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    柴芍乳增膠囊抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

    2023-10-02 15:44:37楊銘肖丹丹于德偉赫慧楊明
    關(guān)鍵詞:鎮(zhèn)痛肉芽腫抗炎

    楊銘 肖丹丹 于德偉 赫慧 楊明

    【摘 要】目的:觀察柴芍乳增膠囊抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法:灌胃給予大鼠或小鼠柴芍乳增膠囊高、中、低劑量(1.2 g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg),采用大鼠肉芽腫實(shí)驗(yàn)、小鼠熱板實(shí)驗(yàn)和醋酸扭體實(shí)驗(yàn),觀察其抗炎、鎮(zhèn)痛作用及對肉芽腫實(shí)驗(yàn)大鼠血清中前列腺素E2(PGE2)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影響。結(jié)果:與模型對照組比較,高、中、低劑量組肉芽腫重量明顯降低(P<0.05或P<0.01),高、中劑量組PGE2、TNF-α含量降低(P<0.05或P<0.01),高、中、低劑量組NO含量降低、SOD活性增加(P<0.05或P<0.01);與溶劑對照組比較,高、中、低劑量組小鼠熱板痛閾值明顯提高(P<0.05或P<0.01),高、中、低劑量組小鼠扭體次數(shù)減少,高劑量組扭體出現(xiàn)時(shí)間延長(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:柴芍乳增膠囊具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用,其作用與降低血清中PGE2、TNF-α、NO含量,提高SOD活性有關(guān)。

    【關(guān)鍵詞】柴芍乳增膠囊;抗炎;鎮(zhèn)痛;肉芽腫

    【中圖分類號】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517(2023)17-0028-04

    DOI:10.3969/j.issn.1007-8517.2023.17.zgmzmjyyzz202317007

    Study on Anti - inflammatory and Analgesia Effects of Chaishao Ruzeng Capsule

    YANG Ming1 XIAO Dandan2 YU Dewei1 HE Hui1 YANG Ming1*

    1.Jilin Academy of Traditional Chinese Medicine,Changchun 130012,China;2.School of Pharmacy, Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China

    Abstract:Objective To observe the anti-inflammatory and analgesia effects of Chaishao Ruzeng capsule. Methods Rats or mice were given high, medium and low doses (1.2 g/kg, 0.6 g/kg, 0.3 g/kg) of Chaishao Ruzeng Capsule by intragastric administration. To observe its anti-inflammatory and analgesia effects and effects on the contents of PGE2, TNF-α,NO and SOD in serum of granuloma experimental rats. Results Compared with model control group, the granuloma weight in high, medium and low dose groups was significantly decreased (P<0.05 or P<0.01), the contents of PGE2 and TNF-αin high and medium dose groups were decreased (P<0.05 or P<0.01), the content of NO in high, medium and low dose groups was decreased and the activity of SOD was increased (P<0.05 or P<0.01). Compared with the solvent control group, the hot plate pain threshold of mice in high-dose, medium-dose and low-dose groups was significantly increased (P<0.05 or P<0.01), the writhing times of mice in high-dose, medium-dose and low-dose groups were decreased, and the writhing time of mice in high-dose group was prolonged (P<0.05 or P<0.01). Conclusions Chaishao Ruzeng capsule has obvious anti-inflammatory and analgesia effects, which are related to decreasing the contents of PGE2, TNF-αand NO in serum and increasing the activity of SOD.

