凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951對(duì)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的保護(hù)作用

高涵,吳影,2,3,鐵珊珊,2,趙麗娜,2,李欣,2,3,曹力,3,古紹彬,2,3*

1(河南科技大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院,河南 洛陽,471000)2(河南省食品微生物工程技術(shù)研究中心,河南 洛陽,471023)3(食品加工與安全國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,河南 洛陽,471023)

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)是一種主要發(fā)生在結(jié)腸的慢性非特異性炎癥性腸病,其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)逐年上升[1]。UC患者的臨床癥狀主要表現(xiàn)為體重下降、腹痛及血性腹瀉,其發(fā)病與地理、年齡、性別、遺傳和環(huán)境因素有關(guān)[2],但確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全確定。近年研究發(fā)現(xiàn)腸黏膜機(jī)械屏障在UC的發(fā)病機(jī)制中起重要作用,例如抗氧化能力及免疫炎癥因子失衡造成結(jié)腸黏膜屏障不同程度受損,腸上皮細(xì)胞大面積凋亡,導(dǎo)致局部腸道環(huán)境發(fā)生病變,加快UC進(jìn)程[3]?；赨C的無法治愈性,UC患者通常需終身服用美沙拉嗪等藥物,但其仍具有一定的毒副作用,因此,探索可預(yù)防UC健康無副作用的益生菌制劑成為新的研究熱點(diǎn)[4]。

凝結(jié)芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)是益生菌中一類兼具乳酸菌和芽孢桿菌特征、革蘭氏陽性的桿狀細(xì)菌,已先后在多種動(dòng)物腸道及糞便[5]中分離獲得。當(dāng)凝結(jié)芽孢桿菌的生長條件惡化時(shí),會(huì)從營養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有良好抗逆性的芽孢,其芽孢耐酸、耐膽鹽,可在胃腸道中存活及定植[6],從而降低腸道pH,抑制有害菌滋生,起到調(diào)節(jié)人體腸道健康、提高消化能力及免疫力等益生作用[7]。此前,已有多項(xiàng)研究證實(shí)凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)結(jié)腸炎有緩解效果,FITZPATRICK等[8]發(fā)現(xiàn)凝結(jié)芽孢桿菌BC30改善了艱難梭菌誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎,減輕了小鼠腹瀉癥狀;SASAKI等[9]采用模型培養(yǎng)系統(tǒng)構(gòu)建體外人結(jié)腸微生物群,發(fā)現(xiàn)凝結(jié)芽孢桿菌SANK 70258增加了毛螺菌科相關(guān)細(xì)菌,使受試者的微生物群模型中產(chǎn)生了更多具有健康益處的丁酸鹽;SHINDE等[10]利用綠色香蕉抗性淀粉與凝結(jié)芽孢桿菌MTCC 5856作為合生元,發(fā)現(xiàn)其對(duì)葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎有明顯緩解作用。據(jù)研究[11],包括凝結(jié)芽孢桿菌在內(nèi)的乳酸菌可能通過消除腸道自由基、產(chǎn)生多種有機(jī)酸修復(fù)腸道損傷。但目前對(duì)于凝結(jié)芽孢桿菌干預(yù)UC患者腸道氧化應(yīng)激反應(yīng)及腸道機(jī)械屏障的系統(tǒng)性研究甚少。

前期研究發(fā)現(xiàn),凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951具有良好的益生性能[5]。因此,本研究以DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎為模型,系統(tǒng)性探討凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠腸道氧化應(yīng)激、免疫炎癥及腸道機(jī)械屏障等保護(hù)效果,為凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951干預(yù)結(jié)腸炎提供科學(xué)依據(jù),從而促進(jìn)凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951在食品、醫(yī)藥等不同領(lǐng)域的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 菌株

凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951,由河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院微生物育種與代謝調(diào)控研究室前期分離保藏。經(jīng)活化后制備種子液,于5 L發(fā)酵罐中37 ℃發(fā)酵96 h,取發(fā)酵液混入質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的玉米淀粉,于160 ℃噴霧干燥制為菌粉。

1.2 試劑與儀器

DSS,上海翌圣生物科技股份有限公司;總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、乳酸、總蛋白檢測(cè)試劑盒,南京建成生物工程研究所;白細(xì)胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-10測(cè)試盒、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)檢測(cè)試劑盒,上?？瓢┥锛夹g(shù)有限公司;二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO)檢測(cè)試劑盒,江蘇連云港伊勢(shì)久生物科技有限責(zé)任公司;多聚甲醛固定液,北京蘭杰柯科技有限公司。

