血清抵抗素、丙二醛、IL-6聯(lián)合檢測(cè)對(duì)急性胰腺炎嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值

于雪華,張 寧,吳 婧,孫 惠,趙云紅,劉改芳

(1.河北北方學(xué)院 研究生院,河北 張家口 075132;2.河北省人民醫(yī)院 消化內(nèi)科,河北 石家莊 050057;3.河北醫(yī)科大學(xué) 研究生院,河北 石家莊 050017)

急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)是一種常見(jiàn)的消化科臨床疾病,是由于胰液逆流和胰酶損害胰腺甚至其他組織而引起的急性炎癥,輕則有充血、水腫改變,重則引起出血、壞死,造成腹膜炎,甚至發(fā)生休克, 嚴(yán)重威脅人們的身體健康。盡早預(yù)測(cè)AP嚴(yán)重程度,可提高AP患者的療效并降低病死率,因此對(duì)AP嚴(yán)重程度的早期評(píng)估至關(guān)重要。但是,目前仍缺少準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的臨床評(píng)分系統(tǒng)和生化指標(biāo),早期預(yù)測(cè)AP是否進(jìn)展為重癥急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)仍是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究顯示肥胖可增加AP發(fā)病率和嚴(yán)重程度,且常伴隨多種并發(fā)癥,預(yù)后不佳[1-2]。脂肪組織,尤其是內(nèi)臟脂肪組織在AP患者的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起核心作用[3-5]。脂肪積聚于胰腺中的胰腺腺泡細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞,以及脂肪細(xì)胞浸潤(rùn)胰腺組織,可形成脂肪胰,與AP期間更廣泛的胰腺壞死和多器官功能衰竭有關(guān)[6],常導(dǎo)致AP病情加重[7]。內(nèi)臟脂肪組織,特別是胰腺脂肪組織,不僅可以儲(chǔ)存脂質(zhì),通過(guò)脂質(zhì)代謝影響AP嚴(yán)重程度,還具有強(qiáng)大的內(nèi)分泌功能,可分泌大量的脂肪因子參與AP的發(fā)生和發(fā)展中。

抵抗素(Resistin)是近年來(lái)研究較多的脂肪因子,大量臨床研究證實(shí)抵抗素可早期預(yù)測(cè)AP嚴(yán)重程度[8-11],與AP患者持續(xù)器官衰竭相關(guān)[12-13], 2022年一項(xiàng)meta分析也顯示了抵抗素對(duì)SAP有預(yù)測(cè)作用[14]。丙二醛(Malonaldehyde,MDA)是脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物,血清丙二醛濃度可反應(yīng)機(jī)體氧化應(yīng)激及細(xì)胞損傷程度,常被用做評(píng)價(jià)AP氧化應(yīng)激強(qiáng)度的指標(biāo)[15]。白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)是經(jīng)典的細(xì)胞因子,在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞因子調(diào)控中均發(fā)揮重要作用,血清IL-6升高提示AP預(yù)后不良已經(jīng)成為行業(yè)內(nèi)共識(shí)并應(yīng)用于臨床診治過(guò)程[16-17],早期檢測(cè)IL-6可以更早對(duì)AP進(jìn)行分級(jí),有助于臨床的早期診斷和治療。

本研究以AP病患群體為研究對(duì)象,通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)血清脂肪因子抵抗素、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛和炎癥因子IL-6水平,探討三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AP嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值,以期在早期預(yù)測(cè)和治療重癥急性胰腺炎發(fā)面發(fā)揮作用。

1 資料與方法

1.1病例選擇 選取2022年1月至2022年11月在河北省人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院治療的急性胰腺炎患者120例,其中男性90例,女性30例。本研究經(jīng)河北省人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)[倫理審查編號(hào):(2023)科研倫審第(04)號(hào)]。

病例納入標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡18～75歲患者;(2)發(fā)病48～72小時(shí)內(nèi)急性胰腺炎患者,急性胰腺炎患者臨床診斷符合《中國(guó)急性胰腺炎診治指南(2021)》[18]診斷標(biāo)準(zhǔn):①上腹部持續(xù)性疼痛;②血清淀粉酶和(或)脂肪酶濃度高于正常上限值 3 倍;③腹部影像學(xué)檢查結(jié)果顯示符合急性胰腺炎影像學(xué)改變;上述3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)中符合2項(xiàng)即可診斷為急性胰腺炎;(3)同意參與實(shí)驗(yàn)并簽署知情同意書(shū)的患者。

病例排除標(biāo)準(zhǔn):(1)慢性胰腺炎急性發(fā)作及復(fù)發(fā)性急性胰腺炎患者;(2)患有惡性腫瘤、自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重感染、慢性臟器功能衰竭等影響機(jī)體免疫功能的疾病;(3)妊娠患者;(4)患有精神疾病或不能充分知情配合實(shí)驗(yàn)的患者;(5)研究者判斷為不適合入組的患者。

