• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    梨矮化砧木中矮1 號(hào)組培快繁技術(shù)研究

    2023-07-17 07:36:24王藝衡馮靜涵于春亮李濤李金斗趙健霄張海霞張玉星馬輝許建鋒
    山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年6期
    關(guān)鍵詞:根數(shù)培苗外植體

    王藝衡,馮靜涵*,于春亮,李濤,李金斗,趙健霄,張海霞,3,張玉星,3,馬輝,3,許建鋒,3

    (1. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,河北保定 071051;2. 威縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,河北威縣 054700;3. 河北省梨技術(shù)創(chuàng)新中心,河北保定 071051)

    矮化密植栽培具有早果豐產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)高效、省地易管等優(yōu)點(diǎn),利用矮化砧木是實(shí)現(xiàn)梨矮化密植的重要途徑,但是國(guó)外選育的梨矮化砧木大都因其適應(yīng)性差而不宜在我國(guó)推廣應(yīng)用。 梨矮化砧木中矮1 號(hào)的代號(hào)為S2,由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所在1980 年從‘錦香’梨(南果梨×巴梨) 的實(shí)生后代中選育而成,具有果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良、樹(shù)冠矮化緊湊、豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、抗病性強(qiáng)(強(qiáng)抗腐爛病和枝干輪紋病)等特性,是我國(guó)北方梨園矮化密植的常用砧木[1-3]。

    由于梨屬植物具有童期較長(zhǎng)、自交不親和、雜合程度高等特質(zhì),其實(shí)生繁殖易造成果園整齊度差和苗木良莠不齊,這嚴(yán)重影響建園效果和優(yōu)良砧木在生產(chǎn)上的應(yīng)用推廣,所以無(wú)性系砧木成為現(xiàn)代果園生產(chǎn)的基礎(chǔ),無(wú)性育苗成為現(xiàn)代果業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。 在無(wú)性繁殖中,嫁接、扦插等營(yíng)養(yǎng)繁殖存在成本高、速度慢、質(zhì)量差、品種混雜、病毒感染嚴(yán)重等諸多弊端[4,5],最關(guān)鍵的是中矮1號(hào)極難扦插成活。 組培快繁與之相比則具有增殖系數(shù)高、病害率少、基因型一致、不受季節(jié)和環(huán)境影響、短期大規(guī)模生產(chǎn)等眾多優(yōu)勢(shì),已被廣泛應(yīng)用于植物的快速繁殖、品種改良、基因工程育種和種質(zhì)資源保存等方面,在梨無(wú)性系砧木生產(chǎn)和現(xiàn)代生物育種中具有重要作用[6-9]。 但目前,組培快繁技術(shù)仍存在增殖系數(shù)低、生根率低、重復(fù)性差等問(wèn)題。 所以本試驗(yàn)以梨矮化砧木中矮1 號(hào)為試材,研究篩選其適宜的外植體種類(lèi)及消毒方式、繼代和生根培養(yǎng)基及生根條件,以建立起一種增殖系數(shù)高、生根效果好的組培快繁技術(shù),為建立高效、穩(wěn)定的組培快繁體系提供依據(jù),為梨的轉(zhuǎn)基因研究和遺傳轉(zhuǎn)化體系奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    2021 年3 月于河北省邢臺(tái)市威縣香花營(yíng)種質(zhì)資源圃,剪取芽體飽滿但未萌發(fā)的一年生中矮1 號(hào)健壯枝條,置于河北農(nóng)業(yè)大學(xué)梨中心溫室中進(jìn)行水培催芽,隔日換水以促進(jìn)萌發(fā)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 中矮1 號(hào)外植體種類(lèi)及消毒時(shí)間篩選將萌發(fā)后的芽體完整地取下(不破壞生長(zhǎng)點(diǎn))并作為外植體,將其分為莖段芽、混合芽、無(wú)花芽混合芽、葉芽四種(圖1A ~D)。 首先用洗潔精水清洗外植體2 min,然后將其置于燒杯中并用雙層紗布封口后用自來(lái)水沖洗30 min,最后在超凈工作臺(tái)中用75%酒精涮洗30 s→0.1%升汞涮洗(3、5、7)min→無(wú)菌水沖洗30 s→用濾紙吸干水分后接種于初代培養(yǎng)基(MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.4 mg/L GA3+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA,pH=6.0)中。 培養(yǎng)室條件:光照強(qiáng)度為4 000 lx,光照時(shí)間為16 h,溫度為24℃,下同。 30天時(shí)統(tǒng)計(jì)其成活率、污染率和褐變率。

    圖1 四種外植體和兩種幼化程度的苗

    1.2.2 中矮1 號(hào)組培苗繼代培養(yǎng)基篩選 切取初代培養(yǎng)30 天時(shí)長(zhǎng)勢(shì)一致的1.5 cm 長(zhǎng)莖尖,分別接種于表1 正交設(shè)計(jì)的①~⑨號(hào)繼代培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+表1中的激素組合,pH =6.0)中。 每個(gè)處理接種20株,重復(fù)3 次,30 天時(shí)統(tǒng)計(jì)其增殖系數(shù)、芽長(zhǎng)、苗高、葉片數(shù)、節(jié)間數(shù)和節(jié)間長(zhǎng)度。