Multiskan FC酶標(biāo)儀,美國Thermo Fisher(賽默飛世爾)公司;D3024R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),美國Scilogex(賽洛捷克)公司;L5S型紫外可見分光光度計(jì),上海儀電分析儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌懸液的制備

準(zhǔn)確稱取凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951菌粉1 g于10 mL 0.85%無菌生理鹽水中,得到3×108CFU/mL菌懸液,之后用無菌生理鹽水逐級(jí)稀釋得到3×107、3×106CFU/mL菌懸液。配制完成后,4 ℃冷藏備用。

1.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

健康昆明雄性小鼠30只(n=6只/組),鼠齡12周,體質(zhì)量(30±2) g,飼養(yǎng)于12 h光照12 h黑夜交替循環(huán),溫度(24±2) ℃,濕度(50±10)%的環(huán)境中。

實(shí)驗(yàn)小鼠自由飲食適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、CGMCC 9951低、中、高劑量組。隨后,對(duì)各組小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn):對(duì)照組與模型組每日灌胃0.85%無菌生理鹽水0.3 mL,低、中、高劑量組每日分別灌胃3×106、3×107、3×108CFU/mL CGMCC 9951菌懸液0.3 mL,灌胃2周。在第3周,除對(duì)照組外,其他各組小鼠均自由飲用5%DSS水溶液誘發(fā)急性結(jié)腸炎。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,小鼠禁食12 h后處死小鼠,采集血清、結(jié)腸組織等樣品,用于后續(xù)相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定與分析。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案如表1所示。該研究內(nèi)容和過程遵循國際及國家頒布的有關(guān)生物醫(yī)學(xué)研究所制訂的倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)[SYXK-(豫)2018—0010]。

表1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案Table 1 Animal experiment design

1.3.3 疾病活動(dòng)指數(shù)(disease activity index, DAI)的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)期間,每日觀察小鼠精神及活動(dòng)狀況,并于固定時(shí)間點(diǎn)稱量小鼠體重及飼料,計(jì)算小鼠體重下降比與日均攝食量。另外,從實(shí)驗(yàn)第3周開始每日注意觀察小鼠的糞便性狀,根據(jù)SHICHIJO等[12]的評(píng)分方法,計(jì)算得出小鼠DAI評(píng)分,具體評(píng)分項(xiàng)目如表2所示。

表2 疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分Table 2 Disease activity index score

1.3.4 結(jié)腸長度的測(cè)定

處死小鼠后,從小鼠回盲瓣至肛門取得整段結(jié)直腸組織,測(cè)量其長度,做好記錄。

1.3.5 病理組織H&E染色

剪取小鼠結(jié)腸0.5 cm放入4%多聚甲醛中固定,采用95%乙醇脫水,之后使用二甲苯洗脫結(jié)腸組織中的乙醇,將組織包埋于石蠟中,冷卻后切片,采用H&E染色法染色,于光學(xué)顯微鏡下觀察結(jié)腸組織上皮細(xì)胞病變、隱窩損傷、炎癥浸潤等病理情況,并參照WALLACE等[13]的方法進(jìn)行組織學(xué)評(píng)分,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表3。

表3 小鼠結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)分Table 3 Mouse colon histopathological scoring

1.3.6 結(jié)腸組織氧化應(yīng)激程度的測(cè)定

準(zhǔn)確稱取結(jié)腸組織樣本0.1 g于0.9 mL生理鹽水中,冰水浴條件下機(jī)械勻漿充分后,在4 ℃、3 000 r/min離心10 min,取上清至1.5 mL離心管中,獲得結(jié)腸組織勻漿,放于-80 ℃保存。隨后根據(jù)試劑盒說明書對(duì)組織勻漿樣本中的T-SOD、GSH及MDA的含量進(jìn)行測(cè)定。

1.3.7 血清炎癥反應(yīng)的測(cè)定

將血液樣本在4 ℃、4 000 r/min離心15 min,獲得血清,放于-80 ℃保存。嚴(yán)格按照酶聯(lián)免疫吸附試劑盒說明分析血清中IL-10、TNF-α、IL-1β含量。

1.3.8 結(jié)腸腸道通透性的測(cè)定

小鼠血清中LPS含量及結(jié)腸組織勻漿中DAO含量可作為評(píng)判結(jié)腸腸道通透性的指標(biāo)。依照相關(guān)試劑盒操作指示取血清測(cè)定LPS含量;根據(jù)DAO試劑盒說明書制備結(jié)腸組織粗酶液,測(cè)定DAO含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

