鄰苯二甲酸酯對育齡人群及其子代生殖健康影響的研究進(jìn)展

林彩云，尹飛飛，王惠子，楊 華

（1.海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心，海南 海口 570206；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)教育部重點實驗室，海南 ?？?571199；3.海南醫(yī)學(xué)院-香港大學(xué)熱帶傳染病聯(lián)合實驗室，海南 ?？?571199）

近年來，我國在經(jīng)歷社會經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的同時，育齡婦女總和生育率卻呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢。第7 次全國人口普查數(shù)據(jù)顯示，我國育齡婦女總和生育率僅為1.3%［1］，這表示我國已進(jìn)入全球低生育率國家行列。同時，我國育齡夫婦不孕不育率高達(dá)15.6%［2］，自然流產(chǎn)率已達(dá)15%［3］。因此，確定新的影響育齡人群生殖健康可干預(yù)的因素，將在很大程度上降低生育率的下行風(fēng)險，具有重大的社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展和公共衛(wèi)生意義。除年齡和遺傳因素之外，目前大量證據(jù)表明，食物、水、空氣和消費(fèi)品中合成和天然存在的環(huán)境化學(xué)物質(zhì)也可導(dǎo)致生育能力受損［4］。值得關(guān)注的是，環(huán)境內(nèi)分泌干擾化合物（endocrine-disrupting chemicals，EDCs）已成為繼“溫室效應(yīng)”和“臭氧層破壞”之后又一嚴(yán)重的全球性環(huán)境公害問題，被稱為“第三代環(huán)境污染物”。多項證據(jù)表明，EDCs 通過與激素受體相互作用、干擾激素作用或改變激素合成、釋放、轉(zhuǎn)運(yùn)或代謝過程來破壞人體的內(nèi)分泌功能，可能直接或間接損害生殖系統(tǒng)的發(fā)育和功能［5-7］。研究發(fā)現(xiàn)，全氟和多氟烷基化物（PFASs）、雙酚A（bisphenol A）、有機(jī)磷農(nóng)藥（organopesticides，OPs）、擬 除 蟲 菊 酯 類 農(nóng) 藥（pyrethroids，PYRs）與育齡女性生育力下降顯著相關(guān)。然而，關(guān)于使用量與日劇增的新型環(huán)境污染物，如新型塑化劑-鄰苯二甲酸酯（phthalates，phthalate acid esters，PAEs）等對育齡夫婦生育能力影響的研究總體非常有限，且當(dāng)前PAEs 及新型替代品在生殖健康的人群流行病學(xué)研究尚存在爭議，毒性機(jī)制仍處于探索階段。本文就當(dāng)今國內(nèi)外關(guān)于PAEs 對人群及各類動物生殖系統(tǒng)的各種影響的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，以期將來更加深入探討PAEs 與育齡人群生殖健康的關(guān)系。

1 鄰苯二甲酸酯的介紹

PAEs，又稱酞酸酯，是鄰苯二甲酸形成酯的總稱。常溫下為無色透明油狀粘稠液體，不易揮發(fā)，難溶于水而易溶于有機(jī)溶劑，屬于中等極性物質(zhì)［8，9］。PAEs 是一種常用塑料制品中的增塑劑，普遍存在于玩具、食品包裝、建筑材料、電子與醫(yī)療部件、個人護(hù)理產(chǎn)品、辦公學(xué)習(xí)用品等塑料包裝產(chǎn)品中［10］。PAEs 可分為兩類：低分子量（low molecular weight phthalates，LMWP，PAEs≤6 個碳鏈）、高分子 量（high molecular weight phthalates，HMWP，PAEs＞6 個碳鏈）［11］。鄰苯二甲酸二酯（2-乙基己基，di-2（ethylhexyl）-phthalate，DEHP）是產(chǎn)量最大的一種PAEs 化合物，也是近年來研究報道的熱點。由于PAEs 與塑料制品以一種非共價的方式結(jié)合，而且其使用年限長、易受紫外光等因素變化的影響，故其很容易釋放或遷移到周圍環(huán)境介質(zhì)中［12］，從 而 廣 泛 存 在 于 土 壤［13］、水［14］、室 內(nèi) 灰 塵［15］和 食物［16］等生態(tài)環(huán)境里，因此被認(rèn)為是一種新型環(huán)境污染物。多項研究顯示，PAEs 不僅能造成環(huán)境及水源的污染，還因其具有生殖毒性、遺傳毒性、免疫毒性、神經(jīng)毒性、致畸、致癌等多種毒性作用［17］，所以對人類健康尤其是對育齡人群及其子代生殖健康的影響不容忽視。

