• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    食源性蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制劑的功能意義和結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系

    2023-10-17 07:02:54包美麗王振宇
    食品科學(xué) 2023年17期
    關(guān)鍵詞:食源性類化合物磷酸化

    包美麗,王振宇*

    (哈爾濱工業(yè)大學(xué)化工與化學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150000)

    2型糖尿病是一種以高血糖為特征的代謝性疾病。近年來(lái),糖尿病發(fā)病率大幅上升,迄今為止,全球成人患病率已達(dá)到8.5%,到2040年將達(dá)到世界人口的10.4%[1-2]。糖尿病的主要發(fā)病機(jī)制是胰島β細(xì)胞功能障礙和胰島素靶組織(肝臟、脂肪和肌肉)胰島素抵抗[3],在分子水平上表現(xiàn)為胰島素與胰島素受體(insulin receptor,IR)結(jié)合后信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)缺陷[4]。酪氨酸磷酸化(phosphotyrosine,pTyr)是開(kāi)啟和傳導(dǎo)胰島素信號(hào)的關(guān)鍵反應(yīng)[5]。胰島素結(jié)合IR誘導(dǎo)胰島素受體β-亞基酪氨酸激酶自磷酸化而被激活。隨后激活的IR募集并磷酸化胰島素受體底物(insulin receptor substrate1-4,IRS1-4)和其他與胰島素生物效應(yīng)有關(guān)的銜接蛋白(Gab1和Shc)[6],從而傳導(dǎo)胰島素信號(hào)。

    細(xì)胞信號(hào)通路的精準(zhǔn)和快速傳播需要嚴(yán)格的調(diào)節(jié)機(jī)制以及靈活的調(diào)節(jié)方式。蛋白質(zhì)磷酸化在細(xì)胞周期、生長(zhǎng)、凋亡和信號(hào)傳導(dǎo)等過(guò)程中起著重要調(diào)控作用。真核細(xì)胞中的大部分蛋白質(zhì)磷酸化發(fā)生在絲氨酸或蘇氨酸殘基上,而pTyr僅占總蛋白磷酸化的0.01%~0.05%[7]。盡管細(xì)胞pTyr的發(fā)生概率要小得多,但pTyr在控制細(xì)胞正常代謝活動(dòng)中至關(guān)重要[8]。在體內(nèi),pTyr是動(dòng)態(tài)可逆過(guò)程,是由特異性蛋白質(zhì)酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases,PTKs)和蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)平衡調(diào)控的。PTPs的異常表達(dá)與人類許多疾病相關(guān),如癌癥、糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和高血壓[9]。PTPs是催化蛋白質(zhì)酪氨酸去磷酸化的酶。人體中存在100 多種PTPs,它們?cè)诟鞣N信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中充當(dāng)著正或負(fù)調(diào)節(jié)劑[10]。蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)是一種在胰島素靶向組織中普遍表達(dá)的細(xì)胞內(nèi)非受體型PTPs,是PTPs超家族中的一員,于1988年首次成功分離[11-12]。研究表明,PTP1B通過(guò)催化活化的IR的去磷酸化,在胰島素信號(hào)傳導(dǎo)中起到負(fù)調(diào)節(jié)作用[13-15]。PTP1B缺陷小鼠表現(xiàn)出胰島素敏感性增強(qiáng)和對(duì)飲食誘導(dǎo)肥胖的抵抗,肝臟和骨骼肌中的IR和IRS的pTyr增加[16-17]。自PTP1B被發(fā)現(xiàn)以來(lái),它已成為治療2型糖尿病的潛在靶點(diǎn)[18]。因此,PTP1B抑制劑已被認(rèn)為是治療2型糖尿病的備選藥物。

    食源性天然產(chǎn)物為開(kāi)發(fā)和治療2型糖尿病的藥物提供了寶貴的資源[19-20]。由于結(jié)構(gòu)的多樣性,它們能夠針對(duì)不同的靶點(diǎn)和途徑對(duì)糖尿病或其并發(fā)癥起到獨(dú)特的預(yù)防和治療作用[21]。近些年來(lái),隨著研究人員對(duì)天然產(chǎn)物的廣泛關(guān)注,具有PTP1B抑制活性的食源性天然產(chǎn)物被發(fā)現(xiàn)并深入研究[22]。這其中以酚類、萜類、皂苷和生物堿等食源性天然產(chǎn)物為主,作用機(jī)制涉及多種抑制類型。本文就PTP1B的結(jié)構(gòu)、作用機(jī)制和食源性天然PTP1B抑制劑的相關(guān)研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述,以期為進(jìn)一步開(kāi)展PTP1B抑制劑的研究工作,開(kāi)發(fā)新型PTP1B抑制劑和降糖功能食品提供參考。

    1 PTP1B的結(jié)構(gòu)生物學(xué)與作用機(jī)制

    PTP1B是第一個(gè)從人胎盤中分離、純化并鑒定的細(xì)胞內(nèi)PTP,位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum,ER)的細(xì)胞質(zhì)面,在人體組織中廣泛表達(dá)。1994年,Barford等[23]利用X射線晶體學(xué)闡明了PTP1B的晶體結(jié)構(gòu),它主要由435 個(gè)氨基酸組成,其抑制劑的作用位點(diǎn)主要有3 個(gè)(圖1)。其中,N端結(jié)構(gòu)域包含兩個(gè)芳基磷酸酯結(jié)合位點(diǎn),即高親和力催化位點(diǎn)(A位點(diǎn))和低親和力非催化位點(diǎn)(B位點(diǎn))。此外,第三個(gè)作用位點(diǎn)是距催化活性區(qū)域約20 ?處的C端變構(gòu)位點(diǎn)。PTP1B的A位點(diǎn)是由8 個(gè)氨基酸殘基(His214、Cys215、Ser216、Ala217、Gly218、Ile219、Gly220、Arg221)形成的剛性環(huán)狀結(jié)構(gòu),被稱為磷酸結(jié)合環(huán)——P環(huán)(phosphate binding loop,P-loop),該位點(diǎn)中的親核半胱氨酸殘基Cys215在PTP1B催化過(guò)程中至關(guān)重要,是高度保守催化中心。通過(guò)化學(xué)修飾活性位點(diǎn)Cys215,PTP1B活性經(jīng)歷氧化或S-亞硝基化而失活。PTP1B的B位點(diǎn)是由Arg24、Arg254、Met258和Gln262等組成的非保守結(jié)合位點(diǎn),對(duì)底物特異性識(shí)別具有重要作用,其中Arg24和Arg254與磷酸化底物間的相互作用至關(guān)重要。變構(gòu)位點(diǎn)由一些獨(dú)特的α-螺旋(α3、α6和α7等)組成,當(dāng)PTP1B分子的C端結(jié)構(gòu)域影響N端結(jié)構(gòu)域時(shí),PTP1B分子的整體構(gòu)象發(fā)生變化,進(jìn)一步使催化結(jié)構(gòu)域與磷酸化底物之間直接接觸,相互作用[24],PTP1B變構(gòu)抑制劑通過(guò)切斷他們之間的相互作用,使其不能呈現(xiàn)活性構(gòu)象,從而使PTP1B失活[25]。此外,WDP環(huán)的封閉構(gòu)象對(duì)PTP1B的催化過(guò)程也具有重要影響[26-27]。當(dāng)?shù)孜锱cP環(huán)結(jié)合時(shí),WDP環(huán)上的Asp181使P環(huán)上的Cys215攻擊磷原子,導(dǎo)致P—O鍵斷裂并形成磷酸半胱氨酸中間體,最終使底物去磷酸化[28]。

