復(fù)方植物精油對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能和腸道菌群的影響

何佳楠，何叔年，康樺華，符德佳，樊志紅，曾憲軍，陳 杰，彭新宇

（1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，廣東 廣州 510225；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物衛(wèi)生研究所/廣東省畜禽疫病防治研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸用藥物與診斷技術(shù)廣東科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站/廣東省中獸藥工程技術(shù)研究中心，廣東 廣州 510640；3.廣州市江豐實(shí)業(yè)股份有限公司，廣東 廣州 510510；4.廣州市江豐實(shí)業(yè)翁源有限公司，廣東 韶關(guān) 512600）

【研究意義】飼用抗生素可提高畜禽生產(chǎn)性能、減少疾病，但其廣泛應(yīng)用導(dǎo)致畜禽產(chǎn)品藥物殘留問(wèn)題，也促使細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，嚴(yán)重威脅食品安全和人體健康。因此，世界各國(guó)對(duì)飼用抗生素紛紛采取限制措施。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求，從2020 年7 月1 日起，我國(guó)飼料生產(chǎn)企業(yè)必須停止生產(chǎn)含有促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑（中藥類除外）的商品飼料。這標(biāo)志著我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展進(jìn)入綠色發(fā)展階段，“禁抗、減抗、限抗”已成為畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的必然趨勢(shì)，研究抗生素替代品是行業(yè)發(fā)展的迫切需求。

【前人研究進(jìn)展】目前抗生素替代品的研究主要集中在天然植物（包括中草藥）、益生菌和酸化劑等方面。其中，植物提取物是通過(guò)物理、化學(xué)等方式從植物中提取的單一或混合的化合物，具有促生長(zhǎng)、抗氧化、抗菌和增強(qiáng)免疫等功效［1］。植物精油作為一類重要的植物提取物，是植物的天然揮發(fā)性油類，通常由幾十種不同的化學(xué)物質(zhì)組成，含量較高的幾種化學(xué)物質(zhì)可占總量的70%［2-3］，這些成分對(duì)植物精油的生物學(xué)功能影響極大。目前關(guān)于植物精油抑殺病原微生物、抗氧化、消炎等研究很多［4］。據(jù)報(bào)道，肉豆蔻與肉豆蔻衣精油對(duì)大腸桿菌、葡萄球菌等具有抑菌作用［5］，羅勒精油可提高腸道內(nèi)溶菌酶的活性［6］。此外，植物精油可以提高肉雞的抗氧化能力，如在肉雞日糧中添加鼠尾草精油和迷迭香精油，其胸肌和腿肌的抗氧化能力更好，膽固醇氧化產(chǎn)物更低［7］。研究表明，肉豆蔻精油能提高鐵離子的還原能力，羅勒精油能使氧化酶mRNA 表達(dá)降低［8-9］。

腸道微生物是動(dòng)物腸道中共生的一個(gè)龐大的微生物族群，細(xì)菌是其最重要的組成部分。研究表明，超過(guò)100 萬(wàn)種微生物在肉雞腸道定殖，其基因相當(dāng)于肉雞全基因組的40～50 倍［10］。正常肉雞的腸道菌群具有免疫屏障、營(yíng)養(yǎng)代謝和促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育等作用，是雞生理功能中不可或缺的一環(huán)，因此腸道菌群平衡對(duì)肉雞健康具有重要意義［11］。研究表明，肉雞的生長(zhǎng)性能不同，其腸道菌群組成也存在顯著差異［12-13］，肉雞的生產(chǎn)性能與腸道菌群密切相關(guān)。

【本研究切入點(diǎn)】前期研究發(fā)現(xiàn)，肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油對(duì)雞產(chǎn)氣莢膜梭菌具有良好的體外抑菌作用，在雞壞死性腸炎的人工發(fā)病模型試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的預(yù)防效果［14］。但該復(fù)方精油對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖黃羽肉雞的應(yīng)用效果還不清楚。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究開展黃羽肉雞規(guī)模養(yǎng)殖試驗(yàn)，在日糧中添加肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油預(yù)混劑，評(píng)價(jià)該復(fù)方精油對(duì)集約化飼養(yǎng)黃羽肉雞主要生產(chǎn)性能指標(biāo)的影響；并對(duì)腸道菌群16S rDNA V3～V4可變區(qū)進(jìn)行高通量測(cè)序，分析肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油對(duì)肉雞腸道菌群的影響，探討其作用機(jī)制，為肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油在黃羽肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試的復(fù)方精油預(yù)混劑（以下簡(jiǎn)稱“復(fù)方精油”）由肉豆蔻精油和羅勒精油配制（含精油20%），由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物衛(wèi)生研究所提供。