2 PAEs 對親本生殖健康的影響

2.1 對雌性生殖系統(tǒng)的影響

PAEs 的暴露對不同種系雌性動物的生殖器官均可產(chǎn)生影響，可能破壞雌性生殖器官和相關(guān)生殖細(xì)胞，使生殖組織形態(tài)發(fā)生改變并影響類固醇激素水平，導(dǎo)致雌性生殖系統(tǒng)的發(fā)育和功能異常，最終影響后代的生長發(fā)育。

2.1.1 對雌性生殖器官的影響 在人群研究方面有一項國內(nèi)女性鄰苯二甲酸酯暴露與卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）相關(guān)性的病例對照研究［18］發(fā)現(xiàn)大多數(shù)女性尿液中的鄰苯二甲酸酯代謝物濃度與血清雌二醇水平呈顯著反比關(guān)系，而與血清卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone，F(xiàn)SH）水平呈正比關(guān)系，該結(jié)果表明接觸某些鄰苯二甲酸酯可能會損害卵巢功能并增加女性卵巢早衰的概率。另一項國外基于原發(fā)性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）女性與鄰苯二甲酸正丁酯（mono-butyl phthalate，MBP）或其代謝物濃度的橫斷面病例對照研究［19］中發(fā)現(xiàn)POI 的女性血清中鄰苯二甲酸酯代謝物水平呈正相關(guān)，其中MBP 為最重要的一種，并且可能是POI 發(fā)生發(fā)展的一個危險因素。雖然已有一些學(xué)者提出鄰苯二甲酸酯會對卵巢功能產(chǎn)生不利影響，但在人群中的流行病學(xué)研究還非常有限。

