動物口蹄疫的檢疫與防疫探析

文│宋麗 駱幫清 丁幸福 楊紅 文武 徐小和 劉廷鐵 謝鳳萍（湖北省荊門市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊）

由RNA病毒科的口蹄疫病毒引起的口蹄疫是一種嚴重的疾病，主要影響牛、羊和豬等動物，也可在動物和人之間相互傳染。該疾病具有急性發(fā)熱和高傳染性的特點。臨床癥狀主要表現(xiàn)為在皮膚或黏膜形成水皰和潰瘍，具有高度傳染性、廣泛流行、嚴重危害和迅速發(fā)病等特點，在疫區(qū)中，發(fā)病率可高達100%。如果無法及時控制該病，將會導致更多的病例，給養(yǎng)殖者帶來巨大的經(jīng)濟損失。因此，對確診為口蹄疫的牲畜應(yīng)進行隔離，并加強日常的防護工作。筆者旨在通過綜合診斷患有口蹄疫的牲畜，根據(jù)病癥采取具體的防治措施，以避免畜牧業(yè)遭受更大損失。

一、動物口蹄疫的診斷

1.口蹄疫傳染源?？谔阋叩膫魅驹粗饕翘幱跐摲诤桶l(fā)病期的動物。受感染的動物通過其器官和排泄物攜帶著口蹄疫病毒。當動物排出分泌物時，病毒也被帶到外部環(huán)境中，對生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生重大影響。

2.易感動物感染途徑。該病不僅死亡率極高，最可怕的是傳染方式極具多樣性，非常容易擴散到各個地方中去，除日常接觸外，呼吸的空氣與攝入的飲食也是較常見的傳染途徑。

3.口蹄疫的發(fā)病特征?？谔阋咄ǔＴ趧游镉揍讨邪l(fā)病率較高，且很難有效控制病情，常導致養(yǎng)殖場大范圍的疫情暴發(fā)，特別是春冬季節(jié)為口蹄疫的高發(fā)期。該病毒可以通過動物的直接或間接接觸迅速傳播，同時能在動物的排泄物和飼料中較長時間存活。

（1）早期癥狀。動物在感染病毒后的2～4天才會表現(xiàn)出病癥，存在潛伏期。當動物受感染時，口腔和蹄部會出現(xiàn)水皰。動物的口鼻、口腔、腳蹄以及腹部乳房周圍的皮膚也會出現(xiàn)水皰，動物體溫持續(xù)升高，某些部位甚至可能逐漸腐爛。如果動物在感染后1～2周才出現(xiàn)癥狀，那些患有水皰的部位將慢慢結(jié)痂。有些動物的發(fā)病癥狀可能會持續(xù)約3周，持續(xù)時間越長病情越嚴重。隨著病情的加重，動物體上患有水皰的部位會在2～3天內(nèi)破裂，嚴重時甚至會導致蹄殼脫落。在這一階段內(nèi)，如果沒有發(fā)生其他病毒感染，動物有可能自愈，但這并不代表病毒會完全從動物體內(nèi)消除。口蹄疫病毒具有特別長的潛伏期，可以在動物體內(nèi)存活達半年左右。如果在水皰破裂時同時感染其他病毒，病情將會變得更加嚴重，甚至無法收拾，會導致動物的蹄部無法正常行走跳躍。

（2）疾病特征。動物在感染口蹄疫后，口腔內(nèi)會出現(xiàn)大量的潰瘍和

水皰，影響其正常進食，導致幼崽逐漸消瘦。受感染部位也會出現(xiàn)多個小水皰，身體的腐爛現(xiàn)象會導致出血，尤其在胃部、口腔和腸道等地方。另外，如果動物正處于孕期，由于其自身抵抗力下降，一旦感染口蹄疫很可能出現(xiàn)流產(chǎn)的現(xiàn)象。即使是勉強生存的幼仔也可能患有先天性的心肌炎，心包會出血，幸存率極低。而強壯的成年動物由于其自身抵抗力強，死亡率相對較低。判斷動物是否患有口蹄疫，還可以通過身上是否出現(xiàn)虎斑狀病變來推斷。