    1.2.3 中矮1 號(hào)組培苗生根培養(yǎng)基篩選 生根培養(yǎng)采用兩步生根法,即第一步先切取繼代培養(yǎng)30 天時(shí)長(zhǎng)勢(shì)一致且健壯的3.5 cm 長(zhǎng)組培苗,分別接種于表2 正交設(shè)計(jì)的①~⑨號(hào)生根培養(yǎng)基(1/2 MS+15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+表2 中的生根調(diào)節(jié)物質(zhì)組合,pH=6.0)中誘導(dǎo)7 天,其中前5 天進(jìn)行暗培養(yǎng),后續(xù)轉(zhuǎn)為全光照培養(yǎng);第二步將誘導(dǎo)后的組培苗轉(zhuǎn)接至不含激素的培養(yǎng)基(1/2MS+15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA,pH=6.0)中培養(yǎng)33 天。 每個(gè)處理接種20 株,重復(fù)3 次,40 天時(shí)統(tǒng)計(jì)其生根率、根數(shù)、根長(zhǎng)和生根所需天數(shù)。

    表2 生根培養(yǎng)基調(diào)節(jié)物質(zhì)L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)(mg/L)

    1.2.4 光照對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響 將組培苗接種于⑨號(hào)生根培養(yǎng)基(1/2MS +15 g/L蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.5 mg/L IBA+0.8 mg/L IAA+0.3 mg/L NAA,pH=6.0)后,分別在強(qiáng)光(4 000 lx)、弱光(無(wú)燈管直照處)、微光(開(kāi)口箱子中)、黑暗(暗箱中)四種光照環(huán)境下培養(yǎng)5天,其它條件同上。 每個(gè)處理接種30 株,40 天時(shí)統(tǒng)計(jì)生根指標(biāo)。

    1.2.5 組培苗幼化程度對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響 分別將剛完成繼代培養(yǎng)的幼嫩苗(圖1E)和經(jīng)過(guò)一次生根培養(yǎng)但未生根的成熟苗(圖1F)接種于⑤號(hào)生根培養(yǎng)基(1/2MS +15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.0 mg/L IBA+0.4 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA,pH=6.0)中,其它條件同上。 每個(gè)處理接種30 株,40 天時(shí)統(tǒng)計(jì)生根指標(biāo)。

    1.2.6 一步生根法對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響 選取30 株組培苗使用一步生根法來(lái)進(jìn)行生根培養(yǎng),即全程在⑨號(hào)生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)(前5天為暗培養(yǎng)),期間不更換培養(yǎng)基,40 天時(shí)統(tǒng)計(jì)生根指標(biāo)。 以使用兩步生根法進(jìn)行生根培養(yǎng)的組培苗為對(duì)照,比較二者生根過(guò)程中的差異。

    1.3 指標(biāo)計(jì)算及方法

    褐化率(%)=外植體褐化數(shù)/外植體接種數(shù)×100;污染率(%)=外植體污染數(shù)/外植體接種數(shù)×100;成活率(%)=外植體成活數(shù)/外植體接種數(shù)×100。

    增殖系數(shù)=增殖芽總數(shù)/接種株數(shù);平均株高=苗干總高/接種株數(shù);平均葉片數(shù)=完全展開(kāi)的葉片總數(shù)/接種株數(shù);平均芽長(zhǎng)=增殖芽總長(zhǎng)/接種株數(shù)。

    生根率(%)=生根株數(shù)/接種株數(shù)×100;平均根數(shù)=總根數(shù)/生根株數(shù);平均根長(zhǎng)=總根長(zhǎng)/總根數(shù);平均生根天數(shù)=(生根日期-接種日期)/生根株數(shù)。

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS Statistics 25 進(jìn)行方差分析,用Duncan’s 新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較,用Microsoft Excel 制圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 中矮1 號(hào)外植體種類(lèi)及消毒時(shí)間篩選結(jié)果

    由表3 可以看出,0.1%升汞消毒3 min 時(shí),葉芽成活率(91.7%)最高,其次為無(wú)花芽混合芽(44.4%);消毒5 min 時(shí),無(wú)花芽混合芽成活率(34.5%)高于葉芽(25.8%);消毒7 min 時(shí),只有無(wú)花芽混合芽成活,成活率為33.3%;三個(gè)消毒時(shí)段下莖段芽和混合芽均無(wú)成活株。除莖段芽,另外三種外植體的褐化率隨消毒時(shí)間延長(zhǎng)而升高。無(wú)花芽混合芽和葉芽的成活率隨消毒時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。

    表3 不同消毒時(shí)間和外植體種類(lèi)對(duì)外植體引入的影響

    綜上,葉芽和無(wú)花芽混合芽較適合作為中矮1 號(hào)的外植體,引外植體時(shí)的最佳升汞消毒時(shí)間為3 min,總消毒時(shí)間為4 min。