供試的黃羽肉雞為江村黃雞商品雛雞（1 日齡，♀），由廣州市江豐實(shí)業(yè)股份有限公司提供。

試驗(yàn)用基礎(chǔ)日糧為玉米-小麥-豆粕-菜粕型日糧，參照國(guó)家農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)需要量》（NYT/3645-2020）進(jìn)行配制，為顆粒狀配合飼料。日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient level of diets

1.2 試驗(yàn)分組與飼養(yǎng)管理

隨機(jī)將3 942 只1 日齡黃羽肉雞分為空白對(duì)照（EOCON）、復(fù)方精油低劑量（EOL）和復(fù)方精油高劑量（EOH）3 個(gè)處理組，分別飼喂基礎(chǔ)日糧、添加0.025%和0.05%復(fù)方精油預(yù)混劑的基礎(chǔ)日糧 。每個(gè)處理6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)219 只黃羽肉雞。

試驗(yàn)于2020 年7—9 月在廣州市江豐實(shí)業(yè)股份有限公司花都雞場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)期為60 d，肉雞全程自由采食，由乳頭式飲水器供水。1～35 日齡在育雛舍飼養(yǎng)，35 日齡后轉(zhuǎn)移至育成舍。每天記錄各處理組的飼料消耗量、健康狀態(tài)和死亡情況等。

1.3 生產(chǎn)性能指標(biāo)測(cè)定

60 日齡時(shí)統(tǒng)計(jì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能相關(guān)數(shù)據(jù)，包括各處理組的合格雞體質(zhì)量（＞1.3 kg）、合格存活個(gè)體數(shù)、死淘數(shù)以及飼料消耗量。計(jì)算各處理組肉雞的平均合格品出欄率、平均日采食量、平均體質(zhì)量以及料肉比等。

合格品出欄率（%）=出欄合格活體數(shù)/219×100

1.4 腸道菌群分析

60 日齡時(shí)，每個(gè)處理組隨機(jī)抽取5 只雞，脫頸處死，無(wú)菌操作取空腸（以其卵黃蒂為起點(diǎn)，上下各5 cm）和盲腸內(nèi)容物，干冰暫存，隨后送到實(shí)驗(yàn)室-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

采用天根生物科技有限公司的糞便基因組DNA 提取試劑盒，按說(shuō)明書提取腸道內(nèi)容物細(xì)菌DNA。根據(jù)細(xì)菌16S rDNA V3～V4可變區(qū)進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，引物序列為：338F 5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3' 和806 R 5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3'。

PCR 反應(yīng)體系（20 μL）：4 μL 5×FastPfu 緩沖液，2 μL 2.5 mmol/L dNTPs，0.4 μL 上游引物，0.4 μL 下游引物，0.4 μL FastPfu 聚合酶，0.2 μL BSA，10 ng 模板DNA，dd H2O 加至20 μL。

綜上所述，2015—2017年江蘇省如皋市育齡婦女死亡原因中以腫瘤和意外傷害占有率最高，相關(guān)部門需針對(duì)死亡原因?qū)嵤┽槍?duì)性干預(yù)，加強(qiáng)育齡婦女惡性腫瘤疾病的防治工作，采取各種宣傳渠道、宣傳手段，增強(qiáng)廣大育齡婦女的防癌意識(shí)，并積極預(yù)防意外傷害的發(fā)生，減少育齡婦女死亡率。

PCR 反應(yīng)程序：95 ℃ 預(yù)熱 3 min；95 ℃ 變性 30 s、58 ℃ 退火 30 s、72 ℃ 延伸 45 s，35 個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸 10 min，之后保持10 ℃。

PCR 產(chǎn)物利用2%瓊脂糖電泳進(jìn)行檢測(cè)，合格產(chǎn)物送至上海美吉生物有限公司進(jìn)行高通量測(cè)序。利用Illumina 測(cè)序平臺(tái)，將得到的PE reads 根據(jù)Overlap 關(guān)系進(jìn)行拼接，并對(duì)序列進(jìn)行質(zhì)量控制。然后進(jìn)行OTU 聚類分析和物種分類分析，進(jìn)一步對(duì)群落組成進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和可視化分析。

