補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲壽命及生殖能力的影響

張方平，朱俊洪，陳俊諭，王建赟，李 磊,5，韓冬銀，葉政培，符悅冠*

（1.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所，?？?571101；2.海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院，?？?570228；3.海南省熱帶作物病蟲害生物防治工程技術(shù)研究中心，?？?571101；4.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571101；5.海南省熱帶農(nóng)業(yè)有害生物監(jiān)測(cè)與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571101）

橡副珠蠟蚧Parasaissetianigra是2004 年以來(lái)在橡膠樹上大面積暴發(fā)成災(zāi)的一種重要害蟲，已對(duì)我國(guó)天然橡膠產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重影響[1]。副珠蠟蚧闊柄跳小蜂Metaphycusparasaissetiae是一種內(nèi)寄生于橡副珠蠟蚧成蟲的本土優(yōu)勢(shì)天敵，并對(duì)其具有較大的控制潛能[2]。該蜂為卵育型寄生蜂，剛羽化時(shí)其卵巢內(nèi)僅有少量的成熟卵[3]。

卵育型的寄生蜂需在成蟲期補(bǔ)充一定的氮、碳水化合物、脂類物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)繼續(xù)完成卵的發(fā)育及寄生等活動(dòng)[4,5]。如Gelisagilis、潛蠅姬小蜂Diglyphusisaea等寄生蜂需取食寄主或其他糖類來(lái)完成卵的發(fā)育[6,7]；提供補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)給Macrocentmsgrandii、Microplitiscrocepes等寄生蜂的成蜂，能使其延長(zhǎng)壽命、增強(qiáng)活力，有更多的時(shí)間和能量來(lái)進(jìn)行寄生活動(dòng)[8,9]。

補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的影響方面僅見(jiàn)溫麗娜[3]報(bào)道蜂蜜水能顯著延長(zhǎng)其壽命。由于寄生蜂在自然界的營(yíng)養(yǎng)包括了寄主昆蟲及花蜜、蜂蜜等富糖物質(zhì)[10]，不同來(lái)源的糖分在組份、濃度、結(jié)構(gòu)及功能上存在差異，寄生蜂取食后其繁殖能力、成蟲壽命及對(duì)后代的發(fā)育和繁殖會(huì)有所差異[10-12]。鑒于目前已有報(bào)道尚未涉及多種糖類物質(zhì)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲壽命及繁殖能力的影響，本研究選取了自然界花蜜或蜜露中常含有的葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、蜂蜜等6 種糖及橡副珠蠟蚧的蜜露作為該蜂成蟲期的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，比較了不同糖源對(duì)其成蜂壽命、卵子成熟、產(chǎn)卵及后代發(fā)育與出蜂量的影響，以期為該蜂的室內(nèi)擴(kuò)繁及大田應(yīng)用提供理論依據(jù)及指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

橡副珠蠟蚧：采于云南省熱帶作物研究所試驗(yàn)場(chǎng)六隊(duì)橡膠樹上，在中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所內(nèi)溫度25～27 ℃、濕度70%～90%的養(yǎng)蟲室內(nèi)用南瓜繁殖至成蟲備用。

副珠蠟蚧闊柄跳小蜂：于云南熱作所試驗(yàn)場(chǎng)橡副珠蠟蚧嚴(yán)重發(fā)生區(qū)的橡膠林段收集跳小蜂褐蛹，待羽化后用橡膠上的橡副珠蠟蚧繁殖，建立起以橡膠為植物寄主的實(shí)驗(yàn)種群。待種群數(shù)量擴(kuò)大后，將蜂轉(zhuǎn)接在用南瓜飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧上，建立起以南瓜為植物寄主的種群以供試驗(yàn)所需。