使用Origin 2021軟件繪圖;實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析或克魯斯卡爾-沃利斯統(tǒng)計(jì)分析,其中P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.01認(rèn)為差異具有顯著性,P<0.001認(rèn)為差異具有極顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠癥狀的影響

以DSS誘導(dǎo)的UC小鼠模型在建模后表現(xiàn)為精神萎靡、毛發(fā)暗淡、攝食減少、血性腹瀉以及結(jié)腸損傷,進(jìn)而影響小鼠體重、攝食、結(jié)腸長度和DAI評(píng)分的變化。由圖1所示,在本實(shí)驗(yàn)第1、2周內(nèi),CGMCC 9951的低、中、高干預(yù)組、模型組與對(duì)照組小鼠的日均攝食量和體重減輕比不存在顯著差異;在第3周,除對(duì)照組外,各組經(jīng)5%DSS處理后,小鼠日均攝食量及體重呈不同程度下降,其中模型組體重下降最為顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),相比對(duì)照組,模型組小鼠體重顯著下降(P<0.05),達(dá)24.25%。而與模型組相比,中劑量組和高劑量組緩解了結(jié)腸炎小鼠的體重下降(P<0.05),使小鼠體重增加了9.15%及8.59%。

a-攝食量;b-體重下降比

由圖2可知,與對(duì)照組相比,模型組小鼠DAI評(píng)分在造模期內(nèi)極顯著升高(P<0.001),表明結(jié)腸炎模型建立成功;與模型組相比,高劑量組DAI評(píng)分降低53.33%(P<0.05),說明高劑量CGMCC 9951能明顯減輕由DSS引起的便血、糞便松散等癥狀。

圖2 各處理組小鼠DAI評(píng)分Fig.2 DAI score of mice in each treatment group

如圖3-a所示,與對(duì)照組相比,模型組結(jié)腸長度呈顯著下降趨勢(shì)(P<0.001),表明小鼠結(jié)腸受到損傷而縮短;而與模型組相比,中劑量、高劑量組結(jié)腸長度分別增加了27.12%(P<0.05)和38.55%(P<0.01)。表明中劑量及高劑量的CGMCC 9951干預(yù)可改善UC造成的結(jié)腸縮短癥狀,從而減緩UC進(jìn)程。脾臟作為機(jī)體最大的淋巴器官,不斷參與到免疫應(yīng)答反應(yīng)中。當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí),脾臟由于更多免疫調(diào)節(jié)的發(fā)生而腫脹,造成其質(zhì)量的增加。由圖3-b可知,模型組與對(duì)照組相比脾臟指數(shù)顯著增加(P<0.05),而經(jīng)CGMCC 9951保護(hù)的中劑量、高劑量組小鼠脾臟指數(shù)相比模型組顯著降低(P<0.01)。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中劑量及高劑量CGMCC 9951可顯著改善UC癥狀。

a-結(jié)腸長度;b-脾臟指數(shù)

2.2 CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠病理組織的影響

通過對(duì)小鼠結(jié)腸組織進(jìn)行H&E染色和組織學(xué)損傷評(píng)分,以評(píng)估CGMCC 9951對(duì)DSS誘導(dǎo)的UC小鼠結(jié)腸結(jié)構(gòu)和形態(tài)的影響。如圖4-a和4-b所示,對(duì)照組小鼠的結(jié)腸完整,上皮細(xì)胞正常,隱窩結(jié)構(gòu)清晰,杯狀細(xì)胞明顯;而經(jīng)DSS誘導(dǎo)后,模型組小鼠的結(jié)腸腸上皮細(xì)胞損傷明顯,隱窩結(jié)構(gòu)部分缺失,炎癥浸潤程度較高,病變范圍高(P<0.001)。高劑量組小鼠結(jié)腸黏膜上皮結(jié)構(gòu)十分完整,炎癥細(xì)胞浸潤程度低,病變深度主要在黏膜下層,隱窩病灶范圍較小,與模型組組織學(xué)評(píng)分相比下降了46.43%(P<0.05)。結(jié)果表明高劑量CGMCC 9951顯著減少了DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸組織損傷,在一定程度上保護(hù)腸道上皮細(xì)胞,減輕小鼠UC炎癥程度,維持腸黏膜完整性。

