甘肅豬病毒性腹瀉病的流行病學調(diào)查與分析

陳伯祥 趙子惠 李元新 楊明 成偉偉 薛健

摘? 要：2020年5月至2021年3月對甘肅省5市10縣規(guī)?；i場和散養(yǎng)戶共116家（戶）進行了豬病毒性腹瀉病的流行病學調(diào)查及抽樣樣本及臨床樣本的檢測。調(diào)查顯示：甘肅省部分縣（區(qū)），豬腹瀉的發(fā)病率為8.5％，死亡率4.5％；發(fā)病豬場（散養(yǎng)戶）保育仔豬的腹瀉率為40％，發(fā)病率為3.5％，死亡率為1％；腹瀉的發(fā)生主要在小型規(guī)模化豬場和散養(yǎng)戶，發(fā)病季節(jié)多發(fā)生于每年的第一季度和第四季度，特別是冬春季交替之際。對所采樣本檢測顯示，豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬輪狀病毒陽性率分別為30％、35％、20％。結(jié)果表明，目前甘肅省豬病毒性腹瀉的病原體主要以豬流行性腹瀉病毒為主，混合感染較多，主要發(fā)生冬春季交替之際。

關(guān)鍵詞：豬病毒性腹瀉；流行病學；調(diào)查

中圖分類號：S855.3 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2023）04-0078-04

豬病毒性腹瀉通常包括豬流行性腹瀉（porcine transmissible gastroenteritis，PED）、豬傳染性胃腸炎（transmissible gastroenteritis，TGE）和豬輪狀病毒（porcine rotavirus，PRV）病。這三種病分別是豬流行性腹瀉病毒（PRD virus，PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGE virus，TGEV）和豬輪狀病毒（PRV）引起的以豬嘔吐、腹瀉、脫水為特征的傳染病，具有較高的致死率，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了重大的損失。這三種疾病在臨床癥狀上極為相似，豬群中一旦出現(xiàn)發(fā)病豬，疾病會快速波及全群，尤其在感染仔豬后會出現(xiàn)高發(fā)病率和高死亡率，給養(yǎng)豬企業(yè)或散養(yǎng)戶帶來巨大經(jīng)濟損失；同時，還存在多種病原體混合感染的情況，已成為一個引人注目的世界性的新問題。為摸清甘肅省豬病毒性腹瀉的流行情況，通過對甘肅省部分縣（區(qū)）豬群腹瀉疫病的流行狀況、流行特點等進行調(diào)查分析，掌握本轄區(qū)疫病流行態(tài)勢，為豬群病毒性腹瀉疾病的科學防治提供科學依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1 材料

2×Taq反應(yīng)緩沖液、Bst DNA聚合酶、dNTP混合液、反轉(zhuǎn)錄酶AMV均購自蘭州希瑞科技有限公司；核酸檢測試紙條由杭州憂思達生物技術(shù)有限公司提供；TGEV、PEDV、PRV的RT-PCR引物分別由金開瑞生物工程有限公司合成。

1.2 方法

1.2.1 調(diào)查對象、樣本采集及處理

根據(jù)各縣（區(qū)）豬的飼養(yǎng)量不同，按照隨機抽樣的原則，于2020年5月、9月、11月至2021年3月，對甘肅省慶陽市、平?jīng)鍪小足y市、定西市、隴南市部分縣（區(qū)）的規(guī)模化豬場及散養(yǎng)戶進行調(diào)查，共計10個縣（區(qū)）的規(guī)?；i場及散養(yǎng)戶116家（戶）。每家豬場或散養(yǎng)戶用棉簽采集10份不同窩的仔豬糞便樣本，置于4 ｍL離心管中，－20 ℃保存，共計1 160份糞便樣本；同時，采集因腹瀉而死亡的仔豬腸道組織樣本20份。

1.2.2 現(xiàn)場調(diào)查與問卷

設(shè)計了調(diào)查問卷，內(nèi)容包括：豬場（散養(yǎng)戶）名稱、聯(lián)系人、地址、電話等基本信息；存欄量、飼養(yǎng)方式、仔豬來源、仔豬斷奶日齡等基本情況；防疫設(shè)施、欄舍通風、消毒、除糞、免疫等防疫情況；病死豬無害化處理方式；腹瀉發(fā)病豬群、發(fā)病率、死亡率、腹瀉發(fā)病原因、是否進行實驗室診斷等情況。每家（戶）被調(diào)查的豬場（散養(yǎng)戶）填寫１份調(diào)查表。

