肖志國 王秀蘭 閆春梅 劉慧吉 陳偉強(qiáng) 金香琴 韓晴
(吉林省水產(chǎn)科學(xué)研究院,吉林長春 130033)
雜色杜父魚(CottuspoecilopusHeckel)又名花足杜父魚、山胖頭等,隸屬于鲉形目(Scorpaeniformes)、杜父魚科(Cottidae)、杜父魚屬(Cottus),在我國僅分布于黑龍江、松花江、烏蘇里江、綏芬河、圖們江、鴨綠江、遼河支流渾河、太子河、遼東半島碧流河等,國外見于朝鮮北部、俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)及北歐諸國[1]。雜色杜父魚(見圖1)為喜低溫的底層魚類,以水生昆蟲及其幼蟲、河蝦、東北螯蝦、小魚為食[1]。該魚生活在無污染、水質(zhì)清澈的溪流中,具有營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價值高、品質(zhì)優(yōu)等特點(diǎn),因而頗受消費(fèi)者青睞,市場供不應(yīng)求。2019年,本項(xiàng)目組以冰凍鹵蟲為餌料,采用等滲液采精、等滲液載精授精和降氧孵化的方法,以鹵蟲無節(jié)幼體、冰凍海溞為餌料,突破了野生雜色杜父魚馴化和繁育技術(shù)難關(guān),并在長白山地區(qū)進(jìn)行了較為廣泛的推廣養(yǎng)殖。目前雜色杜父魚養(yǎng)殖產(chǎn)量可達(dá)12 kg/m2,養(yǎng)殖效益在800元/m2以上。為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)雜色杜父魚的規(guī)模化全人工繁育,本研究采用人工繁殖的2齡雜色杜父魚作親本進(jìn)行了繁育試驗(yàn)?,F(xiàn)將繁育技術(shù)總結(jié)如下,旨在為實(shí)現(xiàn)吉林省雜色杜父魚的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供參考。
圖1 雜色杜父魚
試驗(yàn)于2022年1—12月在長白山保護(hù)開發(fā)區(qū)福順祥冷水魚有限公司、和龍市青龍漁業(yè)有限公司進(jìn)行。水源為山泉水,水質(zhì)清澈無污染,溶解氧為8.0~10.5 mg/L,pH為7.0~7.8。
1.2.1 親魚來源與雌雄鑒別
親魚來源于2019年野生親本經(jīng)人工繁殖的子代,飼養(yǎng)至2022年1月9日,平均體長84 mm,平均體質(zhì)量9 g,共21萬尾。雜色杜父魚親魚雌雄易辨,雌魚背鰭均為棕褐色,而雄性第一背鰭上緣呈黃色。
1.2.2 親魚培育
2022年1月10日—4月19日,選擇近水源的水泥池作為親魚培育池,每口水泥池面積為20 m2,池深0.8~1.0 m,養(yǎng)殖水深0.3~0.5 m。將雌、雄親魚分開飼養(yǎng),同時按其平均體質(zhì)量5、7、9、11、13 g分檔進(jìn)行飼養(yǎng),放養(yǎng)密度為300~500尾/m2。以冰凍鹵蟲作為餌料,將冰凍鹵蟲裝入網(wǎng)眼大小5 cm×5 cm的網(wǎng)袋,每天于7:00—8:00、15:00—16:00掛袋投喂2次,投餌量為魚體質(zhì)量的3%~5%。培育水溫3~9 ℃,溶解氧不低于6 mg/L,養(yǎng)殖水體每2 h交換1次。培育過程中注意及時清洗進(jìn)出水口的攔魚網(wǎng)柵,每3 d刷池1次。發(fā)生水霉病時,將培育池水深降至15 cm,用0.1%的雙氧水(H2O2)消毒15~20 min。如發(fā)生腸炎病,則將腸炎藥和保肝藥(“百毒威2號”和“生命1號”,常州市武進(jìn)動物藥品廠生產(chǎn))均勻摻拌在餌料中速凍,掛袋投喂,連續(xù)3 d。