a-結(jié)腸病理組織切片;b-組織學(xué)評(píng)分

2.3 CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸氧化應(yīng)激程度的影響

DSS誘導(dǎo)的UC通常伴有結(jié)腸環(huán)境大量活性氧的產(chǎn)生,導(dǎo)致小鼠體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失調(diào),即引發(fā)了氧化應(yīng)激反應(yīng),對(duì)結(jié)腸組織造成不同程度的炎癥損傷[14-15]。GSH是機(jī)體重要的自由基清除劑,組織內(nèi)GSH濃度較高,使細(xì)胞損傷減少,同時(shí)使機(jī)體各種免疫細(xì)胞得到充分的活化與分化,增強(qiáng)免疫力[16]。如圖5-a所示,與對(duì)照組相比,模型組GSH含量極顯著下降(P<0.001),證實(shí)DSS誘導(dǎo)會(huì)導(dǎo)致小鼠抗氧化防御系統(tǒng)功能異常。經(jīng)低、中、高劑量CGMCC 9951干預(yù)后的小鼠GSH含量均極顯著升高(P<0.001),其中高劑量組升高最顯著,達(dá)181.89%,說明小鼠腸道氧化應(yīng)激程度得到有效緩解。T-SOD是參與保護(hù)組織免受氧化損傷的重要抗氧化酶之一,可將活性氧分解為O2和H2O2,抑制結(jié)腸組織中的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)[17]。如圖5-b所示,其含量變化與GSH趨勢(shì)一致,中、高劑量組相比模型組酶活性顯著升高22.80%及48.73%(P<0.01)。MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度,通常與T-SOD的測(cè)定相配合,間接反映組織細(xì)胞受損傷程度。如圖5-c所示,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與模型組相比中劑量組和高劑量組MDA含量差異性降低53.35%及55.41%(P<0.05)。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CGMCC 9951可減少小鼠結(jié)腸的氧化損傷程度。

a-GSH含量;b-T-SOD含量;c-MDA含量

2.4 CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠炎癥因子的影響

當(dāng)發(fā)生UC時(shí),機(jī)體會(huì)處于應(yīng)激狀態(tài),誘發(fā)多種炎癥因子參與到免疫反應(yīng)中,從而促進(jìn)炎癥反應(yīng)的進(jìn)程。機(jī)體的免疫細(xì)胞通過TLR4/NF-κB等信號(hào)通路[18]的激活,釋放促炎因子(TNF-α、IL-1β)[19-20],從而促進(jìn)UC。如圖6所示,模型組相比對(duì)照組TNF-α及IL-1β含量上升(P<0.05),表示DSS誘導(dǎo)后加劇了小鼠體內(nèi)的炎癥反應(yīng)。而與模型組相比,中、高劑量組小鼠TNF-α下降20.91%(P<0.05)及24.87%(P<0.01),表明中、高劑量CGMCC 9951能夠有效抑制小鼠體內(nèi)促炎因子的升高?？寡滓蜃覫L-10含量在實(shí)驗(yàn)中與促炎因子呈相反趨勢(shì),中、高劑量組IL-10濃度的顯著上升36.46%及46.81%說明小鼠體內(nèi)的炎癥擴(kuò)散得到有效控制(P<0.05)。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CGMCC 9951可通過調(diào)節(jié)免疫炎癥因子控制炎癥反應(yīng)的加劇。

a-TNF-α含量;b-IL-1β含量;c-IL-10含量

2.5 CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠腸道通透性的影響

腸道通透性的增加是結(jié)腸炎發(fā)生的重要標(biāo)志,表明腸道機(jī)械屏障的完整性遭到破壞。研究表明,腸黏膜通透性會(huì)隨著腸道炎癥的增加而顯著增加[21]。當(dāng)腸黏膜受到損傷,導(dǎo)致腸道內(nèi)外多種炎癥性疾病的發(fā)生及腸道通透性增加,進(jìn)而影響腸道機(jī)械屏障。因此,改善腸道通透性是緩解UC的有效途徑之一。本實(shí)驗(yàn)中,利用LPS濃度和DAO活力來評(píng)估小鼠結(jié)腸機(jī)械屏障的完整性。腸黏膜受損導(dǎo)致腸道通透性增加,致使腸道內(nèi)革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的LPS通過腸上皮進(jìn)入血液,進(jìn)而引發(fā)全身炎癥。如圖7-a所示,模型組相較對(duì)照組血清LPS升高(P<0.05),說明DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠腸道通透性增加,腸道機(jī)械屏障遭到破壞。模型組相比,高劑量組LPS含量下降16.57%(P<0.05),證明經(jīng)高劑量CGMCC 9951干預(yù)保護(hù)的小鼠腸黏膜損傷減輕,腸道通透性未受明顯影響。DAO可催化多胺氧化為醛,與核酸和蛋白質(zhì)的合成密切相關(guān),常被臨床上用來反映腸道機(jī)械屏障的受損程度。如圖7-b所示,模型組DAO活力較對(duì)照組顯著下降(P<0.05),而高劑量組DAO活力較模型組顯著上升74.49%(P<0.05),表明高劑量組小鼠腸道機(jī)械屏障受到CGMCC 9951保護(hù),較為完整。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)CGMCC 9951通過維持小鼠腸道機(jī)械屏障的完整性預(yù)防結(jié)腸炎。

