基于代謝組學(xué)技術(shù)探討除濕化濁降酸方對高尿酸血癥小鼠的降尿酸作用機(jī)制

李雅云 李艷 朱關(guān)保 吳正治 謝夢洲

〔摘要〕 目的 基于代謝組學(xué)技術(shù)探討除濕化濁降酸方對高尿酸血癥（hyperuricemia， HUA）小鼠的降尿酸作用機(jī)制。方法 將32只雄性昆明小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、除濕化濁降酸方組（中藥組）、別嘌呤醇組，每組8只。除正常組外，其余各組小鼠每日喂食15%酵母粉添加飼料復(fù)制HUA模型，持續(xù)9周。在造模同時，除濕化濁降酸方組每日給予除濕化濁降酸方水提液28.05 g/kg灌胃，別嘌呤醇組每日以別嘌呤醇5 mg/kg灌胃。9周后取材，計算小鼠肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)，檢測血尿酸（serum uric acid， SUA）、血尿素氮（blood urea nitrogen， BUN）、血肌酐（serum creatinine， SCr）水平，測定肝臟組織黃嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase， XOD） 活性，采用HE染色法觀察小鼠腎臟組織病理變化，采用非靶向代謝組學(xué)技術(shù)分析HUA小鼠血清代謝譜，結(jié)合多元統(tǒng)計學(xué)方法篩選差異代謝物，通過KEGG富集分析獲得差異代謝通路。結(jié)果 與正常組比較，模型組SUA、BUN、SCr指標(biāo)均有顯著升高（P<0.01），模型組小鼠腎臟組織可見少量腎小管上皮細(xì)胞水樣變性，胞質(zhì)疏松淡染。與模型組比較，中藥組SUA、BUN、SCr指標(biāo)均有顯著降低（P<0.01），別嘌呤醇組SUA、SCr指標(biāo)降低（P<0.05）。與模型組比較，中藥組抑制XOD活性效果顯著（P<0.01），中藥組、別嘌呤醇組小鼠腎臟組織損傷均有不同程度改善。利用非靶向代謝組學(xué)技術(shù)進(jìn)行分析，模型組與正常組之間篩選出48種HUA差異代謝物，中藥組治療后部分代謝物趨勢出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)。通過將篩選出的差異代謝物進(jìn)行富集通路分析發(fā)現(xiàn)與甘油磷脂、谷胱甘肽等代謝通路相關(guān)。結(jié)論 除濕化濁降酸方降尿酸作用可能與其抑制XOD 活性有關(guān)，治療HUA作用可能與甘油磷脂、谷胱甘肽代謝通路有關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕 除濕化濁降酸方;高尿酸血癥;代謝組學(xué);甘油磷脂;谷胱甘肽

〔中圖分類號〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2023.06.007

〔Abstract〕 Objective To explore the mechanism of action of? Chushi Huazhuo Jiangsuan Formula on uric acid-lowering in hyperuricemic mice based on metabolomics. Methods The total of 32 male Kunming mice were randomly divided into normal group， model group， Chushi Huazhuo Jiangsuan Formula group （Chinese medicine group） and allopurinol group， with 8 mice in each group. Except normal group， the mice in other groups were fed with 15% yeast powder daily for 9 weeks to establish the HUA model. At the same time of modeling， Chinese medicine group was given 28.05 g/kg of water extract of Chushi Huazhuo Jiangsuan Formula by gastric irrigation and allopurinol group was given 5 mg/kg of allopurinol by gastric irrigation daily. The samples were taken after 9 weeks， the liver index and kidney index of mice were calculated， the levels of serum uric acid （SUA）， blood urea nitrogen （BUN） and serum creatinine （SCr） were measured， and the activity of xanthine oxidase （XOD） in liver tissue was determined. HE staining was used to observe the pathological changes of kidney tissue in mice， non-targeted metabolomics technology was used to analyze the serum metabolic spectrum of HUA mice， multivariate statistical method was combined to screen differential metabolites， and KEGG enrichment analysis was performed to obtain differential metabolic pathways. Results Compared with normal group， the indexes of SUA， BUN， and SCr in model group were significantly higher （P<0.01）， and watery degeneration in a small amount of renal tubular epithelial cells and? loose and pale cytoplasm were observed in the mice kidney tissues of model group. Compared with model group， the indexes of SUA， BUN and SCr in Chinese medicine group were significantly lower （P<0.01）， and the indexes of SUA and Scr in allopurinol group were lower （P<0.05）. Compared with model group， Chinese medicine group had a significant effect on inhibiting XOD activity （P<0.01） and the kidney tissue damages of mice in Chinese medicine group and allopurinol group were improved at different degree. Non-targeted metabolomics was used for analysis， the total of 48 kinds of HUA differential metabolites were screened between model group and normal group and the trend of some metabolites in Chinese medicine group reversed after treatment. Through the enrichment pathway analysis of the screened differential metabolites， it was found that they were related to the metabolic pathways such as glycerophospholipid and glutathione. Conclusion The effects of Chushi Huazhuo Jiangsuan Formula on uric acid-lowering may be related to its inhibition of XOD activity， and its therapeutic effects on hyperuricemia may be related to the metabolic pathways of glycerophospholipid and glutathione.

