摘? ? 要:以望謨縣花生品種為材料,研究重金屬鉛對花生種子萌發(fā)的影響,共設(shè)0、50、100、200、400、800和1 600 mg/L7個鉛濃度梯度培養(yǎng)液對花生種子進(jìn)行處理,觀測處理后各鉛濃度下種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、芽長、根長、芽鮮重、根鮮重、芽干重、根干重等。結(jié)果表明,隨著濃度的升高,鉛對花生種子有抑制作用,花生種子對不同濃度鉛溶液耐受能力不同。當(dāng)鉛濃度為50 mg/L時,對花生種子萌發(fā)有一定的促進(jìn)作用;隨著鉛濃度成倍增加,表現(xiàn)為抑制作用,濃度越高抑制作用越強(qiáng)。
關(guān)鍵詞:重金屬鉛;花生種子;萌發(fā);抑制作用
文章編號:1005-2690(2023)10-0025-03? ? ? ?中國圖書分類號:S565.2? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B
作者簡介:蒙澤輝(1990—),男,苗族,貴州獨山人,本科,中小學(xué)二級教師,研究方向為生物教學(xué)。
花生在我國種植范圍廣泛,在食用、榨油、藥用等方面具有較高的價值。隨著我國經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展,工業(yè)化、城市化、城鎮(zhèn)化進(jìn)程不斷加快,工業(yè)“三廢”造成的污染程度進(jìn)一步增強(qiáng),重金屬造成的污染問題更為嚴(yán)峻[1]。從植物生理學(xué)理論研究可知,重金屬對植株的危害是從種子萌發(fā)開始的,重金屬具有富集性,不容易排出生物體外,對植株的危害貫穿整個生命進(jìn)程。了解鉛脅迫對種子萌發(fā)的影響,有利于進(jìn)一步認(rèn)識重金屬對植物生理為害的機(jī)理途徑,研究鉛濃度對花生種子的萌發(fā)具有深刻的實踐意義。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗材料為貴州省望謨縣種植的花生種子,由當(dāng)?shù)剞r(nóng)民提供。試驗所用化學(xué)試劑為分析純的醋酸鉛、冰醋酸。
1.2 發(fā)芽試驗
試驗設(shè)7個處理,3次重復(fù)。挑選籽粒飽滿、大小均勻的花生種子,用0.4%高猛酸鉀溶液浸泡10 min消毒,再用蒸餾水反復(fù)沖洗15 min,用濃度分別為50、100、200、400、800、1 600 mg/L的醋酸鉛溶液浸泡12 h。稱取適量醋酸鉛裝入小燒杯,用少量冰醋酸溶解,用稀釋法配制各濃度溶液,測定酸堿度為中性。以濃度為0 mg/L為對照,用一次性飯盒裝沙土進(jìn)行培養(yǎng),每個飯盒培養(yǎng)6粒種子,每2個飯盒為1個重復(fù)(即1個重復(fù)為12粒種子)置于實驗室內(nèi)有序擺放,確保光照、溫度條件相同,每天加10 mL蒸餾水,保持種子濕潤。
1.3 種子形態(tài)指標(biāo)測定
培養(yǎng)3 d后統(tǒng)計發(fā)芽指數(shù)(以長出胚芽為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)),12 d后結(jié)束統(tǒng)計,測量發(fā)芽種子的芽長、根長、芽鮮重、根鮮重、芽干重和發(fā)芽率,公式如下。
芽干重(GR)=∑G/T×100%(1)
式中:G為發(fā)芽的種子數(shù),T為供試種子數(shù),根據(jù)試劑濃度分別統(tǒng)計。
發(fā)芽率(GI)=∑GL/T(2)
式中:GL為第L天的發(fā)芽數(shù),T為供試種子數(shù),根據(jù)試劑濃度分別統(tǒng)計。
1.4 數(shù)據(jù)分析
采用Excel和DPS軟件統(tǒng)計分類試驗數(shù)據(jù)。
2 結(jié)果與分析
2.1 鉛對花生種子發(fā)芽勢的影響