在動物研究方面有許多與影響雌性生殖器官相關(guān)的報道，其中包括鵪鶉、斑馬魚、小鼠、大鼠等。Li 等［20］通 過 對 鵪 鶉 暴 露 于DEHP 及 其 主 要 代 謝 物鄰苯二甲酸單（2-乙基己基）酯（mono-（2-ethylhexyl）phthalate，MEHP）后對卵巢的作用進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)二者經(jīng)過受體介導(dǎo)的信號通路可以進(jìn)一步抑制雌激素的產(chǎn)生；另外還可以通過干擾下丘腦-垂體-卵 巢 軸（hypothalamic - pi - tuitary - ovarian axis，HPOA）的調(diào)控來抑制性激素的合成，從而引起性激素 分 泌 障 礙。Park 等［21］通 過 對21 d 雌 性 斑 馬 魚 暴露于不同劑量（0、2、10 和50 μg/mL）MEHP 后的研究發(fā)現(xiàn)，所有MEHP 暴露組中體內(nèi)雌二醇及孕激素水平均顯著增加，而暴露于劑量50 μg/mL MEHP中雌性斑馬魚排卵的數(shù)量明顯下降。Liu 等［22］研究發(fā)現(xiàn)暴露于DEHP 的哺乳期雌性小鼠（母代和F1代）卵巢中17β-羥甾類固醇脫氫酶（17-beta dehydrogenase 1，HSD17B）的表達(dá)水平顯著下調(diào)，并進(jìn)一步降低了血清與卵巢中雌激素的產(chǎn)生；不僅如此，卵巢中的DNA 損傷標(biāo)志物γH2AX 的比例呈上升趨勢，卵巢的凋亡水平也隨之出現(xiàn)上升，同時卵巢細(xì)胞的增殖表現(xiàn)為抑制狀態(tài)。Chen 等［23］將成年雌性斑馬魚暴露于鄰苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate，DBP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（diisobutyl phthalate，DIBP）以及二者聯(lián)合暴露30 d，通過對以上3 組的卵巢組織學(xué)、性激素水平及卵巢轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，在DBP 和DIBP 暴露組中，雌二醇水平均顯著降低，而晚期/成熟卵母細(xì)胞的百分比也表現(xiàn)為顯著下降；有趣的是，在聯(lián)合暴露下并沒有表現(xiàn)出顯著的影響；而在轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序時，聯(lián)合暴露組中卵巢的差異表達(dá)基因（differentially expressed genes，DEGs）在分子水平表現(xiàn)出潛在的生殖毒性，這表明聯(lián)合暴露組可能通過介導(dǎo)相關(guān)信號通路中關(guān)鍵基因的轉(zhuǎn)錄，從而破壞雌性斑馬魚的繁殖能力。Fu等［24］通 過 連 續(xù)30 d 暴 露 于DEHP 的ICR 小 鼠 的 隨機(jī)對照研究發(fā)現(xiàn)，DEHP 的暴露可引起顯著的生殖毒性，主要表現(xiàn)為卵巢器官系數(shù)、雌激素水平均顯著降低。Takai 等［25］通過對雌性大鼠分別予以持續(xù)2 周和4 周口服劑量水平各為0、300、1 000 和3 000 mg/kg DEHP 的毒性的研究中發(fā)現(xiàn)卵巢、子宮、陰道均有組織病理學(xué)異常，其中暴露于300 mg/kg 或以上劑量暴露組出現(xiàn)卵巢間質(zhì)細(xì)胞空泡化；而暴露于1 000 mg/kg 及以上劑量暴露組則發(fā)現(xiàn)卵巢閉鎖卵泡增加；在為期4 周的觀察中，3 000 mg/kg 劑量暴露組出現(xiàn)新黃體減少、子宮萎縮、陰道上皮細(xì)胞變薄及粘液化；另外在生育能力方面的觀察中，接觸DEHP 后各劑量暴露組的平均發(fā)情周期延長：在3 000 mg/kg 劑量暴露組中出現(xiàn)發(fā)情周期不規(guī)則，其余劑量暴露組的發(fā)情周期均在正常范圍內(nèi)。Chiang等［26］在一項對成年雌性CD-1 小鼠口服DEHP 或鄰苯二甲酸二異壬酯（diisononyl phthalate，DINP）后進(jìn)行育種的試驗中發(fā)現(xiàn)，給藥后立即育種并沒有影響小鼠的生育能力；但在給藥3 個月后，DEHP 和DINP 的暴露均降低了雌性小鼠的受孕能力；此外，DINP 的暴露還破壞了雌性小鼠的發(fā)情周期；在給藥9 個月后的DINP 暴露仍在顯著破壞雌性小鼠的發(fā)情周期，并縮短了其與雄性小鼠的交配時間。Somasundaram 等［27］通過對處于哺乳期的F1 代雌性大鼠灌胃DEHP（1、10、100 mg·kg-1·d-1）的研究發(fā)現(xiàn)，其成年雌性大鼠的卵巢和子宮的重量明顯下降；同時對卵巢的結(jié)構(gòu)也產(chǎn)生影響，表現(xiàn)為卵巢顆粒細(xì)胞排列解體、卵母細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變；該研究發(fā)現(xiàn)黃體細(xì)胞數(shù)量呈下降趨勢，間質(zhì)間隙增加，并且伴有血清雌二醇、睪酮及孕酮水平的明顯下降，這表明哺乳期暴露于DEHP 可損害雌性大鼠的生殖系統(tǒng)。以上研究表明，PAEs 的暴露對不同種系雌性動物的生殖器官均可產(chǎn)生影響，導(dǎo)致其生殖系統(tǒng)產(chǎn)生不同程度的損害。

