不同HBV基因型乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌患者的臨床特征和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在肝癌組織中的表達(dá)

白露,李慶剛

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 感染科,河南 鄭州 450000)

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一種包含4個(gè)重疊的開(kāi)放閱讀框的球形DNA病毒,感染后能引起急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎等。其中部分慢性肝炎可演變成肝硬化或肝癌。乙型肝炎已成為世界范圍內(nèi)危害人類(lèi)健康的疾病,我國(guó)現(xiàn)存70萬(wàn)穩(wěn)定HBV感染者,給社會(huì)和家庭造成沉重負(fù)擔(dān)。HBV具有病毒復(fù)制產(chǎn)量高和突變率高等特征,現(xiàn)已至少形成A～I(xiàn) 9種基因型,根據(jù)目前報(bào)道HBV基因型和亞基因型具有不同的地理分布,還可能受到社會(huì)人口學(xué)、種族或遷徙因素的影響,其分型影響許多臨床疾病特征和對(duì)治療的反應(yīng),盡管關(guān)于HBV基因型分布的報(bào)道很多,但研究之間存在很大差異[1-2]。目前我國(guó)HBV以B型和C型最為常見(jiàn),其中B型主要分布于南方,而C型則多見(jiàn)于北方、中原和華東地區(qū),兼有少量B+C混合型和D型。臨床研究表明,HBV的基因型與疾病進(jìn)程、感染后臨床表現(xiàn)、預(yù)后和抗病毒治療應(yīng)答等密切相關(guān)。例如,B型患者對(duì)普通干擾素和聚乙二醇干擾素為主的治療均敏感,累積生存率高于C型;與B型相比,C型患者血清乙型肝炎表面抗原出現(xiàn)遲,清除慢,核酸復(fù)制力強(qiáng),更易進(jìn)展為肝纖維化和肝癌,僅對(duì)聚乙二醇干擾素治療敏感;D型容易在年輕患者中引發(fā)原發(fā)性肝細(xì)胞癌。因此,對(duì)HBV進(jìn)行基因分型具有重要的臨床意義。臨床上目前對(duì)于HBV基因型與乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌臨床特征和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和受體(Flt-1,Flk-1)在肝癌組織中表達(dá)關(guān)系的研究較少,本研究基于此對(duì)其展開(kāi)研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

前瞻性納入2020年10月至2022年10月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診住院的200例乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者作為研究對(duì)象,根據(jù)HBV基因型檢測(cè)結(jié)果將患者分為HBV基因型B型組101例,HBV基因型C型組90例,HBV基因型D型組9例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡>18歲;(2)乙型肝炎核心抗體陽(yáng)性和表面抗原陰性;(3)臨床資料、病程等相關(guān)資料完整可查。剔除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并其他腫瘤、心力衰竭、心肌梗死、嚴(yán)重感染、免疫系統(tǒng)疾病及嚴(yán)重心、肝、腎功能不全;(2)依從性差或溝通障礙等條件脫落研究。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意,患者對(duì)此研究知情同意。3組一般資料見(jiàn)表1。

表1 3組患者一般資料比較

1.2 研究方法

采集病史并檢測(cè)各組肝功能相關(guān)指標(biāo)以及VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)的表達(dá),分析肝功能相關(guān)指標(biāo)[甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平以及HBV載量、Child-Pugh評(píng)分]以及VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)的表達(dá)的差異。VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)在肝癌組織中的表達(dá):抽提肝癌組織樣本RNA,利用NCBI網(wǎng)站設(shè)計(jì)VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)引物并合成樣本模板DNA,進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 不同HBV基因型肝癌患者的腫瘤標(biāo)志物、病毒載量以及肝功能比較

HBV基因型C型肝細(xì)胞癌患者AFP以及HBV病毒載量、肝功能評(píng)分較HBV基因型B型肝細(xì)胞癌與HBV基因型D型肝細(xì)胞癌更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 不同HBV基因型肝癌患者的腫瘤標(biāo)志物、病毒載量以及肝功能比較

2.2 VEGF、VEGFR(Flt-1,Flk-1)在不同HBV基因型肝癌組織中表達(dá)比較

HBV基因型C型肝細(xì)胞癌患者VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達(dá)較HBV基因型B型肝細(xì)胞癌與HBV基因型D型肝細(xì)胞癌更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)在不同HBV基因型患者的水平比較