    圖1 PTP1B晶體結(jié)構(gòu)圖(PDB ID: 1PTV)Fig.1 Crystal structure of PTP1B (PDB ID: 1PTV)

    2 PTP1B與2型糖尿病和肥胖癥的關(guān)系

    糖尿病是一種復(fù)雜的慢性全身性疾病,是十大導(dǎo)致人類死亡的疾病之一。糖尿病分為1型糖尿病、2型糖尿病、特殊類型糖尿病和妊娠期糖尿病。其中,2型糖尿病患者約占糖尿病患者的95%[29]。人體長(zhǎng)期保持高血糖狀態(tài)會(huì)導(dǎo)致多器官損傷,并引起多種并發(fā)癥?;颊呷魶](méi)有得到及時(shí)有效的治療,則會(huì)大大增加其患糖尿病腎病、神經(jīng)性病變、視網(wǎng)膜病變和心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[30]。PTP1B作為2型糖尿病的潛在治療靶點(diǎn),不僅是胰島素和瘦素信號(hào)通路的負(fù)調(diào)節(jié)因子,而且與ER應(yīng)激和胰島素分泌密切相關(guān)。

    2.1 PTP1B對(duì)胰島素和瘦素信號(hào)通路的負(fù)調(diào)節(jié)作用

    2型糖尿病的關(guān)鍵誘因是胰島素抵抗和β細(xì)胞功能障礙所導(dǎo)致的胰島素絕對(duì)缺乏。IR與胰島素結(jié)合后使IR催化結(jié)構(gòu)域發(fā)生自磷酸化,引起IRS1和IRS2的多個(gè)酪氨酸殘基磷酸化,進(jìn)而激活磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)/Akt通路,隨后葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)轉(zhuǎn)移至細(xì)胞表面,促進(jìn)細(xì)胞的葡萄糖攝取[31]。被激活的Akt還通過(guò)抑制糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK3)的活性來(lái)刺激糖原合成[32]。PTP1B使磷酸化的IR和IRS1去磷酸化,致使IR失活并終止胰島素信號(hào)(圖2),抑制細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取和糖原合成,導(dǎo)致胰島素抵抗[33]。PTP1B缺陷(PTP1B-/-)小鼠對(duì)胰島素敏感性增強(qiáng),肌肉和肝臟中IR的pTyr水平增加,這表明PTP1B是影響胰島素信號(hào)通路非常重要的酶[34-35]。

    圖2 PTP1B對(duì)胰島素與瘦素信號(hào)通路影響的作用機(jī)制Fig.2 Mechanism of the effect of PTP1B on the insulin and leptin signaling pathways

    瘦素是一種分泌性蛋白類激素,主要由脂肪組織產(chǎn)生和分泌,以單體形式存在于血漿中[36]。瘦素與瘦素受體結(jié)合后使Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)磷酸化,從而將信號(hào)傳導(dǎo)至下游信號(hào)分子——信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的物質(zhì)和能量代謝。瘦素還能夠刺激脂肪酸的氧化和胰島素的釋放[37]。PTP1B使經(jīng)瘦素活化的JAK2去磷酸化而失活,進(jìn)而抑制瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。研究發(fā)現(xiàn),對(duì)嚙齒類動(dòng)物施用瘦素后,IRS-PI3K通路被激活[38-39],這表明PI3K可能在胰島素和瘦素信號(hào)通路之間起到了交互作用(圖2)。因此,抑制PTP1B可能是減弱甚至逆轉(zhuǎn)肥胖患者對(duì)胰島素和瘦素抵抗的有效策略。

    2.2 PTP1B與ER應(yīng)激的關(guān)系

    ER是負(fù)責(zé)將分泌蛋白和膜蛋白折疊、修飾和運(yùn)輸?shù)募?xì)胞器。慢性高血糖和高脂血癥則會(huì)破壞ER穩(wěn)態(tài),導(dǎo)致錯(cuò)誤折疊或未折疊的蛋白堆積,進(jìn)而產(chǎn)生ER應(yīng)激。PTP1B位于ER膜上,與ER應(yīng)激密切相關(guān)。用衣霉素或棕櫚酸處理體外培養(yǎng)的成肌細(xì)胞C2C12,誘導(dǎo)使其產(chǎn)生ER應(yīng)激,結(jié)果發(fā)現(xiàn)ER應(yīng)激上調(diào)PTP1B的表達(dá),使細(xì)胞對(duì)葡萄糖攝取減少。另一方面,PTP1B基因缺失可抑制ER應(yīng)激,逆轉(zhuǎn)衣霉素處理的小鼠肌細(xì)胞C2C12中葡萄糖攝取的下調(diào)[40];提高肝特異性PTP1B缺失(L-PTP1B-/-)小鼠胰島素敏感性,降低其脂質(zhì)積累[41]。因此,PTP1B有望成為由ER應(yīng)激引起的胰島素抵抗的有效治療靶點(diǎn)。

    2.3 PTP1B在胰島β細(xì)胞中的作用

    2型糖尿病的重要特征是胰島素抵抗,即細(xì)胞對(duì)胰島素的反應(yīng)能力下降,外周組織對(duì)葡萄糖攝取和利用減少[42]。PTP1B基因敲除小鼠的胰島β細(xì)胞數(shù)量增多,凋亡率下降,葡萄糖刺激的胰島素分泌增強(qiáng),同時(shí)由鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的β細(xì)胞缺失被部分逆轉(zhuǎn)[13]。此外,一項(xiàng)來(lái)自哈佛醫(yī)學(xué)院Joslin糖尿病中心的報(bào)道顯示,胰腺PTP1B缺陷的正常小鼠葡萄糖耐量無(wú)異常,而胰腺PTP1B缺陷的肥胖小鼠則表現(xiàn)出葡萄糖耐量受損,同時(shí)由葡萄糖刺激的胰島素分泌減少,在分子水平上還確定了酪氨酸蛋白激酶A5受體——EphA5是胰腺中一個(gè)潛在的PTP1B底物[43]。這些結(jié)論為胰腺PTP1B在調(diào)節(jié)葡萄糖穩(wěn)態(tài)方面提供了新的見(jiàn)解。綜上,PTP1B的表達(dá)水平可能是影響胰腺β細(xì)胞功能的潛在因素。