由圖1可知,隨著鉛濃度升高,花生種子的發(fā)芽勢逐漸降低。鉛濃度為50~400 mg/L時,發(fā)芽勢與對照組相比下降趨勢較為平緩;鉛濃度為800~1 600 mg/L,發(fā)芽勢下降速度趨快。試驗中,對照組的發(fā)芽勢最高,為9.2%,其他加有鉛鹽的試驗組中,最高發(fā)芽勢是鉛濃度為50 mg/L的試驗組,發(fā)芽勢為8.9%;最低發(fā)芽勢是鉛濃度為1 600 mg/L的試驗組,發(fā)芽勢為2.5%。鉛濃度為800~1 600 mg/L時,種子發(fā)芽勢與對照組相比分別下降了5.3%和6.7%。經(jīng)F檢驗(F=13.424**,F(xiàn)0.01=4.46),不同鉛濃度處理間差異達(dá)到極顯著水平。
2.2 鉛對花生種子發(fā)芽率的影響
隨著鉛濃度成倍增加,鉛濃度對花生種子發(fā)芽率的抑制作用逐漸增大。鉛濃度為50~400 mg/L時,抑制作用增加較為平緩;鉛濃度為800~1 600 mg/L時,抑制作用增加較快,這與鉛濃度對花生種子發(fā)芽勢的影響相似。試驗中,發(fā)芽率最高的為對照組,為92%;其次為鉛濃度50 mg/L的試驗組,為83%,最低為鉛濃度1 600 mg/L的試驗組,為19.4%。當(dāng)鉛濃度為800~1 600 mg/L時,種子發(fā)芽率較對照組下降了53%和72%。經(jīng)F檢驗(F=27.951**,F(xiàn)0.01=4.46),不同濃度鉛濃度處理間發(fā)芽率差異達(dá)到極顯著水平。
2.3 鉛對花生種子根長、芽長的影響
由圖2可知,隨著鉛濃度成倍增加,花生種子的根長和芽長均受到不同程度的影響,根長的受抑制作用大于芽長。試驗中,鉛濃度對花生種子根長有明顯的抑制作用,鉛濃度為200 mg/L時,根長為4.302 cm;鉛濃度為100 mg/L時,根長為3.668 cm,鉛濃度為50 mg/L時,根長為4.342 cm;應(yīng)該是測量根長時不細(xì)心或不規(guī)范導(dǎo)致。鉛濃度為50~100 mg/L與800~1 600 mg/L時,抑制作用增加較慢;鉛濃度為400~800 mg/L時,抑制作用增加較快。試驗中,各試驗組根長均比對照組短,其最高根長為4.343 cm,最低根長為0.583 cm。鉛濃度為50 mg/L時,對芽的生長有促進(jìn)作用,較對照組上升了13.4%。鉛濃度為100~1 600 mg/L時,對花生種子芽的生長有抑制作用,鉛濃度越高抑制作用越明顯,最高芽長為8.767 cm,較對照組高1.133 cm;最低芽長為1.422 cm,較對照組低6.321 cm。鉛濃度為1 600 mg/L時,根長和芽長較對照組下降87%、82%,經(jīng)F檢驗(F根=21.221**,F(xiàn)芽=16.824**,F(xiàn)0.01=4.46),不同鉛濃度處理間根長、芽長差異均達(dá)到極顯著水平。
2.4 鉛對花生種子根鮮重、根干重的影響
由圖3可知,當(dāng)鉛濃度成倍增加時,根鮮重、根干重隨之降低,根鮮重下降速度快于根干重下降速度。當(dāng)鉛濃度為50 mg/L時,花生種子根鮮重、根干重均有上升,根鮮重上升尤為明顯,表明低濃度鉛溶液對花生種子根活力有一定的促進(jìn)作用。根鮮重曲線的變化程度較大,根干重曲線的變化程度較小,表明鉛溶液對花生種子酶活性影響較大,對蛋白質(zhì)含量影響較小。
在根鮮重曲線中,鉛濃度為50 mg/L時根鮮重最高,為0.252 g,較對照組高0.014 g,升高5.9%;鉛濃度為1 600 mg/L時根鮮重最低,為0.047 g,較對照組低0.191 g,降低80.3%。在根干重曲線中,鉛濃度為50 mg/L時根干重最高,為0.056 g,較對照組高0.003 g,升高5.7%;鉛濃度為1 600 mg/L時根干重最低,為0.011 g,較對照組低0.042 g,降低79.2%。經(jīng)F檢驗(F根鮮重=8.196**,F(xiàn)根干重=3.596**,F(xiàn)0.01=4.46,F(xiàn)0.05=2.85)不同鉛濃度處理間根鮮重差異達(dá)到極顯著水平,根干重差異達(dá)到顯著水平。
2.5 鉛對花生種子芽鮮重、干重的影響
