溶血三項(xiàng)聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢測對(duì)新生兒溶血病早期診斷的臨床價(jià)值

鄺慧玲,鄒蓓,馮釗贊（廣東省佛山市南海區(qū)第六人民醫(yī)院,廣東 佛山 528200）

新生兒溶血病為近年臨床兒科中較為常見的一種新生兒病變，指母嬰血型不合，母體出現(xiàn)血型抗體經(jīng)胎盤結(jié)合胎兒體中血型抗原，進(jìn)而出現(xiàn)免疫性溶血[1]。臨床往往將其分為Rh血型系統(tǒng)、ABO血型系統(tǒng)不合[2]?；純褐饕憩F(xiàn)為黃疸、肝脾腫大，如不及時(shí)診治，病變會(huì)誘發(fā)膽紅素腦病，甚至直接威脅其生命。目前臨床主要采用溶血三項(xiàng)檢查，即直接抗球蛋白試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)，但溶血三項(xiàng)檢查往往需等待1-2d才能出結(jié)果[3]，加之檢測結(jié)果受存放條件、血液抽取時(shí)間等因素干擾，導(dǎo)致此方式仍然有漏診幾率，單一用于早期診斷新生兒溶血病存在局限性[4]。血清總膽紅素水平、網(wǎng)織紅細(xì)胞為近年來臨床判定進(jìn)行性貧血、新生兒黃疸的常用指標(biāo)。血清總膽紅素為反映人體肝、膽功能的主要指標(biāo)[5]，臨床也將其用于評(píng)估黃疸病變狀況，也在診斷隱性黃疸方面有積極意義。通過測得網(wǎng)織紅細(xì)胞能知曉人體骨髓紅細(xì)胞生成狀況，在診斷貧血和相關(guān)性病變中有較大作用。同時(shí)也有學(xué)者報(bào)告稱，血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞也在診斷新生兒溶血病中有積極意義?，F(xiàn)本文共納入2022年3月-2023年2月收治的80例疑似新生兒溶血病患兒，旨在分析溶血三項(xiàng)聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢測的診斷效能。具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2022年3月-2023年2月收治的80例疑似新生兒溶血病患兒作為研究對(duì)象，按照臨床綜合確診結(jié)果將其分為非新生兒溶血組（25例）和新生兒溶血組（55例）。非新生兒溶血組：男性15例、女性10例；年齡0-12天，平均為（5.68±0.15）天。新生兒溶血組：男性37例、女性18例；年齡0-12天，平均為（5.61±0.13）天。兩組患兒基本資料比較，差異不顯著（P＞0.05）。本研究方案經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后實(shí)施。

入選標(biāo)準(zhǔn)：①新生兒溶血組患兒均滿足《新生兒溶血病診斷與治療》[6]中新生兒溶血病判定標(biāo)準(zhǔn)；②足月且體重正常的新生兒；③各研究對(duì)象母親血型為O型RhD陽性，和新生兒血型存在不合；④均為單胎妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn)：①重要臟器功能不全；②合并感染；③先天性肝/膽系統(tǒng)病變；④有頭顱血腫史或顱內(nèi)出血史；⑤中途轉(zhuǎn)院者。

1.2 方法 所有患兒均接受溶血三項(xiàng)、網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢查。

溶血三項(xiàng)：采集各患兒靜脈血3ml，用37℃試劑卡孵育器、專用檢測卡離心機(jī)、Rh（D）血型檢測卡、人ABO血清正/反定型、抗人球蛋白檢測卡、熱放散法做左釋放試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、直抗試驗(yàn)，由長春博訊生物技術(shù)公司提供試劑盒。若釋放試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、直抗試驗(yàn)均為（+）則判定新生兒溶血病[7]；若游離或直抗試驗(yàn)單項(xiàng)為陽性，則判定疑似新生兒溶血??；若任意≥2項(xiàng)或釋放試驗(yàn)為陰性[8]，臨床需綜合確診。

總膽紅素和網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測：用邁瑞CL6000plus檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞，用西門子流水線（重氮法）檢測總膽紅素指標(biāo)?？偰懠t素標(biāo)準(zhǔn)值[9]：3.4-17.1μmol/L；網(wǎng)織紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)值：3%-6%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 溶血三項(xiàng)檢測結(jié)果 溶血三項(xiàng)檢測診斷新生兒溶血組共47例確診（85.45%），非新生兒溶血組共19例確診（76.00%）。見表1。

表1 溶血三項(xiàng)檢測結(jié)果

2.2 兩組患兒血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞水平比較 新生兒溶血病患兒血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞高于非新生兒溶血病患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患兒血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞水平比較()

2.3 溶血三項(xiàng)、溶血三項(xiàng)+血清總膽紅素+網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測結(jié)果與臨床確診比較 溶血三項(xiàng)+血清總膽紅素+網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測靈敏度為98.18%（54/55）、特異度為96.00%（24/25）、陽性預(yù)測值為98.18%（54/55）、陰性預(yù)測值為96.00%（24/25）高于溶血三項(xiàng)檢測敏感度的85.45%（47/55）、特異度76.00%（19/25）、陽性預(yù)測值88.68%（47/53）、陰性預(yù)測值70.37%（19/27），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