    2.2 中矮1 號(hào)組培苗繼代培養(yǎng)基篩選結(jié)果

    圖2 顯示,⑦號(hào)繼代培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3,pH =6.0)組培苗的增殖系數(shù)(5.52)最高,顯著高于其它處理;⑥號(hào)培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA,pH =6.0)組培苗的平均芽長(zhǎng)(1.15 cm)最長(zhǎng),9 個(gè)處理間無(wú)顯著差異;⑦號(hào)培養(yǎng)基組培苗的平均苗高(4.14 cm)最高,與⑧號(hào)培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+7 g/L瓊脂+2 g/L PVA +1.8 mg/L 6-BA +0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA,pH=6.0)無(wú)顯著差異,顯著高于其它處理;⑦號(hào)培養(yǎng)基組培苗的平均葉數(shù)(20.28 片)最多,與⑧號(hào)、⑨號(hào)培養(yǎng)基(MS+30 g/L蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3,pH =6.0)無(wú)顯著差異,顯著多于其它處理;⑦號(hào)培養(yǎng)基組培苗的平均節(jié)間數(shù)(4.89 節(jié))最多,與⑥號(hào)、⑨號(hào)培養(yǎng)基無(wú)顯著差異,顯著多于其它處理;⑤號(hào)培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L GA3,pH =6.0)組培苗的平均節(jié)間長(zhǎng)度(1.23 cm)最長(zhǎng),9 個(gè)處理間無(wú)顯著差異。

    圖2 不同增殖激素組合對(duì)組培苗繼代培養(yǎng)的影響

    極差分析結(jié)果(表4)表明,四種激素中6-BA對(duì)繼代增殖的影響最大,主要影響增殖系數(shù)、苗高、葉片數(shù)和節(jié)間數(shù);NAA 主要影響芽長(zhǎng)和節(jié)間長(zhǎng)度;GA3對(duì)芽長(zhǎng)、苗高和節(jié)間長(zhǎng)度也有一定影響。 方差分析篩選出的最佳繼代培養(yǎng)基激素組合為:1.8 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA +0.2 mg/L GA3,再結(jié)合圖2 的單因素分析結(jié)果認(rèn)為,1.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3為最佳繼代培養(yǎng)基激素組合。

    表4 增殖激素正交試驗(yàn)的方差分析及極差分析

    2.3 中矮1 號(hào)組培苗生根培養(yǎng)基篩選

    圖3 顯示,⑤號(hào)生根培養(yǎng)基(1/2MS+15 g/L蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.0 mg/L IBA+0.4 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA,pH =6.0)組培苗的生根率(72.22%)最高,顯著高于其它處理;⑨號(hào)培養(yǎng)基(1/2MS +15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.5 mg/L IBA +0.8 mg/L IAA +0.3 mg/L NAA,pH=6.0)組培苗的平均根數(shù)(5.36 條)最多,僅顯著多于②號(hào)培養(yǎng)基(1/2MS +15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+0.5 mg/L IBA+0.4 mg/L IAA +0.3 mg/L NAA +0.5 mg/L AC,pH =6.0),與其余7 個(gè)處理無(wú)顯著差異;⑨號(hào)培養(yǎng)基組培苗的平均根長(zhǎng)(7.74 cm)最長(zhǎng),與⑤號(hào)培養(yǎng)基無(wú)顯著差異,顯著高于其它處理;⑨號(hào)培養(yǎng)基生根所需天數(shù)(13.65 天)最少,與①號(hào)(1/2MS+15 g/L蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA +0.5 mg/L IBA,pH=6.0)、③號(hào)(1/2MS+15 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+0.5 mg/L IBA+0.8 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA+1.0 mg/L AC,pH=6.0)、④號(hào)(1/2MS+15 g/L蔗糖+7 g/L 瓊脂+2 g/L PVA+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L AC,pH =6.0)、⑤號(hào)培養(yǎng)基無(wú)顯著差異,顯著少于其它處理。

    圖3 不同生根調(diào)節(jié)物質(zhì)組合對(duì)組培苗生根的影響

    極差分析結(jié)果(表5)表明,四種生根調(diào)節(jié)物質(zhì)中AC 對(duì)組培苗生根的影響最大,為四項(xiàng)生根指標(biāo)的最主要影響因素,高濃度的AC 會(huì)影響組培苗的生長(zhǎng)狀態(tài),可能造成組培苗葉片枯黃、頂梢發(fā)黑、基部不長(zhǎng)愈傷;IBA 主要影響生根率;IAA 主要影響根數(shù)和根長(zhǎng);NAA 主要影響生根所需天數(shù)。 方差分析篩選出的最佳生根調(diào)節(jié)物質(zhì)組合為:1.0 mg/L IBA+0.8 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA,結(jié)合圖3 的單因素分析結(jié)果認(rèn)為,1.0 mg/L IBA+0.4 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA 為最佳生根調(diào)節(jié)物質(zhì)組合。

    表5 生根調(diào)節(jié)物質(zhì)正交試驗(yàn)的方差分析及極差分析

    2.4 光強(qiáng)對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響

    由圖4 可以看出,組培苗生根培養(yǎng)前期暗培養(yǎng)5 天的平均生根率(60.00%)最高,顯著高于其它處理,強(qiáng)光培養(yǎng)的生根率(6.67%)最低;微光培養(yǎng)組培苗的平均根數(shù)(4.40 條)最多,暗培養(yǎng)(3.67條)其次,4 個(gè)處理間無(wú)顯著差異;暗培養(yǎng)組培苗的平均根長(zhǎng)(5.55 cm)最長(zhǎng),與微光和弱光培養(yǎng)無(wú)顯著差異,顯著長(zhǎng)于強(qiáng)光培養(yǎng)。 表明,4 個(gè)處理在各自光照強(qiáng)度下培養(yǎng)5 天,其愈傷生成速率隨光照強(qiáng)度的減弱而增加,暗培養(yǎng)下愈傷組織的生成量最多,強(qiáng)光培養(yǎng)則幾乎不產(chǎn)生愈傷。