1.2.3 檢測樣本處理

不同樣本按以下方法處理：①糞便棉拭子：在仔豬糞便棉試子離心管中加入1 mL無菌生理鹽水稀釋，混勻后反復凍融3次，

5 000 r/min離心５ min，吸上清備用。②腸道組織：取1～2 cm小腸于研缽中，加入少許石英砂和1 mL無菌生理鹽水，研磨成勻漿，然后收集于離心管中，反復凍融3次，12 000 r/min離心5 min，取上清備用。

1.2.4 樣本RT-PCR方法檢測

按照建立的TGEV、PEDV、PRV的RT-PCR檢測方法進行樣本檢測，包括1 160份糞便樣本和20份病死仔豬的腸道組織樣本。

3? 結(jié)果

3.1 問卷調(diào)查豬腹瀉發(fā)生情況

共計調(diào)查了省內(nèi)5個市10個縣（區(qū)）規(guī)模化豬場及散養(yǎng)戶116家（戶），結(jié)果見表1。由表1可知，其中采用自繁自養(yǎng)生產(chǎn)模式的豬場（散養(yǎng)戶）106家（戶），規(guī)模化豬場19家，散養(yǎng)戶97戶，發(fā)生過腹瀉的豬場或散養(yǎng)戶32家（戶），未發(fā)生過腹瀉的豬場或散養(yǎng)戶84家（戶）。116家均未進行過實驗室診斷。免疫接種過豬傳染性胃腸炎-豬流行腹瀉二聯(lián)疫苗或豬傳染性胃腸炎-豬流行性腹瀉-豬輪狀病毒三聯(lián)活疫苗的有42家（戶），占36.2％。在發(fā)生腹瀉的原因中，由單獨感染TGEV、PEDV或PRV引起腹瀉的豬場（散養(yǎng)戶）分別占31.03％、20.69％、10.34％，由混合感染兩種或兩種以上病毒后發(fā)病的占27.59％，其他原因引起的占37.93％。其他原因主要包括大腸埃希氏桿菌感染、其他未檢出的且能引發(fā)腹瀉的病毒感染及晝夜溫差大、母豬乳汁不足、斷奶應(yīng)激等引起的仔豬腹瀉。使用抗菌素治療腹瀉效果明顯的有10家（戶）豬場（散養(yǎng)戶），用抗菌素治療腹瀉無效的有22家（戶）。在發(fā)生腹瀉的豬場（散養(yǎng)戶）中，隨著防疫措施的加強，發(fā)生腹瀉的仔豬比例逐漸下降。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，規(guī)?；i場的仔豬腹瀉率較低，而散養(yǎng)戶的較高，這與規(guī)?；i場強化生物安全和落實防疫措施相關(guān)；采用了自繁自養(yǎng)或“全進全出”制生產(chǎn)模式后，豬場（散養(yǎng)戶）的仔豬腹瀉發(fā)生率較低。

3.2 豬腹瀉發(fā)生的群間分布情況

在發(fā)生腹瀉的豬場（散養(yǎng)戶）中，所有場或戶均出現(xiàn)了哺乳仔豬腹瀉疫情（表2），32家（戶）豬場（散養(yǎng)戶）擁有哺乳仔豬9 551頭，其中發(fā)病仔豬812頭，發(fā)病率為8.5％，死亡430頭，死亡率4.5％；13家（戶）豬場（散養(yǎng)戶）暴發(fā)保育仔豬腹瀉病例，發(fā)生率為40％（13/32），但是發(fā)病仔豬數(shù)少，僅為3.5％，死亡率為1.0％；其他日齡的豬未發(fā)生或表現(xiàn)為一過性癥狀。由此表明，豬病毒性腹瀉病主要引起哺乳仔豬發(fā)病，保育仔豬次之，成年豬則很少發(fā)病。在生產(chǎn)規(guī)模上，主要發(fā)生于散養(yǎng)戶和小規(guī)?；i場，大型規(guī)?；i場則很少發(fā)病，這可能與豬場的防疫措施和計劃的執(zhí)行率有關(guān)；還與哺乳仔豬的欄舍衛(wèi)生、保溫情況及母豬的產(chǎn)前免疫有關(guān)。

3.3 豬腹瀉發(fā)生的時間分布情況

表3列出了 根據(jù)問卷調(diào)查對哺乳仔豬進行時間分布上的數(shù)據(jù)分析結(jié)果。由表3可知，2020年5月至2021年4月，11月份的發(fā)病率最高，6月份發(fā)病率最低。結(jié)果表明，仔豬病毒性腹瀉病的發(fā)生一年四季均可發(fā)生，但不同季節(jié)差異較大，寒冷的冬春季節(jié)發(fā)病率最高，特別是冷熱交替時應(yīng)加強哺乳仔豬的飼養(yǎng)管理。

