我國獸藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀

王恩輝 張志然

【摘要】隨著限量標(biāo)準(zhǔn)的更迭，我國獸藥殘留檢測技術(shù)也在近2年陸續(xù)更新頒布與實施。本文通過比對2021版與2022版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》中部分獸藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)的差異，分析不同檢測標(biāo)準(zhǔn)的先進(jìn)性與適用性，便于檢測機構(gòu)在獸藥殘留檢測及監(jiān)管部門制定抽檢方案上采用正確的檢測方法，確保檢測報告的合規(guī)性以及檢測結(jié)論的符合性。

【關(guān)鍵詞】獸藥殘留；檢測標(biāo)準(zhǔn)；抗生素；激素

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.04.007

Current Status of Detection Standards for Veterinary Drug Residues in China

WANG Enhui， ZHANG Zhiran*

（Yantai Standard Metrology Inspection and Testing Center， Yantai 264003， China）

Abstract： With the change of limit standards， Chinas veterinary drug residue detection technology has also been updated and implemented in the past two years. This paper compares the differences between some veterinary drug residue detection standards in the 2021 and 2022 National Food Safety Supervision and Random Inspection Implementation Rules， and analyzes the progressiveness and applicability of different detection standards， so as to facilitate the detection agencies to adopt correct detection methods in veterinary drug residue detection and the supervision departments to develop sampling inspection plans， and ensure the compliance of the detection reports and the compliance of the detection conclusions.

Key words： veterinary drug residues； testing standards； antibiotics； hormone

0引言

獸藥殘留是指食用動物在使用獸藥后，蓄積或殘存在動物機體、組織器官以及進(jìn)入泌乳動物乳汁或禽蛋等農(nóng)副產(chǎn)品中的藥物原形、代謝與衍生產(chǎn)物的總稱。其對食用動物的疾病預(yù)防與治療，提高禽畜出欄率以及改善農(nóng)副產(chǎn)品品質(zhì)具有重要作用[1]。雖然我國根據(jù)休藥期長短、獸藥在動物體內(nèi)的代謝周期，以及對人體的危害狀況制定了獸藥限用和禁用名錄，但由于部分養(yǎng)殖戶缺乏相關(guān)理論培訓(xùn)，在經(jīng)濟利益驅(qū)使下，不僅未能遵守獸藥休藥期的管理規(guī)定，還在施用飼料時摻雜多種獸藥，導(dǎo)致同一農(nóng)副產(chǎn)品中獸藥殘留超標(biāo)且超標(biāo)種類多樣化的現(xiàn)象頻發(fā)，直接影響到我國消費者舌尖上的安全以及農(nóng)副產(chǎn)品的出口貿(mào)易[2-3]。

獸藥根據(jù)作用機理主要分為抗菌治療的抗生素類藥物（四環(huán)素、磺胺、呋喃等）、降低動物外界感知提高新鮮度的精神類藥物（〔鹽酸〕氯丙嗪、利血平、地西泮等），以及改變新陳代謝與蛋白脂肪合成的激素類藥物（克侖特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺等β-腎上腺素受體阻斷劑）[4]。

獸藥殘留種類不同對人體的危害也不盡相同。例如抗生素類藥物中的硝基呋喃與喹諾酮能改變動物細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)，使其產(chǎn)生位點突變；而氯霉素不僅能夠引起“灰嬰綜合征”反應(yīng)，還會造成人體再生障礙性貧血[5]。精神類藥物中的地西泮通過增強抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，不僅會產(chǎn)生嗜睡的副作用，還會造成肌肉松弛，甚至是出現(xiàn)呼吸抑制癥狀[6]。激素類藥物中的克侖特羅，會導(dǎo)致人體心律失常、甲狀腺功能亢進(jìn)，甚至誘發(fā)惡性腫瘤[7-8]。

為切實保護(hù)消費者的健康安全，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部與國家衛(wèi)健委、市場監(jiān)管總局在“十三五”期間共同制定并公布了GB 31650—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最大殘留限量》[9]，該標(biāo)準(zhǔn)替代農(nóng)業(yè)部公告第235號中的相關(guān)部分，明確了動物性農(nóng)副產(chǎn)品中阿苯達(dá)唑等104種（類）獸藥的最大殘留限量；規(guī)定了醋酸等154種允許用于食品動物，但不需要制定殘留限量的獸藥；規(guī)定了氯丙嗪等9種允許作治療用，但不得在動物性食品中檢出的獸藥。