〔Keywords〕 Chushi Huazhuo Jiangsuan Formula; hyperuricemia; metabolomics; glycerophospholipid; glutathione

高尿酸血癥（hyperuricemia， HUA）指機(jī)體出現(xiàn)嘌呤代謝紊亂，造成尿酸分泌過多或腎臟排泄功能障礙，引起血尿酸（serum uric acid， SUA）水平持續(xù)升高的代謝性疾病[1-2]。隨著社會經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展，人們生活方式和飲食結(jié)構(gòu)隨之發(fā)生改變，HUA的患病率持續(xù)升高，中國成年人HUA的患病率為8.4%～13.3%，中老年男性和絕經(jīng)后女性為高發(fā)人群，且年輕化趨勢正在加劇[3]。

越來越多研究表明[4-5]，HUA除引發(fā)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎外，還增加了高血壓、糖尿病、慢性腎臟病和心血管疾病的患病風(fēng)險。目前，臨床上常用的降尿酸藥物主要為抑制尿酸生成藥（如別嘌醇、非布司他等）和促進(jìn)尿酸排泄藥（如丙磺舒、苯溴馬隆等），都存在惡心、腹瀉、肝腎毒性等多種副作用[6-7]。因此，尋找一種安全、有效、依從性良好的藥物對于HUA的治療具有重要意義。大量臨床實(shí)踐證實(shí)中醫(yī)藥在治療HUA中具有多效、作用靶點(diǎn)廣泛、毒副作用小等西醫(yī)無法比擬的優(yōu)勢[8-9]。

目前，代謝組學(xué)技術(shù)已經(jīng)運(yùn)用到HUA的尿酸含量測定、生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)、HUA藥物作用機(jī)制研究等方面[10]。而將代謝組學(xué)方法應(yīng)用于中醫(yī)藥的研究中，能夠?yàn)橹兴帍?fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制研究以及中醫(yī)證候的認(rèn)識提供強(qiáng)有力的技術(shù)支持[11]?；诖?，本研究通過自主喂食15%酵母粉添加飼料方式建立HUA小鼠模型，探討除濕化濁降酸方對HUA模型小鼠的藥效作用，從血清代謝組學(xué)角度探討除濕化濁降酸方治療HUA的作用機(jī)制，以期為臨床防治HUA提供新的理論支撐。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1? 實(shí)驗(yàn)動物

SPF級雄性昆明小鼠32只，體質(zhì)量22～25 g，購買于廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心[許可證號SCXK（粵）2022-0002]，實(shí)驗(yàn)方案由中科產(chǎn)業(yè)控股（深圳）有限公司動物福利倫理委員會審核通過（編號：20220082）。動物飼料購買于江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司，產(chǎn)品名稱為輻射滅菌實(shí)驗(yàn)動物加工飼料，主要內(nèi)容為15%酵母粉添加飼料（批號：20220927）。