    Key words:Chaishao Ruzeng Capsule; Anti-inflammatory; Analgesia; Granulomatous

    乳腺增生病,又稱乳腺小葉增生病,屬中醫(yī)乳癖范疇。是臨床上最常見的乳房疾病。其發(fā)病率占乳房疾病的首位[1]。中醫(yī)認(rèn)為本病是由于情志不遂憂郁不解,久郁傷肝,導(dǎo)致肝氣郁結(jié),氣機(jī)瘀滯,蘊(yùn)結(jié)于乳房胃絡(luò),乳絡(luò)經(jīng)脈阻塞不通,不通則痛而引起乳房疼痛;肝氣郁久化熱,熱灼津液為痰,氣滯痰凝,即可形成乳房腫塊。乳痛和乳房腫塊等兩大主癥為主要臨床表現(xiàn)。柴芍乳增膠囊處方是本課題組根據(jù)我院臨床應(yīng)用多年的內(nèi)部制劑處方,經(jīng)對各方藥配伍臨床觀察,結(jié)合臨床辨病與辨證,確立的治療乳腺增生病的處方,具有疏肝理氣、調(diào)沖和血,化痰散結(jié)之功效。本研究通過大鼠肉芽腫實(shí)驗(yàn)、小鼠熱板實(shí)驗(yàn)和醋酸扭體實(shí)驗(yàn),觀察其抗炎、鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物 Wistar大鼠SPF級,雄性,體重180~200 g;KM小鼠,SPF級,雌雄兼用,19~21 g。購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司,生產(chǎn)許可證號:SCXK(遼)2020-0001。飼料:大小鼠維持飼料均購自北京(天津)科奧協(xié)力飼料有限公司,許可證號:津飼證(2020)01005。動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)4 d,正常飲食。飼養(yǎng)環(huán)境:屏障環(huán)境動(dòng)物觀察室,溫度:20~24 ℃,相對濕度:40%~70%,換氣次數(shù) 10~15次/h,照明時(shí)間每日12/12 h交替照明。

    1.2 藥物 柴芍乳增膠囊,規(guī)格:0.4 g/粒(3.875生藥/g),批號:200601,由吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院提供。阿司匹林,規(guī)格:100 mg/片,批號:BJ54292,由拜耳醫(yī)藥保健有限公司生產(chǎn)。

    1.3 試劑 前列腺素E2(PGE2)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、ELISA 試劑盒,長春晶美生物科技有限公司產(chǎn)品;一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒,南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

    1.4 儀器 電子天平(d=0.1 mg),上海精密科學(xué)儀器有限公司;GJ-8402型熱板測痛儀,浙江寧海白石電子醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品;酶標(biāo)儀ST-360,上??迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司;T6紫外可見分光光度計(jì),北京普利生有限公司;TGL-16B高速離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠。

    1.5 方法

    1.5.1 對大鼠棉球肉芽腫及血清中PGE2、TNF-α、NO、SOD含量的影響 取大鼠50只,腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg,麻醉,消毒,于腋下左右兩側(cè)埋入重量20 mg的無菌棉球(青霉素0.2 mg/0.2 mL,浸泡,烘干)各一個(gè)。于術(shù)后2 h分隨機(jī)分為5組,分別為柴芍乳增膠囊(膠囊粉)高、中、低(1.2 g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg)三個(gè)劑量組、陽性藥組(乳康片1.0 g/kg)及模型對照組(蒸餾水),每日灌胃給藥一次(10 mL/kg)。連續(xù)給藥7 d后,戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉,使用眼科剪剪開腹腔,腹主動(dòng)脈取血3 mL,室溫放置20 min,離心20 min(速度3000 r/min,半徑10 cm)分離血清。取血清按照試劑盒說明書方法操作,檢測PGE2、TNF-α、NO、SOD含量。處死動(dòng)物,將兩側(cè)腋下棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出,剔除脂肪組織,在60 ℃烘箱中放置12 h后稱重。將稱得的重量減去棉球的重量即得肉芽腫重量。

    1.5.2 對小鼠熱板的影響 取預(yù)先篩選合格(凡舔足時(shí)間小于5 s或大于30 s或跳躍者棄之不用)雌性小鼠50只,隨機(jī)分為5組,分別為柴芍乳增膠囊高、中、低(1.2 g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg)三個(gè)劑量組、陽性藥組(阿司匹林20 mg/kg)及溶劑對照組(蒸餾水),灌胃給藥一次(20 mL/kg)。于給藥后2 h,將小鼠分別置于熱板上[溫度控制在(55±0.5) ℃],記錄小鼠自放在熱板上出現(xiàn)舔足所需時(shí)間(秒)作為該鼠的痛閾值。如痛閾值超過60 s,即停止測試而按60 s計(jì)。觀察小鼠60 s內(nèi)痛閾值。

    1.5.3 對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響 取雌性小鼠50只,按體重隨機(jī)分為5組,分別為柴芍乳增膠囊高、中、低(1.2、0.6、0.3 g/kg)三個(gè)劑量組、陽性藥組(阿司匹林20 mg/kg)及溶劑對照組(蒸餾水),灌胃給藥一次(20 mL/kg)。于給藥后2 h,腹腔注射0.8%醋酸溶液0.1 mL/10 g,觀察小鼠15 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時(shí)間及扭體反應(yīng)次數(shù)。

