湖南地區(qū)呼吸系統(tǒng)疾病患兒過敏原sIgE檢測(cè)結(jié)果分析*

羅伶俐,劉 燦,祝興元,彭艷華

1.湖南省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)中心,湖南長(zhǎng)沙 410007;2.湖南省職業(yè)病防治院檢驗(yàn)科,湖南長(zhǎng)沙 410007

過敏性疾病指的是機(jī)體將外界環(huán)境中的外來物質(zhì)識(shí)別為有害物質(zhì)時(shí)產(chǎn)生的超敏反應(yīng)性疾病,導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)不同程度的損傷或功能障礙,通常累及多個(gè)器官和系統(tǒng)[1]。引起機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生這種疾病的物質(zhì)被稱為變應(yīng)原或過敏原。近年來,隨著生態(tài)環(huán)境和生活方式的改變,我國(guó)兒童呼吸道過敏性疾病的患病率明顯升高[2]。由于過敏原在呼吸道過敏性疾病發(fā)生、發(fā)展中起到了重要的作用,因此盡早明確致敏原種類及分布特征進(jìn)而采取積極的預(yù)防和治療措施,對(duì)呼吸道過敏性疾病的預(yù)防和治療具有重要意義。但我國(guó)地域遼闊,不同地區(qū)氣候、生活方式和環(huán)境的差異較大,不同地區(qū)引起呼吸道過敏性疾病的過敏原種類及致敏能力存在一定的差異。目前湖南地區(qū)兒童的過敏原種類和分布研究還尚未被報(bào)道過,因此本研究通過血清過敏原檢測(cè),對(duì)在湖南省兒童醫(yī)院就診的呼吸道疾病患兒的吸入性過敏原和食入性過敏原的種類、分布及其與年齡的關(guān)系等進(jìn)行了分析,為本地區(qū)兒童呼吸系統(tǒng)過敏性疾病的防治和診療方案研究提供了一定的科學(xué)理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年10月至2022年10月于湖南省兒童醫(yī)院確診為咳嗽及喘息呼吸系統(tǒng)疾病的患兒639例。臨床診斷包括支氣管哮喘497例,咳嗽變異性哮喘98例,上氣道咳嗽綜合征26例,喘息性支氣管肺炎18例,平均年齡為(4.46±2.69)歲?；純旱呐R床診斷均由本院呼吸專科醫(yī)師確診,符合疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)。本項(xiàng)目通過湖南省兒童醫(yī)院倫理部審批,患兒納入研究前均已獲得法定監(jiān)護(hù)人同意并簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 采用的過敏原特異性免疫球蛋白E(sIgE)抗體檢測(cè)試劑盒(DP 3713-1601 )由歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份有限公司提供,用于體外定性檢測(cè)人血清中的吸入性及食入性過敏原sIgE 抗體檢測(cè)。檢測(cè)儀器為歐蒙EUROBlotMaster Ⅱ自動(dòng)蛋白印跡儀、配套孵育板和精益 S910 掃描儀。檢測(cè)項(xiàng)目包括10種吸入性過敏原:柳樹/楊樹/榆樹、普通豚草、艾蒿、戶塵螨/粉塵螨、屋塵、貓毛、狗上皮、德國(guó)小鐮、霉菌組合1(點(diǎn)青霉/分枝孢霉/煙曲霉/交鏈孢霉)、葎草;9種食入性過敏原:雞蛋白、牛奶、花生、大豆、牛肉、羊肉、海魚組合(鱈魚/龍蝦/扇貝)、蝦、蟹。根據(jù)血清sIgE 水平分為7級(jí),0 級(jí): <0.35 kU/L,1 級(jí):0.35～<0.70 kU/L,2級(jí):0.70～<3.50 kU/L,3級(jí):3.50～<17.50 kU/L,4級(jí):17.50～<50.00 kU/L,5級(jí):50.00～100.00 kU/L,6級(jí):>100.00 kU/L,1 級(jí)及以上為陽性。