    圖4 不同光強(qiáng)對(duì)組培苗生根的影響

    4 個(gè)處理生根培養(yǎng)40 天后,總體的生根效果隨光照的減弱而變好,強(qiáng)光培養(yǎng)組培苗的生根效果較差,根數(shù)少且短粗,暗培養(yǎng)的生根質(zhì)量較好,根數(shù)多且細(xì)長(zhǎng)。

    綜上,生根培養(yǎng)前期暗培養(yǎng)5 天更有益于中矮1 號(hào)組培苗生根。

    2.5 苗幼化程度對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響

    由表6 可以看出,幼嫩苗的生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)都要高于成熟苗,生根速度也更快。幼嫩苗莖段基部的愈傷組織大小適中,根系細(xì)軟(圖5A),而成熟苗的愈傷組織則較小,根系粗硬(圖5B)。 綜上,繼代培養(yǎng)40 天的幼嫩苗生根效果更好。

    圖5 幼嫩苗(A)和成熟苗(B)的生根效果對(duì)比

    表6 幼嫩苗和成熟苗的生根指標(biāo)對(duì)比

    2.6 一步生根法對(duì)中矮1 號(hào)組培苗生根的影響

    圖6 A 顯示,組培苗用一步生根法生根培養(yǎng)后的愈傷組織生成量極大,生長(zhǎng)狀態(tài)較差,出現(xiàn)苗細(xì)弱、葉焦邊、枯尖等現(xiàn)象,沒(méi)有出現(xiàn)生根苗。 兩步生根法的組培苗愈傷組織大小正常,苗健康粗壯,根系狀態(tài)較好(圖6B)。 所以?xún)刹缴ǜm合中矮1 號(hào)的生根培養(yǎng)。

    圖6 一步生根苗(A)和兩步生根苗(B)的生根效果對(duì)比

    3 討論與結(jié)論

    外植體的高效引入是建立組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵,外植體種類(lèi)和滅菌方法的選擇將直接影響其成活率。 本試驗(yàn)采用的外植體為早春時(shí)溫室中水培萌發(fā)的嫩梢,其本身攜帶的病菌、酚類(lèi)物質(zhì)較少,酶活性較弱,所以污染率、褐變率不高[6,10]。本試驗(yàn)用于篩選的四種外植體中,混合芽多在花芽和花穗處滋生真菌,莖段芽則在莖部滋生真菌,二者與葉芽、無(wú)花芽混合芽相比滅菌難度較大,滅菌時(shí)間難以把握。 如果滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng),植物細(xì)胞會(huì)受到傷害,導(dǎo)致生長(zhǎng)點(diǎn)死亡,褐化率增高;滅菌時(shí)間太短,外源菌無(wú)法被完全消滅,導(dǎo)致污染率增高[4,7]。 因此合理的滅菌時(shí)間將直接關(guān)系到外植體的成活。

    植物激素是促進(jìn)植物組織分化的重要調(diào)節(jié)物質(zhì),不同的激素組合及濃度配比可能會(huì)刺激不同基因控制的酶類(lèi),從而影響內(nèi)源激素的分布水平,進(jìn)而影響不定芽的增殖效果和植株的生長(zhǎng)狀態(tài),因此篩選適宜的激素組合是建立組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵[4,10,11]。 6-BA 可促使腋芽萌發(fā)和抑制頂端優(yōu)勢(shì),對(duì)組培苗增殖的影響最大,但當(dāng)其濃度超過(guò)2.0 mg/L 時(shí)會(huì)加劇組培苗的玻璃化,抑制芽和莖的伸長(zhǎng)[1,12,13];低濃度的GA3可促進(jìn)植物細(xì)胞分裂和伸長(zhǎng),進(jìn)而影響組培苗的增殖數(shù)和苗高[14];低濃度的NAA 能促進(jìn)莖干上腋芽的分生,且對(duì)苗高起一定的主導(dǎo)作用[15,16]。 本研究結(jié)果與以上論述相一致。 前人研究中,蔡猛[17]篩選的中矮1號(hào)繼代培養(yǎng)基(MS+1.0 mg/L 6-BA +0.3 mg/L IBA+30 g/L 蔗糖+6 g/L 瓊脂)的增殖系數(shù)為3.38;及華等[18]篩選的繼代培養(yǎng)基(MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3+20 g/L 蔗糖+6.5 g/L 瓊脂)的增殖系數(shù)為3.4;羅婭等[19]篩選的繼代培養(yǎng)基(MS +3.0 mg/L BA +0.2 mg/L IBA+2.0 mg/L GA3+30 g/L 蔗糖+6 g/L 瓊脂)的增殖系數(shù)為3.88。 本試驗(yàn)篩選出的繼代培養(yǎng)基的平均增殖系數(shù)為5.52,較前人研究結(jié)果有明顯提高,且組培苗繼代30 天的平均苗高可達(dá)4.14 cm。高壯苗可以更早地進(jìn)行后續(xù)的生根培養(yǎng),從而加速育苗進(jìn)程。