1抗生素類藥物檢測標(biāo)準(zhǔn)的差異

1.1氯霉素的檢測

根據(jù)2021版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》規(guī)定，禽畜肉中氯霉素的檢測標(biāo)準(zhǔn)有2種，分別為GB/T 22338—2008《動物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定》[10]和GB/T 20756—2006《可食動物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[11]。前者根據(jù)樣品基質(zhì)類型不同，采用不同的溶劑與方法進(jìn)行提?。∪饨M織-乙腈震蕩提取后旋蒸、內(nèi)臟-酶解后乙酸乙酯-乙醚溶液提取后旋蒸、蜂蜜-乙酸乙酯震蕩提取后旋蒸），并根據(jù)基質(zhì)類型選用相對應(yīng)的固相萃取柱進(jìn)行凈化；后者采用統(tǒng)一的乙酸乙酯溶液震蕩提取，旋蒸近干后再利用正己烷清洗掉雜質(zhì)，用水定容上機測試。GB/T 22338—2008能有效解決基質(zhì)效應(yīng)的影響且凈化徹底，但由于提取過程需要針對基質(zhì)類型采取不同的前處理方法，在實際操作過程中無法滿足檢測機構(gòu)大批量產(chǎn)品抽檢時的效率要求；GB/T 20756—2006雖然提取相對快捷，但其凈化方式無法完全去除脂肪等雜質(zhì)，使其對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。為此2022版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》增加了GB 31658.2—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物性食品中氯霉素殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[12]進(jìn)行檢測。該方法提取過程采用乙腈與氯化鈉溶液震蕩提取，利用水飽和的乙酸乙酯溶液進(jìn)行液液分配，氮吹盡干后復(fù)溶，并利用固相萃取柱進(jìn)行凈化。該方法處理過程中無需考慮基質(zhì)差異，且由于增加了一道液液分配程序，使其在回收率和凈化程度得到提升，契合當(dāng)下檢測機構(gòu)的使用需求。

1.2四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的檢測

2021版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物檢測標(biāo)準(zhǔn)分別為GB/T 21317—2007《動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法與高效液相色譜法》[13]、GB/T 21316—2007《動物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》[14]、SN/T 1751.2—2007《進(jìn)出口動物源食品中喹諾酮類藥物殘留量檢測方法第2部分：液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》[15]、農(nóng)業(yè)部1077號公告—1—2008《水產(chǎn)品中17種磺胺類及15種喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[16]和GB/T 21312—2007《動物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》[17]，其中SN/T 1751.2—2007適用于禽畜肌肉組織喹諾酮類的檢測，農(nóng)業(yè)部1077號公告—1—2008適用于水產(chǎn)品喹諾酮類的檢測，而GB/T 21312—2007適用于禽畜肝臟等動物性農(nóng)副產(chǎn)品的檢測。

GB/T 21317—2007和GB/T 21312—2007在提取和凈化方式較為相似，均采用EDTA-Mcllvaine緩沖溶液進(jìn)行震蕩提取，然后利用HLB固相萃取柱進(jìn)行凈化。GB/T 21316—2007在提取磺胺類藥物時采用乙腈-水溶液提取，微波輻照完畢重復(fù)提取一次，利用乙腈飽和的正己烷溶液進(jìn)行液液分配凈化，旋蒸后復(fù)溶上機測試。SN/T 1751.2—2007和農(nóng)業(yè)部1077號公告—1—2008提取均使用酸化乙腈進(jìn)行震蕩提取，然后利用正己烷液液分配進(jìn)行凈化。

從上述標(biāo)準(zhǔn)方法中可以看出針對四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的檢測，各標(biāo)準(zhǔn)在提取前處理過程以及凈化方式上均有相似之處。但受標(biāo)準(zhǔn)適用范圍及《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》規(guī)定所限，檢測機構(gòu)在檢測時需要針對這些檢測項目分別進(jìn)行提取和凈化，提升工作量的同時也加大了試劑耗材的成本投入。針對該情況，GB 31658.17—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[18]應(yīng)運而生，并被2022版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》規(guī)定用于禽畜肌肉組織及其農(nóng)副產(chǎn)品的檢測。該檢測方法采用Mcllvaine-Na2-EDTA溶液進(jìn)行提取后，利用磷酸緩沖液重復(fù)提取一次，提取完畢利用固相萃取柱進(jìn)行凈化，氮吹盡干并復(fù)溶上機測試。該方法適用于多種基質(zhì)類型，并通過多種緩沖溶液提取配合固相萃取凈化使樣本的回收率得到極大提升，不僅減少了檢測機構(gòu)的成本投入，也使工作效率和檢測精確度得到改善。

