益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)和抗氧化力的影響

張勇剛，榮 真，趙曉燕，付文艷，董改香

（1.朔州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山西朔州 036002；2.遼寧省阜新市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧阜新 123000）

在豬生產(chǎn)實(shí)踐中，人們對(duì)育肥豬的自然需求重視不夠，易受多種應(yīng)激因素影響，如飼養(yǎng)環(huán)境差、管理粗放、獸藥和免疫程序不合理等，導(dǎo)致育肥豬生產(chǎn)性能、免疫水平降低（薛佳俐，2020 ；苗啟翔，2019 ；李旭驍，2018）。動(dòng)物受到應(yīng)激后（如產(chǎn)生自由基）會(huì)發(fā)生一系列過氧化反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞膜受損，新陳代謝功能紊亂，影響動(dòng)物健康。益生菌具有促進(jìn)腸道菌群平衡，提高營養(yǎng)物質(zhì)吸收，提高機(jī)體免疫力等優(yōu)點(diǎn)。中草藥含有大量有效生物活性物質(zhì)，可提高動(dòng)物機(jī)體非特異性免疫，具有促生長(zhǎng)、強(qiáng)體質(zhì)、抗氧化、防疾病等作用（肖建根，2011）。益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥一方面可使中草藥有效成分充分分離，活性成分增強(qiáng)，供機(jī)體吸收利用，另一方面中草藥可促進(jìn)益生菌純化、不斷增殖和代謝，兩者結(jié)合發(fā)揮更大的功效（張謙等，2018）。本試驗(yàn)在育肥豬日糧中添加益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥，旨在對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)和抗氧化能力的評(píng)價(jià)，為今后使用益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥產(chǎn)品提供基礎(chǔ)性依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 益生菌 主要由植物乳桿菌和發(fā)酵乳桿菌兩種益生菌組成，按照1 ∶1 比例混合，活菌數(shù)量達(dá)到1.0×108CFU/g。

1.2 發(fā)酵復(fù)方中草藥制備 黃芪、黨參、金銀花、沙棘（葉）、當(dāng)歸、山楂等中草藥購于朔州市藥材市場(chǎng)，按照一定比例組合成復(fù)方中草藥，并置于60 ～65℃烘箱中烘干，用孔徑40 目粉碎。兩種益生菌純化后接種于已粉碎的中草藥中，并置于發(fā)酵罐中發(fā)酵，時(shí)間為24 ～36 h。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 試驗(yàn)選擇48 頭體重相近[（30.43±0.32）kg]、健康狀況良好的杜× 長(zhǎng)×大三元育肥豬，基礎(chǔ)日糧為玉米－豆粕型日糧，營養(yǎng)指標(biāo)參考NRC（2012）標(biāo)準(zhǔn)，育肥豬基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 育肥豬基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)將48 頭育肥豬隨機(jī)分為3組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4 頭育肥豬，公母各半。試驗(yàn)配制3 種日糧，其中對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)A 組飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5% 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥，試驗(yàn)B 組飼喂基礎(chǔ)日糧+1.0% 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥，試驗(yàn)為期30 d。

1.5 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)于2021 年8 月在當(dāng)?shù)匾火B(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)前對(duì)圈舍進(jìn)行清掃、消毒，隨后轉(zhuǎn)入育肥豬分欄飼養(yǎng)，同一重復(fù)的育肥豬圈養(yǎng)在一個(gè)圈里。自由采食，自由飲水，定期消毒。

2 測(cè)定指標(biāo)

2.1 血清生化指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束后空腹12 h，在每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)抽取2 頭健康的育肥豬進(jìn)行采血。采集10 mL 血液置于普通采血管中靜置30 min后進(jìn)行離心，取5 mL 血清。按照試劑盒說明書測(cè)定試驗(yàn)組血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/ 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/ 谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、血尿素氮（BUN）等血清生化指標(biāo)。所用試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

2.2 血清抗氧化能力指標(biāo) 所用試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，按照說明書要求分別測(cè)定血清中總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛含量（MDA）等。

2.3 數(shù)據(jù)處理與分析 用Excel 軟件初步整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用SPSS 21.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較。結(jié)果用“平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

3 結(jié)果與分析

3.1 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響 由表2 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)B 組血清中TP 和ALB 含量分別提高11.83% 和5.47%（P＜0.05），試驗(yàn)A 組血清中TP 和ALB含量高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)A、B 組血清中GPT、GOT 含量低于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)A、B 組血清中BUN 含量分別顯著降低18.30% 和23.11%（P＜0.05）。各試驗(yàn)組相比，血清中各生化指標(biāo)差異不顯著（P＞0.05）。該結(jié)果表明，益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥能改善育肥豬血清生化指標(biāo)，提高血清中總蛋白和白蛋白含量，降低血清中尿素氮含量。

表2 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

3.2 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬抗氧化力的影響 由表3 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清中T-AOC、GSH-Px 和SOD 的活性均顯著升高（P＜0.05），MDA 含量顯著降低（P＜0.05）。各試驗(yàn)組間血清中T-AOC 和SOD 含量差異顯著（P＜0.05），血清中GSH-Px 活性差異不顯著（P＞0.05），MDA 含量差異顯著（P＜0.05）。說明益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥可顯著提高育肥豬血清中抗氧化指標(biāo)，降低機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的形成。