病例分組:根據(jù)《中國(guó)急性胰腺炎診治指南(2021)》RAC分級(jí)診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所有納入研究的患者進(jìn)行分級(jí)。將患者分為3組:輕癥急性胰腺炎(Mild acute pancreatitis,MAP)組(66例)、中度重癥急性胰腺炎(Moderate severe acute pancreatitis,MSAP)組(30例)、重癥急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)組(24例)。

1.2研究方法 收集患者一般資料[性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、病因等]及血液C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、降鈣素原(Procalcitonin,PCT)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)等生化指標(biāo)。抽取AP患者發(fā)病48～72小時(shí)內(nèi)的靜脈血液4 ml,置于無(wú)菌抗凝管中,使用臺(tái)式離心機(jī)在4 ℃環(huán)境下以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min,然后使用微量移液器吸取上層血清,采用ELISA法檢測(cè)血清抵抗素、丙二醛、IL-6水平,試劑盒均來(lái)自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。使用 Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)評(píng)估計(jì)量資料是否符合正態(tài)分布,符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用方差分析,相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析;非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)及四分位數(shù)間距表示,組間比較采用Kruskal-wallis秩和檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析。計(jì)數(shù)資料組間比較采用卡方檢驗(yàn)。利用受試者工作特征曲線(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析各觀察指標(biāo)的臨界值及評(píng)價(jià)效能,P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1一般資料的比較 3組在性別、年齡、BMI、病因方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性,見(jiàn)表1。

表1 不同嚴(yán)重程度AP的一般指標(biāo)的比較

2.23組間血清抵抗素、丙二醛、IL-6及其他檢測(cè)指標(biāo)水平的比較 MAP組、MSAP組及SAP組的血清抵抗素水平隨病情的加重而升高,3組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);隨著AP病情的加重,丙二醛也呈增加趨勢(shì),3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);3組間IL-6水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見(jiàn)表2。

表2 不同嚴(yán)重程度AP患者血清抵抗素、丙二醛、IL-6等指標(biāo)的比較

3組的CRP、PCT差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),3組間TC、TG水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表2。

2.3血清抵抗素、丙二醛、IL-6三者間的相關(guān)性分析及與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析 對(duì)抵抗素、丙二醛、IL-6進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析,表明抵抗素和丙二醛之間存在顯著的線性相關(guān)性(r=0.437,P<0.01);抵抗素與IL-6之間存在顯著相關(guān)性(r=0.574,P<0.01);丙二醛與IL-6之間存在顯著相關(guān)性(r=0.343,P<0.01), 見(jiàn)表3。

表3 抵抗素、丙二醛、IL-6等指標(biāo)的相關(guān)性分析

對(duì)抵抗素、丙二醛、IL-6與CRP、PCT、TC、TG進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示抵抗素與CRP、PCT存在顯著線性相關(guān)性(r=0.373,r=0.342,P<0.01),與TC、TG無(wú)顯著線性相關(guān)性(P>0.05);丙二醛與PCT存在顯著線性相關(guān)性(r=0.283,P<0.01),與CRP、TC、TG無(wú)顯著線性相關(guān)性(P>0.05);IL-6與CRP、PCT存在顯著線性相關(guān)性(r=0.356,r=0.370,P<0.01),與TC、TG無(wú)顯著線性相關(guān)性(P>0.05),見(jiàn)表3。

2.4應(yīng)用ROC曲線評(píng)價(jià)抵抗素、丙二醛、IL-6及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)SAP的預(yù)測(cè)價(jià)值 血清抵抗素預(yù)測(cè)SAP(MSAP+SAP)的ROC曲線下面積為0.850,最佳預(yù)測(cè)值為693.99 ng/ml,敏感度和特異度分別為77.80%和78.80%;血清丙二醛預(yù)測(cè)SAP(MSAP+SAP)的ROC曲線下面積為0.774,最佳預(yù)測(cè)值為314.36 ng/ml,敏感度和特異度分別為90.70%和62.10%;血清IL-6預(yù)測(cè)SAP(MSAP+SAP)的ROC曲線下面積為0.817,最佳預(yù)測(cè)值為31.86 pg/ml,敏感度和特異度分別為72.20%和83.30%;聯(lián)合檢測(cè)血清抵抗素、丙二醛、IL-6預(yù)測(cè)SAP(MSAP+SAP)的ROC曲線下面積為0.890,最佳預(yù)測(cè)值分別為1055.68 ng/ml、357.63 ng/ml、26.03 pg/ml,敏感度和特異度分別為74.10%和90.90%,見(jiàn)表4,圖1。

圖1 抵抗素、IL-6及三者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)SAP的ROC曲線

表4 血清抵抗素、丙二醛、IL-6及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)SAP(MSAP+SAP)的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

