 (P＞0.05)。

圖2 不同底質(zhì)中氨氮和亞硝酸鹽質(zhì)量濃度注：不同字母代表不同養(yǎng)殖底質(zhì)各實(shí)驗(yàn)組之間存在顯著性差異 (P＜0.05)，下同。Fig.2 Mass concentrations of NH4+-N and NO2--N in different substrate groupsNote: Different letters indicate significant differences among different groups (P＜0.05).The same below.

2.2 不同底質(zhì)環(huán)境下的成活率

不同底質(zhì)環(huán)境顯著影響方斑東風(fēng)螺稚螺的成活率 (圖3，P＜0.05)。黃色和白色陶粒組稚螺的成活率顯著低于河砂組、棕色和黑色陶粒組 (P＜0.05)，而棕色和黑色陶粒組稚螺的成活率顯著高于河砂組(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，棕色陶粒組的成活率最高[(62.00±2.00)%]，白色陶粒組最低 [(42.50±3.00)%]，且各實(shí)驗(yàn)組的成活率均小于65%。

圖3 不同底質(zhì)養(yǎng)殖的方斑東風(fēng)螺稚螺成活率Fig.3 Survival rate of juvenile B.areolata in different substrate groups

2.3 不同底質(zhì)環(huán)境下的生長情況

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的推移，養(yǎng)殖在不同底質(zhì)環(huán)境中的稚螺在殼高、殼寬、體質(zhì)量等生長指標(biāo)上表現(xiàn)出差異 (圖4)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，河砂組稚螺的殼高、殼寬、體質(zhì)量分別為 (14.22±0.03) mm、(9.37±0.04)mm、(0.541±0.022) g，顯著高于黑色、黃色和白色陶粒組 (P＜0.05)，但與棕色陶粒組之間無顯著性差異 (P＞0.05)；白色陶粒組稚螺平均體質(zhì)量最小，僅(0.427±0.024) g。

圖4 不同底質(zhì)養(yǎng)殖的方斑東風(fēng)螺稚螺生長差異Fig.4 Growth differences of juvenile B.areolata in different substrate groups

2.4 不同底質(zhì)環(huán)境下的殼色分析

不同底質(zhì)環(huán)境會(huì)顯著影響方斑東風(fēng)螺稚螺的殼色 (圖5)。各實(shí)驗(yàn)組稚螺殼的L*、a*和b*具有一致的規(guī)律性；棕色陶粒組的L*、a*、b*最高，分別為45.86±0.11、7.38±0.12、26.53±0.01，顯著高于其他組 (P＜0.05)；黑色陶粒組方斑東風(fēng)螺的L*、a*、b*次之，分別為43.67±0.32、7.09±0.06、24.35±0.3 2，顯著高于河砂組、黃色和白色陶粒組(P＜0.05)；而河砂組、黃色和白色陶粒組的L*、a*、b*無顯著性差異 (P＞0.05)。

圖5 不同底質(zhì)養(yǎng)殖的方斑東風(fēng)螺稚螺貝殼的明度、紅度和黃度Fig.5 Lightness,redness and yellowness of juvenile B.areolata in different substrate groups

2.5 抗氧化酶活性和膜脂過氧化物含量分析

不同底質(zhì)環(huán)境下稚螺抗氧化酶活性和膜脂過氧化物含量見圖6。各組間稚螺的總抗氧能力存在顯著性差異(圖6-a，P＜0.05)，由高到低分別為：棕色陶粒組[(0.297±0.009) mmol·g-1]＞黑色陶粒組[(0.246±0.004) mmol·g-1]＞河砂組[(0.220±0.007)mmol·g-1]＞黃色陶粒組[(0.168±0.004) mmol·g-1]＞白色陶粒組 [(0.141±0.002) mmol·g-1]。

對(duì)CAT 活性的影響見圖6-b，白色陶粒組稚螺的CAT 活性為 (30.864±0.623) U·mg-1，顯著高于其他實(shí)驗(yàn)組；黃色陶粒組次之，顯著高于另外3 組；棕色陶粒組稚螺的CAT 活性最低 [(12.614±0.378)U·mg-1]，顯著低于其他組 (P＜0.05)。