1.5 數(shù)據(jù)分析

腸道菌群數(shù)據(jù)采用SPSS26 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)對(duì)門和屬的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，采用Benjamini Hochberg 法進(jìn)行P值校正。生產(chǎn)性能數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，多重比較采用LSD 法。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表2 可知，復(fù)方精油組與空白對(duì)照組的合格品出欄率均無(wú)顯著差異；復(fù)方精油高、低劑量組的平均采食量均極顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.01），其中復(fù)方精油高劑量組的采食量為空白對(duì)照組的86.6%；各組之間平均體質(zhì)量和平均日增重沒(méi)有顯著性差異；兩復(fù)方精油組的料肉比極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），飼料轉(zhuǎn)化率均提高11.4%。

表2 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effect of compound plant essential oil on production performance of yellow-feathered broilers

2.2 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞空腸菌群的影響

黃羽肉雞空腸菌群共檢測(cè)到OTU 585 個(gè)，分屬于308 種178 屬89 科48 目17 綱11 門1 界。

2.2.1黃羽肉雞空腸樣品物種組成Venn 圖分析結(jié)果 由圖1 可知，復(fù)方精油高劑量組、低劑量組和空白對(duì)照組共有的OTU 數(shù)目為154 個(gè)，復(fù)方精油高劑量組特有的OTU 數(shù)目為30 個(gè)，復(fù)方精油低劑量組特有的OTU 數(shù)目為194 個(gè)，空白對(duì)照組特有的OTU 數(shù)目為34 個(gè)。復(fù)方精油低劑量組的OTU 數(shù)量最多，其次為復(fù)方精油高劑量組。

圖1 黃羽肉雞空腸樣品物種組成Venn 圖Fig.1 Venn diagram of species composition of jejunum samples of yellow-feathered broilers

2.2.2復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞空腸菌群α多樣性指數(shù)的影響 由表3 可知，各組空腸菌群Coverage指數(shù)均大于0.995，即各組樣品檢測(cè)覆蓋率均達(dá)到99.5%以上，說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果可信。各組樣品空腸菌群的Sobs 指數(shù)、Shannon 指數(shù)和 Simpson 指數(shù)均沒(méi)有顯著性差異，說(shuō)明各組空腸菌群的多樣性、豐富度、均勻度表現(xiàn)一致。

表3 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞空腸菌群α 多樣性指數(shù)的影響Table 3 Effect of compound essential oil on α diversity index of jejunum microflora of yellow-feathered broilers

2.2.3黃羽肉雞空腸菌群稀釋曲線分析結(jié)果 由黃羽肉雞空腸菌群物種稀釋曲線（圖2）可見(jiàn)，隨著樣本測(cè)序深度的增加，表觀實(shí)際觀測(cè)到的物種豐度在OTU 水平上不斷增加。但所有曲線最終趨于平緩，表示測(cè)序深度足夠，數(shù)據(jù)量合理，實(shí)際觀測(cè)到的物種數(shù)目能夠覆蓋空腸內(nèi)容物樣品中的菌群物種。

圖2 黃羽肉雞空腸菌群Sobs 指數(shù)稀釋曲線Fig.2 Sobs index rarefaction curves of jejunum microflora of yellow-feathered broilers

2.2.4復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞空腸菌群組成的影響 由表4 可知，黃羽肉雞空腸菌群中相對(duì)豐度≥總豐度0.1%的細(xì)菌門有9 個(gè)。9 個(gè)門中占據(jù)優(yōu)勢(shì)的是厚壁菌門（相對(duì)豐度＞90%）和放線菌門（相對(duì)豐度＞1%）。復(fù)方精油高、低劑量組疣微菌門的相對(duì)豐度均顯著低于空白對(duì)照組（P<0.05）。各組間空腸菌群的厚壁菌門與擬桿菌門相對(duì)豐度比值（F/B）無(wú)顯著性差異。

表4 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞空腸菌群組成的影響Table 4 Effect of compound essential oil on the composition of jejunum microflora of yellow-feathered broilers