1.2? 藥品及試劑

除濕化濁降酸方為吳正治教授專利配方，由高良姜、余甘子、茯苓等10余味藥物組成，實(shí)驗(yàn)室自制。按原方比例稱取各藥材，加入10倍水浸泡30 min，加熱回流提取2次，每次1.5 h，濾過，合并濾液，減壓濃縮至3.85 g/mL，冷凍保存。

別嘌呤醇片（合肥久聯(lián)制藥有限公司，批號：20211102）;異氟烷（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，批號：20220301）;尿酸檢測測試盒（南京建成生物工程研究所，批號：20221013）;肌酐測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20221015）;尿素氮（blood urea nitrogen， BUN）含量檢測試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，批號：20221014）;黃嘌呤氧化酶（xanthine oxidase， XOD）活性檢測試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，批號：20221017）。

1.3? 主要儀器

全波長全自動多功能酶標(biāo)儀（廣州動克生物儀器有限公司，型號：SpectraMax i3x）;低溫離心機(jī)（美國Sigma公司，型號：1-16K）;組織研磨儀（武漢賽維爾生物科技有限公司，型號：KZ-III-F）;臺式快速離心濃縮干燥器（太倉市華美生化儀器廠，型號：LNG-T88）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1? HUA小鼠造模及分組給藥

32只小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。隨機(jī)分為正常組、模型組、除濕化濁降酸方組（中藥組）、別嘌呤醇組，每組8只。正常組小鼠普通飼料喂養(yǎng)，每日蒸餾水灌胃;其余3組每日喂食15%酵母添加飼料復(fù)制HUA模型[12]。9周后，檢測正常組與模型組小鼠血清尿酸值，若差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），則視為造模成功。成人除濕化濁降酸方給藥劑量為185 g/d，按小鼠與成人的體表面積換算公式計算得每日除濕化濁降酸方給藥劑量為28.05 g/kg。別嘌呤醇組為5 mg/kg，正常組和模型組灌胃同等體積的蒸餾水，灌胃體積為10 mL/kg。每日給藥1次，連續(xù)給藥9周。

2.2? 標(biāo)本采集

給藥9周后，各組小鼠禁食不禁水12h后，異氟烷呼吸麻醉，眼球取血，靜置1 h，3000 r/min離心15 min，離心半徑13.5 cm，取上清液，置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。取血后，斷頸處死小鼠，于冰臺上快速分取肝臟和腎臟組織，稱重，計算臟器指數(shù)（臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量×100%），用生理鹽水沖洗干凈后，濾紙吸干多余水分，將肝臟裝入凍存管-80 ℃保存。左腎縱切一部分放置于4%多聚甲醛溶液中固定，剩余部分裝入凍存管中，再放入液氮速凍，-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3? SUA、腎功能指標(biāo)及肝臟XOD活性檢測

按試劑盒說明測定小鼠血清中SUA、血肌酐（serum creatinine， SCr）、BUN值。

肝臟XOD活性測定：取0.1 g小鼠肝臟組織，加入指定試劑1 mL，組織研磨儀-10 ℃下離心收取上清液，放置冰上待測。按試劑盒說明書測定肝臟XOD活性。

2.4? 腎組織病理學(xué)觀察

將各組的小鼠腎臟用4%多聚甲醛溶液固定后，切成2 mm厚度組織片，石蠟包埋，采用HE染色，在顯微鏡下對腎臟病理變化進(jìn)行觀察。

2.5? 液相色譜與質(zhì)譜條件

色譜條件：進(jìn)樣足3 μL樣本經(jīng)HSS T3色譜柱（100 mm×2.1 mm， 1.8 μm）分離后進(jìn)入質(zhì)譜檢測。流動相A為95%水+5%乙腈（含0.1%甲酸），流動相B為47.5%乙腈+47.5%異丙醇+5%水（含0.1%甲酸）。正負(fù)離子模式下，進(jìn)行梯度洗脫。流速為0.40 mL/min，柱溫為40 ℃。

質(zhì)譜條件：樣品質(zhì)譜信號采集采用正負(fù)離子掃描模式，質(zhì)量掃描范圍為70～1050 m/z。鞘氣壓力為344.75 kPa，輔助氣壓力為89.635 kPa，輔助氣加熱溫度為425 ℃，正模式離子噴霧電壓設(shè)置為3500 V，負(fù)模式離子噴霧電壓設(shè)置為-3500 V，離子傳輸管溫度為325 ℃。一級質(zhì)譜分辨率60 000，二級質(zhì)譜分辨率7500，采用DDA模式采集數(shù)據(jù)。