1.3方法 所有患兒均用含分離凝膠的真空采血管抽取靜脈血 5 mL,3 000 r/min 離心 10 min,取上層血清進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)操作步驟嚴(yán)格按照試劑說明書執(zhí)行,取 400 μL 患者樣品置于孵育板槽內(nèi),與膜條室溫孵育60 min,洗滌后加入生物素標(biāo)記的抗人 IgE單克隆抗體,繼續(xù)室溫孵育 60 min,再次洗滌后加入鏈霉親和素標(biāo)記的堿性磷酸酶,孵育 10 min 后充分洗滌并加底物顯色,將檢測(cè)膜條放置在結(jié)果判定模板上,風(fēng)干后按照EUROLineScan軟件的操作指南判斷結(jié)果,其采用的濃度等級(jí)等同于過敏原判斷公認(rèn)的放射過敏原吸附試驗(yàn)系統(tǒng)。只存在一種過敏原致敏為單一致敏,存在兩種及以上過敏原致敏為多重致敏。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)、百分?jǐn)?shù)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法,P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1過敏原sIgE陽性分布特征 在639例呼吸道疾病患兒中,至少對(duì)一種過敏原過敏的患兒共271例,占42.4%。在過敏的兒童中有102例(37.64%)為單一過敏,有169例(62.36%)兒童是多重過敏。其中,食入性過敏原sIgE陽性率為27.54%,吸入性過敏原sIgE陽性率為29.26%,兩類過敏原sIgE陽性率差異不明顯。吸入性過敏原sIgE陽性率最高的前 3 位致敏原為戶塵螨/粉塵螨(33.96%)、屋塵(5.16%)和貓毛皮屑(2.97%),最低的為葎草(0.31%);食入性過敏原中前3位為雞蛋白(26.13%)、牛奶(14.24%)和牛肉(10.17%),最低的是蝦(1.56%)。對(duì)19種過敏原進(jìn)行致敏級(jí)別分析,結(jié)果顯示19種過敏原的致敏級(jí)別程度以輕中度(1～3級(jí))為主,重度(4～6級(jí))較少。戶塵螨/粉塵螨致敏級(jí)別較高,4級(jí)和5級(jí)的sIgE陽性率分別為7.5%和13.3%,其余的吸入性過敏原均未超過10%。見表1。

表1 過敏原sIgE 陽性率及不同致敏級(jí)別患兒分布

2.2不同性別、年齡過敏原 sIgE 陽性率分布 本研究639例咳嗽及喘息呼吸系統(tǒng)疾病兒童中有男性患兒401例,過敏原sIgE陽性率為42.14%(169/401);女性患兒238例,過敏原sIgE陽性率為38.66%(92/238),男性和女性患兒間的過敏原sIgE陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.386)。根據(jù)患兒年齡分為以下3組:嬰幼兒組<3歲、學(xué)齡前組(3～6歲)和學(xué)齡期兒童組(>6歲)。隨著患兒年齡的增長(zhǎng),吸入性過敏原的致敏率逐漸增高,而食入性過敏原的致敏率隨年齡增加呈下降趨勢(shì)。嬰幼兒組食入性過敏原sIgE陽性率(33.33%vs.17.95%)顯著高于吸入性過敏原sIgE陽性率。學(xué)齡前組(31.20%vs.22.56%)和學(xué)齡期兒童組(47.58%vs.19.35%)吸入性過敏原sIgE陽性率均顯著高于食入性過敏原sIgE陽性率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在食入性過敏原中,雞蛋白、牛奶、牛肉、羊肉、大豆的sIgE陽性率均隨年齡增加而呈下降趨勢(shì)。在吸入性過敏原中,戶塵螨/粉塵螨和屋塵的sIgE陽性率則隨患兒年齡增加而呈上升趨勢(shì),在學(xué)齡期兒童組達(dá)到最高峰。不同年齡階段的主要過敏原分布不同,在嬰幼兒組中以雞蛋白、牛奶和牛肉3種食入性過敏原為主;在學(xué)齡前組中以戶塵螨/粉塵螨、雞蛋白和牛奶為主;而在學(xué)齡期兒童組以戶塵螨/粉塵螨、雞蛋白和蟹為主。見表2。