3 討論

近些年，新生兒科中非常常見的一種急癥病變?yōu)樾律鷥喝苎?，多因母嬰血型不合，母體血型抗體通過胎盤結(jié)合胎兒血型抗原發(fā)生免疫性溶血。臨床一般可將其分為ABO血型系統(tǒng)不合、Rh血型系統(tǒng)不合。主要表現(xiàn)為程度不同的肝脾腫大、水腫、貧血、黃疸等，甚至出現(xiàn)有核黃疸、死亡等。大部分新生兒溶血病患兒在出生時(shí)無典型癥狀，如貧血、皮膚黏膜黃染等均為輕度或中度，對(duì)臨床及時(shí)診治有較大干擾性。目前，臨床判定新生兒溶血病主要采用溶血三項(xiàng)檢查，即抗體釋放、游離抗體、直接抗球蛋白試驗(yàn)，但檢查結(jié)果需在1-2d后才可獲得。加之多因素干擾的狀況下，單一使用此方式檢測的敏感度、特異度均不高。本文重點(diǎn)分析了溶血三項(xiàng)聯(lián)合血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測的價(jià)值，以提升診斷準(zhǔn)確性，為臨床診治疾病奠定基礎(chǔ)。

我國發(fā)生ABO血型不合的幾率較高，母親血型為O型，首次分娩則可發(fā)病，分娩次數(shù)明顯增多的狀況下，也會(huì)逐年增高新生兒溶血病，病情日益嚴(yán)重。臨床診斷新生兒溶血病時(shí)，主要按照產(chǎn)后診斷、產(chǎn)前評(píng)估、分娩次數(shù)、母親血型等進(jìn)行判定，而在判定時(shí)需滿足以下兩個(gè)條件：①新生兒釋放或直抗試驗(yàn)為陽性；②母嬰血型不合。本研究采用溶血三項(xiàng)聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，溶血三項(xiàng)+血清總膽紅素+網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測靈敏度（98.18%）、陽性預(yù)測值（98.18%）高于溶血三項(xiàng)（85.45%、88.68%），P＜0.05，表明溶血三項(xiàng)聯(lián)合血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)行檢測的效能更理想，此結(jié)果與夏幫坤[10]等學(xué)者的報(bào)告結(jié)果相符。也可從中得知，單一用溶血三項(xiàng)進(jìn)行檢測存在漏診幾率，有假陰性情況。分析原因可能受檢測操作、標(biāo)本采集后樣本保存時(shí)間、采集樣本時(shí)間等因素干擾。本研究還顯示，新生兒溶血病患兒的血清總膽紅素、網(wǎng)織紅細(xì)胞指標(biāo)明顯比非新生兒溶血病患兒高（P＜0.05），其原因可能為網(wǎng)織紅細(xì)胞屬于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟細(xì)胞，此指標(biāo)能將人體骨髓紅細(xì)胞具備的生成能力直接反映出，并還和新生兒溶血病發(fā)病有關(guān)聯(lián)性。臨床多將其用于檢測貧血疾病，評(píng)估骨髓抑制造血狀況和放化療后造血功能。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)核酸染色熒光強(qiáng)度，進(jìn)而得到低、中、高熒光強(qiáng)度指標(biāo)。有報(bào)告[11]稱，溶血性貧血者體內(nèi)高、中、低熒光強(qiáng)度Ret百分率顯著增高，腎性貧血體內(nèi)低熒光強(qiáng)度Ret率顯著降低，中強(qiáng)度無典型變化，高強(qiáng)度明顯增高。正常狀況下，未成熟Ret比率值在2.0%-6.0%，胎兒出生1d內(nèi)含量最高，此后逐步降低。新生兒溶血病初期主要癥狀為黃疸，機(jī)體血清膽紅素指標(biāo)比正常新生兒明顯更高。加之其出生后機(jī)體自行清除膽紅素的功能未發(fā)育成熟，造成無法及時(shí)將聚集的膽紅素清除干凈，明顯增高血清膽紅素指標(biāo)。同時(shí)，溶血三項(xiàng)聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢測在敏感度、特異度、陽性預(yù)測值等方面明顯比單一使用溶血三項(xiàng)更高，可能因溶血三項(xiàng)內(nèi)采用釋放、游離、直抗試驗(yàn)，前者非常重要，使用間接方式進(jìn)行檢測，其準(zhǔn)確性、陽性率、敏感性較高，檢測結(jié)果顯示為陽性的患兒，其母體IgG抗-A（B）抗體會(huì)對(duì)患兒體內(nèi)紅細(xì)胞產(chǎn)生致敏效果[12]，其中經(jīng)典方式為熱放散法，臨床多將其用于檢測新生兒溶血病ABO血型的IgM、抗B、IgG抗A血型抗體。人體血液內(nèi)具有標(biāo)志性的紅細(xì)胞則為網(wǎng)織紅細(xì)胞，通過測得此指標(biāo)能直接反映機(jī)體中骨髓紅細(xì)胞生成狀況，此也為新生兒紅細(xì)胞標(biāo)志。人體處于新生兒時(shí)期，機(jī)體中血清總膽紅素指標(biāo)較高，會(huì)造成機(jī)體中大量蓄積膽紅素，并穿透血腦屏障在神經(jīng)系統(tǒng)中沉積，所產(chǎn)生的毒性常常會(huì)造成下丘腦神經(jīng)核、海馬、基底神經(jīng)節(jié)壞死，并損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘，干擾神經(jīng)元能量代謝。

綜上所述，溶血三項(xiàng)聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢測判定新生兒溶血病的效能較高，可為臨床早期確診新生兒溶血病提供主要指標(biāo)。