值得注意的是水產(chǎn)品中四環(huán)素類藥物殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)在22版抽檢細(xì)則中增加了GB 31656.11—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素殘留量的測定》[19]。該標(biāo)準(zhǔn)針對樣品類型采用Na2-EDTA溶液與醋酸鉛緩沖溶液提取，離心后殘渣利用Na2-EDTA溶液重復(fù)提取兩次，凈化過程增加了乙酸乙酯液液分配（針對特殊魚類增加2次液液分配）的步驟，利用固相萃取柱進(jìn)行凈化，然后氮吹后復(fù)溶上機測試。多次的提取與凈化使該方法在提取效率和凈化程度有不錯表現(xiàn)，針對鰻鱺等基質(zhì)復(fù)雜的水產(chǎn)品，檢測機構(gòu)可以優(yōu)先采用該方法，避免基質(zhì)效應(yīng)對檢測結(jié)果的影響。

1.3硝基呋喃類的檢測

2021版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》規(guī)定禽畜類硝基呋喃藥物檢測標(biāo)準(zhǔn)采用農(nóng)業(yè)部781號公告—4—2006《動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[20]，而針對水產(chǎn)品類的硝基呋喃藥物檢測標(biāo)準(zhǔn)則采用農(nóng)業(yè)部783號公告—1—2006《水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[21]。農(nóng)業(yè)部781號公告—4—2006先采用水和冰浴甲醇對勻漿后的樣品進(jìn)行洗滌，該步驟主要目的是降低呋喃西林代謝物（SEM）的誤判。由于SEM產(chǎn)生機理復(fù)雜、來源多樣，可能的外源性污染途徑包括偶氮甲酰胺（面粉中常見物質(zhì)）、水產(chǎn)品的甲殼素、次氯酸鈉消毒副產(chǎn)物、瓶蓋密封墊和膠帶等，通過上述方式洗滌，可有效洗去游離態(tài)代謝物，只測定結(jié)合態(tài)代謝物，降低“假陽性”誤判；同時該洗滌步驟還可以去除樣品中組織黏液、色素等干擾雜質(zhì)，減少分析干擾，降低基質(zhì)效應(yīng)。洗滌后的樣品加入鹽酸和2-硝基苯甲醛的二甲砜溶液，37℃避光水浴16小時衍生，衍生后利用磷酸氫二鉀調(diào)節(jié)pH后利用乙酸乙酯先后進(jìn)行兩次提取，氮氣吹干后用甲醇水溶液復(fù)溶后上機測試。農(nóng)業(yè)部783號公告—1—2006則是直接對勻漿后的樣品加入鹽酸和二硝基苯甲醛溶液，置于恒溫水浴振蕩16小時進(jìn)行衍生，調(diào)節(jié)pH后利用乙酸乙酯先后進(jìn)行兩次提取，氮氣吹干后用甲醇水溶液復(fù)溶后上機測試。二者除有無洗滌步驟和衍生試劑方面存在差別，在提取和凈化方式較為相似。2022版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》對于水產(chǎn)品中硝基呋喃藥物的檢測增加了GB 31656.13—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物多殘留的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[22]。該標(biāo)準(zhǔn)與農(nóng)業(yè)部783號公告—1—2006相似，衍生和提取所用試劑及提取凈化方式均無較大改變。

2精神類藥物檢測差異

2021版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》規(guī)定禽畜類中氯丙嗪、地西泮等鎮(zhèn)靜劑類藥物檢測采用SN/T 2113—2008《進(jìn)出口動物源性食品中鎮(zhèn)靜劑類藥物殘留量的檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》[23]。該標(biāo)準(zhǔn)采用乙腈提取，HLB固相萃取柱凈化，然后使用酸化乙腈進(jìn)行洗脫，最后氮吹盡干并復(fù)溶上機測試。2022版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》沒有推薦新的檢測標(biāo)準(zhǔn)，但GB 31656.4—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中氯丙嗪殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的實施[24]，使水產(chǎn)品中氯丙嗪檢測有了基質(zhì)適用的檢測標(biāo)準(zhǔn)，針對風(fēng)險評價和安全性抽檢過程中水產(chǎn)品中氯丙嗪的檢測可以采用該標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測和評估。該標(biāo)準(zhǔn)與SN/T 2113—2008相比，在提取過程中增加了乙腈二次提取殘渣的過程，并在固相萃取柱凈化后的洗脫液和復(fù)溶液的選擇上從酸化乙腈與水改變?yōu)榘被状寂c甲醇乙酸銨溶液，提高了洗脫效率的同時，增加了離子電離度，使樣本回收率和檢測限得到改善。