1.3.1 室內(nèi)暫養(yǎng)
4月20日,將食欲顯著減退的親魚從培育池移入孵化車間,暫養(yǎng)于長2.80 m、寬0.52 m的玻璃鋼養(yǎng)殖槽內(nèi),按雌雄、規(guī)格大小進(jìn)行分養(yǎng)(同親魚培育)。在玻璃鋼槽上、進(jìn)水管下方設(shè)置餌料筐,將冰凍鹵蟲放入筐內(nèi),使鹵蟲隨著水流沖下進(jìn)行投喂。于上午7:00—8:00、下午16:00—17:00各投喂1次,投喂量以第2天略有剩餌為宜。
1.3.2 性成熟度檢查和分養(yǎng)
性成熟的雌性雜色杜父魚腹部柔軟,輕壓其腹部會有橙色或橘紅色的卵粒流出;而成熟的雄性雜色杜父魚,輕壓其泄殖腔會有乳白色精液流出。按腹部的柔軟程度(軟、較軟和不軟),將不同的雌親魚分槽暫養(yǎng)。每周用0.1%的雙氧水消毒15~20 min。
1.3.3 人工授精
采卵、采精前先配制等滲液。將2.4 g氯化鉀(沈陽市新化試劑廠,分析純)、2.6 g氯化鈣(遼寧泉瑞試劑有限公司,分析純)和90.4 g氯化鈉(沈陽市東興試劑廠,分析純)充分溶解于10 L蒸餾水中,即配成等滲液。在避光、防水條件下分別采卵和采精。采卵時,先用毛巾輕輕擦干雌親魚體表的水,然后用擠腹采卵法連續(xù)將2~3尾雜色杜父魚的卵采入適當(dāng)大小(一般上口直徑13 cm,深6 cm)的干燥的采卵盆中。采精時,輕壓雄魚的泄殖腔至精液流出,用燒杯中的等滲液將精液沖入干燥的采精盆中。授精:將載有精液的等滲液倒入采卵盆中,立即充分?jǐn)嚢?~10 s,再靜置3~5 min。
人工繁殖試驗(yàn)雜色杜父魚親魚的雌雄數(shù)量比為(2~3)∶1。為了便于精、卵的充分?jǐn)嚢?載精等滲液體積以卵體積的5~7倍為宜。本次試驗(yàn)共用雌魚9.5萬尾,采卵9.31萬尾,采卵率為98.0%,共采得魚卵1 178萬粒。
1.3.4 受精卵孵化
將受精卵放在規(guī)格2.80 m×0.52 m×0.22 m(長×寬×深)的玻璃鋼平列槽中孵化(見圖2)。每口玻璃鋼平列槽內(nèi)設(shè)有0.4 m×0.5 m×0.2 m(長×寬×深)的5個串聯(lián)小槽。為使孵化用水順次流經(jīng)每個小槽,小槽的阻水板及側(cè)邊用長80 cm、寬5 cm、厚2 cm的海綿帶密封,出水口設(shè)于離底部高11~12 cm處。從位于出水口處的小槽開始布卵,將盛有受精卵的盆貼著水面均勻傾灑,密度為35 000~40 000粒/m2,即每個小槽布放受精卵7 000~8 000粒。受精卵在避光、防震條件下進(jìn)行孵化,孵化水流1.5~2.0 L/min,水溫7~11 ℃,水體溶解氧在6 mg/L以上。
圖2 雜色杜父魚平列槽孵化
1.3.5 孵化管理
