兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療的臨床研究

陳方根 李蘇寶 藍(lán)欣 廖細(xì)生

[摘要]?目的?探究兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療對(duì)其影響。方法?回顧性選取2020年12月至2022年3月江西省兒童醫(yī)院收治的26例腺病毒肺炎患兒作為病例組，選取同期就診的25例上呼吸道感染患兒作為對(duì)照組。觀察治療前后病例組患兒外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD16+CD56+、CD4、CD8、CD19、CD4/CD8）、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）（IgM、IgG、IgA、IgE）、補(bǔ)體（complement，C）（C3、C4）、相關(guān)細(xì)胞因子[白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）]變化，并比較其與對(duì)照組的差異。結(jié)果?治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4顯著低于對(duì)照組（P<0.05），CD8、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；治療后，病例組的CD8、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。治療后病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均顯著高于治療前（P<0.05），CD8顯著低于治療前（P<0.05），IgM、IgE與治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論?腺病毒肺炎可導(dǎo)致患兒免疫功能變化，免疫治療有助于患兒免疫功能提升，控制患兒病情。

[關(guān)鍵詞]?兒童；腺病毒肺炎；免疫功能；免疫治療

[中圖分類號(hào)]?R72??????[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]?A??????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2023.20.005

Clinical?study?on?immune?function?changes?and?immunotherapy?in?children?with?adenovirus?pneumonia

CHEN?Fanggen，?LI?Subao，?LAN?Xin，?LIAO?Xisheng

Department?of?Internal?Medicine?of?Pediatric?Infection，?Jiangxi?Provincial?Childrens?Hospital，?Nanchang?330000，?Jiangxi，?China

[Abstract]?Objective?To?explore?the?changes?of?immune?function?in?children?with?adenovirus?pneumonia?and?the?effect?of?immunotherapy.?Methods?A?total?of?26?children?with?adenovirus?pneumonia?admitted?to?Jiangxi?Provincial?Children?s?Hospital?from?December?2020?to?March?2022?were?selected?as?the?case?group，?and?25?children?with?upper?respiratory?tract?infection?attending?the?same?period?were?selected?as?the?control?group.?The?T-lymphocyte?subsets?（CD16+CD56+，?CD4，?CD8，?CD19，?CD4/CD8），?immunoglobulin?（IgM，?IgG，?IgA，?IgE），?complement?（C3，?C4），?and?related?cytokines?[interleukin?（IL）-2，?IL-6，?IL-10，?tumor?necrosis?factor-α?（TNF-α）]?were?observed?in?the?case?group?before?and?after?treatment，?and?the?differences?were?compared?with?the?control?group.?Results?Before?treatment，?CD16+CD56+，?CD4，?CD19，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4?were?significantly?lower?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05），?and?CD8，?IL-2，?IL-6，?IL-10，?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05）.After?treatment，?CD8，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4，?IL-2，?IL-6，?IL-10，?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05）.?After?treatment，?CD16+CD56+，?CD4，?CD19，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4，?IL-2，?IL-6，?IL-10?and?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?pre-treatment?（P<0.05），?CD8?was?significantly?lower?than?pre-treatment?（P<0.05），?and?IgM?and?IgE?were?not?statistically?significant?when?compared?with?pre-treatment?（P>0.05）.?Conclusion?Adenovirus?pneumonia?can?lead?to?changes?in?immune?function?of?children，?and?immunotherapy?can?help?improve?the?immune?function?and?control?the?disease?condition?of?children.

[Key?words]?Children;?Adenovirus?pneumonia;?Immune?function;?Immunotherapy

腺病毒是引起兒童病毒性肺炎的常見病原，臨床上易發(fā)展為重癥肺炎，對(duì)患兒生命安全造成嚴(yán)重威脅[1-2]。目前臨床認(rèn)為腺病毒肺炎導(dǎo)致的肺及肺外臟器損傷，與病毒載量及表型、體內(nèi)炎癥介質(zhì)及免疫功能紊亂有關(guān)[3-4]。當(dāng)患兒感染腺病毒后，機(jī)體首先發(fā)生固有免疫應(yīng)答，其次發(fā)生適應(yīng)性免疫應(yīng)答，白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）等多種細(xì)胞因子均參與了上述兩種免疫應(yīng)答過程[5]。細(xì)胞免疫主要受人體T細(xì)胞調(diào)節(jié)，體液免疫則受人體B細(xì)胞調(diào)節(jié)，腺病毒感染對(duì)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫有不同程度的影響，自體免疫功能的紊亂對(duì)重癥腺病毒肺炎的發(fā)生、發(fā)展起重要作用[6-7]。本研究旨在對(duì)兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療對(duì)其影響進(jìn)行探討。