1.2 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲壽命的影響

1.2.1 不提供寄主時(shí)的成蟲壽命 收集初羽化的成蜂20 頭，以5 頭為一組分別裝于試管（1.5 cm×7.5 cm）內(nèi)，管口用棉花塞住。分別將蜂蜜（上海冠生園蜂制品有限公司）、葡萄糖（廣州化學(xué)制劑廠）、果糖（果藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、蔗糖（廣州化學(xué)制劑廠）、海藻糖（上海源葉生物科技有限公司）、松三糖（上海源葉生物科技有限公司）、寄主蜜露配制成濃度為20%的糖源水溶液，用小棉球在上述糖液中浸濕后放入裝蜂的試管中進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，對(duì)照包括清水和空白2 種。每處理雌、雄蜂各20 頭，放入溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度為70%±10%，光周期12L:12D 的人工氣候箱內(nèi)，每天觀察2 次，記錄成蜂的存活情況，同時(shí)更換新的營(yíng)養(yǎng)棉球，試驗(yàn)重復(fù)4 次。

1.2.2 提供寄主時(shí)的成蟲壽命 收集初羽化、已交配后的雌蜂20 頭，放入1 個(gè)裝有20 頭褐色期橡副珠蠟蚧成蟲的自制局部接蜂器（杯口直徑為7.5 cm，高為8.5 cm 的透明塑料杯口邊沿粘一層海綿，杯底開一直徑略大于1.1 cm 孔）內(nèi)，用小棉球在1.2.1 的糖液中浸濕后放入裝蜂的接蜂器內(nèi)進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，然后放入1.2.1 的人工氣候箱內(nèi)。每天觀察2 次，記錄成蜂的存活情況，并更換1 次新的蚧蟲及補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。對(duì)照包括清水和空白2 種，試驗(yàn)重復(fù)4 次。

1.3 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂產(chǎn)卵量的影響

將上述試驗(yàn)1.2.2 中每天更換出的蚧蟲于體視鏡下解剖，觀察、計(jì)錄副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的單日產(chǎn)卵量，并統(tǒng)計(jì)累計(jì)產(chǎn)卵量。

1.4 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂卵巢的發(fā)育動(dòng)態(tài)觀察

選擇初羽化且已交配后的120 頭雌蜂，用20%的蜂蜜、果糖、蔗糖的水溶液為補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，清水為對(duì)照。然后分別在提供寄主（寄生蜂:寄主＝1:1）和不提供寄主的條件下放入1.2.1 的人工氣候箱內(nèi)，并于0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d 定時(shí)對(duì)20 頭雌蜂解剖，在解剖鏡下觀察卵巢的發(fā)育形態(tài)，計(jì)數(shù)未成熟卵子和成熟卵子的數(shù)量，試驗(yàn)重復(fù)4 次。

卵子的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參照溫麗娜等[3]：未成熟卵子是卵母細(xì)胞橢圓形或短棒狀，半透明或漸變?yōu)槿榘咨胁块_始縊縮；成熟卵子是卵母細(xì)胞已溢縮為淡黃褐色的卵柄，然后將其一分為二形成的卵細(xì)胞。

1.5 副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲期的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)其子代的影響

在南瓜上挑選褐色期橡副珠蠟蚧成蟲20 頭，按1 雌蜂:1 雄蜂:1 蚧蟲的比例接蜂，并在自制局部接蜂器內(nèi)分別放入用1.2.1 中糖液浸濕的小棉球，以清水和空白為對(duì)照。在1.2.1 設(shè)置的人工氣候箱內(nèi)接蜂24 h后，去除副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蜂，放回同一條件的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)。觀察其子代的發(fā)育歷期雌性比、出蜂量和寄生率，試驗(yàn)重復(fù)4 次。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

成蟲壽命、未成熟卵量、成熟卵量、產(chǎn)卵量、子代的發(fā)育歷期、出蜂量、寄生率及雌性比等的比較采用SAS 分析軟件進(jìn)行方差分析方法，平均數(shù)間的比較采用Duncan’s 新復(fù)極差法。

2 結(jié)果與分析

2.1 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲壽命的影響

以葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、蜂蜜及寄主蜜露等為副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蜂的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)均能延長(zhǎng)其成蟲壽命（表1）。不提供寄主時(shí)，補(bǔ)充果糖的雌成蜂壽命最長(zhǎng)，為16.6 d，顯著長(zhǎng)于其他糖類物質(zhì)，其次為蔗糖（13.6 d）、蜂蜜（10.9 d），清水對(duì)照的雌蜂壽命為2.8 d，空白對(duì)照的壽命最短，為2.3 d，均顯著短于提供糖類物質(zhì)的壽命；提供寄主時(shí)，補(bǔ)充清水的雌蜂壽命最長(zhǎng)，為10.0 d，補(bǔ)充寄主蜜露、松三糖、葡萄糖、蔗糖的壽命均在9.0 d 以上，與清水處理的差異不顯著，空白對(duì)照的壽命最短，為3.9 d。雄蜂的壽命在不提供寄主時(shí)，以補(bǔ)充果糖的最長(zhǎng)，為16.0 d，其次為蔗糖（12.3 d）、葡萄糖（10.0 d），均顯著長(zhǎng)于CK（2.0 d）和清水（2.6 d）的。