受精卵消毒:采用滴定式流水消毒的方法,每天1次對受精卵消毒,消毒液(18%的溴硝丙二醇溶液)質(zhì)量濃度為0.35~0.40 g/L,消毒時長40~60 min。洗槽:觀察發(fā)現(xiàn)發(fā)眼卵出苗量在0.3%時,每3 d清洗1次孵化槽。清洗時,先封閉出水管,將孵化槽的水位提高至20 cm,然后關(guān)閉進(jìn)水管,去除孵化槽中的密封海綿,用清水輕輕沖洗孵化槽,將仔魚連同死卵一起倒入盆中。移槽:將清洗后的孵化槽移入事先準(zhǔn)備好的平列槽主槽中,繼續(xù)進(jìn)行受精卵孵化。仔魚暫養(yǎng):將盆中的死卵擇出,漂洗干凈,把仔魚倒入設(shè)置了防逃網(wǎng)的規(guī)格2.80 m×0.52 m×0.22 m(長×寬×深)玻璃鋼槽中暫養(yǎng),防逃網(wǎng)孔徑為600 μm(30目),槽內(nèi)水深0.10~0.12 m,水流量為2.5~3.0 L/min。隨著暫養(yǎng)仔魚數(shù)量的增多,水流量調(diào)整為3~4 L/min。降氧孵化:當(dāng)出苗量在1%時,封閉出水管,將孵化槽水位提升至20 cm,然后關(guān)閉進(jìn)水管,當(dāng)溶解氧降至6.5~7.0 mg/L時,清洗孵化槽,將仔魚移出暫養(yǎng);如此重復(fù)操作,直至出苗結(jié)束。
1.3.6 稚魚培育
利用1.5 m2(規(guī)格2.80 m×0.52 m×0.22 m)的玻璃鋼水槽作為飼育槽進(jìn)行分級培育。仔魚剛孵出時呈側(cè)臥狀態(tài),偶爾游動,1周后能正常游動,可開食馴化。體質(zhì)量僅為0.01 g的仔魚,放養(yǎng)密度約為40 000尾/m2,在培育槽進(jìn)水處投喂活體鹵蟲無節(jié)幼體,每天4次(8:00、11:00、14:00、17:00),投餌率在20%左右。當(dāng)稚魚體質(zhì)量為0.1 g時,放養(yǎng)密度約為20 000尾/m2,以活體鹵蟲無節(jié)幼體和小型冰凍海溞作為餌料:上、下午各投喂1次鹵蟲無節(jié)幼體活體,投餌率為10%;另外在培育槽的進(jìn)水管下方放置餌料筐,將冰凍海溞放入筐中,隨水流沖下進(jìn)行投喂,上、下午各投1次,投餌率為5%。當(dāng)稚魚體質(zhì)量為0.3 g時,放養(yǎng)密度約為10 000尾/m2,于上、下午各投喂1次鹵蟲無節(jié)幼體活體和中型冰凍海溞,兩種餌料的投餌率均為6%。當(dāng)稚魚體質(zhì)量為0.5 g時,放養(yǎng)密度約為5 000尾/m2,于上、下午各投喂1次活體鹵蟲無節(jié)幼體和大型冰凍海溞,兩種餌料的投餌率分別為3%、6%。每月1次將培育槽水位降至4~5 cm,將充分溶解的食鹽水均勻潑入槽中,配制成濃度為2%的食鹽水,對稚魚消毒浸泡40~60 min,以預(yù)防細(xì)菌性疾病;如果是治療則連續(xù)用3 d。
親魚經(jīng)99 d培育,培育成活率約為90%。試驗(yàn)共采卵1 178萬粒,受精率為93.0%。受精卵發(fā)眼積溫105~126 ℃·d,共獲得發(fā)眼卵1 052萬粒,發(fā)眼率為96.0%。降氧孵化出苗積溫為250~310 ℃·d,孵化天數(shù)為33~35 d,共出苗971萬尾,孵化率為92.3%。稚魚培育成活率為96.7%,共培育平均體質(zhì)量1.3 g的稚魚939萬尾。
雜色杜父魚具有相殘的習(xí)性[2]。進(jìn)行大小分養(yǎng),一方面是避免較大個體吞食較小個體,直接造成親魚培育成活率降低;另一方面是避免較大個體咬傷較小的個體,引發(fā)水霉病,導(dǎo)致較小個體死亡,進(jìn)而影響親魚培育成活率。另外,相同規(guī)格的雌、雄個體,在親魚培育過程中,通常雄魚的生長要顯著快于雌魚,為防止較大的雄魚吞食或咬傷較小的雌魚,親魚培育時一定要進(jìn)行雌雄分養(yǎng)。