    3 食源性天然PTP1B抑制劑

    食源性天然產(chǎn)物與人類生活息息相關(guān),它們不僅為人類提供生命所需的能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)還為人類提供了許多具有特殊生理活性的次生代謝物。食源性天然產(chǎn)物因其結(jié)構(gòu)多樣、種類繁多,對(duì)疾病靶點(diǎn)的作用機(jī)制也不盡相同。目前,通過(guò)分離純化技術(shù)和活性跟蹤法分離出的具有生物活性的天然產(chǎn)物已有幾萬(wàn)種,主要包括酚類、萜類、皂苷和生物堿類化合物等。本節(jié)就食源性天然PTP1B抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系進(jìn)行綜述。

    3.1 酚類化合物

    酚類化合物的特征是至少具有1 個(gè)芳香環(huán),并有1 個(gè)或多個(gè)羥基與之相連,廣泛存在于茶葉、咖啡、谷物和蔬菜中。由于酚類化合物具有抗氧化、抗炎和調(diào)節(jié)代謝等功能,對(duì)許多疾病具有預(yù)防和治療作用[44]。類黃酮是由15 個(gè)碳組成的酚類化合物,2 個(gè)芳香環(huán)由三碳鏈相連。類黃酮是自然界中數(shù)量最多的天然產(chǎn)物,廣泛存在于水果、蔬菜、草藥和其他植物性食物中。秋葵(Abelmoschus esculentus(L.) Moench)中黃酮類化合物是其主要的成分之一。在一項(xiàng)對(duì)糖尿病大鼠進(jìn)行連續(xù)8 周灌胃秋葵提取物和槲皮素的研究中發(fā)現(xiàn)[45],秋葵提取物和槲皮素(酚類化合物1)可以通過(guò)抑制PTP1B和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-α(peroxisome proliferatoractivated receptor-α,PPAR-α)來(lái)調(diào)節(jié)糖尿病大鼠體內(nèi)葡萄糖穩(wěn)態(tài)和脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)。甘草(Glycyrrhiza uralensisFisch.)作為世界上最古老和最常見(jiàn)的草藥之一,也是食品中的天然甜味劑和調(diào)味劑。有研究從甘草中分離出18 種黃酮類化合物,其中甘草黃酮B(licoflavone B)(酚類化合物2)對(duì)PTP1B的抑制活性較強(qiáng),這可能與其結(jié)構(gòu)中羥基或戊烯基的數(shù)目和位置有關(guān),特別是環(huán)B上的戊烯基或異戊烯基可能會(huì)增強(qiáng)其抑制活性[46]。另一項(xiàng)研究又從甘草的地上部分中分離出86 種酚類化合物,其中16 種化合物在10 μmol/L濃度下對(duì)PTP1B的抑制率大于80%。這16 種化合物中有12 種化合物至少含有1 個(gè)異戊烯基結(jié)構(gòu),其中化合物glycyuralin H、glycyuralin L、glycyuralin P(酚類化合物3~5)具有顯著的PTP1B抑制活性,半抑制濃度(half-maximal inhibitory concentration,IC50)分別為5.9、6.7 μmol/L和5.3 μmol/L,表明異戊烯基結(jié)構(gòu)在抑制PTP1B活性中發(fā)揮著重要作用[47]。黃牛木(Cratoxylum cochinchinense(Lour.) Blume)是一種富含多酚的植物,在我國(guó)被用作食物香料,其茶產(chǎn)品也廣泛流傳。研究發(fā)現(xiàn)從黃牛木中分離出的山酮類化合物——Cratoxanthone A(酚類化合物6)對(duì)PTP1B具有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用和時(shí)間依賴性抑制作用,其抑制機(jī)制是通過(guò)異構(gòu)化酶復(fù)合物實(shí)現(xiàn)的[48]。菊苣(Cichorium intybusL.)作為藥食同源植物,其葉和根部都可食用,具有清熱解毒和利尿消腫等功效。從菊苣中分離的2 種咖啡酰衍生物綠原酸(酚類化合物7)和菊苣酸(酚類化合物8)對(duì)PTP1B具有非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用,是其變構(gòu)抑制劑。通過(guò)分子對(duì)接模擬發(fā)現(xiàn),綠原酸與PTP1B的關(guān)鍵殘基Lys 197、Glu 200和Gln 288之間形成氫鍵相互作用,與其變構(gòu)位點(diǎn)α7螺旋有效結(jié)合。而菊苣酸與PTP1B的殘基Asn 193、Glu 276和Ile 281形成氫鍵相互作用,對(duì)PTP1B進(jìn)行變構(gòu)抑制[49]。青錢柳(Cyclocarya paliurus(Batal.) Ijinskaja)在我國(guó)一直被用作傳統(tǒng)滋補(bǔ)品,其葉被加工成茶產(chǎn)品。從青錢柳中分離出的槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(酚類化合物9)比楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(酚類化合物10)對(duì)PTP1B有更強(qiáng)的抑制作用,這可能是因?yàn)殚纹に?3-O-β-D-葡萄糖醛酸比后者在結(jié)構(gòu)環(huán)B中的C-5’上少了一個(gè)羥基。此外,從青錢柳中分離出的槲皮素-3-O-α-D-葡萄糖醛酸是沒(méi)有活性的,其結(jié)構(gòu)與槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸具有不同構(gòu)型的葡萄糖醛酸部分,這意味著葡萄糖醛酸構(gòu)型在體外抑制活性中起著關(guān)鍵作用[50]。漿果類水果因富含酚酸、類黃酮和花青素等活性物質(zhì)而一直備受研究人員關(guān)注,美國(guó)農(nóng)業(yè)部數(shù)據(jù)庫(kù)還將漿果類食品確定為類黃酮的主要來(lái)源[51]。在一項(xiàng)對(duì)漿果(綠醋栗、黑醋栗、野生越橘和越橘提取物商品Mirtoselect?)體外消化提取物進(jìn)行PTP1B抑制活性的研究中發(fā)現(xiàn),這些提取物富含花青素和其他酚類物質(zhì),且在一定濃度下均顯示出PTP1B抑制活性。繼續(xù)對(duì)其提取物中單體進(jìn)行PTP1B抑制活性研究,發(fā)現(xiàn)錦葵色素-3-葡萄糖苷(酚類化合物11)對(duì)PTP1B的抑制作用最強(qiáng),而花色苷和飛燕草苷對(duì)PTP1B沒(méi)有抑制作用,這表明錦葵色素上葡萄糖基團(tuán)的存在是導(dǎo)致PTP1B受到抑制的原因,類似于環(huán)B中甲氧基的影響,而羥基的存在可能不會(huì)促進(jìn)花色苷對(duì)PTP1B的抑制活性;分子對(duì)接模擬結(jié)果顯示,錦葵色素-3-葡萄糖苷與PTP1B的Tyr46、Asp48、Lys120、Asp181、Ser216、Gly220和Arg221殘基形成氫鍵相互作用(圖3),與Val49、Phe182和Ala217殘基形成疏水作用力[52]。藍(lán)莓作為一種美味的漿果類食品備受大眾喜愛(ài)。有學(xué)者以PTP1B抑制活性為指標(biāo),通過(guò)活性跟蹤法共分離出6 種花青素,發(fā)現(xiàn)其中花青素-3-阿拉伯糖苷(酚類化合物12)對(duì)PTP1B的抑制活性最強(qiáng),構(gòu)效關(guān)系分析結(jié)果表明,花青素環(huán)B中的羥基數(shù)量在對(duì)PTP1B活性抑制中起著重要作用[53]。酚類化合物1~12的結(jié)構(gòu)如圖4所示。