    1.6 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 對大鼠棉球肉芽腫的的影響 柴芍乳增膠囊高、中、低劑量組及陽性藥組肉芽腫重量明顯低于模型對照組,有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。表明柴芍乳增膠囊能夠明顯抑制棉球肉芽腫重量。結(jié)果見表1。

    2.2 對棉球肉芽腫大鼠血清中PGE2、TNF-α、NO、SOD含量的影響柴芍乳增膠囊高、中劑量組及陽性藥組能明降低PGE2、TNF-α含量,高、中、低劑量組及陽性藥組能明顯降低NO含量,增加SOD活性,與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見表2。

    2.3 對小鼠熱板的影響 柴芍乳增膠囊高、中、低劑量組及陽性藥組能明顯延長小鼠舔足出現(xiàn)時(shí)間提高痛閾值,與溶劑對照組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見表3。

    2.4 對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響 柴芍乳增膠囊高、中、低劑量組和陽性藥組能減少化學(xué)刺激所引起的小鼠扭體次數(shù),高劑量組和陽性藥組能延長小鼠出現(xiàn)扭體時(shí)間,與溶劑對照組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見表4。

    3 討論

    柴芍乳增膠囊由柴胡、郁金、赤芍、夏枯草、香附、鹿角膠、橘核、玄參、浙貝母、海藻組成。疏肝理氣,調(diào)沖和血,化痰散結(jié)。用于肝郁氣滯,沖任失調(diào),痰凝血瘀所致的乳房腫塊、乳房脹痛、煩躁易怒,西醫(yī)之乳腺小葉增生見上述證候者。方中柴胡具有和解少陽、疏肝解郁、升陽舉陷的功效, 柴胡皂苷具有良好的抗炎、抗病毒作用[2];郁金具有行氣化瘀止痛、清心解郁、利膽退黃涼血之功,能通過促炎性細(xì)胞因子的釋放發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用[3];赤芍清熱涼血,散瘀止痛,有抗炎和解痙鎮(zhèn)痛的作用[4-5];夏枯草清肝瀉火、明目、散結(jié)消腫,對乳腺炎及乳腺增生癥有治療作用[6];香附具有行氣解郁、調(diào)經(jīng)止痛的功效,具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用[7];鹿角膠具有溫補(bǔ)肝腎、益精血、止血的功效,有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛作用[8];橘核具有理氣、散結(jié)、止痛的功效,有較好的鎮(zhèn)痛抗炎作用[9];玄參清熱涼血,滋陰降火,解毒散結(jié),對炎癥因子的釋放具有抑制作用[10];浙貝母具有鎮(zhèn)痛止咳、抗炎抑菌和抗癌抗腫瘤等功效[11],海藻軟堅(jiān)、消痰、利水、退腫。研究結(jié)果表明,柴芍乳增膠囊能明顯減輕大鼠棉球肉芽腫的重量,顯示對炎癥有明顯的抑制作用;能明顯提高小鼠熱板痛閾值,減少醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù),顯示有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

    炎癥是在致炎因素的作用下,由炎癥細(xì)胞及其釋放的炎癥介質(zhì)參與引起的一系列病理生理過程。炎癥介質(zhì)中PGE2能增強(qiáng)血管通透性,從而吸引中性粒細(xì)胞引起發(fā)熱,誘導(dǎo)疼痛引發(fā)炎癥損傷。TNF-α能介導(dǎo)炎性細(xì)胞向炎癥局部聚集,最終造成組織損傷、炎癥等病理變化。NO可導(dǎo)致發(fā)生炎癥部位的滲出和水腫[12-14]。研究發(fā)現(xiàn),柴芍乳增膠囊能降低棉球肉芽腫大鼠血清中PGE2、TNF-α、NO含量,同時(shí)能刺激機(jī)體產(chǎn)生大量的SOD,減輕氧自由基的損害。提示,其通過抑制炎癥介質(zhì)PGE2、TNF-α、NO釋放及增高SOD活性發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用。上述抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究為柴芍乳增膠囊臨床治療乳腺增生病提供了藥理學(xué)依據(jù)。

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