頂空毛細(xì)管柱氣相色譜法測定食用植物油中溶劑殘留量的方法研究

◎ 陳垂鳳

（?？谑屑Z油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測站，海南 ?？?570145）

現(xiàn)階段，我國食用植物油生產(chǎn)工藝主要有壓榨法和溶劑浸出法。其中，壓榨法比較安全，但出油率低、生產(chǎn)成本高；溶劑浸出法一般是使用6 號溶劑提取油料中的油，然后在一定條件下把6 號溶劑蒸餾出來而得到植物油，該方法的出油率比較高、生產(chǎn)成本低，因此普遍用于生產(chǎn)各類食用植物油。然而，用此法生產(chǎn)得到的食用植物油，仍有或多或少的6 號溶劑殘留在油中，而6 號溶劑對人們的身體健康有害，為了保障人民的身體健康，油中溶劑殘留量必須控制在相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍內(nèi)方可上市銷售，因此，溶劑殘留是植物油的必檢項目[1]。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 材料與試劑

正庚烷(C7H16)：純度≥99%；N,N-二甲基乙酰胺[CH3C(O)N(CH3)2]：純度≥99%；6 號溶劑溶液標(biāo)準(zhǔn)品編號為BWL0001，濃度為10 mg/mL（國家糧食局科學(xué)研究院)；基體植物油（取適量未檢測出溶劑殘留的植物油，于70 ℃的烘箱中烘0.5 h）；待測定的食用植物油；正庚烷標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜儀Agilent（7890A+7697B）；氫火焰離子化檢測器（FID）；HP-5 色譜柱。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

稱量7 份質(zhì)量均為5.00 g 的基體植物油放在20 mL 頂空進(jìn)樣瓶中。向每份樣品中迅速加入5 μL正庚烷標(biāo)準(zhǔn)工作液作為內(nèi)標(biāo)，分別迅速加入0 μL、1 μL、5 μL、10 μL、25 μL、50 μL、100 μL 的六號溶劑標(biāo)準(zhǔn)品,密封搖勻后,得到濃度分別為 0 mg/kg、2 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg 的基體植物油標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2 色譜條件

柱流量1 mL/min；氫氣流量25 mL/min；空氣流量300 mL/min；檢測器溫度300 ℃；進(jìn)樣口溫度250 ℃；分流比20 ∶1；平衡時間30 min、平衡溫度70 ℃；柱溫度程序：40 ℃保持3 min,以1 ℃/min 的速度升到55 ℃，再以40 ℃/min 升到180 ℃，180 ℃保持2 min。

1.2.3 樣品制備

稱取植物油樣品5.00 g 2 份置于20 mL 頂空進(jìn)樣瓶中,均迅速加入5 μL 正庚烷標(biāo)準(zhǔn)工作液，搖勻后密封。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的優(yōu)化

本次研究原疑定多個檢測器溫度、多個載氣流速和多種柱溫程序條件，并逐個上機(jī)加以實驗，最終確定本試驗的色譜條件。本色譜條件下的基線平穩(wěn)，峰形對稱好，除溶劑峰外，沒有其他雜峰。

2.2 頂空條件的優(yōu)化

2.2.1 平衡溫度對測定的影響

本研究原疑定50 ℃、52 ℃、54 ℃、56 ℃、58 ℃、60 ℃、62 ℃、64 ℃、66 ℃、68 ℃、70 ℃、72 ℃、74 ℃、76 ℃、78 ℃和80 ℃等多種平衡溫度,并上機(jī)逐個進(jìn)行調(diào)試，最終發(fā)現(xiàn)平衡溫度選擇70 ℃時的響應(yīng)值和靈敏度最佳。

2.2.2 平衡時間對測定的影響

本研究原疑定20 min、22 min 、24 min 、26 min 、28 min 、30 min、32 min 、34 min 、36 min 、38 min 、40 min、42 min、44 min、 46 min 、48 min 和50 min等多個平衡時間，并逐個上機(jī)調(diào)試，最終發(fā)現(xiàn)平衡時間為30 min 時的響應(yīng)值和靈敏度最佳。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作、曲線方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)分析后, 以標(biāo)準(zhǔn)溶液與內(nèi)標(biāo)物濃度比為橫坐標(biāo), 以標(biāo)準(zhǔn)溶液總峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線可知，6 號溶劑在0～200 mg/kg 內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 71，以3 倍基線噪聲乘以最小濃度除以對應(yīng)濃度的峰高即為檢出限，算得儀器的檢出限濃度為1.01 mg/kg, 小于食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.262—2016 中規(guī)定的檢出限2 mg/kg[2]。因此，滿足檢驗的要求。曲線方程為：Y=1.603 9X+0.038 0、相關(guān)系數(shù)為0.999 71, 檢出限為1.01 mg/kg。

2.4 加標(biāo)回收率測定

按照《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）附錄F 的要求，回收率和精密度應(yīng)在方法測定限、限量指標(biāo)中選合適點進(jìn)行加標(biāo)回收實驗[3]。分3 組加標(biāo)，每組8 個樣品，向每個頂空進(jìn)樣瓶中加入5.00 g 基體植物油，迅速加入5 μL 正庚烷標(biāo)準(zhǔn)工作液，3 組添加10 mg/mL 6 號溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積分別為5 μL、10 μL、25 μL，即得六號溶劑濃度分別為10 mg/kg、20 mg/kg、50 mg/kg。上機(jī)測定結(jié)果如表1 所示，回收率在90.1%～108%之間，符合檢測方法確認(rèn)的技術(shù)要求。

表1 加標(biāo)樣品測定結(jié)果表

2.5 精密度的測定

取溶劑殘留不相同的6 份植物油樣品，分別稱取植物油樣品5.00 g 于20 mL 頂空進(jìn)樣瓶中,均迅速加入5 μL 正庚烷標(biāo)準(zhǔn)工作液作為內(nèi)標(biāo),搖勻后密封[4]。每個樣品進(jìn)樣7 次，上機(jī)檢測結(jié)果如表2 所示，表明精密度良好。

表2 樣品上機(jī)檢測結(jié)果表

3 結(jié)語

本文在國標(biāo)的基礎(chǔ)上，使用毛細(xì)管頂空氣相色譜法進(jìn)行測定，通過對色譜柱、頂空進(jìn)樣條件和柱程序溫度的優(yōu)化，建立了食用植物油中溶劑殘留的測定方法[5]。該方法操作簡單、穩(wěn)定性好，加標(biāo)回收率高、精密度好、檢出限低、相關(guān)系數(shù)為0.999 71，可作為食用植物油中溶劑殘留的測定方法。