2.1.2 對卵子質(zhì)量的影響 在人群研究方面，現(xiàn)有研究表明PAEs 通過干擾內(nèi)源性類固醇激素的合成與代謝、破壞卵泡的生長模式、增加氧化應(yīng)激并導(dǎo)致卵泡死亡，從而加速卵巢的衰老［28］。在一項針對194 名女性卵泡液的橫斷面研究［29］中發(fā)現(xiàn)所有卵泡樣品中均能檢測到大多數(shù)的PAEs 代謝物，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)PAEs 的代謝產(chǎn)物中的MBP 和鄰苯二甲酸單（2-乙基-5-羥基已基）酯（mono-2-ethyl-5-hydroxylhexyl phthalate，MEHHP）與卵巢類固醇激素呈正相關(guān)，這也證明了卵泡液中的PAEs 代謝物與卵泡內(nèi)生殖激素水平改變有關(guān)。這與當(dāng)前PAEs 通過干擾內(nèi)源性類固醇激素的合成與代謝、加速卵巢衰老的研究結(jié)果一致。在尋求助孕治療的育齡女性中，PAEs 暴露與竇卵泡計數(shù)（antral follicle counting，AFC）顯著降低［30，31］和卵母細(xì)胞產(chǎn)生下降［32-34］有關(guān)。但Du 等［35］的一項研究中發(fā)現(xiàn)卵泡液或尿液代謝物濃度與卵母細(xì)胞產(chǎn)生之間無關(guān)。并且，Du等［36］在一項基于415 名不孕育齡女性的回顧性分析發(fā)現(xiàn)，尿液中PAEs 代謝物濃度與與血清抑制素b（inhibin-b，INH-b）水平之間存在負(fù)相關(guān)，但其與血清抗苗勒氏管激素（anti-mullerain hormone，AMH）水平之間無關(guān)。Sacha 等［37］觀察到PAEs 代謝物的尿液濃度與接受助孕治療女性的排卵前卵泡液中的AMH 濃度之間呈負(fù)相關(guān)，并可能對竇卵泡募集和生育結(jié)局有影響?？梢?，現(xiàn)有的關(guān)于PAEs 暴露與育齡期女性卵泡的發(fā)生發(fā)育及生殖內(nèi)分泌激素水平之間關(guān)聯(lián)性的研究尚存在爭議。

在動物實驗研究方面，一項針對雌性SD 大鼠后代（暴露于1、20、50 或300 mg DEHP ·kg-1·d-1）的研究［38］發(fā)現(xiàn)，在胚胎時期接觸DEHP 會導(dǎo)致成年后雌二醇水平在發(fā)情期出現(xiàn)下降，而促卵泡激素水平在發(fā)情期前后都表現(xiàn)出明顯升高的趨勢；在接觸DEHP 劑量為50 mg·kg-1·d-1及以上時，卵泡膜細(xì)胞層厚度出現(xiàn)下降；在生育能力上，F(xiàn)1 代的繁殖并不受影響，而在接觸劑量為20 mg DEHP·kg-1·d-1時，F(xiàn)3代中表現(xiàn)為產(chǎn)崽數(shù)增加，幼崽體重下降；因此，盡管產(chǎn)生以上影響，但也并不會導(dǎo)致后代不育的結(jié)局。Liu 等［39］通過灌胃的方式將DEHP（0、100、400 和1 600 mg·kg-1·d-1）對21 d 日齡的ICR 小鼠進(jìn)行持續(xù)6周的染毒，研究結(jié)果顯示卵泡發(fā)育相關(guān)因子（包括ckit，kitl，gdf9 和atm）的表達(dá)顯著降低；然而，卵巢miRNA（let-7b，miR-17-5p miR-181a 和miR-151）的表達(dá)量卻明顯升高，表明PAEs 可抑制卵泡顆粒細(xì)胞的增殖。Xu 等［40］通過向雌性大鼠持續(xù)灌胃600 mg/kg DEHP 60 d 的研究發(fā)現(xiàn)，被染毒雌性大鼠的卵巢內(nèi)卵泡數(shù)量減少，閉鎖卵泡顯著增加。同樣，F(xiàn)U 等［41］對4 周 齡 的ICR 雌 性 小 鼠 經(jīng) 過 連 續(xù)30 d 胃內(nèi)注射DEHP 的隨機(jī)對照研究中發(fā)現(xiàn)，DEHP 暴露下的雌性小鼠卵泡數(shù)量減少（初級卵泡、次級和竇卵泡減少，初級卵母細(xì)胞數(shù)量明顯減少）。這與Liu等［22］的研究結(jié)果一致，表明DEHP 的暴露會影響卵泡的發(fā)育。