    生長(zhǎng)素的種類(lèi)及濃度是影響組培苗生根的關(guān)鍵因素[20]。 首先,對(duì)于生根困難的果樹(shù)材料,兩步生根法要好于一步生根法,其原因可能為根原基誘導(dǎo)、根和莖的生長(zhǎng)對(duì)生長(zhǎng)素的需求濃度不同,根原基的形成需要在高濃度生長(zhǎng)素下進(jìn)行誘導(dǎo),而根的生長(zhǎng)發(fā)育階段,高濃度的生長(zhǎng)素反而會(huì)抑制幼根生長(zhǎng)[21-23];一步生根法較省時(shí)省力,可降低移瓶過(guò)程中組培苗污染的可能性,但組培苗的莖段基部易生成大團(tuán)愈傷組織,不利于其誘導(dǎo)生根和移栽成活。 其次,組培苗在混合生長(zhǎng)素下培養(yǎng)其生根效果要好于單一生長(zhǎng)素:IBA 可以誘發(fā)根原基形成,促進(jìn)內(nèi)源激素IAA 的運(yùn)輸,可在輔酶作用下轉(zhuǎn)化成IAA 來(lái)發(fā)揮作用[7];羅嘉亮等[8]認(rèn)為IBA 的生根誘導(dǎo)效果最佳,但李曉剛[12]和方明[9]等認(rèn)為IBA 對(duì)組培苗的生根無(wú)顯著性影響;IAA 是影響不定根形成的重要因子,但其易被氧化酶氧化,性質(zhì)不穩(wěn)定且作用持續(xù)的時(shí)間較短[8];NAA 可以促進(jìn)組培苗儲(chǔ)存的淀粉水解為還原糖,有利于不定根的形成,但高濃度NAA 會(huì)使組培苗基部產(chǎn)生較大的愈傷,誘導(dǎo)出的根較粗短,不利于移栽成活[8,23,24];活性炭(AC)可以吸附某些有害物質(zhì),為組培苗提供暗環(huán)境,提高組培苗的可溶性蛋白和總糖含量,從而有利于根的誘導(dǎo)和根系生長(zhǎng),但活性炭濃度太高時(shí)則可能減少愈傷組織的生成,吸附大部分的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及對(duì)生根有利的物質(zhì),從而抑制根的發(fā)生[24]。 欒曉龍等[25]在生根培養(yǎng)基中添加1.0 g/L AC,顯著提高山梨的生根率和生根條數(shù);王宏偉等[15]研究表明豆梨組培苗的增殖系數(shù)和株高隨著活性炭濃度的提高而降低;劉翠瓊[26]試驗(yàn)表明0.5 g/L AC 可提高巴梨的生根率,1.0 g/L AC 則會(huì)起到抑制作用。本研究表明,AC 對(duì)組培苗生根的影響最大,0.5、1.0 g/L AC 均對(duì)中矮1 號(hào)的生根起明顯抑制作用;IBA 主要影響生根率;IAA 主要影響根數(shù)和根長(zhǎng);NAA 主要影響生根所需天數(shù)。 前人研究中,蔡猛[17]篩選的中矮1 號(hào)生根培養(yǎng)基(1/2MS+0.1 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖+7 g/L 瓊脂)的生根率為50.1%,平均根數(shù)為2.99 條;羅婭等[19]篩選的培養(yǎng)基(1/2QL+5.0 mg/L IBA+5.0 g/L 蔗糖上暗培養(yǎng)10 d→1/2QL+5.0 g/L 蔗糖+0.5 g/L AC)為67%,平均根數(shù)為1.5 條;及華[27]篩選的培養(yǎng)基(ASH+2.0 mg/L IBA+20 g/L 蔗糖+6.5 g/L 瓊脂上暗培養(yǎng)7 ~9 d→ASH+蛭石+20 g/L 蔗糖+6.5 g/L 瓊脂)為70%,平均根數(shù)為3 條。 本試驗(yàn)優(yōu)選出的生根培養(yǎng)基其生根率為72.22%,平均根數(shù)為5.36 條,明顯多于前人研究中的誘導(dǎo)結(jié)果,生根效果較好。

    暗培養(yǎng)時(shí)間、光強(qiáng)、苗的幼化程度等也是影響組培苗生根的重要因素。 暗培養(yǎng)時(shí)間受組培苗生長(zhǎng)狀態(tài)、繼代次數(shù)和培養(yǎng)環(huán)境等因素影響,合適的時(shí)間有助于組培苗根的形成,但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易造成組培苗細(xì)弱、葉焦邊、枯尖等現(xiàn)象[23,26]。 培養(yǎng)時(shí)的光強(qiáng)不同,生根效果也有很大差異。 本試驗(yàn)中,光強(qiáng)越弱,生根越早,根系質(zhì)量越好。 分析其原因可能是,暗環(huán)境更有利于根原基的誘導(dǎo),更早的形成愈傷組織。 本研究認(rèn)為,中矮1 號(hào)組培苗的生根能力還與其幼化程度有關(guān),與成熟組織相比,幼齡組織和過(guò)渡態(tài)組織具有更強(qiáng)的再生能力,因?yàn)槠浼?xì)胞具有強(qiáng)大的分裂能力,這是根原基形成的前提條件[27]。