    圖3 預(yù)測(cè)錦葵色素-3-葡萄糖苷與PTP1B(PDB ID: 1AAX)的結(jié)合模式[53]Fig.3 Predicted binding mode of malvidin-3-glucoside to PTP1B(PDB ID: 1AAX)[53]

    圖4 酚類化合物1~12的結(jié)構(gòu)Fig.4 Structures of phenolic compounds 1–12

    3.2 萜類化合物

    萜類化合物是由甲戊二羥酸衍生,分子骨架以異戊二烯單元(C5單元)為基本結(jié)構(gòu)單元的化合物及其衍生物,廣泛存在于自然界中。五味子(Schisandra chinensis(Turcz.) Baill.)是我國(guó)著名的草藥,同時(shí)也廣泛用作食品補(bǔ)充劑,由于其重要的營(yíng)養(yǎng)和醫(yī)學(xué)作用,近年來(lái)越來(lái)越受到研究人員的關(guān)注。研究人員通過(guò)生物活性跟蹤法從五味子石油醚提取物中分離出11 種化合物,其中包括4 種三萜類化合物、6 種木脂素和1 種酚酸,其中萜類化合物24-亞甲基環(huán)木菠蘿烯酮(24-methylenecycloartenone)(萜類化合物1)是首次從五味子中分離得到的,并且發(fā)現(xiàn)其對(duì)PTP1B具有顯著的抑制作用?;跇?gòu)效關(guān)系的研究,推斷該化合物的抑制活性可能與其結(jié)構(gòu)上C-3中的—OH和—COOH以及C-17在苷元中的構(gòu)型有關(guān)[54]。在我國(guó),花楸是一種漿果類食品,同時(shí)也是治療慢性氣管炎、肺結(jié)核和水腫的中藥。研究顯示,花楸乙醇提取物(體積分?jǐn)?shù)70%)中6 種烏蘇烷型和1 種羽扇豆烷型三萜具有顯著的PTP1B抑制活性,其中,具有19α-羥基結(jié)構(gòu)的烏蘇烷型三萜化合物(pomolic acid-3β-acetate)(萜類化合物2)的抑制活性相對(duì)于化合物(3β-acetoxy-urs-12-ene-28-oic acid)(萜類化合物3)較低,而具有羽扇豆烷型三萜化合物(樺木酸)(萜類化合物4)對(duì)PTP1B的抑制活性最強(qiáng),接近于陽(yáng)性對(duì)照熊果酸(天然五環(huán)三萜類化合物)的抑制效果,它們僅在E環(huán)上具有不同的結(jié)構(gòu),正是這種結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致了它們不同的抑制效果[55]。山茱萸作為藥食同源植物,含有多種活性物質(zhì),其中以熊果酸含量最為豐富,是山茱萸重要的質(zhì)控指標(biāo)[56]。有學(xué)者基于糖尿病臨床使用的中藥提取物庫(kù),采用高通量篩選法確定了山茱萸果實(shí)中的熊果酸是PTP1B抑制劑,且是一種競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑[57]??紤]到熊果酸的可用性和生物學(xué)特性,研究人員將熊果酸進(jìn)行化學(xué)改性,合成了一系列熊果酸衍生物,其中合成得到的熊果酸衍生物UA0713(萜類化合物5)對(duì)PTP1B的抑制效果是熊果酸的10 倍,它在體外還能夠刺激L6肌細(xì)胞中葡萄糖攝取,并通過(guò)增強(qiáng)IR磷酸化來(lái)促進(jìn)CHO/hIR細(xì)胞中GLUT4的轉(zhuǎn)運(yùn)[57]。萜類化合物1~5的結(jié)構(gòu)如圖5所示。

    圖5 萜類化合物1~5 的結(jié)構(gòu)Fig.5 Structures of terpenoids 1–5

    3.3 皂苷類化合物

    皂苷是一類具有多種生物活性的類固醇或三萜類化合物,已廣泛用于化妝品和制藥行業(yè)。三七是一種中藥,同時(shí)也是功能性食品[58]?!睹绹?guó)膳食補(bǔ)充劑健康和教育法案》已將三七茶或三七膠囊作為非處方膳食補(bǔ)充劑[59]。從三七中分離的新達(dá)馬烷型三萜類化合物三七皂苷-LY(皂苷類化合物1)以及3 種已知化合物——20(R)-原人參二醇(皂苷類化合物2)、20(R)-人參皂苷-Rh2(皂苷類化合物3)、20(S)-人參皂苷-Mc(皂苷類化合物4)對(duì)PTP1B具有顯著抑制活性,根據(jù)它們對(duì)PTP1B抑制活性的大小分析,具有原人參二醇型配基的化合物比具有3 種以上糖基的達(dá)瑪烷三萜更有效,糖基部分的存在可能降低了化合物對(duì)PTP1B的抑制活性;而具有R構(gòu)型的20(R)-人參皂苷-Rh2對(duì)PTP1B的抑制活性更強(qiáng)[60]。皂苷類化合物1~4的結(jié)構(gòu)如圖6所示。