4.血清學診斷。

（1）補體結(jié)合試驗（CFT）。在1952年，Brooksby發(fā)明了免疫熒光試驗（CFT，Complement Fixation Test）。這一試驗主要基于對不同抗體進行相關(guān)研究，通過對紅細胞、補體等指標進行判斷是否能產(chǎn)生新的抗體。如果產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，則結(jié)果為陰性；反之則為陽性。CFT這種判斷方法客觀可靠，但要準確掌握各種要素的使用量，否則結(jié)果可能會有偏差。

（2）病毒中和試驗（VNT）。在國際上，口蹄疫病毒的檢測常常使用病毒中和試驗（Virus Neutralization Test，VNT）來確定動物是否感染了該病毒。VNT是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）檢測口蹄疫病毒的主要標準。許多其他形式的檢測方法都是參考VNT的基礎(chǔ)上進行開發(fā)和應(yīng)用的。這種方法具有極高的敏感性，可以詳細檢測口蹄疫病毒的抗原和抗體。然而，VNT的一個不足之處是必須依賴活體動物進行實驗研究。使用活病毒在實驗室進行這種檢測方式的操作要求很高，很少有實驗室能夠滿足這些要求。野外田間試驗無法區(qū)分產(chǎn)生的抗體是由于自身免疫還是感染引起的。

（3）瓊脂免疫擴散試驗（AGID）。AGID（Agar Gel Immunodiffusion）是一種用于檢測病毒抗原和抗體的方法。在感染了口蹄疫病毒（FMDV）的組織液中提取感染源，然后通過該方法找到病毒的抗原。將提取的抗原放置在瓊脂內(nèi)，可以觀察到血清和抗原的生長速度，通常只需要兩天就能得出結(jié)果。該方法適用于檢測曾感染過FMDV或接種過FMDV疫苗的動物，該檢測方法能夠很好地區(qū)分感染動物和免疫動物。

（4）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一種新型的檢測技術(shù)，已經(jīng)得到醫(yī)學界的廣泛認可。ELISA技術(shù)包括液相阻隔、固相結(jié)合和非直接ELISA等多種方式。根據(jù)不同的檢測內(nèi)容，選擇相應(yīng)的方式進行檢測。通常情況下，ELISA主要用于動物疫苗免疫抗體水平或口蹄疫感染的檢測。固相競爭ELISA具有明顯的優(yōu)勢，是在液相阻斷的基礎(chǔ)上進行改進的方法。其特異性指標高達99.5%，敏感指標達到100%。后來，OIE指定ELISA作為口蹄疫病毒的主要血清學檢測方法，間接ELISA用于診斷抗原，需要使用未結(jié)構(gòu)化的FMD蛋白類型，如2C、3AB、3ABC和3D來檢測感染狀態(tài)下動物的血液抗體和健康動物的血清抗體。在不同研究中，使用了合成肽包被抗原構(gòu)成的間接ELISA檢測儀、國外的隔斷ELISA檢測儀以及多克隆抗體的液相阻斷等進行了比較。試驗數(shù)據(jù)表明，這三類檢測儀所得的結(jié)果沒有顯著差異，而合成肽包被抗原構(gòu)成的間接ELISA檢測儀具有簡單易用的優(yōu)勢。同時，研究者還開發(fā)了用于檢測口蹄疫的O、A、AsiaI抗體的ELISA方法。根據(jù)實驗結(jié)果，該檢測方法的各項指標均符合標準，經(jīng)過大量測試，發(fā)現(xiàn)各項指標表現(xiàn)良好，其中變異指標降低至10%，證明該診斷方法可以應(yīng)用于口蹄疫病毒的檢測。

另外，利用以MAb2D8為包被抗體，以HRP作為檢測因子，借助MAb2E10抗體，開發(fā)出了一種用于檢測FMDV和Asia1抗體的夾心ELISA法。這種檢測方法對于FMDV病毒的檢測比較敏感，最低可檢測到103TCID50的病毒，而且可以排除A型FMDV、O型FMDV、牛呼吸道病毒、腸道病毒、牛氣管炎病毒、鼻炎病毒等陰性病毒。