表2 不同年齡組呼吸道疾病兒童的過敏原sIgE陽性率比較[n(%)]

2.3不同月份過敏原sIgE陽性率分布 隨著不同月份和季節(jié)的更替,食入性過敏原sIgE陽性率總體的變化不明顯。其中,雞蛋白和牛奶在常年sIgE陽性率較高,且無明顯變化趨勢(shì)。牛肉在3～4月sIgE陽性率較高,其余月份變化相似。海魚組合在6～8月短暫性升高,其他月份sIgE陽性率較低。吸入性過敏原中,戶塵螨/粉塵螨在全年sIgE陽性率最高,在4～8月sIgE陽性率相對(duì)更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其他吸入性過敏原各個(gè)月份sIgE陽性率較低,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),僅柳樹/楊樹/榆樹和霉菌組合1在4月份sIgE陽性率出現(xiàn)短暫增高。見圖1。

圖1 不同月份呼吸道疾病患兒的過敏原sIgE陽性率分布特征

3 討 論

兒童呼吸道過敏性疾病包括過敏性哮喘、過敏性鼻炎等。反復(fù)刺激機(jī)體的過敏原是兒童呼吸道過敏性疾病發(fā)病的重要原因[3]。研究發(fā)現(xiàn)近三十年來,兒童呼吸道過敏性疾病的發(fā)病率不斷升高,已經(jīng)成為我國(guó)兒童最常見的慢性疾病,發(fā)展為影響公共衛(wèi)生的突出問題之一[4]。對(duì)特定過敏原的sIgE開展檢測(cè),明確患兒過敏原致敏的種類和程度是預(yù)防、診斷和治療過敏性疾病的關(guān)鍵步驟。

本研究的639例呼吸系統(tǒng)疾病兒童中,至少對(duì)一種過敏原過敏的患兒共271例(42.4%),其中37.64%的患兒是單一過敏,62.36%的患兒是多重過敏,提示多數(shù)患兒對(duì)多種過敏原存在過敏。食入性過敏原sIgE陽性率為27.54%,吸入性過敏原sIgE陽性率為29.26%,兩類過敏原sIgE陽性率差異不明顯。男性患兒過敏原sIgE陽性率為42.14%(169/401);女性患兒過敏原sIgE陽性率為 38.66%(92/238),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),這與閆紅等[4]的研究結(jié)果一致。但YING等[5]對(duì)上海過敏性疾病兒童的研究發(fā)現(xiàn),男性患兒的sIgE陽性率高于女性患兒,約64.5%的兒童對(duì)至少1種過敏原過敏,過敏率高于本研究結(jié)果;SUN等[6]發(fā)現(xiàn)河南省約41.97%的過敏性疾病兒童至少對(duì)一種過敏原過敏,與本研究的sIgE陽性率結(jié)果基本相似,說明在我國(guó)的不同地區(qū)過敏原sIgE陽性率分布存在差異。本研究結(jié)果表明,湖南地區(qū)呼吸道疾病患兒最常見的吸入性過敏原是戶塵螨/粉塵螨(33.96%),其次為屋塵(5.16%)和貓毛皮屑(2.97%)。除戶塵螨/粉塵螨外,其他吸入性過敏原sIgE陽性率均小于10%,引起吸入性過敏原譜發(fā)生變化的原因可能是由于新型冠狀病毒防控期間,口罩的佩戴極大地減少了室外吸入性過敏原的暴露機(jī)會(huì),在一定程度上降低了呼吸道過敏原sIgE陽性率。對(duì)過敏原的致敏級(jí)別分析發(fā)現(xiàn),戶塵螨/粉塵螨致敏所占比例的遠(yuǎn)超過其他吸入性過敏原,且其致敏級(jí)別較高,以4級(jí)和5級(jí)為主,提示在湖南地區(qū)的呼吸道疾病患兒中,戶塵螨/粉塵螨可能已成為主要致敏原。這與YING等[5]報(bào)道的上海地區(qū)和鄒亞平等[7]報(bào)道的金華地區(qū)呼吸道過敏性疾病兒童最常見的吸入性過敏原為戶塵螨/粉塵螨的研究結(jié)果大致相同。中國(guó)一項(xiàng)近十年的全國(guó)性調(diào)查發(fā)現(xiàn),在哮喘和(或)鼻炎患者中,戶塵螨仍然是最重要的過敏原[8]。但閆紅等[4]針對(duì)河北中南部地區(qū)呼吸道疾病患兒的研究發(fā)現(xiàn),最常見的吸入性過敏原是屋塵和霉菌組合;張曉雙等[9]對(duì)石家莊地區(qū)過敏患兒的研究發(fā)現(xiàn)吸入性過敏原sIgE陽性率的前 3 位是貓毛/狗毛、混合霉菌組合和混合塵螨組;吸入性過敏原在不同地區(qū)有所差異,這可能與地理位置、氣候環(huán)境和生活方式的差異有關(guān),也與過敏性疾病的種類及占比不同有關(guān)[10]。