綜上，PAEs 可能通過破壞雌性生殖器官和相關(guān)生殖細(xì)胞，使生殖組織形態(tài)發(fā)生改變，以及影響類固醇激素水平，卵泡數(shù)量減少，卵子質(zhì)量下降，導(dǎo)致雌性生殖系統(tǒng)的發(fā)育和功能異常，最終影響后代的生長發(fā)育。

2.2 對雄性生殖系統(tǒng)的影響

PAEs 暴露會對雄性動物生殖器官及其生殖細(xì)胞的發(fā)育造成不良影響，不僅導(dǎo)致睪丸及附睪重量下降、睪丸組織損害，還會引起精液質(zhì)量降低，最終導(dǎo)致雄性生殖能力下降。

2.2.1 對雄性生殖器官的影響 青春期是生殖系統(tǒng)發(fā)育成熟的重要時期，對雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育也具有關(guān)鍵作用。在人群研究方面，既往有關(guān)PEAs 類物質(zhì)產(chǎn)生的生殖毒性與男性生殖器官損害的相關(guān)研究均提示兩者間具有直接或間接的關(guān)系。在國內(nèi)一項針對年齡在7～14 歲的男孩尿液中PAEs 代謝物的研究中發(fā)現(xiàn)，尿液中MBP 水平與睪丸體積呈反比關(guān)系；鄰苯二甲酸單-（2-乙基-5-氧代己基）酯（mono （2-ethyl-5-oxohexyl）phthalate，MEOHP）水平與陰毛發(fā)育也同樣為反比關(guān)系［42］。一項針對兒童的研究顯示，PAEs 暴露與男孩青春期發(fā)育存在相關(guān)性，尿液樣本中鄰苯二甲酸單丁酯 （mono-nbutyl phthalate，MnBP）暴露可能與男孩陰毛發(fā)育延遲有關(guān)［43］。對患有體質(zhì)性青春發(fā)育延遲 （constitutional Delay of Growth and Puberty，CDGP）的兒童與PAEs 暴露相關(guān)性的研究發(fā)現(xiàn)，CDGP 組兒童的尿液中PAEs 濃度與對照組相比明顯升高；并且，尿液中的MBP、鄰苯二甲酸單乙酯及總鄰苯二甲酸酯濃度與血清睪酮水平表現(xiàn)出顯著負(fù)相關(guān)，表明PAEs 通過降低血清睪酮的水平對CDGP 產(chǎn)生間接影響［44］。