黃色和白色陶粒組稚螺的SOD 活性顯著高于其他實(shí)驗(yàn)組 (P＜0.05)，其中河砂組的SOD 活性最低 [(7.008±0.817) U·mg-1，圖6-c]。

方斑東風(fēng)螺稚螺膜脂過氧化物含量受底質(zhì)環(huán)境影響顯著 (圖6-d)，黃色和白色陶粒組稚螺MDA 質(zhì)量摩爾濃度分別為 (1.539±0.045) 和 (1.580±0.015) nmol·mg-1，顯著高于其他3 組 (P＜0.05)。

3 討論

3.1 底質(zhì)對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的影響

在養(yǎng)殖過程中，底質(zhì)不僅是底棲貝類的棲息場所，還承擔(dān)了大部分營養(yǎng)物質(zhì)和有機(jī)物的沉積。餌料殘?jiān)⑴判刮镆约皠?dòng)物尸體傾向于在底部聚集。當(dāng)沉積物超出了底質(zhì)自身的承載量，這些有毒物質(zhì)會(huì)被釋放到養(yǎng)殖水體中，間接對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物造成影響[24]。在水體中，NH4+-N 以NH4+和NH3的形式存在，NH3可直接進(jìn)入細(xì)胞膜，破壞膜結(jié)構(gòu)、影響蛋白質(zhì)代謝，甚至造成DNA 損傷[25]。在養(yǎng)殖水體和底質(zhì)中，NH4+-N 與NO2--N 是微生物利用含氮有機(jī)物進(jìn)行硝化作用過程中產(chǎn)生的重要中間產(chǎn)物，其含量可作為判斷養(yǎng)殖環(huán)境好壞的重要指標(biāo)[26]。本研究發(fā)現(xiàn)，不同底質(zhì)環(huán)境中NH4+-N 和NO2--N 的含量存在差異，河砂組中NH4+-N 含量高，陶粒組中NH4+-N 含量低。這可能與陶粒多孔、比表面積大的結(jié)構(gòu)有關(guān)[27]，有利于硝化細(xì)菌的繁殖，且陶粒間空隙較大有利于底質(zhì)中的水體流動(dòng)、物質(zhì)交換。已有研究表明，陶粒能有效去除NH4+-N，去除率高達(dá)80%[28]。本實(shí)驗(yàn)棕色陶粒組的NO2--N 含量與河砂組無顯著性差異，黃色和白色陶粒組NH4+-N含量較低，這可能與底質(zhì)顏色影響?zhàn)B殖生物有關(guān)。在黃色和白色陶粒環(huán)境下，淺色或更透亮的環(huán)境使稚螺受到較強(qiáng)的環(huán)境脅迫，攝食減少，排泄量降低，從而導(dǎo)致NH4+-N 含量低。且在實(shí)驗(yàn)后期黃色和白色陶粒組稚螺成活個(gè)數(shù)較少，通過流水可以充分地將殘餌與糞便排出養(yǎng)殖系統(tǒng)。Abed 和Zeng[29]研究表明深色背景能夠明顯促進(jìn)生物攝食，減輕生理壓力，而淺色背景下 (白色) 鋸緣青蟹 (Scyllaserrata) 的成活率最低。