2.3 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞盲腸菌群的影響

黃羽肉雞盲腸共檢測(cè)到OTU 917 個(gè)，分屬于383 種189 屬84 科45 目20 綱12 門1 界。

2.3.1黃羽肉雞盲腸樣品物種組成Venn 圖分析結(jié)果 由圖3 可知，復(fù)方精油高劑量組、復(fù)方精油低劑量組和空白對(duì)照組共有的OTU 數(shù)目為671個(gè)，復(fù)方精油高劑量組特有的OTU 數(shù)目最多、為54 個(gè)，其次為復(fù)方精油低劑量組、為35 個(gè)，空白對(duì)照組特有的OTU 數(shù)目最少、為21 個(gè)。

圖3 黃羽肉雞盲腸樣品物種組成Venn 圖Fig.3 Venn diagram of species composition of caecum samples of yellow-feathered broilers

2.3.2復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞盲腸菌群α多樣性的影響 由表5 可知，各組盲腸菌群Coverage 指數(shù)均大于0.995，即各組樣品檢測(cè)覆蓋率均達(dá)到99.5%以上，說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果可信。各組Sobs 指數(shù)、Shannon 指數(shù)和Simpson 指數(shù)均無(wú)顯著差異，表明復(fù)方精油對(duì)盲腸菌群的多樣性、豐富度、均勻度沒(méi)有影響。

表5 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞盲腸菌群α 多樣性的影響Table 5 Effect of compound essential oil on α diversity index of cecum microflora of yellow-feathered broilers

2.3.3黃羽肉雞盲腸菌群稀釋曲線分析結(jié)果 由黃羽肉雞盲腸菌群物種稀釋曲線（圖4）可見(jiàn)，隨著樣本測(cè)序深度的增加，實(shí)際觀測(cè)到的物種豐度在OTU 水平上不斷增加。但是所有樣本的稀釋曲線最終趨于平緩，表示測(cè)序深度足夠，數(shù)據(jù)量合理，實(shí)際觀測(cè)到的物種數(shù)目能夠覆蓋盲腸內(nèi)容物樣品中的菌群物種。

圖4 黃羽肉雞盲腸菌群Sobs 指數(shù)稀釋曲線Fig.4 Sobs index rarefaction curves of cecum microflora of yellow-feathered broilers

2.3.4復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞盲腸菌群組成的影響 黃羽肉雞盲腸菌群中相對(duì)豐度≥總豐度1% 的細(xì)菌門有8 個(gè)（表6）。由表6 可知，黃羽肉雞盲腸優(yōu)勢(shì)菌是厚壁菌門（Firmicutes）和擬桿菌門（Bacteroidota），其次是放線菌門（Actinobacteriota）和藍(lán)藻門（Cyanobacteria）。

表6 復(fù)方精油對(duì)黃羽肉雞盲腸菌群組成的影響Table 6 Effect of compound essential oil on the composition of cecum microflora of yellow-feathered broilers

復(fù)方精油低劑量組的彎曲桿菌門（Campilobacterota）和藍(lán)藻門（Cyanobacteria）相對(duì)豐度顯著高于空白對(duì)照組（P<0.05），復(fù)方精油高劑量組的變形桿菌門（Proteobacteria）相對(duì)豐度顯著高于空白對(duì)照組（P<0.05）。復(fù)方精油低劑量組的厚壁菌門（Firmicutes）相對(duì)豐度顯著高于復(fù)方精油高劑量組（P<0.05），擬桿菌門（Bacteroidota）相對(duì)豐度顯著低于復(fù)方精油高劑量組（P<0.05），且其厚壁菌和擬桿菌相對(duì)豐度比值（F/B）顯著高于復(fù)方精油高劑量組（P<0.05）。

黃羽肉雞盲腸菌群中相對(duì)豐度≥總豐度1%的細(xì)菌屬有13 個(gè)（表6）。13 個(gè)屬中各組優(yōu)勢(shì)屬均為擬桿菌屬（Bacteroides）、乳桿菌屬（Lactobacillus）、另枝菌屬（Alistipes）、Clostridia UCG-014、Christensenellaceae R-7 屬、糞桿菌屬（Faecalibacterium）以及瘤胃球菌屬（Ruminococcus）。

復(fù)方精油高、低劑量組的 Clostridia_vadinBB60_group 和另枝菌屬相對(duì)豐度均顯著低于空白對(duì)照組（P<0.05），復(fù)方精油高劑量組的Clostridia_UCG-014 相對(duì)豐度顯著低于空白對(duì)照組（P<0.05），復(fù)方精油高劑量組擬桿菌屬相對(duì)豐度顯著高于空白對(duì)照組和復(fù)方精油低劑量組（P<0.05），復(fù)方精油低劑量組瘤胃球菌屬相對(duì)豐度顯著高于空白對(duì)照組（P<0.05）。