本研究還發(fā)現(xiàn)湖南地區(qū)呼吸道疾病患兒最常見的食入性過敏原為雞蛋白(26.13%)、牛奶(14.24%)和牛肉(10.17%),與文獻(xiàn)[4-5,11]研究結(jié)果大致相同。對(duì)食入性過敏原致敏的原因可能是由于兒童年齡小,消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完全,因此缺乏消化這幾類食物的酶。食物進(jìn)入體內(nèi)后不能完全消化而以肽的形式進(jìn)入腸道,被免疫系統(tǒng)識(shí)別為外來物質(zhì),導(dǎo)致一系列的臨床癥狀。有研究表明,年幼兒童早期發(fā)生食物過敏,后期則容易發(fā)生吸入性過敏原過敏[12]。另有研究報(bào)道,食入性過敏原過敏的兒童的哮喘患病率是非過敏兒童的5～6倍,并可加劇哮喘發(fā)作的嚴(yán)重程度[12]。因此,評(píng)估呼吸道過敏性疾病兒童的吸入性過敏原致敏情況的同時(shí)也應(yīng)該關(guān)注食物過敏的情況,避免加劇呼吸道疾病的癥狀。對(duì)食物過敏但無呼吸道癥狀的患兒進(jìn)行早期干預(yù)和食物管理,來減少其未來呼吸道過敏性疾病的發(fā)生。