在動物實驗研究方面，PAEs 暴露對雄性動物具有明顯的生殖毒性，能影響生精過程和動物的生殖內(nèi)分泌，但相關(guān)的機(jī)制尚不明確。精子的產(chǎn)生過程包括生精細(xì)胞的分化、支持細(xì)胞的作用以及雄激素的調(diào)節(jié)。Zhao 等［45］對青春期前的雄性大鼠經(jīng)口暴 露DEHP（250 和500 mg·kg-1·d-1）的 研 究 中 觀 察到，接觸DEHP 可使睪丸組織學(xué)惡化，睪丸激素水平降低，睪丸細(xì)胞凋亡增加，這提示DEHP 暴露可致睪丸損傷。孫镠佳等［46］對4 周齡ICR 雄性小鼠灌胃染毒DEHP（0.5、50、500 mg/kg）35 d 后，發(fā)現(xiàn)在中、高劑量組的小鼠睪丸組織均受到損傷，且在高劑量組中睪丸濕重顯著下降。但這一結(jié)果與Capela等［47］的研究相反，可能是接觸劑量之間的差異所導(dǎo)致。同時，Oudir 等［48］在生后21～120 d 暴露于低劑量DEHP（0.5、50 和5 000 μg·kg-1·d-1）的雄性Wistar大鼠的研究中發(fā)現(xiàn)，低劑量的DEHP 暴露不可僅使睪丸和附睪重量下降，精子的數(shù)量減少，還可導(dǎo)致睪丸支持細(xì)胞的數(shù)量降低。此外，Abarikwu 等［49］通過將鄰苯二甲酸二正丁酯（1 mL/kg）持續(xù)暴露15 d，發(fā)現(xiàn)大鼠的生精小管直徑、上皮高度、上皮生殖細(xì)胞計數(shù)和小管長度均明顯下降，表明鄰苯二甲酸二正丁酯暴露可導(dǎo)致雄性大鼠的睪丸組織受到損害。以上研究均表明PAEs 暴露會對雄性動物生殖器官及其生殖細(xì)胞的發(fā)育造成不良影響。

2.2.2 對精液質(zhì)量的影響 在影響男性精液質(zhì)量方面，在人群中的多項研究與薈萃分析表明，鄰苯二甲酸單酯暴露對精子密度和活力下降以及形態(tài)異常中水平更高［50］。Xie 等［51］在DBP 及其主要代謝物MBP 與人類精子功能的體外研究中觀察到，DBP 和MBP 在精液中高水平積累，可能會通過抑制精子酪氨酸磷酸化，從而進(jìn)一步損害男性的精子功能。Lidia 等［52］在一項評估105 名受試者的7 種鄰苯二甲酸酯代謝物與精液質(zhì)量的相關(guān)性研究中發(fā)現(xiàn)，精液量與鄰苯二甲酸二壬酯呈負(fù)相關(guān)，精子濃度與鄰苯二甲酸單乙酯呈顯著負(fù)相關(guān)。并且，在動物實驗上也證實了這一點，Mondal 等［53］通過對8 周的小鼠進(jìn)行3 個月低劑量鄰苯二甲酸二乙酯暴露的研究中發(fā)現(xiàn)睪丸組織結(jié)構(gòu)改變伴隨著抗氧化劑比例的紊亂，精子中出現(xiàn)許多結(jié)構(gòu)異常，精子功能下降，說明長期暴露于低劑量鄰苯二甲酸二乙酯對精子數(shù)量、活力、生存力和形態(tài)產(chǎn)生不利影響。Goudarzi 等［54］研究發(fā)現(xiàn)，成年雄性小鼠服用DEHP（2 g/kg）后，精子活力明顯下降，血清睪酮水平顯著降低，提示DEHP 暴露可導(dǎo)致成年期小鼠的睪丸功能遭到破壞。這與孫镠佳等［46］的研究結(jié)果一致，該研究發(fā)現(xiàn)在劑量500 mg/kg 組的小鼠中附睪精子數(shù)量和精子活力等級明顯降低?？傮w來說，PAEs 暴露不僅會導(dǎo)致睪丸及附睪重量下降，睪丸組織損害，還會引起精液質(zhì)量降低，這些損傷都會造成生殖系統(tǒng)的影響，最終導(dǎo)致雄性生殖能力下降。