表1 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的成蟲壽命Table 1 Longevity of adult M.parasaissetiae in different nutritious conditions (d)

2.2 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂產(chǎn)卵量的影響

補(bǔ)充糖類物質(zhì)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蜂的產(chǎn)卵有顯著影響（圖1）。補(bǔ)充20%蔗糖水時(shí)，該蜂的產(chǎn)卵量最高，為43.7 粒/雌，顯著高于其他處理；其次是果糖（39.0 粒/雌）、葡萄糖（37.1 粒/雌）、清水（31.8粒/雌）、蜂蜜（31.0 粒/雌）、寄主蜜露（28.7 粒/雌）；空白對(duì)照的產(chǎn)卵量則最少，為12.3 粒/雌，顯著低于補(bǔ)充糖源或清水的處理。

圖1 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的產(chǎn)卵量Fig.1 Fecundity of M.parasaissetiae in different nutritious conditions

2.3 不同補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂雌成蜂卵子發(fā)育的影響

2.3.1 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂體內(nèi)成熟卵量 成蟲期補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)能明顯促進(jìn)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂卵巢發(fā)育及卵子成熟（表2）。初羽化的成蜂體內(nèi)有少量的成熟卵，然后隨副珠蠟蚧闊柄跳小蜂日齡的增加，體內(nèi)的成熟卵量呈先上升后下降的趨勢(shì)。僅補(bǔ)充清水時(shí)，日齡24 h 雌成蜂成熟卵量最高，然后隨成蜂日齡的增加而逐漸降低；同時(shí)提供清水和寄主時(shí)，成蜂日齡96 h 達(dá)高峰。補(bǔ)充蜂蜜、蔗糖、果糖的成熟卵量均在羽化后48 h 時(shí)達(dá)高峰，然后呈下降趨勢(shì)。寄主對(duì)跳小蜂體內(nèi)成熟卵量的影響總體表現(xiàn)為：在羽化后96 h 之前，補(bǔ)充蜂蜜和果糖時(shí)，不提供寄主的成熟卵量多于提供寄主，而補(bǔ)充蔗糖和清水則為不提供寄主的成熟卵量少于提供寄主的成熟卵量。

表2 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂體內(nèi)成熟卵量Table 2 Amount of mature eggs of M.parasaissetiae in different nutritional conditions

2.3.2 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂體內(nèi)的未成熟卵量 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的未成熟卵量影響明顯（表3）。初羽化時(shí)的未成熟卵量最多，隨雌蜂日齡的增加，均呈下降趨勢(shì)。24 h 以蜂蜜（無(wú)寄主）最高，為4.5 粒，其次是清水（有寄主），為4.4 粒，顯著高于其他處理；48 h、72 h 均是清水（無(wú)寄主）最高，蔗糖（無(wú)寄主）最低；96 h 以同時(shí)提供寄主和清水的最高，蔗糖（無(wú)寄主）最低；120 h補(bǔ)充蜂蜜的最高，為3.5 粒，僅補(bǔ)充清水的成蜂則全部死亡。

表3 不同營(yíng)養(yǎng)條件下副珠蠟蚧闊柄跳小蜂體內(nèi)的未成熟卵量Table 3 Amount of unmature eggs of M.parasaissetiae in different nutritional conditions