1??資料與方法

1.1??一般資料

回顧性選取2020年12月至2022年3月江西省兒童醫(yī)院收治的26例腺病毒肺炎患兒作為病例組，選取同期就診的25例上呼吸道感染患兒作為對(duì)照組。病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[8]中腺病毒肺炎的診斷；②在監(jiān)護(hù)人陪伴下完成相關(guān)檢查者；③患兒監(jiān)護(hù)人充分知情同意。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①上呼吸道感染住院兒童；②無自身免疫性疾??；③無先天性免疫缺陷；④無手術(shù)、外傷、精神創(chuàng)傷、無長期藥物服用等病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料缺失者；②合并其他病原體感染、支氣管哮喘者；③合并自身免疫性疾病或近期使用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素者；④生命垂危者；⑤血液樣本采集困難者；⑥合并與肺炎無關(guān)的嚴(yán)重合并癥者。病例組患兒中，男16例，女10例，年齡為4個(gè)月～4歲11個(gè)月，平均（28.71±7.18）個(gè)月，病程為7～18d，平均（12.54±3.05）d；對(duì)照組患兒中，男16例，女9例，年齡為7個(gè)月～3歲，平均（20.47±5.98）個(gè)月。本研究經(jīng)江西省兒童醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過（倫理審批號(hào)：JXSETYY-YXKY-20200031）。

1.2??方法

對(duì)照組患兒入組時(shí)、病例組患兒治療前和治療7d后，均采集2ml外周靜脈血。使用流式細(xì)胞儀（FACSCanto，美國BD公司）檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群（CD16+CD56+，CD4，CD8，CD19，CD4/CD8）；使用免疫比濁法檢測血清免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）（IgM、IgG、IgA、IgE）及補(bǔ)體（complement，C）（C3、C4），使用儀器為ADVIA2400生化分析儀（德國西門子公司）；使用化學(xué)發(fā)光法檢測細(xì)胞因子[白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）]，使用儀器為IMMULITE?1000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（德國西門子公司）。所有病例組患兒均給予丙種球蛋白治療[1g/（kg·d），連用2d]及抗病毒治療。

1.3??觀察指標(biāo)

觀察病例組患兒治療前后CD16+CD56+、CD4、CD8、CD19、CD4/CD8、IgM、IgG、IgA、IgE、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α變化，及其與對(duì)照組的差異。

1.4??統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS?19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)（百分比）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2??結(jié)果

2.1??外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較

治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8均顯著低于對(duì)照組，CD8顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；治療后，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8顯著高于治療前，CD8顯著低于治療前（P<0.05）；治療后病例組的CD8和CD4/CD8均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），見表1。

2.2??外周血免疫球蛋白與補(bǔ)體水平變化比較

治療前，病例組的IgG、IgA、C3、C4水平均顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；治療后，病例組的IgG、IgA、C3、C4均顯著高于治療前（P<0.05），IgM、IgE與治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后，病例組IgG、IgA、C3、C4水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），見表2。

2.3??外周血相關(guān)細(xì)胞因子水平變化比較

治療前，病例組的IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；治療后，病例組的IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于治療前（P<0.05）；治療后，病例組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），見表3。

3??討論

由于幼兒氣管及支氣管未發(fā)育完善，免疫系統(tǒng)抵抗能力低下，無法有效清除呼吸道微生物，故肺炎是影響小兒身體健康的常見疾病，嚴(yán)重者甚至?xí)斐伤劳?。近幾年腺病毒肺炎發(fā)病率升高，其所致的肺炎屬于嬰幼兒病毒性肺炎中最嚴(yán)重的一類，對(duì)患兒生命安全威脅較大[9]。有研究表明，重癥病毒感染相關(guān)性肺炎與機(jī)體免疫功能失衡有關(guān)[10]。目前，臨床治療腺病毒肺炎的方式主要為抗病毒治療及免疫治療。腺病毒屬于無包膜的雙鏈DNA病毒，可分為7個(gè)亞群、90個(gè)型別，我國常見的是3型及7型，該病毒在感染機(jī)體的過程中會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞溶解及壞死，可使患兒支氣管、細(xì)支氣管黏膜充血水腫，分泌大量分泌物影響氣道功能，且能從氣道進(jìn)入肺部，刺激肺部的巨噬細(xì)胞，引起炎癥反應(yīng)[11-13]。