2.6? 數(shù)據(jù)處理與多元統(tǒng)計分析

上機(jī)完成后，采用美吉公司軟件對正常組、模型組、中藥組質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理。使用ropls （R packages）、scipy（Python）等軟件進(jìn)行主成分分析（principal component analysis， PCA）和有監(jiān)督的正交偏最小二乘判別分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis， OPLS-DA），篩選同時符合VIP>1、P<0.05（校正后）、FC>1.2或<0.8三種條件的離子為差異代謝物。將差異代謝物導(dǎo)入KEGG Compound（Release 2017-05-01）、KEGG Pathway（Release 2017-05-01）進(jìn)行代謝通路分析。

2.7? 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“x±s”表示，多組間比較采用單因素方差（ANOVA）分析，滿足方差齊性用LSD法，不滿足方差齊性則選用DunnettT3檢驗(yàn)。以P<0.05為數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1? 各組小鼠肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)比較

與正常組比較，模型組小鼠肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)明顯升高（P<0.01）。與模型組比較，各組小鼠肝臟指數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）;別嘌呤醇組小鼠腎臟指數(shù)明顯降低（P<0.01），中藥組小鼠腎臟指數(shù)降低（P<0.05）。詳見表1。

3.2? 各組小鼠SUA比較

與正常組比較，模型組SUA濃度顯著升高（P<0.01），表明本實(shí)驗(yàn)HUA模型建立成功。與模型組比較，中藥組、別嘌呤醇組SUA濃度均有顯著降低（P<0.01）。詳見表2。

3.3? 各組小鼠SCr、BUN比較

與正常組比較，模型組小鼠的SCr、BUN均顯著升高（P<0.01）。與模型組比較，中藥組SCr、BUN均顯著降低（P<0.01），別嘌呤醇組SCr顯著降低（P<0.01）。詳見表3。

3.4? 各組小鼠肝臟XOD結(jié)果

與正常組比較，模型組的肝臟XOD值明顯升高（P<0.01）;與模型組比較，中藥組抑制肝臟XOD活性效果顯著（P<0.01），別嘌呤醇組肝臟XOD值有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），詳見表4。

3.5? 各組小鼠腎臟HE染色結(jié)果

正常組小鼠腎組織皮質(zhì)中腎小球分布均勻，腎小球中細(xì)胞數(shù)量以及基質(zhì)均勻，腎小管上皮細(xì)胞圓潤、飽滿，刷狀緣排列整齊規(guī)則，髓質(zhì)未見明顯異常;與正常組相比，模型組小鼠腎組織可見少量腎小管上皮細(xì)胞水樣變性，胞質(zhì)疏松淡染;與模型組相比，中藥組、別嘌呤醇組腎臟損傷均有不同程度改善，各組小鼠腎臟組織均可見皮質(zhì)中腎小球分布均勻，腎小管上皮細(xì)胞圓潤、飽滿，刷狀緣排列整齊規(guī)則，髓質(zhì)未見明顯異常（見圖1）。結(jié)果表明，除濕化濁降酸方在一定程度上對腎臟有保護(hù)作用。

3.6? PCA分析

模型組與正常組陽離子、陰離子模式下PCA圖可以觀察到樣本均落在95%置信區(qū)間內(nèi)，兩種模式下模型組與正常組樣本落點(diǎn)無重疊，組間樣本呈分離趨勢，表明造模后HUA小鼠體內(nèi)的代謝模式有變化，后續(xù)可進(jìn)一步分析。詳見圖2。

中藥組與模型組陽離子、陰離子模式下PCA圖可以觀察到樣本均落在95%置信區(qū)間內(nèi)。兩種模式下，中藥組與模型組組間樣本落點(diǎn)無重疊，組內(nèi)樣本聚集度可，組間樣本均呈分離趨勢，表明中藥組與模型組間有代謝差異。詳見圖3。