有研究發(fā)現(xiàn),對(duì)食入性過敏原的過敏在嬰兒早期最為普遍,而對(duì)吸入性過敏原的過敏則在后期占主導(dǎo)地位,稱為“過敏性進(jìn)展”[13]。本研究結(jié)果顯示,嬰幼兒組中以雞蛋白、牛奶和牛肉3種食入性過敏原為主;學(xué)齡前組中以戶塵螨/粉塵螨、雞蛋白和牛奶為主;而學(xué)齡期兒童組以戶塵螨/粉塵螨、雞蛋白和蟹為主。這提示由于生活方式和周圍環(huán)境的改變,使得兒童過早暴露于高濃度的吸入性過敏原環(huán)境,可能在很大程度上促使了呼吸道過敏性疾病患病率的增加。食入性過敏原中,雞蛋白、牛奶、牛肉、羊肉、大豆的sIgE陽性率均隨年齡增加而呈下降趨勢(shì),提示食物過敏主要發(fā)生在嬰幼兒消化系統(tǒng)不全的時(shí)期。文獻(xiàn)[5]研究發(fā)現(xiàn),年齡越大吸入性過敏原sIgE陽性率越高,而食入性過敏原sIgE陽性率則下降。在吸入性過敏原中,戶塵螨/粉塵螨和屋塵的sIgE陽性率隨患兒的年齡增加而呈上升趨勢(shì),與文獻(xiàn)[4]研究結(jié)果一致,原因可能是隨著年齡增長(zhǎng),兒童的活動(dòng)范圍增大,接觸外界過敏原的概率增加。戶塵螨是一種常見的塵螨寄生蟲,常出現(xiàn)在布質(zhì)沙發(fā)、床上用品、枕頭上,可引起各種過敏性疾病,有研究發(fā)現(xiàn)氣候較濕潤(rùn)地區(qū)的兒童對(duì)戶塵螨的敏感度更高[10]。粉塵螨是指空氣中的各種塵螨,在環(huán)境濕度超過75%時(shí)生長(zhǎng),且嬰幼兒可以母乳接觸到塵螨而產(chǎn)生高水平的IgE[14]。因此,應(yīng)及時(shí)更換床上用品和枕套,借助除螨儀或空氣凈化器等進(jìn)行除螨工作,保持室內(nèi)通風(fēng)來減少塵螨的暴露。

本研究發(fā)現(xiàn)隨不同月份和季節(jié)的更替,食入性過敏原sIgE陽性率總體的變化不明顯。其中,雞蛋白和牛奶在不同月份變化趨勢(shì)相似,常年sIgE陽性率較高。牛肉在3～4月sIgE陽性率較高,其余月份變化相似。海魚組合在6～8月短暫性升高,其他月份sIgE陽性率較低。吸入性過敏原中,戶塵螨/粉塵螨在各個(gè)月份和季節(jié)sIgE陽性率最高,在春夏季節(jié)sIgE陽性率相對(duì)更高。文獻(xiàn)[15]研究報(bào)道,一年春、秋兩季的室內(nèi)螨蟲種類和數(shù)量最高,與本研究結(jié)果大致相同;而廣東地區(qū)的塵螨在冬、春季節(jié)較高,高峰出現(xiàn)在春季;上海地區(qū)的塵螨在夏季密度最高[16]。溫度、濕度和飲食習(xí)慣是決定環(huán)境中螨蟲群落的物種組成和多樣性的主要限制因素,各地由于氣候不同,塵螨的分布也不盡相同[17]。屋塵常年sIgE陽性率較高,但各個(gè)月份差異變化不明顯。其他吸入性過敏原在各個(gè)月份中的sIgE陽性率較低,柳樹/楊樹/榆樹和霉菌組合1在4月份sIgE陽性率出現(xiàn)短暫增高,其他月份sIgE陽性率變化不明顯。

綜上所述,湖南地區(qū)呼吸系統(tǒng)疾病兒童主要的過敏原是戶塵螨/粉塵螨、雞蛋白和牛奶,以多種過敏原共同致敏多見。不同年齡組兒童的吸入和食入性過敏原分布特征存在差異。隨著患兒年齡的增長(zhǎng),吸入性過敏原的致敏率逐漸增高,而食入性過敏原的致敏率呈下降趨勢(shì)。本研究反映了湖南地區(qū)呼吸道疾病患兒的過敏原分布特征,對(duì)本地區(qū)過敏性疾病的預(yù)防和治療有重要的指導(dǎo)意義。本研究為單中心回顧性研究,樣本量偏小,不能代表整體情況,結(jié)果可能存在一定偏移。期望未來能進(jìn)行多中心、大樣本的前瞻性研究來獲得湖南地區(qū)呼吸系統(tǒng)疾病患兒更確切的致敏譜。