AP病情兇險(xiǎn),進(jìn)展迅速,部分患者可發(fā)生短暫性或持續(xù)性器官衰竭,進(jìn)展為SAP,病死率高達(dá)15%～35%。內(nèi)臟脂肪組織,尤其是胰腺脂肪組織在AP病情進(jìn)展過(guò)程中起重要作用,是AP發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[19],與AP患者的嚴(yán)重程度、死亡率和全身并發(fā)癥獨(dú)立相關(guān)[20]。在AP發(fā)病期間,脂肪酶被釋放到細(xì)胞外,導(dǎo)致胰腺脂肪組織破壞,大量脂質(zhì)和脂肪因子被釋放,大量脂質(zhì)在脂肪酶的作用下被脂解為游離脂肪酸,產(chǎn)生“脂毒性”,直接損害腺泡細(xì)胞,同時(shí)脂肪因子可通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)加重AP[7]。

抵抗素是近年來(lái)研究較多的脂肪因子,可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶活性和轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)活性,并促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生和胰腺細(xì)胞中的IL-6表達(dá)[21],促進(jìn)炎癥反應(yīng)。此外,抵抗素可誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子、趨化因子、細(xì)胞內(nèi)黏附分子-1、血管細(xì)胞黏附分子-1和單核細(xì)胞趨化蛋白-1的表達(dá)[22-24],促進(jìn)白細(xì)胞向發(fā)炎組織的募集[25]。當(dāng)患者發(fā)生AP時(shí),脂肪組織內(nèi)的免疫細(xì)胞和脂肪細(xì)胞可分泌大量抵抗素促進(jìn)炎癥反應(yīng),從而加重AP。本研究表明抵抗素與AP嚴(yán)重程度相關(guān),隨AP嚴(yán)重程度的增加而增加,三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明抵抗素水平可以反應(yīng)AP病情嚴(yán)重程度,這一結(jié)果與以往研究相同[8-13]。

丙二醛是不飽和脂肪酸的過(guò)氧化分解產(chǎn)物,其不僅可以體現(xiàn)機(jī)體氧化應(yīng)激的水平,還可引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合,且具有細(xì)胞毒性,引起多種細(xì)胞功能的損傷[26-27]。本研究顯示血清丙二醛水平隨AP病情加重而升高,MAP、MSAP、SAP三組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明血清丙二醛水平可以反映AP嚴(yán)重程度,這與以往的研究結(jié)果相同[28-29]。氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在AP的疾病進(jìn)展中起重要作用,本研究顯示血清丙二醛水平與IL-6、CRP、PCT呈正相關(guān),提示氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)在AP的發(fā)病中相互關(guān)聯(lián),相互促進(jìn),協(xié)同參與AP進(jìn)展過(guò)程。

IL-6是經(jīng)典的細(xì)胞因子,在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,也是參與感染后免疫損傷的關(guān)鍵炎癥因子。大量研究顯示早期血清IL-6 水平對(duì)于AP嚴(yán)重程度有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值[30-33],血清IL-6升高往往提示AP預(yù)后不良。本研究顯示早期血清IL-6水平隨AP嚴(yán)重程度的增加呈升高趨勢(shì),這與上述研究結(jié)果相同,同樣體現(xiàn)了IL-6對(duì)AP嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值。因此,早期監(jiān)測(cè)血清IL-6水平可以更好的對(duì)AP嚴(yán)重程度進(jìn)行分級(jí),有助于臨床的早期診斷和治療。

本研究還進(jìn)一步通過(guò)ROC曲線評(píng)估了血清脂肪因子抵抗素、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛、炎癥因子IL-6水平對(duì)SAP(MSAP+SAP)的預(yù)測(cè)價(jià)值,結(jié)果顯示血清抵抗素、丙二醛、IL-6對(duì)SAP均具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值,這與以往的研究相同[9, 10, 28-29, 32-33],三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于SAP(MSAP+SAP)的早期預(yù)測(cè)具有較高的效能。

本研究的不足之處:(1)本研究的樣本量較小,需要更多的臨床數(shù)據(jù)以獲得更加穩(wěn)定的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。(2)未對(duì)AP患者進(jìn)行跟蹤隨訪,未能動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清抵抗素、丙二醛、IL-6的變化。

綜上所述,我們的研究顯示血清脂肪因子抵抗素、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛、炎癥因子IL-6水平隨AP嚴(yán)重程度的增加而升高,三者之間兩兩相關(guān),提示抵抗素、丙二醛、IL-6可通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)參與AP的疾病進(jìn)展。聯(lián)合檢測(cè)抵抗素、丙二醛、IL-6預(yù)測(cè)AP嚴(yán)重程度具有較高的效能,可為臨床診療提供參考,或許可以成為一種新的方法。