3.7? OPLS-DA分析

模型組與正常組OPLS-DA圖中觀察到兩組間呈明顯的分離趨勢，表明HUA小鼠模型建立成功，詳見圖4。置換檢驗(yàn)結(jié)果顯示R2Y=0.99，Q2=0.747，表明模型具有較好的預(yù)測能力，未發(fā)生過擬合。

中藥組與模型組OPLS-DA 結(jié)果與PCA結(jié)果相一致。OPLS-DA 圖顯示，兩種模式下兩組間樣本都發(fā)生明顯的分離，詳見圖5。置換檢驗(yàn)結(jié)果為R2Y=0.969，Q2=0.749，結(jié)果說明模型穩(wěn)定且有效，可用于后續(xù)篩選差異代謝物。

3.8 差異代謝物篩選

采用單維分析和多維分析相結(jié)合的辦法，篩選出組間差異代謝物。篩選的標(biāo)準(zhǔn)為OPLS-DA模型第一主成分的VIP值>1，t檢驗(yàn)的P<0.05，F(xiàn)C>1.2或FC<0.8，共篩選出80種差異代謝物。

模型組與正常組比較共篩選出48種差異代謝物，其中35種代謝物上調(diào)，包括次黃嘌呤、1-環(huán)己烯-1-羧酸、戊烯內(nèi)酯D、2-苯乙醇葡糖苷酸等;13種代謝物下調(diào)，包括PE（18：1（11Z）/20：5（5Z，8Z，11Z，14Z，17Z））、枇杷甲素、5'-脫氧-5'-氟尿苷、氨甲環(huán)酸、?；敲撗跄懰岬?。中藥組與模型組比較共篩選出32種差異代謝物，其中 26種代謝物上調(diào)，包括黃嘌呤、3-吲哚羧酸葡糖苷酸、4-羥基雄烯二酮葡糖苷酸等;6種代謝物下調(diào)，包括6-甲氧基梅林、精胺等。

3.9? KEGG代謝通路分析

KEGG通路富集分析是指對選擇的代謝集進(jìn)行富集分析，分析差異代謝物參與的主要代謝途徑與信號通路。通過對正常組、模型組、中藥組代謝集進(jìn)行富集分析，結(jié)果顯示（見圖6），與正常組比較，模型組有甘油磷脂等代謝通路被富集（P<0.05）;與模型組比較（見圖7），中藥組有谷胱甘肽等代謝通路被富集（P<0.05）。

4 討論

HUA在中醫(yī)文獻(xiàn)中并無對應(yīng)病證名。部分醫(yī)家根據(jù)疾病在晚期的關(guān)節(jié)癥狀，將它歸類為“痹病”“歷節(jié)”等[13]。本實(shí)驗(yàn)研究所用除濕化濁降酸方為吳正治教授專利配方，針對HUA，證屬脾失健運(yùn)、濕濁內(nèi)生者。該方由高良姜、余甘子、茯苓等藥物組成。該方功效為健脾利濕，化濁降酸。高良姜作為本方君藥，是一種藥食兩用藥材，有散寒止痛、溫中止嘔功效，其主要化學(xué)成分為揮發(fā)油類、黃酮類等，具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化等方面藥理作用[14-15]。有學(xué)者[16]研究高良姜不同提取物對次黃嘌呤所誘導(dǎo)的小鼠HUA的影響，結(jié)果顯示，高良姜不同提取物通過抑制高尿酸血癥小鼠XOD活性發(fā)揮降尿酸作用[17-18]。

尿酸是人體內(nèi)嘌呤代謝的最終產(chǎn)物，主要通過肝臟產(chǎn)生。人體內(nèi)尿酸的來源分為內(nèi)源性和外源性。它通過食物攝入部分，占人體尿酸總量的20%。此外，尿酸通過氨基酸、磷酸核糖和其他小分子的合成和核酸分解代謝，占人體尿酸總量的80%。嘌呤代謝過程中，由于某些關(guān)鍵酶基因的遺傳缺陷，導(dǎo)致酶失去活性或失去功能，從而使尿酸的生成量大幅增加[13-14]。