3.2 底質(zhì)對(duì)方斑東風(fēng)螺存活與生長的影響

方斑東風(fēng)螺具有潛埋習(xí)性，對(duì)底質(zhì)類型有一定要求，且長時(shí)間生活在底質(zhì)中，受底質(zhì)環(huán)境的影響久。而底質(zhì)作為一種外界環(huán)境，與溫度、鹽度、溶解氧共同影響著水生生物的生長發(fā)育、基因表達(dá)、能量積累、物質(zhì)代謝等各個(gè)方面，甚至威脅其生存[30-32]。一般而言，生物長期接受某種 (類) 不適刺激會(huì)導(dǎo)致其消耗大量能量用于抵御外界脅迫、維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)和機(jī)體組織損傷修復(fù)，進(jìn)而影響其生長[33-34]。在水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖過程中，為其提供適宜的棲息環(huán)境，有利于減少其因不適刺激而引起的能量消耗，從而促進(jìn)其健康生長。本研究發(fā)現(xiàn)，不合適的底質(zhì)不僅會(huì)加速方斑東風(fēng)螺稚螺的死亡速率，同時(shí)也會(huì)降低存活個(gè)體的生長性能。在本實(shí)驗(yàn)條件下，棕色陶粒和河砂更利于方斑東風(fēng)螺的成活與生長，而白色陶粒組生長最慢，成活率最低。究其原因可能是由于方斑東風(fēng)螺為海洋底棲生物，淺色(黃色和白色) 陶粒底質(zhì)與東風(fēng)螺自然棲息環(huán)境相差大，造成了較強(qiáng)的環(huán)境脅迫，使得稚螺處于應(yīng)激狀態(tài)，這可從淺色陶粒組的T-AOC 較低，CAT、SOD、MDA 較高得到證實(shí)。而這種對(duì)淺色陶粒底質(zhì)環(huán)境的不適應(yīng)使得稚螺長期處于應(yīng)激狀態(tài)，將更多的能量用于抵御外界的環(huán)境應(yīng)激，導(dǎo)致其生長緩慢。而持續(xù)的脅迫使能量的重分配失衡[34]，最終導(dǎo)致死亡，造成白色陶粒組的死亡率高。已有研究也得出相似結(jié)果，如底質(zhì)環(huán)境較符合原來的生境時(shí)，利于管角螺生長[35]；在黑色和紅色背景環(huán)境下，紅鰲螯蝦成活率最高[36]。腹足類軟體動(dòng)物由于運(yùn)動(dòng)能力較差，日間通常埋棲于海底或躲藏于礁石中，避免被捕獲[37-40]，當(dāng)養(yǎng)殖環(huán)境與其自然棲息地的環(huán)境差異較大時(shí)，其生理會(huì)受到較大影響，所以在養(yǎng)殖過程中應(yīng)注意底質(zhì)環(huán)境對(duì)方斑東風(fēng)螺的影響。此外，本實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)方斑東風(fēng)螺稚螺的成活率總體不高，主要由于實(shí)驗(yàn)在冬季進(jìn)行 (1—2 月)，溫度相對(duì)較低 [(24.3±1.6) ℃]，導(dǎo)致成活率普遍不高，這與生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)相符。方斑東風(fēng)螺為熱帶種，劉永等[41]研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)水溫超過26 ℃時(shí)，方斑東風(fēng)螺的活力好、攝食快且攝食量大，生長速度也較快；當(dāng)水溫在24 ℃左右時(shí)，其攝食能力下降，活力也相對(duì)減弱，隨著溫度的下降，部分稚螺出現(xiàn)死亡。溫度會(huì)影響生物的生長、存活、免疫、代謝等多個(gè)方面[32,34]。因此，在方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖過程中底質(zhì)與水質(zhì)環(huán)境都應(yīng)得到重視。

3.3 底質(zhì)對(duì)方斑東風(fēng)螺外觀的影響

外觀與色澤作為重要的經(jīng)濟(jì)性狀，是影響消費(fèi)者購買經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的重要評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)之一[42-44]。漂亮的外觀不僅給消費(fèi)者帶來視覺享受，還能顯著提高其市場價(jià)值。貝類的殼色受遺傳與環(huán)境調(diào)控，相較于生長發(fā)育、營養(yǎng)成分的影響，殼色變化與環(huán)境的關(guān)系更為緊密[45]。而L*、a*、b*作為評(píng)價(jià)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物色澤最直觀的重要指標(biāo)，在水產(chǎn)動(dòng)物的體色研究中得到廣泛應(yīng)用[46]，如紅螯螯蝦[17]，錦鯉 (Cyprinus carpio)[47]等。本研究利用L*、a*、b*對(duì)不同底質(zhì)條件下的殼色進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)棕色陶粒組養(yǎng)殖的稚螺貝殼更加鮮亮，其L*、a*、b*均顯著高于其他實(shí)驗(yàn)組。同時(shí)深色組 (河砂組、棕色和黑色陶粒組)相較于淺色組，稚螺殼上斑點(diǎn)的顏色更深、更明顯。這可能是在不同環(huán)境下，生物體傾向于選擇與環(huán)境更相近的體色，從而在多變的環(huán)境下保存自己。Manriquez 等[48]研究發(fā)現(xiàn)智利鮑 (Concholepasconcholepas) 的殼色會(huì)隨著個(gè)體生長不斷趨同于周圍環(huán)境的顏色；Siegenthaler 等[19]發(fā)現(xiàn)褐蝦(Crangoncrangon) 能夠通過快速改變體色以適應(yīng)周圍環(huán)境；Stevens 等[49]研究指出角眼沙蟹 (Ocypode ceratophthalmus) 會(huì)根據(jù)每天色彩的變化節(jié)奏來調(diào)整在沙灘上的偽裝。同樣，在方斑東風(fēng)螺的養(yǎng)殖過程中，可以通過改變底質(zhì)顏色來培育特定殼色，以提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