3 PAEs 對子代（包括胚胎）生殖發(fā)育與遺傳毒性的影響

多項人群研究表明，暴露于PAEs 及其代謝物，可干擾子代的正常生長發(fā)育，其影響程度隨暴露的劑量、暴露持續(xù)時間的變化而不同。在一項母體孕期血清PAEs 濃度與男性后代生殖系統(tǒng)長期發(fā)育影響的研究中發(fā)現(xiàn)，母體孕期血清中DEHP 與DINP代謝物濃度越多，男性睪丸體積越小，因此，母體中PAEs 的濃度可能影響男性后代的生殖功能［55］。在一項針對1 059 對母嬰的前瞻性隊列研究中發(fā)現(xiàn)，母體尿液含量較高的PAEs 與兩性青春期早期陰毛發(fā)育相關(guān)［56］。

在動物實驗研究方面，多項研究也能觀察到類似的影響結(jié)果。Brehm 等［57］通過對比暴露于不同劑量（20 和200 μg·kg-1·d-1以 及500 和750 mg·kg-1·d-1）DEHP 的雌性CD-1 小鼠多代（F1、F2 及F3 代）的卵泡數(shù)量、發(fā)情周期和性激素水平，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)前暴露于DEHP 會改變F1 代的發(fā)情周期，卵巢囊腫的發(fā)生概率升高，總卵泡數(shù)下降；在F2 代中不僅縮短了生殖器距離，還改變了卵泡數(shù)目以及改變了發(fā)情周期；在F3 代中卵泡的生成減少。此外，產(chǎn)前暴露于DEHP 還導(dǎo)致血清雌二醇水平升高（F1 代和F3代）、血清孕激素水平降低（F2 代）、血清睪酮水平降低（F1 代、F2 代和F3）、血清促性腺激素水平發(fā)生改變（F1 代和F3 代）以及降低血清INH-b 水平（F1 和F3），這表明產(chǎn)前暴露于DEHP 會對雌性后代產(chǎn)生生殖毒性。Rattan 等［58］針對產(chǎn)前DEHP 暴露的雌性小鼠后代卵巢功能影響的研究中發(fā)現(xiàn)，在F1 代中產(chǎn)前接觸DEHP 會使其卵巢重量、卵泡生成均下降，雌激素水平升高；在F2 代中不僅卵巢重量下降，還會導(dǎo)致卵泡生成及降低血清孕酮水平；在F3 代則表現(xiàn)為加快始基卵泡的形成，該研究同樣提示產(chǎn)前暴露DEHP 會對其子代、甚至多代的卵巢功能產(chǎn)生不利影響。另外，Barakat 等［59］研究發(fā)現(xiàn)，對妊娠期CD-1 小鼠給予PAEs 混合物口服直至F1 代雄性小鼠出生當(dāng)日，評估其生殖功能指標(biāo)，比較正常雄性小鼠與產(chǎn)前暴露于PAEs 混合物的雄性小鼠性腺、前列腺和精囊，發(fā)現(xiàn)12 個月齡后，產(chǎn)前暴露組雄性小鼠的睪丸激素濃度明顯下降，睪丸相關(guān)的類固醇生成基因的mRNA 表達(dá)降低，同時也會導(dǎo)致精子濃度和活力降低，這表明妊娠期暴露于PAEs 混合物對雄性后代可產(chǎn)生長期的影響。而Dobrzyńska 等［60］的研究中發(fā)現(xiàn)，將成年雄性小鼠連續(xù)8 周暴露于DEHP，其F1 子代的精子數(shù)量和質(zhì)量未見明顯異常，但F2 代胎兒死亡率顯著升高。Wang 等［61］通過對母體暴露DEHP 后的子代小鼠的卵巢細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞RNA 測序發(fā)現(xiàn)DEHP 暴露不僅阻礙了始基卵泡的形成，同時干擾了卵泡的發(fā)育，抑制了卵巢顆粒細(xì)胞的增殖活性，并進(jìn)一步激活其死亡的調(diào)節(jié)。不僅如此，DEHP 暴露還能使轉(zhuǎn)化生長因子-β信號傳導(dǎo)介導(dǎo)的卵巢細(xì)胞之間的相互作用遭到破壞，使生殖細(xì)胞和/或體細(xì)胞中的DNA 損傷以及細(xì)胞凋亡增加。Ozkemahli 等［62］的一項隨機(jī)對照實驗研究，將妊娠的SD 大鼠通過胃內(nèi)灌洗DEHP 和雙酚A 至哺乳期，發(fā)現(xiàn)在混合暴露后，其雌性后代血漿睪酮和雌二醇水平明顯降低，黃體數(shù)量和原始卵泡數(shù)量也明顯減少，進(jìn)一步提示早期聯(lián)合接觸DEHP 和BPA 可能會對其雌性后代的生殖系統(tǒng)造成不良影響。因此，在妊娠期及哺乳期接觸PAEs可能對子代的生殖代謝、生長發(fā)育及生殖毒性造成不同程度的損害。