    圖6 皂苷類化合物1~4的結(jié)構(gòu)Fig.6 Structures of saponins 1–4

    3.4 生物堿類化合物

    生物堿是一種含氮有機(jī)化合物,參與植物體的防御功能。天然生物堿具有多種生理活性,如抗癌、抗炎和抗糖尿病等[61]。調(diào)料九里香(Murraya koenigii(L.)Spreng)還稱為咖喱葉,廣泛分布于東南亞地區(qū),在印度作為調(diào)味食品。在民間,其綠葉可用于治療炎癥、痢疾、水腫等疾病[62]。研究人員通過(guò)活性跟蹤法從調(diào)料九里香氯仿提取相分離出4 種新的和14 種已知的咔唑生物堿,其中已知的生物堿mahanine(生物堿類化合物1)、mahanimbine(生物堿類化合物2)、8,8’-biskoenigine(生物堿類化合物3)對(duì)PTP1B具有顯著的抑制作用[63]。魚腥草是《中華人民共和國(guó)藥典》(2015版)中記載的一種重要的中藥,其地上部分在東南亞國(guó)家也是很受歡迎的野菜[64]。有學(xué)者通過(guò)活性跟蹤法從魚腥草氯仿提取部位中分離出2 種新生物堿——哌內(nèi)酰胺D的同系物(生物堿類化合物4)、4-羥基-1,2,3-三甲氧基-7H-二苯并喹啉-7-酮(4-hydroxy-1,2,3-trimethoxy-7H-dibenzo-quinolin-7-one)(生物堿類化合物5)以及2 種已知生物堿——7-氧代脫氫阿西米洛賓(7-oxodehy-droasimilobine)(生物堿類化合物6)和頭花千金藤二酮B(cepharadione B)(生物堿類化合物7)。通過(guò)研究這些生物堿與PTP1B的構(gòu)效關(guān)系發(fā)現(xiàn),這些化合物含有3 個(gè)六原子環(huán),其中1 個(gè)含氮五環(huán)或六環(huán),這種結(jié)構(gòu)可能在對(duì)PTP1B抑制活性中發(fā)揮了積極作用[65]。生物堿類化合物1~7的結(jié)構(gòu)如圖7所示。

    圖7 生物堿類化合物1~7的結(jié)構(gòu)Fig.7 Structures of alkaloids 1– 7

    3.5 其他

    除上述天然酚類、萜類、皂苷類化合物和生物堿外,食源性天然產(chǎn)物還有溴酚、香豆素和木脂素等,也具有PTP1B抑制活性。溴酚是海洋藻類食物中普遍存在的化學(xué)成分,其結(jié)構(gòu)苯環(huán)中溴原子和溴酚衍生物的烷基鏈長(zhǎng)度對(duì)PTP1B抑制起關(guān)鍵作用[66]。

    4 開(kāi)發(fā)PTP1B抑制劑的挑戰(zhàn)

    盡管大量的研究表明,一些天然產(chǎn)物對(duì)PTP1B具有顯著的抑制效果,其結(jié)構(gòu)中的特定基團(tuán)是抑制PTP1B的關(guān)鍵所在,但是這些PTP1B抑制劑作為臨床藥物制劑的開(kāi)發(fā)仍然存在一些問(wèn)題。一方面,PTP1B與其他PTPs的催化活性位點(diǎn)具有高度的同源性;另一方面,PTP1B中的催化結(jié)構(gòu)域具有高極性特征,這導(dǎo)致大部分抑制劑對(duì)PTP1B的選擇性不佳,且對(duì)細(xì)胞的通透性和生物利用度較低[67]。因此,開(kāi)發(fā)出精準(zhǔn)抑制PTP1B的藥物制劑是一項(xiàng)極具挑戰(zhàn)性的任務(wù)。

    4.1 PTP1B抑制劑的選擇性

    選擇性是PTP1B抑制劑作為藥物開(kāi)發(fā)的主要問(wèn)題之一。由于所有的PTPs的活性位點(diǎn)(即pTyr結(jié)合位點(diǎn))都具有高度的結(jié)構(gòu)保守性,阻礙了開(kāi)發(fā)高親和力和選擇性PTP1B抑制劑的進(jìn)程。然而,通過(guò)對(duì)PTPs底物特異性的研究發(fā)現(xiàn),單獨(dú)的pTyr部分不足以進(jìn)行高親和力結(jié)合,而pTyr兩側(cè)的殘基對(duì)PTP1B底物識(shí)別具有重要作用,且其他的PTPs不具有與之相同的活性中心外圍的作用位點(diǎn)[9,68]。因此,PTP1B活性位點(diǎn)附近的子口袋也可以作為其抑制劑開(kāi)發(fā)的目標(biāo),即開(kāi)發(fā)出針對(duì)活性位點(diǎn)和獨(dú)特的相鄰?fù)鈬稽c(diǎn)的雙配基抑制劑。例如,研究人員根據(jù)PTP1B活性位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)特征,合成出化合物Compound 2(圖8),并分析其與PTP1B之間的相互作用機(jī)制。結(jié)果表明,不可水解的pTyr模擬物——膦(二氟甲基)-苯丙氨酸占據(jù)了活性位點(diǎn),且遠(yuǎn)端4-膦二氟甲基苯基乙?;c近端非催化位點(diǎn)Lys41、Arg47和Asp48殘基形成了范德華力和離子間作用力。該研究結(jié)果顯示,盡管PTP1B與Compound 2相互作用的氨基酸殘基并不是PTP1B所獨(dú)有的,但是所有與之相互作用的氨基酸殘基組合都不同于其他PTPs的氨基酸殘基[69]。這些研究為PTP1B抑制劑在生物學(xué)和藥理學(xué)研究中所需的效力和特異性提供了分子基礎(chǔ),也為進(jìn)一步設(shè)計(jì)出有效的、具有特異性的PTP1B抑制劑提供了新思路。

    圖8 Compound 2的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.8 Structure of compound 2

    4.2 PTP1B抑制劑的生物利用度

    生物利用度是PTP1B抑制劑作為藥物開(kāi)發(fā)的另一重要問(wèn)題。由于PTPs的活性位點(diǎn)在生理pH值下帶有2 個(gè)負(fù)電荷,而目前報(bào)道的以活性跟蹤法獲得的PTP1B抑制劑大多數(shù)都具有高帶電性[68],這使得其在細(xì)胞中的滲透性降低,因此,研究人員針對(duì)這一問(wèn)題提出了幾種策略:其一,最直接有效的方法就是減少化合物的負(fù)電荷數(shù)量。例如,研究人員合成的小分子肽類PTP1B抑制劑——二羧酸類似物(圖9A)因帶有2 個(gè)負(fù)電荷而限制了其對(duì)細(xì)胞的滲透性,當(dāng)該化合物中的一個(gè)羧基被四唑基所取代后形成鄰四唑類似物(圖9B),不僅保持了其抑制活性的穩(wěn)定性,還增加了其對(duì)細(xì)胞的滲透性和對(duì)細(xì)胞的功能活性[70]。其二,因細(xì)胞膜的磷脂雙分子層具有疏水性,藥物通過(guò)細(xì)胞膜的過(guò)程可視為是在親水和疏水介質(zhì)之間的再分配,因此,可以通過(guò)增加化合物的疏水性,引入更多的疏水基團(tuán),使其變得更加親脂,從而提高化合物的生物利用度。其三,由于PTP1B的變構(gòu)位點(diǎn)與pTry結(jié)合位點(diǎn)不同,其保守性較差、極性較弱,因此,開(kāi)發(fā)靶向變構(gòu)位點(diǎn)抑制劑是提高化合物生物利用度的一種替代策略。例如,在3.1節(jié)中提到的咖啡酰衍生物綠原酸和菊苣酸是通過(guò)與PTP1B變構(gòu)位點(diǎn)的有效結(jié)合從而對(duì)其發(fā)揮變構(gòu)抑制作用的。