3 討論

植物精油對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能具有一定的促進(jìn)作用。魏全意等［15］研究發(fā)現(xiàn)，植物精油凈力安能顯著提高肉雞的生產(chǎn)性能，提高機(jī)體消化吸收能力和免疫力。黃金昌等［16］研究指出，在雞飲水中添加水溶性植物精油200～ 400 mL/t 能提高白羽肉雞出欄時(shí)的體質(zhì)量，降低死亡率，提高歐洲效益指數(shù)。李彬等［17］研究表明，飼料中添加30 mg/kg 復(fù)合植物精油能有效改善麻黃肉雞平均日采食量和料重比。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果一致，本試驗(yàn)中肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油能夠顯著降低黃羽肉雞的料肉比 。

腸道菌群能影響宿主的新陳代謝、生理和免疫系統(tǒng)，維持腸道菌群結(jié)構(gòu)平衡，對(duì)機(jī)體健康有利［18］。本試驗(yàn)在日糧中添加肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油后，肉雞空腸和盲腸仍保持原有的菌群平衡，有益于腸道健康。已有研究表明，植物精油能增加盲腸的OTU 數(shù)，提高盲腸中細(xì)菌的多樣性［19］。本研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方精油增加了黃羽肉雞空腸和盲腸的OTU 數(shù)，表明復(fù)方精油能提高空腸和盲腸的細(xì)菌多樣性。

植物精油對(duì)腸道菌群具有一定的調(diào)節(jié)作用。Koutsos 等［20］發(fā)現(xiàn)，植物精油能夠降低雞盲腸中大腸桿菌、腸球菌和葡萄球菌的數(shù)量，增加腸道內(nèi)乳酸菌的數(shù)量。Seyyed 等［21］認(rèn)為，日糧中添加600 mg/kg 羅勒精油能顯著降低雞腸道菌群內(nèi)大腸桿菌的菌落數(shù)。Matulyte 等［22］報(bào)道，肉豆蔻精油能抑制肉雞腸道內(nèi)糞腸球菌和多殺性巴氏桿菌的生長(zhǎng)。鄭建怡等［23］指出，多種植物精油能改變?nèi)怆u腸道內(nèi)的微生物菌群數(shù)量，增加有益細(xì)菌數(shù)量，減少有害細(xì)菌數(shù)量。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果一致，肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油能夠提高肉雞腸道菌群中雙歧桿菌的相對(duì)豐度，降低梭菌屬的相對(duì)豐度。

在空腸腸道菌群研究方面，張伯池等［24］報(bào)道，添加600 mg/kg 復(fù)合植物提取物可顯著增加肉雞空腸菌群中疣微菌門豐度，表明復(fù)合植物提取物有利于腸道內(nèi)有益細(xì)菌的定植，使腸道處于較為健康的狀態(tài)。假單胞菌屬和雙歧桿菌屬均屬于雙歧桿菌科［25］。研究發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌能夠調(diào)節(jié)腸道菌群，促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)，抑制有害菌生長(zhǎng)，提高腸道的抵抗力和免疫力，有助于輕度腸道感染的控制［26］。腸道菌群中，韋榮氏球菌屬的存在與疾病緩解或穩(wěn)定相關(guān)［27］，片球菌屬能夠調(diào)節(jié)腸道菌群并維持腸道微生態(tài)平衡［28］。本研究表明，飼糧中添加肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油可顯著降低菌群中疣微菌門的相對(duì)豐度，顯著提高空腸假單胞菌屬、雙歧桿菌屬、韋榮氏球菌屬和片球菌屬的相對(duì)豐度，說(shuō)明肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油能夠增加空腸內(nèi)有益菌的豐度。