4 展望

當(dāng)前我國育齡女性總和生育率呈現(xiàn)持續(xù)下降趨勢，除年齡和遺傳因素之外，大量證據(jù)表明，食物、水、空氣和消費(fèi)品中合成和天然存在的環(huán)境化學(xué)物質(zhì)也可導(dǎo)致生育能力受損，而PAEs 暴露可能會對親本及子代甚至多代的生殖系統(tǒng)造成損害，造成不良的生育結(jié)局。近年來，越來越多的研究關(guān)注于非持久性內(nèi)分泌干擾物PAEs 的暴露與女性生殖健康的關(guān)聯(lián)，但對女性生殖毒性相關(guān)的研究仍不夠全面，PAEs 暴露的劑量對女性生殖系統(tǒng)的影響各有不一，引起毒性反應(yīng)的最低劑量仍未明確，研究的結(jié)論也始終存在爭議，一些研究發(fā)現(xiàn)育齡女性的PFAS 暴露與生殖激素水平之間沒有顯著關(guān)聯(lián)［63-66］，而其他研究指出PFAS 具有內(nèi)分泌干擾效應(yīng)［67-69］。既往的研究多限于考慮單獨PAEs 與生殖健康結(jié)局的關(guān)聯(lián)，多種PAEs 混合暴露的效應(yīng)未知?，F(xiàn)有的研究也多局限于動物模型的暴露，且大多為單一的污染物暴露，并不能充分反映人體的實際暴露情況；而人群實際內(nèi)暴露為多種PAEs 長期低濃度累積效應(yīng)；加之暴露的來源、水平、途徑和劑量均處于未知狀態(tài)。因此，如何評估人群中PAEs 的暴露水平、如何將多種PAEs 混合暴露的現(xiàn)狀在研究中體現(xiàn)、如何確定其產(chǎn)生影響所需的暴露劑量等等是我們接下來需要探索的方向。未來需要進(jìn)一步設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)、考慮多種混雜因素影響的動物毒理模型實驗來開展PAEs 暴露致生育力下降的機(jī)制研究，來探索PAEs 暴露與育齡人群生育結(jié)局的關(guān)聯(lián)性，從而提高育齡人群的生育能力。

總之，深入研究PAEs 暴露對育齡人群生殖健康的影響，確定促進(jìn)育齡人群及其后代生殖健康中可干預(yù)的新因素，從而進(jìn)一步對其危害性進(jìn)行精準(zhǔn)防控，保護(hù)育齡人群的生育健康和子代健康，為推動社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展、保證出生人口健康增長具有重要的公共衛(wèi)生意義。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。