    圖9 二羧酸類似物(A)和鄰四唑類似物(B)的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.9 Structures of dicarboxylic acid analogue (A) and ortho tetrazole analogue (B)

    5 結(jié) 語(yǔ)

    全球糖尿病的患病率正逐年上升,若不能很好地控制2型糖尿病和肥胖癥,患者會(huì)出現(xiàn)各種并發(fā)癥。大量研究已經(jīng)證明PTP1B抑制劑有望成為治療2型糖尿病和肥胖癥的候選藥物,但目前還沒(méi)有被美國(guó)食品藥品管理局批準(zhǔn)的臨床使用的PTP1B抑制劑,究其原因可能是這些抑制劑對(duì)細(xì)胞膜滲透性低或選擇性不佳,因此,設(shè)計(jì)PTP1B抑制劑藥物成為了一項(xiàng)困難重重又極富挑戰(zhàn)的任務(wù)。天然產(chǎn)物因具有結(jié)構(gòu)多樣、種類繁多、多靶點(diǎn)以及、多途徑等優(yōu)點(diǎn),一直都是作為藥物開(kāi)發(fā)的主要原料,現(xiàn)階段使用的藥物約有一半是從天然產(chǎn)物中衍生而來(lái),在生物化學(xué)研究以及藥物創(chuàng)新領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。本文對(duì)食源性PTP1B抑制劑的構(gòu)效關(guān)系以及作用機(jī)制進(jìn)行了綜述,發(fā)現(xiàn)多種食源性天然產(chǎn)物如酚類、萜類、皂苷類化合物和生物堿等對(duì)PTP1B具有顯著的抑制活性,且大多數(shù)已發(fā)表的研究都集中于酚類和萜類抑制劑,其結(jié)構(gòu)中獨(dú)特的化學(xué)基團(tuán)在抑制P T P 1 B 中起著關(guān)鍵作用。

    雖然這些食源性天然產(chǎn)物在抑制PTP1B的研究中取得了一定進(jìn)展,但尚有些問(wèn)題需要思考和解決:1)由于PTP1B催化結(jié)構(gòu)域的高帶電性質(zhì),以及PTPs中活性位點(diǎn)和第二結(jié)合位點(diǎn)結(jié)構(gòu)具有同質(zhì)性,導(dǎo)致靶標(biāo)選擇性不佳。但PTP1B中的pTyr兩側(cè)殘基對(duì)其底物識(shí)別具有重要作用,是其他PTPs所不具有的活性中心外圍作用位點(diǎn),因此,建議將此獨(dú)特的相鄰?fù)鈬稽c(diǎn)作為PTP1B抑制劑開(kāi)發(fā)的下一個(gè)研究目標(biāo);2)大多數(shù)PTP1B抑制劑的高帶電性是其生物利用度低的主要原因之一,因此,建議針對(duì)此化學(xué)特性對(duì)其進(jìn)行化學(xué)修飾或改性,如減少化合物的負(fù)電荷數(shù)量、增加化合物的疏水性或開(kāi)發(fā)靶向變構(gòu)位點(diǎn)抑制劑等;3)盡管天然PTP1B抑制劑表現(xiàn)出顯著的抑制效果,但是目前大部分研究都停留在天然產(chǎn)物與PTP1B的體外分子對(duì)接模擬階段,缺乏體內(nèi)PTP1B抑制活性的驗(yàn)證以及相關(guān)調(diào)控信號(hào)通路的研究,特別是關(guān)于體內(nèi)用藥劑量、給藥途徑、副作用以及不良反應(yīng)等生物安全性相關(guān)的研究甚少。因此,建議研究中可以補(bǔ)充相關(guān)代謝組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、基因組學(xué)和蛋白組學(xué)等組學(xué)技術(shù),深入探究天然PTP1B抑制劑的生物安全性和分子調(diào)控機(jī)制;4)隨著天然產(chǎn)物活性物質(zhì)的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)的發(fā)展日益成熟,利用活性跟蹤法分離和鑒定出了上百種PTP1B抑制劑,但是大部分研究都著重于單一天然產(chǎn)物對(duì)PTP1B的抑制作用,對(duì)于復(fù)配天然產(chǎn)物的PTP1B的抑制研究鮮有報(bào)道,缺乏對(duì)PTP1B的3 個(gè)活性位點(diǎn)和活性中心外圍的作用位點(diǎn)的協(xié)同抑制的研究,因此,根據(jù)天然PTP1B抑制劑的抑制機(jī)理,復(fù)配出具有協(xié)同抑制作用的PTP1B抑制劑有待進(jìn)一步研究。

    總之,食源性天然產(chǎn)物因其結(jié)構(gòu)的多樣性和新穎性在疾病的預(yù)防和治療方面發(fā)揮著獨(dú)特的生理活性和作用,為開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)新型抗糖尿病藥物提供了化學(xué)分子模板,本文可為進(jìn)一步開(kāi)展食源性天然產(chǎn)物抗糖尿病研究提供理論基礎(chǔ)和新思路。