    綜之,本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)梨矮化砧木中矮1 號(hào)組培快繁影響因素的研究而建立的離體快繁技術(shù)為:以中矮1 號(hào)一年生枝條水培萌發(fā)的葉芽或無(wú)花芽混合芽為外植體,采取75%酒精30 s→0.1%升汞3 min→無(wú)菌水30 s 的消毒方式進(jìn)行滅菌,然后接種于啟動(dòng)培養(yǎng)基(MS +30 g/L 蔗糖+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.4 mg/L GA3+7 g/L瓊脂,pH =6.0)上;30 天時(shí)轉(zhuǎn)接入繼代培養(yǎng)基(MS+30 g/L 蔗糖+1.8 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3+7 g/L 瓊脂,pH =6.0)上增殖培養(yǎng),增殖系數(shù)可達(dá)5.52;30 天時(shí)轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基(1/2 MS+15 g/L 蔗糖+1.0 mg/L IBA+0.4 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA+7 g/L 瓊脂,pH =6.0)上培養(yǎng)7 天(前5 天為暗培養(yǎng)),再轉(zhuǎn)入無(wú)激素培養(yǎng)基中,最終生根率可達(dá)72.22%。

    猜你喜歡
    根數(shù)培苗外植體
    更正
    尋找規(guī)律巧算根數(shù)
    不同激素配比對(duì)紫花苜蓿幼苗4種外植體愈傷組織誘導(dǎo)效果的影響
    玉米的胡須
    “增城蜜菊”組培苗有機(jī)栽培管理技術(shù)
    瀕危植物單性木蘭外植體啟動(dòng)培養(yǎng)
    解決蘋(píng)果矮化砧M9外植體褐化現(xiàn)象的研究
    基于改進(jìn)型號(hào)第二婁無(wú)廳點(diǎn)根數(shù)的北斗CEO衛(wèi)星廣播星歷擬合算法及實(shí)現(xiàn)
    不同組培方法對(duì)香蕉組培苗假植階段生理特征的影響
    馬鈴薯組培苗薊馬污染防治試驗(yàn)
    亚洲男人天堂网一区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久婷婷青草| 一区二区三区激情视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 精品国产乱码久久久久久小说| 午夜日本视频在线| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲天堂av无毛| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产精品久久久人人做人人爽| 18禁观看日本| 又黄又粗又硬又大视频| 一级片'在线观看视频| 一区在线观看完整版| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲专区中文字幕在线| 精品福利观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲情色 制服丝袜| 日本vs欧美在线观看视频| av网站免费在线观看视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲 国产 在线| 亚洲最大成人中文| 91麻豆av在线| 午夜精品在线福利| 成在线人永久免费视频| 不卡一级毛片| 亚洲人成电影免费在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产一级毛片七仙女欲春2 | 久久香蕉国产精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 色播在线永久视频| √禁漫天堂资源中文www| 51午夜福利影视在线观看| 在线永久观看黄色视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产亚洲欧美98| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲精品美女久久av网站| 久久精品91蜜桃| 亚洲一区二区三区不卡视频| 脱女人内裤的视频| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲精品美女久久av网站| 身体一侧抽搐| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 免费观看人在逋| 亚洲色图综合在线观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲第一电影网av| 女警被强在线播放| a级毛片在线看网站| 俄罗斯特黄特色一大片| xxx96com| 黄色片一级片一级黄色片| or卡值多少钱| 国产精品一区二区三区四区久久 | 天堂动漫精品| 午夜激情av网站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日本a在线网址| 久热爱精品视频在线9| 婷婷丁香在线五月| av在线天堂中文字幕| 国产单亲对白刺激| 午夜福利,免费看| 成人永久免费在线观看视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲中文av在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 日韩欧美在线二视频| 制服丝袜大香蕉在线| 少妇 在线观看| 老司机福利观看| 满18在线观看网站| 久久久久久人人人人人| 久久热在线av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 婷婷精品国产亚洲av在线| 岛国在线观看网站| 国产高清videossex| a级毛片在线看网站| 两个人免费观看高清视频| 欧美中文日本在线观看视频| 99国产综合亚洲精品| 亚洲国产看品久久| 757午夜福利合集在线观看| 麻豆国产av国片精品| 黄频高清免费视频| 国产主播在线观看一区二区| 欧美日韩黄片免| 咕卡用的链子| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久久久久久久久久久大奶| av欧美777| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 看片在线看免费视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 精品国产一区二区久久| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 淫秽高清视频在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 精品久久久久久,| 999精品在线视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产乱人伦免费视频| 高清毛片免费观看视频网站| 午夜免费观看网址| 国产一区在线观看成人免费| 午夜福利高清视频| 97人妻天天添夜夜摸| 午夜免费鲁丝| 国产精品久久电影中文字幕| 两人在一起打扑克的视频| 久久九九热精品免费| 久久亚洲真实| 91精品三级在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产99白浆流出| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 91九色精品人成在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美中文综合在线视频| 免费在线观看亚洲国产| 十八禁人妻一区二区| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产成人影院久久av| 亚洲性夜色夜夜综合| 免费av毛片视频| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 国产一区二区三区视频了| 757午夜福利合集在线观看| 黑人操中国人逼视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 我的亚洲天堂| 一级毛片高清免费大全| 9色porny在线观看| av有码第一页| 岛国视频午夜一区免费看| 久久香蕉国产精品| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 两性夫妻黄色片| 丝袜美腿诱惑在线| 久久久精品欧美日韩精品| 在线视频色国产色| 两个人视频免费观看高清| 国产亚洲av嫩草精品影院| 性欧美人与动物交配| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美在线一区亚洲| 男女下面进入的视频免费午夜 | 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲电影在线观看av| 国产亚洲精品av在线| www.