3 討論

HBV感染是一種全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題,其嚴(yán)重程度與HBV的基因型有關(guān)。而在乙型肝炎患者中,VEGF和受體的水平與肝功能的分級(jí)也存在關(guān)聯(lián)。本研究根據(jù)其HBV基因型的不同,將其分為不同組別,研究結(jié)果顯示,HBV基因型C型肝細(xì)胞癌患者AFP水平以及HBV載量、Child-Pugh評(píng)分、VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達(dá)較HBV基因型B型肝細(xì)胞癌與HBV基因型D型肝細(xì)胞癌更高。這表明不同HBV基因型可能對(duì)VEGF和受體的表達(dá)產(chǎn)生不同的調(diào)控效應(yīng),這暗示了HBV基因型對(duì)肝功能的影響可能部分通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF和受體的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。

HBV基因型C型肝細(xì)胞癌HCC患者甲胎蛋白AFP水平的升高以及HBV載量和Child-Pugh評(píng)分的增加可能與以下機(jī)制有關(guān)。(1)HBV基因型C型是一種較為致病的基因型,與其他基因型相比,HBV基因型C型更容易引起慢性乙型肝炎,并增加患者發(fā)展為肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn);持續(xù)的HBV感染可以導(dǎo)致肝細(xì)胞的炎癥和損傷,促進(jìn)肝細(xì)胞癌的發(fā)展,并導(dǎo)致AFP水平的升高。(2)HBV感染引起的持續(xù)肝臟炎癥和損傷可以導(dǎo)致肝功能的損害,從而使Child-Pugh評(píng)分升高[3]。Child-Pugh評(píng)分是評(píng)估肝功能的指標(biāo),包括總膽紅素水平、血清白蛋白水平、凝血功能等指標(biāo),這些指標(biāo)的異?？梢苑从掣闻K的損傷程度。加上HBV感染是肝細(xì)胞癌的重要危險(xiǎn)因素之一[4]。(3)在HBV感染的過(guò)程中,病毒基因組的整合和突變可能導(dǎo)致腫瘤抑制基因的失活和腫瘤促進(jìn)基因的激活,從而促進(jìn)肝細(xì)胞癌的發(fā)展。肝細(xì)胞癌的發(fā)展過(guò)程中,AFP水平往往升高,與腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生AFP的能力增強(qiáng)有關(guān)。(4)HBV感染引起的肝臟炎癥和損傷可能導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)的失衡。免疫調(diào)節(jié)失衡可能導(dǎo)致免疫抑制功能的降低,使得HBV感染的控制受到影響,HBV載量增加[5]。同時(shí),免疫調(diào)節(jié)失衡也可能導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸,使肝細(xì)胞癌的發(fā)展更為侵襲性?？傊?HBV基因型C型肝細(xì)胞癌患者甲胎蛋白水平的升高以及HBV載量和Child-Pugh評(píng)分的增加可能是多種復(fù)雜機(jī)制的結(jié)果,包括HBV感染、肝臟損傷、肝細(xì)胞癌的發(fā)展以及免疫調(diào)節(jié)失衡等[6-7]。而HBV基因型C與B和D相比,可能具有更高的致病性和癌變潛力。HBV基因型C感染的肝細(xì)胞可能會(huì)產(chǎn)生更多的病理變化,包括累積的基因突變和異常細(xì)胞增殖,從而導(dǎo)致更高水平的VEGF和其受體的表達(dá)。HBV感染引起的肝炎和炎癥反應(yīng)是肝細(xì)胞癌發(fā)生的重要因素。HBV基因型C患者可能更容易出現(xiàn)持續(xù)性炎癥反應(yīng),導(dǎo)致持續(xù)性的VEGF表達(dá)增加[8]。炎癥反應(yīng)中的細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)也可能通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF和其受體的表達(dá)來(lái)增加腫瘤血管生成。HBV基因型C感染可能導(dǎo)致一系列基因的表達(dá)改變。研究發(fā)現(xiàn),HBV基因型C感染與VEGF及其受體的過(guò)度表達(dá)相關(guān)的基因調(diào)控元件存在差異。這些基因調(diào)控元件的改變可能導(dǎo)致HBV基因型C肝細(xì)胞癌細(xì)胞更容易產(chǎn)生VEGF和其受體,從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和血管生成[9-10]。此外HBV感染的機(jī)制非常復(fù)雜,可能受多個(gè)因素的影響。例如,病毒突變、宿主基因多態(tài)性、免疫反應(yīng)等都可能與HBV基因型C肝細(xì)胞癌中VEGF及其受體的高表達(dá)有關(guān)。

4 結(jié)論

不同HBV基因型患者的腫瘤標(biāo)志物、病毒載量以及肝功能比較有區(qū)別,對(duì)于確診的肝細(xì)胞癌患者及時(shí)進(jìn)行HBV基因型檢測(cè)和VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達(dá)檢測(cè)對(duì)于治療以及預(yù)后具有指導(dǎo)意義。