3.4 豬腹瀉發(fā)生的空間分布情況

對問卷調(diào)查結(jié)果中哺乳仔豬發(fā)生豬病毒性腹瀉情況分析后發(fā)現(xiàn)，慶陽市寧縣、平?jīng)鍪袥艽h和崆峒區(qū)的仔豬發(fā)病率最高，分別為13.6％、10.1％、10.5％，而正寧縣、寧縣、涇川縣的仔豬死亡率分別為5.1％、5.8％、5.3％。

將調(diào)查區(qū)域按照當?shù)貧夂蚝偷乩砦恢脛澐譃?個區(qū)域，按照區(qū)域統(tǒng)計調(diào)查結(jié)果，發(fā)現(xiàn)仔豬的發(fā)病率以平慶地區(qū)的最高（10.44％），平川區(qū)的最低（3.00％）。表明不同區(qū)域在仔豬病毒性腹瀉病發(fā)病率上存在較大的差異，在制定防疫計劃時要有所側(cè)重，不同區(qū)域制定不同的防疫策略，在日常監(jiān)測中對仔豬病毒性腹瀉病發(fā)生率高的地區(qū)應(yīng)加強檢測和疫苗接種。

3.5 豬病毒性腹瀉病三種病毒的檢測

對116家（戶）豬場（散養(yǎng)戶）共計? ? 1 180份樣本，采用RT-PCR方法檢測TGEV、PEDV、PRV。結(jié)果顯示，只有在第一季度和第四季度的樣本中檢測到引起豬病毒性腹瀉的三種病原，即TGEV、PEDV、PRV。對第一季度和第四季度中采集到的糞便樣本和腸道組織樣本，進行檢測，結(jié)果見表4。

由表4可知，采集的樣本中PEDV、TGEV和PRV的陽性率分別為35％、30％、20％，表明甘肅省某些豬場（散養(yǎng)戶）存在豬病毒性腹瀉病，仔豬病毒性腹瀉病主要由這三種病毒中的一種或兩種以上感染引起的。

在臨床上，首先要分清引發(fā)腹瀉的病原，這要結(jié)合臨床癥狀、流行病學特點及實驗檢測結(jié)果，以確定致病原因，并及時對癥治療，針對性地制定治療和防控計劃，及時啟動防控措施，盡可能減少經(jīng)濟損失，控制疫情擴散。

4? 討論

本次調(diào)查表明，甘肅省豬場（散養(yǎng)戶）仔豬腹瀉的發(fā)生主要在小規(guī)?；i場和散養(yǎng)戶，發(fā)病季節(jié)多為每年的第一季度和第四季度，特別是冬春季節(jié)交替之際；引發(fā)豬暴發(fā)病毒性腹瀉病的病原以PEDV為主，PEDV、TGEV和PRV混合感染較多。這與韓慶彥等[1]、徐麗華等[2]、牟迪等[3]的報道一致，說明當前我國引起豬病毒性腹瀉病的主要病原仍以PEDV為主。本次調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，由于近年來非洲豬瘟防控形勢嚴峻，甘肅省各養(yǎng)豬企業(yè)和散養(yǎng)戶加強了防疫措施，多采用了自繁自養(yǎng)的生產(chǎn)模式，導致豬病毒性腹瀉病的發(fā)生率出現(xiàn)下降的趨勢。

本次調(diào)查通過調(diào)查問卷及實驗室檢測分析，弄清了甘肅省部分區(qū)域豬病毒性腹瀉病的流行狀況，為甘肅省豬病毒性腹瀉病的診斷、免疫預防計劃的制定和防控提供了參考依據(jù)，為科學防控豬病毒性腹瀉病提供了可靠的理論和技術(shù)依據(jù)。

參考文獻

[1] 韓慶彥，蘭喜，周峰，等．2011-2012年豬腹瀉疫情中6種病毒在乳豬腸道的感染檢測[J].國外畜牧學（豬與禽），2012，32（9）：62-63.

[2] 徐麗華，李軍星，蘇菲，等．2011－2017年浙江省豬病毒性腹瀉病的流行病學調(diào)查[J].中國獸醫(yī)科學，2018，48（5）：625－630.

[3] 牟迪，夏偉．2015－2017年豬流行性腹瀉病毒病原檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析與預防對策[J].養(yǎng)豬，2017（6）：89－92.