SCr和BUN是評價腎功能的主要指標(biāo)，與正常組比較，模型組小鼠SCr和BUN水平明顯升高，表明模型組小鼠腎功能出現(xiàn)異常。與模型組比較，中藥組SCr、BUN水平顯著降低。結(jié)合中藥組小鼠腎臟組織病理結(jié)果，提示中藥組能改善腎臟組織的病理變化，進(jìn)一步表明其對腎臟有保護(hù)作用。

在人體嘌呤代謝過程中，黃嘌呤氧化酶（XOD）在HUA發(fā)病中占有重要地位。因此，通過抑制XOD活性從而減少尿酸的產(chǎn)生是對抗HUA的重要途徑[19-20]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，模型組小鼠肝臟XOD活性顯著升高，各給藥組顯著抑制了肝臟XOD活性。這提示除濕化濁降酸方可能通過抑制肝臟XOD的活性而減少嘌呤的代謝及尿酸的生成，從而達(dá)到治療HUA的目的。

甘油磷脂代謝的重要環(huán)節(jié)是磷脂酶的合成，其含量的減少可導(dǎo)致大量磷脂代謝產(chǎn)物的積累，導(dǎo)致肥胖、糖尿病等疾病的發(fā)生[21]。相關(guān)文獻(xiàn)[22-23]表明，HUA與甘油磷脂代謝通路密切相關(guān)，推測尿酸可激活磷脂酶，加速磷脂酶催化甘油磷脂水解，抑制模型大鼠血清中磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿含量，影響甘油磷脂代謝。本研究結(jié)果顯示，富集在甘油磷脂代謝通路上的PS（18：1（9Z）/22：2（13Z，16Z））、3-磷酸甘油、PS（18：1（11Z）/20：0）差異代謝物在除濕化濁降酸方干預(yù)后趨勢發(fā)生逆轉(zhuǎn)，水平與正常組趨向一致，提示除濕化濁降酸方可能通過影響甘油磷脂代謝從而影響機(jī)體尿酸水平。

谷胱甘肽由谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸組成。本研究結(jié)果顯示，谷胱甘肽代謝通路上差異代謝物標(biāo)志物有氧化谷胱甘肽、焦谷氨酸、L-谷氨酸。文獻(xiàn)顯示[24]谷胱甘肽通過影響血清BUN水平來緩解腎臟損傷。結(jié)合本研究HUA小鼠腎臟組織病理結(jié)果，表明谷胱甘肽對腎臟有保護(hù)作用。與模型組小鼠相比，除濕化濁降酸方干預(yù)后，差異代謝物氧化谷胱甘肽水平下降，提示本方可能通過調(diào)節(jié)谷胱甘肽代謝起作用。

綜上所述，除濕化濁降酸方能夠顯著降低XOD活性，其發(fā)揮抗尿酸作用可能與甘油磷脂、谷胱甘肽代謝通路有關(guān)。未來將進(jìn)一步對該方進(jìn)行深入機(jī)制研究，為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會內(nèi)分泌與代謝病學(xué)專業(yè)委員會. 高尿酸血癥和痛風(fēng)病證結(jié)合診療指南（2021-01-20）[J]. 世界中醫(yī)藥， 2021， 16（2）： 183-189.

[2]張永琪，陳杰偉，葉博聞，等. 四妙丸上調(diào)高尿酸血癥大鼠小腸ABCG2表達(dá)促進(jìn)腸道尿酸排泄的作用[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2022， 28（22）： 33-39.

[3] 中國醫(yī)師協(xié)會腎臟內(nèi)科醫(yī)師分會. 中國腎臟疾病高尿酸血癥診治的實(shí)踐指南（2017版）[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志， 2017， 97（25）： 1927-1936.

[4] 周啟蒙， 趙曉悅， 梁? 宇， 等.治療高尿酸血癥相關(guān)藥物研究新進(jìn)展[J]. 中國新藥雜志， 2021， 30（10）： 929-936.

[5] 黃清華， 嚴(yán)采馨， 林翠婷， 等.降尿酸藥物對高尿酸血癥合并多系統(tǒng)并發(fā)癥的影響研究進(jìn)展[J]. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志， 2022， 42（9）： 957-960.