3.4 不同底質(zhì)對(duì)方斑東風(fēng)螺抗氧化性能的影響

T-AOC 是機(jī)體內(nèi)抗氧化能力的總體體現(xiàn)[50]，是酶促和非酶促因子抗氧化能力的總合。本研究發(fā)現(xiàn)棕色陶粒組的T-AOC 最高，表明在該養(yǎng)殖環(huán)境下稚螺具有更強(qiáng)的抗氧化能力。而CAT、SOD 是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，CAT 和SOD 的協(xié)同作用可維持自由基的動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)而減少機(jī)體的氧化損傷[51]。SOD 活性間接反映了機(jī)體清除活性氧自由基的能力，它能夠讓活性氧發(fā)生歧化，生成過氧化氫 (H2O2) 和氧氣 (O2)[52]，而CAT 能催化H2O2生成水 (H2O)和O2。因此CAT、SOD 活性的變化在一定程度上能反映出機(jī)體在環(huán)境脅迫下抗氧化系統(tǒng)的變化[53]。本研究中，棕色陶粒組的CAT、SOD較低，表明在該養(yǎng)殖環(huán)境中東風(fēng)螺的應(yīng)激反應(yīng)較小。MDA 是脂質(zhì)過氧化物分解后的重要產(chǎn)物，是研究脂質(zhì)過氧化作用的重要生物標(biāo)志物，也可間接反映細(xì)胞的受損程度，其測定常與SOD 和CAT 測定配合使用[54]。MDA 的檢測結(jié)果同樣顯示棕色陶粒組的水平較低，細(xì)胞受損程度較小，進(jìn)一步證實(shí)該養(yǎng)殖環(huán)境對(duì)東風(fēng)螺稚螺的影響較小。而淺色陶粒的底質(zhì)環(huán)境中，T-AOC 較低，CAT、SOD、MDA較高，均表明稚螺處于較強(qiáng)的應(yīng)激狀態(tài)。其原因可能是背景色對(duì)養(yǎng)殖生物的生理水平產(chǎn)生了影響，相似的結(jié)果在其他生物中也有發(fā)現(xiàn)，如紅鰲螯蝦在黑色環(huán)境下具有較高的生長速度和成活率[55]；擬穴青蟹 (S.paramamosain) 在紅色環(huán)境下產(chǎn)生更強(qiáng)的氧化應(yīng)激[56]；牙鲆 (Paralichthysolivaceus) 在較亮的環(huán)境中皮質(zhì)醇含量增加[57]。

4 結(jié)論

本研究通過對(duì)不同底質(zhì)條件下的底質(zhì)環(huán)境指標(biāo)、生長成活情況、殼色變化、抗氧化能力以及氧化損傷程度的檢測，發(fā)現(xiàn)不同底質(zhì)類型和顏色可顯著影響方斑東風(fēng)螺稚螺的生長、殼色及抗氧化能力。在以棕色陶粒為底質(zhì)的養(yǎng)殖條件下稚螺的成活率最高，生長速度較快，殼色更為艷麗，底質(zhì)NH4+-N含量較低，總抗氧化能力最高，氧化損傷較低。可見，在生產(chǎn)中選擇棕色陶粒作為方斑東風(fēng)螺稚螺養(yǎng)殖底質(zhì)替代河砂，具有廣泛的應(yīng)用前景。