鉛對花生種子芽鮮重、干重的影響趨勢基本一致。隨著鉛濃度增大,對芽鮮重、干重的抑制作用逐漸增大。從曲線斜率來看,鉛溶液對芽鮮重影響程度大于對芽干重的影響。在濃度為50 mg/L時,芽鮮重、干重均有增加,芽鮮重增加幅度大于芽干重,說明低濃度鉛溶液對花生種子芽活力有促進(jìn)作用。在芽鮮重曲線中,鉛濃度為50 mg/L時試驗組單位重量最高,為0.848 g,較對照組高0.095 g,升高8%;鉛濃度為1 600 mg/L時試驗組單位重量最低,為0.126 g,較對照組低0.627 g,降低85.3%。
在芽干重曲線中,鉛濃度為50 mg/L時試驗組單位重量最高,為0.111 g,較對照組高0.01 g,升高9.9%;鉛濃度為1 600 mg/L時試驗組單位重量最低,為0.026 g,較對照組低0.075 g,降低74.3%。經(jīng)F檢驗(F芽鮮重=9.625**,F(xiàn)芽干重=5.725**,F(xiàn)0.01=4.46),不同鉛濃度處理間芽鮮重、芽干重差異均達(dá)到極顯著水平。
3 小結(jié)與討論
根據(jù)已有重金屬對植物種子萌發(fā)的影響研究來看,大多都有低促高抑的現(xiàn)象,本試驗研究也得出了相同結(jié)論[2]。鉛濃度為50 mg/L時,對花生種子的根長、芽長、根鮮重、根干重、芽鮮重和芽干重均有不同程度的促進(jìn)作用,當(dāng)鉛濃度逐漸增大后表現(xiàn)出抑制作用,濃度越高抑制作用越明顯[3]。鉛濃度為50~1 600 mg/L對花生種子根長、芽長、根鮮重、芽鮮重、根干重、芽干重均有不同程度的抑制作用。鉛溶液對花生種子芽長、根鮮重、芽鮮重的抑制作用比對芽長、根干重、芽鮮重的抑制作用更明顯。從數(shù)據(jù)分析來看,鉛溶液對植株根的抑制作用大于芽,當(dāng)鉛溶液濃度為800 mg/L和1 600 mg/L時,對花生種子有極高的抑制作用[4]。
植物種子在萌發(fā)過程中,隨著重金屬離子濃度的增加,細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)會被破壞,使細(xì)胞膜的通透性增強(qiáng),加強(qiáng)了脂質(zhì)過氧化作用,減弱了內(nèi)源抗氧化能力,最終導(dǎo)致膜系統(tǒng)被破壞[5]。在浸泡過程中,根部最先接觸鉛溶液,高濃度的鉛溶液被根部吸收后很難轉(zhuǎn)移到其他地方,進(jìn)而對根部細(xì)胞造成破壞,對細(xì)胞膜的破壞尤為明顯,使膜通透性增大,不利于細(xì)胞對有毒物質(zhì)的隔離和營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,因此根部受重金屬的破壞程度大于芽。同時,部分鉛會進(jìn)入芽中,置換出葉綠素中的鎂離子,降低植株光合作用,不利于植株生長。
重金屬對植株的毒害作用主要途徑是增強(qiáng)植物體內(nèi)的過氧化脅迫,抑制、降低或破壞植株體內(nèi)的相關(guān)作用酶活性,如光合作用酶、呼吸作用酶、脂肪酶,破壞植物正常生理活動[6]。植物體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)會在一定程度上清除由過氧化脅迫產(chǎn)生的自由基,抵抗重金屬脅迫,但隨著重金屬濃度增加,植株抵抗自由基的功能會下降或喪失,進(jìn)一步導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化加強(qiáng),離子滲透加強(qiáng),酶活性降低,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變,葉綠素含量降低,根系代謝及生理活力降低,甚至使細(xì)胞、組織、器官死亡,最終使植株生長受到抑制[7]。不同品種、不同地域的植株抵抗重金屬毒害的能力不同,要多方面、多角度對不同品種進(jìn)行詳細(xì)研究,更好地服務(wù)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
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