3激素類藥物檢測差異

克侖特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺等β-受體激素在《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》中一直使用GB/T 22286—2008《動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》[25]方法檢測。該標(biāo)準(zhǔn)利用乙酸鈉緩沖液與β-葡萄糖醛苷酶進(jìn)行37℃水浴酶解12小時，然后調(diào)節(jié)pH至1.0左右，離心后收集全部上清液，將收集的液體調(diào)節(jié)pH至11左右，用飽和氯化鈉溶液（調(diào)節(jié)極性）與異丙醇-乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行液液分配，待提取物質(zhì)充分進(jìn)入有機相，取全部有機溶劑，氮氣吹干用乙酸鈉緩沖液進(jìn)行復(fù)溶，利用離子交換柱進(jìn)行凈化，然后利用氨化甲醇洗脫，氮吹復(fù)溶上機測試；GB 31658.22—2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物性食品中β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[26]，于2023年2月替代GB/T 22286—2008實施。該標(biāo)準(zhǔn)采用乙酸銨緩沖液與β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶解16 h，用高氯酸調(diào)節(jié)pH至1.0左右，離心后將上清液用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至10左右，先后利用乙酸乙酯和叔丁基甲醚進(jìn)行兩次液液分配，取上清液氮吹干后用甲酸溶液溶解，用離子交換柱進(jìn)行凈化，氨化甲醇洗脫，然后氮吹復(fù)溶上機測試。這種檢測增加了酶解時間和液液分配的次數(shù)，使提取效率、提取種類、凈化程度都大幅提高。

此外，GB 31656.14—2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中27種性激素殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[27]適用于水產(chǎn)品基質(zhì)類型激素檢測標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)與GB 31658.22—2022在提取與凈化方式上存在較大差別，針對水產(chǎn)品特點省去了酶解步驟，樣品粉碎后加入乙酸銨溶液，先后采用乙酸乙酯-甲基叔丁基醚混合溶液和乙酸乙酯進(jìn)行兩次液液分配提取，有機相氮吹干后加入正己烷復(fù)溶，采用C18固相萃取柱凈化，然后復(fù)溶上機測試。這種檢測方法彌補了水產(chǎn)品基質(zhì)激素檢測的空白，同時針對樣品類型節(jié)省了酶解時間，并兼顧了GB 31658.22—2022在提取與凈化效率的優(yōu)點。

4結(jié)束語

隨著獸藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善與更新，我國獸藥殘留前處理方法逐步向操作簡便、適合多種基質(zhì)類型、一次提取適合多種藥物的提取以及高度凈化的方向發(fā)展；在儀器設(shè)備的選用上，也逐漸向高靈敏度、高分辨率、高分析效率的三重四級桿液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜統(tǒng)一。檢測機構(gòu)在承擔(dān)政府抽查任務(wù)時，在確保檢測的樣品回收率、基質(zhì)適用性以及檢測效率的同時，要注意所選用的方法應(yīng)被GB 31650—2019以及《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》所允許或推薦，確保檢測報告的合規(guī)性，防止結(jié)論被推翻。因此，期望相應(yīng)的監(jiān)管部門在制定《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》的過程中，能夠選用適用多種基質(zhì)類型同時提取檢測多種藥物的檢測方法，不僅能提高檢測效率與精確度，也能切實降低檢測機構(gòu)運行成本，進(jìn)而推進(jìn)抽檢任務(wù)高質(zhì)量地完成。

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[10]動物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定：GB/T 22338—2008[S].

[11]可食動物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB/T 20756—2006[S].

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[13]動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法與高效液相色譜法：GB/T 21317—2007[S].

[14]動物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法：GB/T 21316—2007[S].

[15]進(jìn)出口動物源食品中喹諾酮類藥物殘留量檢測方法第2部分：液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法：SN/T 1751.2—2007[S].

[16]水產(chǎn)品中17種磺胺類及15種喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：農(nóng)業(yè)部1077號公告—1—2008[S].

[17]動物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法：GB/T 21312—2007[S].

[18]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB 31658.17—2021[S].

[19]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中土霉素、四環(huán)素、金霉素、多西環(huán)素殘留量的測定：GB 31656.11—2021[S].

[20]動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：農(nóng)業(yè)部781號公告—4—2006[S].

[21]水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：農(nóng)業(yè)部783號公告—1—2006[S].

[22]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物多殘留的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB 31656.13—2021[S].

[23]進(jìn)出口動物源性食品中鎮(zhèn)靜劑類藥物殘留量的檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法：SN/T 2113—2008[S].

[24]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中氯丙嗪殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB 31656.4—2021[S].

[25]動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法：GB/T 22286—2008[S].

[26]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物性食品中β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB 31658.22—2022[S].

[27]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中27種性激素殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB 31656.14—2022[S].

【作者簡介】

王恩輝，男，1991年出生，工程師，碩士，研究方向為食品質(zhì)量安全檢測、食品檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化。

通訊作者：張志然，女，1969年出生，高級工程師，學(xué)士，研究方向為食品質(zhì)量安全檢測、葡萄與葡萄酒釀造技術(shù)，郵箱：934698085@qq.com。

（編輯：于淼）