    猜你喜歡
    食源性類化合物磷酸化
    秋冬季高發(fā)食源性疾病的危害與預(yù)防
    中老年保健(2022年1期)2022-08-17 06:14:22
    論食品安全與食源性疾病的控制
    夏季食品安全頭號(hào)殺手——食源性疾病
    中老年保健(2021年6期)2021-08-24 06:54:00
    ITSN1蛋白磷酸化的研究進(jìn)展
    保健酒中非法添加一種西地那非類化合物的確證
    中成藥(2018年12期)2018-12-29 12:26:08
    一鍋法合成苯并噁唑類化合物
    食源性病原微生物的危害
    新型環(huán)磷腈類化合物的合成
    MAPK抑制因子對(duì)HSC中Smad2/3磷酸化及Smad4核轉(zhuǎn)位的影響
    石巖楓中兩個(gè)新的木脂素類化合物
    国产精品亚洲av一区麻豆| 精品国产亚洲在线| 丝袜人妻中文字幕| www.自偷自拍.com| 免费看a级黄色片| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲五月天丁香| 桃红色精品国产亚洲av| 最新在线观看一区二区三区| 人妻久久中文字幕网| 色尼玛亚洲综合影院| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久 成人 亚洲| 老司机午夜福利在线观看视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久久国产欧美日韩av| 岛国在线观看网站| 久久热在线av| 99久久综合精品五月天人人| 国产主播在线观看一区二区| 欧美日韩黄片免| 人人妻人人看人人澡| 成人欧美大片| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 男人舔女人的私密视频| 国产av麻豆久久久久久久| 黄色丝袜av网址大全| 色av中文字幕| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人妻久久中文字幕网| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲专区字幕在线| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产三级黄色录像| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲免费av在线视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产精品国产高清国产av| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久久久久免费高清国产稀缺| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产一区在线观看成人免费| 成在线人永久免费视频| 一本一本综合久久| www国产在线视频色| 午夜激情福利司机影院| netflix在线观看网站| 亚洲欧美日韩高清专用| 黄色视频,在线免费观看| av欧美777| 国产一区在线观看成人免费| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品不卡国产一区二区三区| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产人伦9x9x在线观看| 99久久国产精品久久久| 两性夫妻黄色片| 国产成人精品久久二区二区91| 色播亚洲综合网| 99热6这里只有精品| 麻豆一二三区av精品| 亚洲成人久久性| 久久久久久久久久黄片| 操出白浆在线播放| 国产亚洲精品一区二区www| 国产av在哪里看| 视频区欧美日本亚洲| 成人av在线播放网站| 欧美一级a爱片免费观看看 | 一本久久中文字幕| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久精品91蜜桃| 18禁国产床啪视频网站| 最近在线观看免费完整版| 黑人欧美特级aaaaaa片| 成人国产一区最新在线观看| 久久中文字幕一级| 人妻久久中文字幕网| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一级a爱片免费观看的视频| av有码第一页| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 99热这里只有精品一区 | 日韩欧美在线二视频| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 我要搜黄色片| 国产成人aa在线观看| www.熟女人妻精品国产| 国产精品免费视频内射| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 日韩欧美三级三区| 狠狠狠狠99中文字幕| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产久久久一区二区三区| 欧美高清成人免费视频www| 小说图片视频综合网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 1024香蕉在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 怎么达到女性高潮| 国产精品亚洲一级av第二区| 午夜a级毛片| 日韩欧美免费精品| e午夜精品久久久久久久| 淫妇啪啪啪对白视频| 特级一级黄色大片| 国产三级在线视频| 亚洲av电影在线进入| 午夜福利在线观看吧| 女人被狂操c到高潮| 日日夜夜操网爽| 国产精品一区二区精品视频观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 黄色视频不卡| 午夜亚洲福利在线播放| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久精品人妻少妇| 亚洲国产精品sss在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美三级亚洲精品| 无遮挡黄片免费观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产精品,欧美在线| 亚洲精品美女久久av网站| 国产黄色小视频在线观看| 国产av不卡久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产主播在线观看一区二区| 香蕉av资源在线| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| a级毛片a级免费在线| 在线观看一区二区三区| 狂野欧美激情性xxxx| 天堂√8在线中文| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 欧美成人午夜精品| 国产爱豆传媒在线观看 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 99久久国产精品久久久| 黄色片一级片一级黄色片| 女人被狂操c到高潮| 欧美另类亚洲清纯唯美| x7x7x7水蜜桃| 日韩大尺度精品在线看网址| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲国产精品sss在线观看| 午夜福利免费观看在线| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲欧美激情综合另类| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲色图av天堂| 久久久久久久久中文| 国产1区2区3区精品| 波多野结衣巨乳人妻| 欧美高清成人免费视频www| 在线国产一区二区在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产高清激情床上av| 国产三级在线视频| 久久99热这里只有精品18| 天堂√8在线中文| 免费看美女性在线毛片视频| 精品久久久久久久末码| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久久亚洲精品不卡| 老熟妇仑乱视频hdxx| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产一区二区在线观看日韩 | 丁香六月欧美| 欧美日韩精品网址| 午夜视频精品福利| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日本 av在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲国产精品成人综合色| 国产高清有码在线观看视频 | 脱女人内裤的视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 黄片小视频在线播放| 听说在线观看完整版免费高清| av片东京热男人的天堂| 亚洲av五月六月丁香网| 久热爱精品视频在线9| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 我要搜黄色片| 亚洲av电影不卡..在线观看| 欧美三级亚洲精品| 日韩欧美国产一区二区入口| 最近最新免费中文字幕在线| 中文字幕久久专区| 99久久精品热视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 精品国产美女av久久久久小说| 一进一出抽搐动态| 香蕉久久夜色| 少妇人妻一区二区三区视频| 久9热在线精品视频| 丁香六月欧美| 美女黄网站色视频| 性色av乱码一区二区三区2| 高清毛片免费观看视频网站| 欧美zozozo另类| 亚洲人成电影免费在线| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩大尺度精品在线看网址| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久中文看片网| 国产精品爽爽va在线观看网站| 99国产精品一区二区蜜桃av| 热99re8久久精品国产| 免费一级毛片在线播放高清视频| 在线观看www视频免费| 精品国产美女av久久久久小说| 国产高清有码在线观看视频 | 在线播放国产精品三级| 亚洲avbb在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 久久久久久久久久黄片| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 中出人妻视频一区二区| 亚洲成人免费电影在线观看| 午夜福利欧美成人| 国内精品久久久久久久电影| 一本大道久久a久久精品| 在线免费观看的www视频| 欧美zozozo另类| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日本五十路高清| 香蕉丝袜av| 精品欧美国产一区二区三| 午夜福利成人在线免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 欧美日本亚洲视频在线播放| 手机成人av网站| 国产精品电影一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲一区中文字幕在线| 午夜福利高清视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久精品国产亚洲av高清一级| www国产在线视频色| 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产亚洲欧美98| 一本大道久久a久久精品| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品精品国产色婷婷| 99国产综合亚洲精品| 黄频高清免费视频| 成人手机av| 黄色丝袜av网址大全| 麻豆成人av在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲精品美女久久av网站| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 9191精品国产免费久久| 国产免费av片在线观看野外av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 白带黄色成豆腐渣| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲五月天丁香| 欧美黄色淫秽网站| 欧美乱色亚洲激情| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品一区二区三区四区久久| 99精品欧美一区二区三区四区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久精品国产清高在天天线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 99国产极品粉嫩在线观看| 