[6] FRANCIS-SEDLAK M， LAMOREAUX B， PADNICK-SILVER L， et al. Characteristics， comorbidities， and potential consequences of uncontrolled gout： An insurance-claims database study[J]. Rheumatology and Therapy， 2021， 8（1）： 183-197.

[7] SATTUI S E， GAFFO A L. Treatment of hyperuricemia in gout： Current therapeutic options， latest developments and clinical implications[J]. Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease， 2016， 8（4）： 145-159.

[8] 龐敏霞， 方穎瑩， 陳素紅， 等.高尿酸血癥的危害及中藥防治特點(diǎn)的研究進(jìn)展[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2017， 35（2）： 340-344.

[9] 彭紅誠， 盧建東. 中醫(yī)藥治療高尿酸血癥研究進(jìn)展[J]. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2023， 18（2）： 419-424.

[10] 李紅星， 張信岳， 武檸子， 等. 代謝組學(xué)技術(shù)在痛風(fēng)類疾病研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)， 2021， 38（1）： 122-128.

[11] 趙? 珊， 王鵬程， 馮? 健， 等. 代謝組學(xué)技術(shù)及其在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用[J]. 中草藥， 2015， 46（5）： 756-765.

[12] 勞文艷， 趙? 建， 郭? 豫， 等. 辣木葉等配方提取物對酵母膏誘導(dǎo)小鼠高尿酸血癥的影響[J]. 北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報， 2020， 34（3）： 83-88.

[13] 張嫻嫻. 泄?jié)岢苑街委煾吣蛩嵫Y療效分析及對URAT1的影響[D]. 廣州： 廣州中醫(yī)藥大學(xué).

[14] 李洪福， 李永輝， 王? 勇， 等. 高良姜化學(xué)成分及藥理活性的研究[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2014， 20（7）： 236-244.

[15] 薛雪梅， 徐? 鑫， 尹? 超， 等. 高良姜不同提取物降尿酸及對黃嘌呤氧化酶抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 長江大學(xué)學(xué)報（自科版）， 2017， 14（24）： 1-3， 22， 83.

[16] 熊遠(yuǎn)果， 沈? 瑤， 張? 洪. 高良姜藥理活性研究新進(jìn)展[J]. 中南藥學(xué)， 2017， 15（10）： 1418-1421.

[17] 孫? 琳， 王桂俠， 郭蔚瑩. 高尿酸血癥研究進(jìn)展[J]. 中國老年學(xué)雜志， 2017， 37（4）： 1034-1038.

[18] 馬金魁， 張宏斌. 高尿酸血癥及治療藥物的研究進(jìn)展[J]. 廣東醫(yī)學(xué)， 2018， 39（S2）： 262-267.

[19] 陳? 娜， 李? 化， 孟? 晶， 等. 番紅花去柱頭花部黃酮提取物抗高尿酸血癥的活性及其作用機(jī)制研究[J]. 中國中藥雜志， 2023， 48（1）： 148-159.

[20] 李晴晴， 楊? 濱， 陳? 娜， 等. 西紅花新藥用部位顆粒劑對大鼠高尿酸血癥的藥效及機(jī)制研究[J]. 中國中藥雜志， 2022， 47（23）： 6431-6437.

[21] YAN， SHEN. Characterization of glycerophospholipid molecular species in muscles from three species of cephalopods by direct infusion-tandem mass spectrometry[J]. Chemistry and Physics of Lipids， 2020， 226： 104848.

[22] QIN N K， JIANG Y， SHI W J， et al. High-throughput untargeted serum metabolomics analysis of hyperuricemia patients by UPLC-Q-TOF/MS[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine： ECAM， 2021， 2021： 5524772.

[23] YANG F， SHI W J， WANG L T， et al. Lipidomics study of the therapeutic mechanism of Plantaginis semen in potassium oxonate-induced hyperuricemia rat[J]. BMC Complementary Medicine and Therapies， 2021， 21（1）： 1-14.

[24] 彭琳秀， 謝? 彤， 單進(jìn)軍. 基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的抗結(jié)核藥致腎損傷代謝組學(xué)及谷胱甘肽治療作用研究[J]. 分析化學(xué)， 2020， 48（9）： 1160-1168.