a-LPS濃度;b-DAO活力

3 結(jié)論與討論

UC是一類慢性、易反復(fù)發(fā)作的炎癥性腸病,可能與腸道通透性增加、腸道菌群失調(diào)、免疫功能下降及炎癥因子失衡等因素有關(guān)。本研究以不同劑量的凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃,之后采用5% DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎,探討CGMCC 9951對(duì)結(jié)腸炎小鼠病癥的干預(yù)作用,主要表現(xiàn)為:(1)CGMCC 9951能顯著改善結(jié)腸炎小鼠的攝食量及體重下降、結(jié)腸長度縮短、DAI評(píng)分和結(jié)腸組織損傷等;(2)CGMCC 9951通過調(diào)節(jié)結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡、影響炎癥因子水平,改善小鼠的炎癥反應(yīng);(3)CGMCC 9951還可通過控制小鼠腸道通透性的增加,從而維護(hù)結(jié)腸炎小鼠腸道機(jī)械屏障的完整性。

UC患者通常存在腸道菌群失調(diào),外源性益生菌通過調(diào)節(jié)內(nèi)源性菌群和免疫系統(tǒng)來改善局部微生物環(huán)境,從而減輕相關(guān)疾病。MAYER等[22]指出,益生菌可通過產(chǎn)生抗菌物質(zhì)以控制腸道中有害菌的數(shù)量;BERMUDEZ-BRITO等[23]發(fā)現(xiàn)益生菌常常通過抑制TLR4/NF-κB信號(hào)通路和PI3K/AKT/NF-κB信號(hào)通路,調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、IFN-γ等釋放,以降低炎癥程度,并指出益生菌可影響腸道上皮黏膜的緊密連接蛋白來調(diào)節(jié)腸道通透性,從而保護(hù)腸道屏障的完整性。JOYCE等[24]研究得出益生菌通過調(diào)節(jié)腸道菌群,降低致病微生物豐度,進(jìn)而影響膽汁酸代謝,緩解UC。多項(xiàng)臨床研究表明,凝結(jié)芽孢桿菌作為益生菌對(duì)UC具有良好的保護(hù)作用。李飛[25]研究發(fā)現(xiàn),凝結(jié)芽孢桿菌TBC-169是凝結(jié)芽孢桿菌活菌片的有效成分,進(jìn)入腸道后分泌大量乳酸、乙酸等有機(jī)酸的同時(shí)產(chǎn)生多種細(xì)菌素以修復(fù)腸道損傷;激活免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)炎癥因子的釋放以改善免疫系統(tǒng)失衡,從而達(dá)到防治UC的作用。此前關(guān)于凝結(jié)芽孢桿菌干預(yù)UC的研究大多圍繞炎癥因子調(diào)節(jié)、腸道菌群變化等,對(duì)凝結(jié)芽孢桿菌干預(yù)機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)及維護(hù)腸道機(jī)械屏障研究較少?；诖?本研究重點(diǎn)探討了凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951對(duì)UC小鼠炎癥反應(yīng)、結(jié)腸氧化應(yīng)激反應(yīng)及腸道機(jī)械屏障的干預(yù)效果,結(jié)果表明CGMCC 9951不但具有與凝結(jié)芽孢桿菌TBC-169調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥反應(yīng)作用的相似功能,還表現(xiàn)出有效改善結(jié)腸氧化與抗氧化失調(diào)、維系腸道機(jī)械屏障完整的能力。

綜上所述,凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951具有改善DSS誘導(dǎo)的功效,可緩和UC導(dǎo)致的體重降低、結(jié)腸長度縮短、DAI增加等表現(xiàn),減輕UC相關(guān)癥狀與小鼠結(jié)腸組織的病理變化。此外,CGMCC 9951可減弱DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸氧化應(yīng)激損傷,調(diào)節(jié)UC小鼠血清炎癥因子水平,且對(duì)腸道機(jī)械屏障損傷及結(jié)腸通透性降低具有緩解作用。因此,本研究為凝結(jié)芽孢桿菌CGMCC 9951作為高效干預(yù)UC的益生菌制劑相關(guān)營養(yǎng)食品開發(fā)和使用提供了基礎(chǔ)支持。