鹵蟲蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為45.4%,營養(yǎng)豐富[3],能夠滿足雜色杜父魚的營養(yǎng)需求。本試驗(yàn)采卵率達(dá)98.0%,說明飼喂效果良好。雜色杜父魚攝食慢,采用掛袋投喂冰凍鹵蟲的方式,鹵蟲逐漸融解,動態(tài)下落,并隨池水緩慢流經(jīng)養(yǎng)殖池,有利于雜色杜父魚的攝食馴化。雜色杜父魚為底層魚類,對光線敏感,投喂時間以7:00—8:00、15:00—16:00為宜。
雜色杜父魚雄魚精液量極少,采精時不能直接將精液采到卵上,而需用采精介質(zhì)。其卵為黏性卵,遇水迅速黏結(jié),無法授精,但能游離于等滲液中,因此必須采用等滲液采精和載精,才能獲得較高的受精率。
雜色杜父魚雌魚在繁殖期腹部顯著膨大,外觀上看已成熟,實(shí)則不然,其卵的成熟程度一定要通過腹部的柔軟度進(jìn)行判別。雌親魚在最佳成熟狀態(tài)時,卵粒游離于腹腔,腹部很柔軟,在進(jìn)行人工采卵時,一般輕揉其腹部即可順利排出卵,且受精率高,一般在90%以上;但有些腹部也較軟的雌魚,由于卵尚未完全成熟,即使能采得卵,這些卵受精率也很低,甚至無法受精,常導(dǎo)致人工繁殖失敗。因此,在雌魚性成熟達(dá)到最佳狀態(tài)時采卵是提高受精率的關(guān)鍵,同時要注意對達(dá)到最佳成熟狀態(tài)的雌魚及時進(jìn)行采卵,防止過熟,導(dǎo)致受精率降低和流產(chǎn)。
在魚類人工繁殖過程中,對受精卵進(jìn)行消毒能有效殺滅致病菌,提高孵化率[4-5]。通常由于在出苗后停用消毒藥物,發(fā)眼卵在出苗量達(dá)0.3%以后容易滋生水霉菌,死卵會堵住孵化槽的進(jìn)水孔,造成局部水流不暢,進(jìn)而導(dǎo)致發(fā)眼卵缺氧死亡,繼發(fā)水霉病。如此蔓延,會造成發(fā)眼卵成片死亡,且水霉菌在孵化水體中大量滋生。因此,要每3 d洗槽一次,并進(jìn)行移槽孵化。
降氧孵化為環(huán)境脅迫,在出苗量達(dá)1%時采用此方法,能加速雜色杜父魚出苗,降低發(fā)眼卵感染水霉菌的風(fēng)險。據(jù)筆者之前的研究[6],雜色杜父魚正常孵化出苗積溫為250~373 ℃·d,出苗需時38~40 d,孵化率為80.8%。本試驗(yàn)的出苗積溫為250~310 ℃·d,孵化天數(shù)為33~35 d,比之前縮短了5~7 d,孵化率達(dá)92.3%,提高了11.5%,效果顯著。
鹵蟲無節(jié)幼體被廣泛應(yīng)用在魚類苗種培育中[7]。雜色杜父魚初孵仔魚在暫養(yǎng)槽中呈側(cè)臥狀態(tài),一周后才能正常游動,并具捕食能力。因仔魚很小,體質(zhì)量僅0.01 g左右,“開口”困難,鹵蟲無節(jié)幼體活體不僅適口性強(qiáng),且游泳速度慢,有利于雜色杜父魚仔魚捕食,一般當(dāng)天即可馴食成功。本試驗(yàn)中將鹵蟲無節(jié)幼體作餌料,再結(jié)合投喂冰凍海溞,稚魚培育成活率高達(dá)96.7%??梢哉f,鹵蟲無節(jié)幼體活體在稚魚培育中起到了決定性的作用。