有研究認(rèn)為，腺病毒感染與患者體內(nèi)免疫功能紊亂相關(guān)[14]。T細(xì)胞介導(dǎo)機(jī)體的細(xì)胞免疫過程，可分為CD4、CD8兩大亞群，前者具備正調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用，后者可特異性識(shí)別內(nèi)源性抗原肽，直接殺滅病毒，二者比值可綜合反映機(jī)體整體免疫狀態(tài)[15-16]。免疫球蛋白屬于免疫活性分子，在患兒體內(nèi)與抗原特異性結(jié)合后可起到抗病毒作用[17]。C3、C4是最常見的補(bǔ)體，臨床認(rèn)為可通過觀察C3、C4的消耗水平來判斷機(jī)體的免疫反應(yīng)是否過度或仍在進(jìn)行，以此可判斷機(jī)體的疾病程度[18]。IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均為炎癥因子，其水平與機(jī)體炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)[19]。本研究結(jié)果顯示，治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4顯著低于對(duì)照組，CD8、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對(duì)照組；治療后，病例組的CD8、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對(duì)照組；治療后，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均顯著高于治療前，CD8顯著低于治療前，IgM、IgE與治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明腺病毒感染可導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生免疫功能紊亂，而免疫球蛋白治療則對(duì)患兒機(jī)體免疫功能有一定影響，且在短期內(nèi)會(huì)造成炎癥反應(yīng)上升。推測其原因可能在于：①CD4具備正調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用，CD8可特異性識(shí)別內(nèi)源性抗原肽，正常情況下CD4、CD8相互制衡，處于動(dòng)態(tài)平衡[20]，機(jī)體感染腺病毒后，導(dǎo)致細(xì)胞免疫損傷，使CD4/CD8失衡，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體促炎、抗炎細(xì)胞因子失衡，引起機(jī)體損傷[21]；②免疫球蛋白主要通過體液免疫應(yīng)答對(duì)病原體進(jìn)行殺滅，補(bǔ)體則主要通過介入免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)來參與機(jī)體的組織損傷過程，IgA水平低下說明患兒呼吸道或其他部位的黏膜組織免疫屏障功能不足，導(dǎo)致病原體定植或感染[22]；③患兒感染腺病毒后，機(jī)體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α等炎癥因子表達(dá)上升；④免疫球蛋白治療后，患兒機(jī)體短期內(nèi)免疫功能受外來因素調(diào)節(jié)，進(jìn)而對(duì)機(jī)體炎癥反應(yīng)產(chǎn)生一定影響；⑤患兒年齡較小，免疫功能發(fā)育不完善，故患兒受腺病毒感染后短期內(nèi)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能受損嚴(yán)重，進(jìn)行免疫球蛋白治療后，能加速患兒體內(nèi)腺病毒清除，更有利于細(xì)胞免疫恢復(fù)。此前有研究證實(shí)，治療后腺病毒肺炎患兒CD4/CD8比值上升[23]，本研究結(jié)果與之相似。

本研究不足之處及改進(jìn)方法如下：①樣本量較少，有待臨床延長研究時(shí)間或與其他醫(yī)院聯(lián)合進(jìn)行研究，以便擴(kuò)大腺病毒肺炎患兒的樣本量，獲取更有說服力的研究結(jié)果；②未觀察不同治療方法對(duì)腺病毒肺炎患兒的療效差異，有待臨床選擇不同治療方法的患兒進(jìn)行對(duì)比，探究有效的治療方案；③本研究選擇的觀察指標(biāo)較少，未對(duì)患兒其他指標(biāo)水平進(jìn)行分析，有待增加檢驗(yàn)指標(biāo)，從多方面觀察腺病毒肺炎的影響及治療后患兒機(jī)體產(chǎn)生的變化；④本研究屬于回顧性研究，未對(duì)患兒進(jìn)行隨訪，未觀察到腺病毒肺炎患兒治療后的復(fù)發(fā)情況，有待臨床延長研究時(shí)長，并對(duì)患兒進(jìn)行一定時(shí)間的隨訪，進(jìn)一步為免疫球蛋白的應(yīng)用提供依據(jù)。

綜上所述，腺病毒肺炎可導(dǎo)致患兒免疫功能變化，免疫治療可調(diào)節(jié)腺病毒肺炎患兒T淋巴細(xì)胞亞群水平、免疫球蛋白與補(bǔ)體水平，并在短期內(nèi)影響炎癥反應(yīng)，本研究結(jié)果為臨床治療方案的選擇提供一定參考依據(jù)。

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（收稿日期：2022–09–07）

（修回日期：2022–11–16）