熟女人妻精品国产| 可以在线观看的亚洲视频| 91av网站免费观看| 深夜精品福利| 久久国产乱子伦精品免费另类| 妹子高潮喷水视频| 久久精品国产综合久久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产熟女午夜一区二区三区| 叶爱在线成人免费视频播放| 久热这里只有精品99| www.自偷自拍.com| 又紧又爽又黄一区二区| 精品高清国产在线一区| 午夜久久久久精精品| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产伦人伦偷精品视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产主播在线观看一区二区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产亚洲av高清不卡| 国产精品国产高清国产av| 久久久久久久久中文| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产精品亚洲av一区麻豆| 制服丝袜大香蕉在线| 视频区欧美日本亚洲| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产一区二区激情短视频| 1024香蕉在线观看| 亚洲国产看品久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日本黄色视频三级网站网址| 一级a爱视频在线免费观看| 一本大道久久a久久精品| 在线观看舔阴道视频| 国产1区2区3区精品| 最新美女视频免费是黄的| 中文字幕色久视频| 久久九九热精品免费| 中国美女看黄片| 日韩av在线大香蕉| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 女性生殖器流出的白浆| 一个人免费在线观看的高清视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 最好的美女福利视频网| 激情在线观看视频在线高清| 成人欧美大片| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产单亲对白刺激| e午夜精品久久久久久久| 精品国产一区二区久久| 亚洲人成电影免费在线| 91国产中文字幕| 在线观看午夜福利视频| 国产成人精品无人区| 免费高清在线观看日韩| 亚洲精品粉嫩美女一区| 午夜福利,免费看| 国产一卡二卡三卡精品| 午夜免费观看网址| av视频免费观看在线观看| 在线观看一区二区三区| 日本五十路高清| 精品人妻1区二区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| aaaaa片日本免费| tocl精华| 99精品久久久久人妻精品| 十八禁人妻一区二区| 18美女黄网站色大片免费观看| 90打野战视频偷拍视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 丝袜美腿诱惑在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 99re在线观看精品视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 精品福利观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 性欧美人与动物交配| 十分钟在线观看高清视频www| 日韩有码中文字幕| 免费在线观看黄色视频的| 免费在线观看黄色视频的| 久久草成人影院| 高潮久久久久久久久久久不卡| 一二三四在线观看免费中文在| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产野战对白在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 91av网站免费观看| 国产精品 国内视频| 母亲3免费完整高清在线观看| 满18在线观看网站| 1024香蕉在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久水蜜桃国产精品网| 99国产综合亚洲精品| 久久久久九九精品影院| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 精品久久久久久成人av| 成人亚洲精品av一区二区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 中文字幕色久视频| 多毛熟女@视频| 久久人妻av系列| 中文字幕av电影在线播放| 波多野结衣巨乳人妻| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 精品久久久久久久毛片微露脸| 色综合站精品国产| 日韩视频一区二区在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 搡老妇女老女人老熟妇| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久精品91无色码中文字幕| 国产成人精品无人区| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 在线观看免费日韩欧美大片| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 大香蕉久久成人网| 久久久久国内视频| a在线观看视频网站| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲熟女毛片儿| 久久精品91蜜桃| 午夜免费成人在线视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 黄色女人牲交| 国产精品久久久人人做人人爽| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久水蜜桃国产精品网| 美女高潮到喷水免费观看| 久久中文字幕人妻熟女| 一级a爱片免费观看的视频| 最好的美女福利视频网| 精品国产亚洲在线| 亚洲精品中文字幕在线视频| 好男人电影高清在线观看| 97碰自拍视频| av欧美777| 老汉色av国产亚洲站长工具| 久久中文字幕人妻熟女| 男女之事视频高清在线观看| 免费看十八禁软件| 美女 人体艺术 gogo| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产片内射在线| 精品国产乱子伦一区二区三区| 午夜日韩欧美国产| 九色亚洲精品在线播放| 日韩免费av在线播放| 黄色女人牲交| 久久香蕉国产精品| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 悠悠久久av| 亚洲中文字幕日韩| 91字幕亚洲| 丁香欧美五月| 一a级毛片在线观看| 国产三级黄色录像| 一级片免费观看大全| 99香蕉大伊视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲黑人精品在线| 女警被强在线播放| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲国产欧美网| 97人妻天天添夜夜摸| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜免费成人在线视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 两个人视频免费观看高清| 亚洲精华国产精华精| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲欧美激情在线| 男女午夜视频在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 免费人成视频x8x8入口观看| 一本久久中文字幕| 国产单亲对白刺激| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产高清有码在线观看视频 | 久热这里只有精品99| 两个人免费观看高清视频| 女性生殖器流出的白浆| 午夜福利视频1000在线观看 | 日韩成人在线观看一区二区三区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品 欧美亚洲| 老熟妇仑乱视频hdxx| 老鸭窝网址在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 色在线成人网| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美一级a爱片免费观看看 | 亚洲av成人av| 国产成人精品无人区| 国产麻豆69| 可以在线观看毛片的网站| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 女性被躁到高潮视频| 久久久久久人人人人人| 国产91精品成人一区二区三区| 