表3 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清抗氧化力的影響

4 討論

4.1 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)直接反映了動(dòng)物機(jī)體各組織器官的功能狀態(tài)、營養(yǎng)代謝水平和生長(zhǎng)性能。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是動(dòng)物肝臟功能健康狀況的兩個(gè)重要指標(biāo)，其水平過高會(huì)造成肝臟器官可能受到一定程度的損傷（尹清強(qiáng)等，2011）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，日糧中添加益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥后育肥豬血清中GPT 和GOT含量降低（P＞0.05），原因可能是益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥降低了中草藥毒性作用，釋放較多生物活性物質(zhì)，抑制組織器官受到損傷，從而降低了血清中GPT 和GOT 含量。這說明肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，較穩(wěn)定。董睿方等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，沙棘葉發(fā)酵后大大降低了毒副作用，活性成分增加，發(fā)揮了其保健功效。血清中總蛋白含量直接與動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白的吸收、合成、分解狀況和體液免疫之間有一定關(guān)聯(lián)。血清中總蛋白和白蛋白含量升高說明機(jī)體蛋白質(zhì)代謝利用率高，蛋白質(zhì)吸收和沉積能力較強(qiáng)，提高了動(dòng)物的生長(zhǎng)性能（賈聰慧等，2016 ；胡新旭等，2015）。而血清中尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)分解的最終產(chǎn)物，其濃度可準(zhǔn)確說明體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝與氨基酸間的平衡，其含量降低反映體內(nèi)氨基酸合成能力提高（王強(qiáng)等，2018）。崔帥等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵中草藥組育肥豬血清總蛋白和白蛋白含量顯著升高（P＜0.05），尿素氮含量顯著降低（P＜0.05）。解軍亮等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加發(fā)酵中草藥后，斷奶仔豬血清中總蛋白（TP）含量顯著升高（P＜0.05），血清尿素氮（BUN）含量顯著降低（P＜0.05）。本試驗(yàn)研究表明，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組均可提高育肥豬血清中總蛋白和白蛋白含量，說明體內(nèi)蛋白質(zhì)利用率增強(qiáng)，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能，而血清中尿素氮含量顯著降低，說明體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝與氨基酸之間趨向平衡，反映了組織器官的健康狀況和代謝水平較好。

4.2 益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬血清中抗氧化力的影響 在飼養(yǎng)過程中，育肥豬與外界不斷接觸，如在呼吸（氧化反應(yīng)）、污染、應(yīng)激、放射等因素影響下機(jī)體產(chǎn)生大量自由基，過多的自由基會(huì)損傷一些生物大分子，如機(jī)體氧化損傷導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)抗氧化酶類物質(zhì)活性降低，影響動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，損害動(dòng)物健康（YU 等，1999）。血清中T-AOC 代表機(jī)體總抗氧化水平，其活性高低直接影響動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育；GSH-Px 可抑制體內(nèi)自由基對(duì)磷脂膜、酶類和其他重要分子的破壞，提高機(jī)體免疫功能和抗病力，可與SOD 協(xié)同作用降低體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生；SOD 是一種酸性蛋白酶，可催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，生成O2和H2O2，過多的自由基與細(xì)胞膜蛋白和膜脂質(zhì)發(fā)生二次反應(yīng)，破壞組織細(xì)胞的穩(wěn)定性，而SOD 能清除動(dòng)物體內(nèi)的自由基，維持機(jī)體自由基產(chǎn)生和清除的動(dòng)態(tài)平衡（王暖等，2012）；MDA 是機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的穩(wěn)定產(chǎn)物，能破壞體內(nèi)細(xì)胞膜的完整結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞發(fā)生變性壞死，其含量越高說明體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)越強(qiáng)烈，細(xì)胞膜受到的氧化損傷越強(qiáng)。劉輝等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加1% 的復(fù)合乳酸菌發(fā)酵飼料，生長(zhǎng)豬血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著升高（P＜0.05），丙二醛含量顯著降低（P＜0.05）。姜露等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，在育肥豬飼料中添加0.1%和0.2% 中草藥組方，血清中T-SOD、CAT、GSHPx 顯著或極顯著上升（P＜0.05 或P＜0.01），MDA 差異無顯著變化（P＞0.05），兩種中草藥組方均可提高育肥豬抗氧化能力。本試驗(yàn)研究表明，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組均可提高育肥豬血清中抗氧化力，提高抗氧物酶的活性，清除體內(nèi)過氧化物。這可能與發(fā)酵后中草藥活性物質(zhì)成分含量較高有關(guān)。

5 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥可改善育肥豬血清中生化指標(biāo)，提高血清抗氧化物酶活性水平，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。本試驗(yàn)為益生菌發(fā)酵復(fù)方中草藥產(chǎn)品的應(yīng)用奠定了良好基礎(chǔ)。