2.4 成蟲期補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂子代的影響

成蟲期的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂子代的發(fā)育與繁殖影響明顯（表4）。補(bǔ)充蔗糖、蜂蜜、葡萄糖、海藻糖、寄主蜜露均能顯著縮短該蜂子代的世代發(fā)育歷期，補(bǔ)充蜂蜜時(shí)子代雌蜂的世代發(fā)育歷期最短，為14.9 d，其次是葡萄糖（15.4 d）、蔗糖（15.7 d）、海藻糖（15.8 d）、寄主蜜露（16.2 d），均顯著短于果糖、清水、空白對(duì)照等處理，補(bǔ)充松三糖最長(zhǎng)，為17.0 d；補(bǔ)充蜂蜜的子代雄蜂的世代發(fā)育歷期最短，為15.0 d，補(bǔ)充松三糖的最長(zhǎng)，為17.4 d。出蜂量和寄生率均以補(bǔ)充蔗糖最高，其次為蜂蜜，顯著高于葡萄糖、松三糖、寄主蜜露、空白對(duì)照和清水對(duì)照等處理。子代的寄生率以補(bǔ)充蔗糖的最高為96.3%，補(bǔ)充葡萄糖的最低為61.5%。雌性比由高到低依次為葡萄糖，清水，海藻糖，無(wú)營(yíng)養(yǎng)，蜂蜜，寄主蜜露，松三糖，果糖，蔗糖，補(bǔ)充葡萄糖最高，為66.1%，而補(bǔ)充蔗糖最低，為47.4%。

表4 補(bǔ)充不同營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂子代發(fā)育及繁殖的影響Table 4 Influence of supplementary nutrition on M.parasaissetiae at adult stage

3 討論

寄生蜂在成蟲期通過(guò)取食寄主或糖類物質(zhì)獲得營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，其中，糖類物質(zhì)是寄生蜂成蟲期的重要營(yíng)養(yǎng)成份，可以顯著延長(zhǎng)寄生蜂的成蟲壽命及提高產(chǎn)卵量[3,13-15]。本研究中，在副珠蠟蚧闊柄跳小蜂成蟲期補(bǔ)充6 種糖類物質(zhì)和寄主蜜露均能延長(zhǎng)其成蟲壽命，結(jié)果與潛蠅姬小蜂Diglyphusisaea(Walker)、長(zhǎng)絨繭蜂Dolichogenideatasmanica、褐帶蚜小蜂Aphelinusmaculatus等相似[7,11,15]。補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)寄生蜂成蟲壽命影響方面的報(bào)道較多是單獨(dú)針對(duì)提供寄主或不提供寄主條件下進(jìn)行研究[17]。本研究比較觀察了不同營(yíng)養(yǎng)條件下提供寄主與否對(duì)成蜂壽命的影響，結(jié)果為補(bǔ)充果糖、蔗糖、蜂蜜、葡萄糖時(shí)，提供寄主時(shí)的雌蜂壽命短于無(wú)寄主的，而補(bǔ)充寄主蜜露、海藻糖、松三糖時(shí)提供寄主的雌蜂壽命則長(zhǎng)于無(wú)寄主的，此結(jié)果是否是因?yàn)樵诠?、蔗糖、蜂蜜、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)條件下產(chǎn)卵量高，在產(chǎn)卵過(guò)程中消耗了大量能量所致[18]，還是其他原因引起值得進(jìn)一步研究。另外，研究發(fā)現(xiàn)同時(shí)提供寄主和清水能大幅度延長(zhǎng)雌蜂壽命，所以，該蜂在野外可利用寄主及水分作為其重要營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充。產(chǎn)卵方面，補(bǔ)充蔗糖最有利于副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的產(chǎn)卵，其次是果糖、葡萄糖、蜂蜜等，這可能是因?yàn)檠a(bǔ)充上述營(yíng)養(yǎng)時(shí)可供產(chǎn)卵的成熟卵子較多和產(chǎn)卵過(guò)程中所需能量得到保證。另外，試驗(yàn)中觀察到補(bǔ)充7 種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和清水的雌成蜂均在產(chǎn)卵高峰后才出現(xiàn)大量死亡，說(shuō)明補(bǔ)充上述營(yíng)養(yǎng)有利于該蜂的種群增長(zhǎng)。