久久99热这里只有精品18| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品久久久久久久久久免费视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 91字幕亚洲| 国产免费av片在线观看野外av| 岛国在线免费视频观看| 久99久视频精品免费| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 校园春色视频在线观看| 午夜福利高清视频| 欧美日韩乱码在线| 丁香六月欧美| 欧美黑人精品巨大| 欧美丝袜亚洲另类 | 757午夜福利合集在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美日韩一级在线毛片| 国产精品亚洲一级av第二区| 丝袜美腿诱惑在线| 国产熟女xx| 免费电影在线观看免费观看| 国产单亲对白刺激| 757午夜福利合集在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 国产亚洲精品av在线| 在线观看www视频免费| 亚洲精品一区av在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲成av人片在线播放无| 欧美不卡视频在线免费观看 | 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产一区二区在线观看日韩 | 免费在线观看亚洲国产| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品一区二区免费欧美| 国产久久久一区二区三区| 丁香六月欧美| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 岛国视频午夜一区免费看| 99久久国产精品久久久| 麻豆一二三区av精品| 国产午夜福利久久久久久| a级毛片a级免费在线| 色尼玛亚洲综合影院| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久精品成人免费网站| 国产精品亚洲美女久久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 丁香欧美五月| 99热6这里只有精品| 国产精品亚洲一级av第二区| 中国美女看黄片| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 国产在线观看jvid| 一区二区三区激情视频| 午夜影院日韩av| 99国产综合亚洲精品| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 在线观看一区二区三区| 黄频高清免费视频| 精品无人区乱码1区二区| 丁香六月欧美| 动漫黄色视频在线观看| 一进一出好大好爽视频| 亚洲人与动物交配视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美乱妇无乱码| 色综合婷婷激情| 草草在线视频免费看| 国产日本99.免费观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 最近在线观看免费完整版| 国产人伦9x9x在线观看| 香蕉av资源在线| 女人被狂操c到高潮| 黄色 视频免费看| 91国产中文字幕| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| cao死你这个sao货| 久久99热这里只有精品18| 一个人免费在线观看电影 | 天堂动漫精品| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美黑人巨大hd| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲专区国产一区二区| 在线永久观看黄色视频| 91国产中文字幕| 国产精品亚洲美女久久久| 午夜福利欧美成人| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美中文综合在线视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲精品一区av在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 色av中文字幕| 手机成人av网站| 国产精品影院久久| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 老司机午夜福利在线观看视频| 成人欧美大片| 18禁观看日本| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美久久黑人一区二区| 97碰自拍视频| 国产不卡一卡二| 国产精品影院久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产日本99.免费观看| 亚洲电影在线观看av| 欧美zozozo另类| 亚洲国产精品合色在线| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产99久久九九免费精品| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久久精品大字幕| 在线免费观看的www视频| 看免费av毛片| 男人舔奶头视频| 成人午夜高清在线视频| 88av欧美| 午夜精品在线福利| 最新美女视频免费是黄的| 在线观看www视频免费| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲av成人一区二区三| 18禁美女被吸乳视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 两个人视频免费观看高清| 亚洲成av人片在线播放无| 十八禁网站免费在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲av电影不卡..在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看 | 两性夫妻黄色片| 国内精品一区二区在线观看| 精品久久久久久久毛片微露脸| 一本大道久久a久久精品| 精品久久久久久久毛片微露脸| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美国产日韩亚洲一区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| av在线天堂中文字幕| 9191精品国产免费久久| or卡值多少钱| 欧美zozozo另类| 观看免费一级毛片| 国产91精品成人一区二区三区| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜免费成人在线视频| 在线看三级毛片| 一a级毛片在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| aaaaa片日本免费| 丁香欧美五月| 欧美色欧美亚洲另类二区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产精品影院久久| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 男女那种视频在线观看| 日韩欧美三级三区| 国产成人av激情在线播放| 欧美黄色片欧美黄色片| netflix在线观看网站| 亚洲av电影在线进入| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产黄片美女视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 身体一侧抽搐| a级毛片在线看网站| 白带黄色成豆腐渣| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久久国产成人免费| 黄色a级毛片大全视频| 免费看a级黄色片| 国产高清有码在线观看视频 | 制服人妻中文乱码| 18禁观看日本| 亚洲精华国产精华精| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 好男人在线观看高清免费视频| 国产男靠女视频免费网站| 两人在一起打扑克的视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 黄片大片在线免费观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 午夜福利免费观看在线| 91麻豆av在线| 国产三级在线视频| 91国产中文字幕| 免费在线观看日本一区| 国产欧美日韩一区二区三| 成人三级做爰电影| 日韩欧美精品v在线| 操出白浆在线播放| 国产精品国产高清国产av| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美久久黑人一区二区| 88av欧美| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 18禁国产床啪视频网站| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲欧美精品综合久久99| www.熟女人妻精品国产| 国产精品亚洲美女久久久| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久伊人香网站| 一a级毛片在线观看| 99热6这里只有精品| 黄色成人免费大全| 国产男靠女视频免费网站| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲国产精品999在线| 中国美女看黄片| 不卡av一区二区三区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜激情av网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产成人欧美在线观看| 在线免费观看的www视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 欧美在线一区亚洲| 日本成人三级电影网站| 国产视频内射| 一进一出抽搐gif免费好疼| 色av中文字幕| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 听说在线观看完整版免费高清| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品欧美国产一区二区三| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久草成人影院| 国产精品一区二区精品视频观看| 热99re8久久精品国产| 精品人妻1区二区| 正在播放国产对白刺激| 亚洲男人天堂网一区| 可以在线观看毛片的网站| 日韩欧美免费精品| 757午夜福利合集在线观看| 欧美色视频一区免费| www.自偷自拍.com| 午夜久久久久精精品| 草草在线视频免费看| 久久久久久久久免费视频了| 天堂动漫精品| 成人国产综合亚洲| 欧美黑人巨大hd| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 91麻豆av在线| 久久久久久国产a免费观看| 无限看片的www在线观看| 日韩欧美免费精品| 国产精品免费视频内射| 国产成人影院久久av| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲人成77777在线视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日韩有码中文字幕| 在线视频色国产色| 亚洲精品av麻豆狂野| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 老汉色∧v一级毛片| 美女 人体艺术 gogo| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产高清videossex| 亚洲男人天堂网一区| 又黄又爽又免费观看的视频| 桃红色精品国产亚洲av| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 中文字幕最新亚洲高清| 精品免费久久久久久久清纯| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 欧美3d第一页| 精品国产美女av久久久久小说| 无限看片的www在线观看| 精品久久久久久久末码| 久久久国产欧美日韩av| 久久久久精品国产欧美久久久| 我要搜黄色片| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 少妇的丰满在线观看| 在线永久观看黄色视频| 亚洲专区字幕在线| 在线观看午夜福利视频| 国产精品久久久av美女十八| 国产av一区在线观看免费| 日本免费a在线| 久久香蕉精品热| 精品日产1卡2卡| 国产精品一及| 窝窝影院91人妻| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 免费观看精品视频网站| 成人精品一区二区免费| 天堂动漫精品| 99国产精品99久久久久|