二、動物口蹄疫的防疫

1.嚴格進行消毒。為了保障養(yǎng)殖場和周邊環(huán)境的健康，應(yīng)落實一系列隔離措施和消毒工作。外來車輛和人員嚴禁進入養(yǎng)殖場，以防止帶入病原體。養(yǎng)殖場被隔離處理，并使用戊二醛進行消毒。通常每天會進行兩到三次消毒操作，戊二醛的濃度設(shè)置為1%～3%。另外，為了預防感染，適量的阿莫西林會加入飼料中。進場的車輛必須接受嚴格的消毒和盤查，不允許外來車輛進入工廠區(qū)域，以防止病菌和病毒傳入。在大門口會設(shè)置消毒池，車輛進入后必須通過消毒池，確保徹底消毒，以達到杜絕外來病原體的目的。

2.做好隔離工作?？谔阋卟《緜鞑ネ緩綇V泛，包括患病動物排出的糞便和呼出的氣體等，都可能攜帶病原體。一旦確診有口蹄疫的患病動物，應(yīng)立即將其隔離飼養(yǎng)，并劃定其活動范圍，禁止與其他動物接觸，同時也不允許共用器具。此外，應(yīng)盡快請獸醫(yī)進行診斷，以防止疫情擴散。由于不同年齡段的動物免疫力差異較大，如果條件允許，可以采取分點飼養(yǎng)的模式，以減少病毒傳播的風險。對飼養(yǎng)人員的要求也應(yīng)加強，要求其不接觸患病動物，經(jīng)常進行消毒工作，以預防交叉感染。

3.加強飼養(yǎng)管理。管理者在口蹄疫防控工作中應(yīng)高度重視飼養(yǎng)管理。這包括勤打掃和勤消毒飼養(yǎng)環(huán)境，嚴格控制各類飼料的流入，以防止患病動物傳入。此外，還應(yīng)減少動物的應(yīng)激反應(yīng)，及時觀察動物的健康狀況。養(yǎng)殖場應(yīng)建立合理的防疫程序，定期進行消毒工作，保持環(huán)境的衛(wèi)生。

4.加強接種管理。動物口蹄疫防治的第一措施是進行免疫接種，因為疫苗注射是最有效的防治方式。由于口蹄疫的傳染性較強且致死率高，傳播速度也很快，保養(yǎng)動物時應(yīng)注重對該病的防御，特別是要加強動物的疫苗接種以增強抵抗力。當前我國主要使用油佐劑滅活疫苗進行口蹄疫的接種，市場上接種范圍已經(jīng)達到了80%以上。這種疫苗可以在動物體內(nèi)產(chǎn)生口蹄疫病的抗體，從而減少患病率。接種頻率方面，母畜每年需要接種三次，公畜每年需要接種四次。在配種前一般需要進行1～2次免疫。幼崽在斷奶后的15天時需要進行一次接種，30天時再進行一次接種，然后按照正常的免疫程序進行接種。

三、結(jié)語

動物口蹄疫是一種具有高傳染性和致死率的疾病，在確診時需要綜合考慮多個方面的癥狀進行診斷。此病不僅對動物健康有威脅，還可以感染人類，因此在養(yǎng)殖過程中對飼養(yǎng)人員的健康構(gòu)成威脅。為了確保畜牧業(yè)的安全生產(chǎn)和養(yǎng)殖業(yè)的順利發(fā)展，需要加強口蹄疫的診斷與防治工作，并加強免疫和日常監(jiān)測。這樣可以保證口蹄疫防控工作的質(zhì)量和效果。養(yǎng)殖者應(yīng)當認識動物口蹄疫防治的重要性，注重疫情的防御控制，及時治療患病動物。發(fā)現(xiàn)類似癥狀后要及時隔離，對其活動范圍進行全面消毒，以防止疾病進一步傳播，從而降低經(jīng)濟損失，保護養(yǎng)殖戶的利益。