在盲腸腸道菌群研究方面，Akram 等［29］報(bào)道，擬桿菌門、厚壁菌門和變形菌門是肉雞盲腸的主要菌群，三者相對(duì)豐度之和甚至超過(guò)90%。胡永飛等［30］報(bào)道，雞盲腸菌群中擬桿菌門占優(yōu)勢(shì)。隨著日齡增加，雞盲腸菌群結(jié)構(gòu)逐漸發(fā)生變化，厚壁菌門相對(duì)豐度逐漸降低，擬桿菌門相對(duì)豐度逐漸升高［31］。本試驗(yàn)黃羽肉雞60 日齡時(shí)，占據(jù)盲腸菌群優(yōu)勢(shì)地位的是厚壁菌門、擬桿菌門、放線菌門。其中，放線菌門成為盲腸優(yōu)勢(shì)菌是因?yàn)樵摼T中的雙歧桿菌豐度較高。

值得注意的是，厚壁菌門和擬桿菌門對(duì)雞的代謝和免疫有重要意義，其中兩者的相對(duì)豐度比值（F/B）是近年來(lái)備受關(guān)注的熱點(diǎn)。研究表明，F(xiàn)/B 比值與脂肪的沉積呈正相關(guān)，高脂食物可提高該比值［32］。馮宇等［33］研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群中F/B 比值降低，有助于改善肉雞代謝、減少脂肪沉積。但本試驗(yàn)中肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油組的F/B 比值與空白對(duì)照組差異不顯著。

據(jù)報(bào)道，動(dòng)物腸道菌群中一些厭氧菌屬能產(chǎn)生短鏈脂肪酸，降低腸道內(nèi)的pH 值，增加腸道內(nèi)酸度，促進(jìn)有益菌增殖，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)［34］。乳酸菌屬在代謝中可產(chǎn)生多種短鏈脂肪酸，抑制有害菌生長(zhǎng)，還可產(chǎn)生多種氨基酸和多種維生素，為動(dòng)物機(jī)體提供額外營(yíng)養(yǎng)［35］。擬桿菌屬細(xì)菌可利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生乙酸、琥珀酸，降低pH 值，抑制有害菌生長(zhǎng)［36］。楊建平等［37］報(bào)道，飼糧中添加復(fù)合植物精油，瘤胃菌科的Ruminococcaceae UCG-005 屬、厭氧球菌屬的相對(duì)豐度顯著降低，unidentified_Ruminococcaceae 的相對(duì)豐度顯著升高，說(shuō)明復(fù)合植物精油對(duì)瘤胃菌科相關(guān)屬細(xì)菌有雙向調(diào)節(jié)作用。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，Clostridia_UCG-014、Clostridia_vadinBB60_group等梭菌屬數(shù)量增多會(huì)造成動(dòng)物機(jī)體腸道微生態(tài)紊亂，并引發(fā)腹瀉［38］。另枝菌屬為擬桿菌門中新發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌屬，與腸道炎癥密切相關(guān)［39］。本研究發(fā)現(xiàn)，肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油能顯著提高雞盲腸菌群中擬桿菌屬和瘤胃球菌屬相對(duì)豐度，顯著降低雞盲腸菌群中Clostridia_vadinBB60_group屬、Clostridia_UCG-014 屬和另枝菌屬的相對(duì)豐度，表明添加復(fù)方精油能夠增加盲腸菌群中有益菌屬的相對(duì)豐度，降低有害菌屬的相對(duì)豐度，保持腸道菌群健康狀態(tài)。

4 結(jié)論

肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油可顯著降低黃羽肉雞的料肉比，飼料轉(zhuǎn)化率提高11.4%。飼喂肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油后，黃羽肉雞空腸和盲腸的優(yōu)勢(shì)菌依然是厚壁菌門、放線菌門、擬桿菌門等，放線菌門中重要的益生菌-雙歧桿菌屬仍為優(yōu)勢(shì)屬。同時(shí)，復(fù)方精油可顯著提高空腸雙歧桿菌屬、假單胞菌屬、韋榮氏球菌屬和片球菌屬及盲腸擬桿菌屬、乳酸菌屬和瘤胃球菌屬等有益菌的相對(duì)豐度，可顯著降低空腸疣微菌門、盲腸有害梭菌屬等的相對(duì)豐度?？梢?jiàn)，飼喂肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油能夠促進(jìn)黃羽肉雞空腸和盲腸的有益菌生長(zhǎng)，抑制有害菌增殖，改善腸道菌群，維持菌群平衡，利于腸道健康，明顯提高黃羽肉雞的生產(chǎn)性能。本研究結(jié)果為肉豆蔻和羅勒復(fù)方精油作為飼料添加劑在肉雞生產(chǎn)中推廣應(yīng)用提供了有力依據(jù)。