卵育型寄生蜂成蟲期取食營(yíng)養(yǎng)的質(zhì)量或種類明顯影響卵的成熟數(shù)量，從而對(duì)寄生蜂的生殖能力產(chǎn)生影響[119-121]。本研究中蜂蜜水溶液、蔗糖水溶液和果糖水溶液及寄主蜜露均可促進(jìn)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂卵子成熟，可使其卵巢中成熟卵子數(shù)量在高水平維持較長(zhǎng)時(shí)間，結(jié)果與毛缺溝姬蜂Lissonotasetosa、蝶蛹金小蜂Pteromaluspuparum相似[22,23]。潛蠅姬小蜂等在沒(méi)有提供寄主產(chǎn)卵條件下，體內(nèi)的成熟卵在高峰期后被重吸收作為其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[20,24,25]。本研究沒(méi)提供寄主時(shí)小蜂體內(nèi)的成熟卵量在高峰期過(guò)后均逐漸減少,這可能是該蜂通過(guò)卵子重吸收的方式來(lái)為搜尋寄主、成蟲存活或發(fā)育新的成熟卵子提供能量[24,25]。寄生蜂常常通過(guò)取食寄主獲得卵子成熟所需的脂類、蛋白質(zhì)等物質(zhì)[20,26-28]，盡管提供寄主時(shí)各日齡的副珠蠟蚧闊柄跳小蜂體內(nèi)的成熟卵量與無(wú)寄主相比差異不明顯，但考慮到提供寄主時(shí)已有大量卵在前期已產(chǎn)到寄主體內(nèi)，說(shuō)明提供寄主時(shí)小蜂體內(nèi)成熟卵的累積數(shù)量顯著高于無(wú)寄主的，提供寄主明顯可以促進(jìn)其卵子成熟。

許多研究發(fā)現(xiàn)寄生蜂親蜂的營(yíng)養(yǎng)種類能對(duì)其子代的產(chǎn)卵、發(fā)育歷期、性比、出蜂數(shù)量等造成影響[29-30,196]。在本研究中發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充蜂蜜、蔗糖等可以加快副珠蠟蚧闊柄跳小蜂子代的世代發(fā)育，提高子代出蜂量，結(jié)果與切割潛蠅繭蜂相似[29]；而松三糖、葡萄糖雖然能加快發(fā)育，但卻不利于提高子代的出蜂量。郭祥令等[32]報(bào)道卷蛾分索赤眼蜂在補(bǔ)充不同營(yíng)養(yǎng)時(shí)其后代的雌性比率與產(chǎn)卵量呈負(fù)相關(guān)，而本研究中副珠蠟蚧闊柄跳小蜂在補(bǔ)充蔗糖時(shí)出蜂量最高，其雌性比最低，而補(bǔ)充葡萄糖的出蜂量最低，其雌性比最高，表現(xiàn)出卷蛾分索赤眼蜂相似同趨勢(shì)。由于，寄生蜂的性比通常分為原生性比和次生性比，前者指雌蜂在寄主上產(chǎn)卵的雌雄卵比，后者則指所產(chǎn)的卵經(jīng)歷孵化、幼蟲和蛹的死亡后最終羽化為成蜂的雌雄數(shù)量比[33]，因此，本研究補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)究竟是影響了副珠蠟蚧闊柄跳小蜂原生性比還是次生性比值得進(jìn)一步明確。補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的濃度會(huì)影響寄生蜂的成蟲壽命及生殖力[34]，本試驗(yàn)只是研究了質(zhì)量百分比為20%濃度下補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的影響，尚需進(jìn)一步研究利用不同營(yíng)養(yǎng)的最佳濃度。另外，本研究是在室內(nèi)穩(wěn)定的環(huán)境條件下進(jìn)行，其結(jié)果可為室內(nèi)大量繁殖副珠蠟蚧闊柄跳小蜂時(shí)的選擇補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)提供依據(jù)。鑒于該蜂在室內(nèi)和田間的營(yíng)養(yǎng)需求、存活及繁殖情況可能存在差異，所以在田間利用方面還應(yīng)充分考慮到田間溫度、寄主、寄主植物及周圍蜜源植物等環(huán)境因子的影響。

綜上所述，結(jié)合補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的成蟲壽命、卵子成熟情況、產(chǎn)卵量、子代發(fā)育歷期、出蜂量和雌性比等方面的影響，擴(kuò)繁時(shí)可選用濃度為20%的蜂蜜、果糖或蔗糖等作為該蜂擴(kuò)繁和釋放前的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。