两个人视频免费观看高清| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产一区二区三区视频了| 国产野战对白在线观看| 999久久久国产精品视频| 看片在线看免费视频| 一区二区三区精品91| 美女大奶头视频| 亚洲 欧美一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 国产乱人伦免费视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美激情高清一区二区三区| 精品欧美国产一区二区三| 日本在线视频免费播放| 欧美精品啪啪一区二区三区| av中文乱码字幕在线| 一个人免费在线观看的高清视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产人伦9x9x在线观看| 不卡av一区二区三区| 涩涩av久久男人的天堂| 久久久久久久午夜电影| 成年人黄色毛片网站| 国产精品永久免费网站| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美色视频一区免费| 多毛熟女@视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 9191精品国产免费久久| 不卡一级毛片| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品久久蜜臀av无| 热re99久久国产66热| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产亚洲欧美在线一区二区| 999久久久精品免费观看国产| 国产欧美日韩一区二区三| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产欧美日韩一区二区三| 长腿黑丝高跟| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 精品久久久久久成人av| 亚洲国产精品合色在线| 精品不卡国产一区二区三区| 久热这里只有精品99| 中国美女看黄片| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久久国产欧美日韩av| 欧美激情 高清一区二区三区| 夜夜爽天天搞| 欧美黄色淫秽网站| 色婷婷久久久亚洲欧美| 欧美在线黄色| 国产成人精品在线电影| 高清毛片免费观看视频网站| 国产片内射在线| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲第一av免费看| 69av精品久久久久久| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 日韩国内少妇激情av| 两个人看的免费小视频| 亚洲精品国产区一区二| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲精华国产精华精| 成人18禁在线播放| 欧美不卡视频在线免费观看 | 在线视频色国产色| 亚洲无线在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 日韩大尺度精品在线看网址 | 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产一区二区在线av高清观看| 久99久视频精品免费| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品在线观看二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产成人av教育| 亚洲国产中文字幕在线视频| 免费观看精品视频网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 老汉色av国产亚洲站长工具| 一区二区三区精品91| 欧美黄色淫秽网站| www日本在线高清视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久久久久久午夜电影| 操出白浆在线播放| 国产伦一二天堂av在线观看| 精品久久久久久,| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 一二三四社区在线视频社区8| 久久久久国内视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲电影在线观看av| 亚洲第一青青草原| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产主播在线观看一区二区| 欧美日韩福利视频一区二区| www国产在线视频色| 91九色精品人成在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产极品粉嫩免费观看在线| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品野战在线观看| 丰满的人妻完整版| 女人精品久久久久毛片| 亚洲精品在线美女| 免费看美女性在线毛片视频| 9色porny在线观看| 午夜a级毛片| 女人精品久久久久毛片| ponron亚洲| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 日韩精品中文字幕看吧| 天天添夜夜摸| 国产99久久九九免费精品| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久久久国产一级毛片高清牌| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美不卡视频在线免费观看 | xxx96com| 一区福利在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 18禁观看日本| 香蕉国产在线看| 少妇 在线观看| 色播亚洲综合网| 亚洲最大成人中文| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 日本在线视频免费播放| 一a级毛片在线观看| 中出人妻视频一区二区| 自线自在国产av| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲黑人精品在线| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 黄色视频,在线免费观看| 男男h啪啪无遮挡| 黄色视频不卡| 中文字幕久久专区| 国产私拍福利视频在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 午夜老司机福利片| 亚洲成人久久性| 久久九九热精品免费| 国产精品99久久99久久久不卡| 欧美在线一区亚洲| 国内精品久久久久精免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 18禁美女被吸乳视频| 久久久久久久久中文| 亚洲,欧美精品.| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品久久蜜臀av无| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 性少妇av在线| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美日韩一级在线毛片| 老司机靠b影院| 国产精华一区二区三区| 久久国产精品影院| 久久久久九九精品影院| 一边摸一边做爽爽视频免费| 麻豆av在线久日| 久热爱精品视频在线9| 母亲3免费完整高清在线观看| 9热在线视频观看99| 亚洲av熟女| 搡老熟女国产l中国老女人| 黑丝袜美女国产一区| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久久水蜜桃国产精品网| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产精品一区二区三区四区久久 | 久久久久九九精品影院| 一区二区三区激情视频| 久久性视频一级片| 一区二区三区激情视频| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲精品在线美女| 黄片大片在线免费观看| 不卡一级毛片| 99香蕉大伊视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品影院久久| 国内精品久久久久久久电影| 日本五十路高清| 少妇的丰满在线观看| 国产xxxxx性猛交| 日本在线视频免费播放| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产人伦9x9x在线观看| 88av欧美| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 亚洲人成电影免费在线| 色精品久久人妻99蜜桃| 在线观看66精品国产| a在线观看视频网站| 久久婷婷成人综合色麻豆| 制服诱惑二区| 午夜视频精品福利| 欧美色欧美亚洲另类二区 | x7x7x7水蜜桃| 97人妻精品一区二区三区麻豆 |