中醫(yī)療法靶向干預SCF/c-kit信號通路治療功能性消化不良機制研究進展

陶永彪 ，汪龍德 ，牛媛媛 ，李正菊 ，靳三省 ，吳毓謙 ，張瑞婷

1.甘肅中醫(yī)藥大學，甘肅 蘭州 730000； 2.甘肅中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，甘肅 蘭州 730020

功能性消化不良（functional dyspepsia，F(xiàn)D）是一種臨床常見的功能性胃腸疾病，病變部位涉及胃腸道的胃十二指腸區(qū)。FD包括2種不同病理生理的亞型：餐后窘迫綜合征（postprandial distress syndrome，PDS）、胃脘痛綜合征（epigastric pain syndrome，EPS）[1]。其癥狀包括餐后飽腹感、上腹部疼痛和胃脘部灼燒感。大約80%的消化不良患者的癥狀沒有結構性解釋[2]。據(jù)報道，F(xiàn)D的全球發(fā)病率為7%～45%。目前FD發(fā)病的病理生理學機制仍未完全闡明，一般認為腦腸互動紊亂、內臟過敏變化、胃腸動力異常、十二指腸屏障受損等是其主要發(fā)生機制[3]。因此，其治療常存在局限性，缺乏有效的治療選擇，多針對病因及癥狀給予抑酸劑、促胃腸動力藥和中樞神經(jīng)調節(jié)劑等，作用較為單一。中醫(yī)在FD 的診療中舉足輕重，具有明顯優(yōu)勢，中醫(yī)療法多成分、多靶點、多通路的特點是其發(fā)揮整體調節(jié)作用的基礎。多項研究證實抑制干細胞因子（SCF）/c-kit信號通路活化是治療FD的有效途徑，且表明中醫(yī)療法具有靶向調控該通路治療FD的作用。

1 SCF/c-kit信號通路在功能性消化不良中的作用

c-kit是由原癌基因c-kit編碼的跨膜蛋白，在胞外配體結合區(qū)與神經(jīng)元表達的配體SCF結合，產(chǎn)生均聚反應，磷酸化細胞膜上氨基殘基，啟動SCF/c-kit信號通路，介導下游信號轉導。目前基于SCF/c-kit通路研究FD的靶向細胞主要集中于卡哈爾間質細胞（ICC），然而，c-kit并不只在胃腸ICC上表達，其他非ICC細胞類型，如神經(jīng)細胞（NC）和肥大細胞（MC），也存在表達高水平的c-kit，表明ICC、NC和MC均是SCF/c-kit系統(tǒng)調控的細胞系[4]，見圖1。

圖1 SCF/c-kit信號通路調控機制

ICC廣泛分布于整個胃腸道的肌層中，是消化道運動的起搏細胞、胃腸道節(jié)律運動的發(fā)起者和胃腸道節(jié)律電位的傳遞者[5]。SCF/c-kit通路參與ICC的發(fā)育和表型分化，扮演ICC起搏功能產(chǎn)生的維持者角色。c-kit由ICC表達，是ICC的特異性受體。SCF/c-kit系統(tǒng)在ICC的開發(fā)中至關重要[6]。SCF蛋白可調控ICC的增殖分化，增加ICC數(shù)量，修復ICC超微結構，進而促進胃腸動力[7-8]。Jensen等[9]研究發(fā)現(xiàn)，SCF/c-kit信號系統(tǒng)具有誘導調控MC的潛力，并通過抑制劑干預c-kit受體，證實該通路對MC的增殖分化具有重要作用。SCF是主要的MC生長因子，具有誘導MC發(fā)育、存活、趨化、細胞黏附、活化等作用[10-11]，在十二指腸區(qū)，SCF促進腸道MC 增生，加速MC 衍生的促炎介質的釋放[12-14]，包括組胺、血清素和白三烯、白細胞介素等，降低局部微循環(huán)的完整性，引起胃、十二指腸的炎癥反應[15-17]。SCF/c-kit通路與NC的調節(jié)機制尚未被闡述，相關研究發(fā)現(xiàn)SCF/c-kit系統(tǒng)與神經(jīng)末梢釋放的各種神經(jīng)遞質聯(lián)系密切，并參與保護和重塑神經(jīng)元，促進神經(jīng)結構網(wǎng)絡的重組，這一過程可能介導了FD疼痛反應的發(fā)生。

2 病因病機

依據(jù)FD癥狀可將其歸屬于中醫(yī)學“胃痞”“胃脘痛”“嘈雜”等范疇。病位涉及胃、肝、脾，《臨證指南醫(yī)案》有“肝為起病之源，胃為受病之所”，肝木不疏橫逆犯傷脾土，陽明斡旋升降失常，清陽不升，濁陰不降，進而影響中焦運化，?脹之疾由此而生。《素問·陰陽應象大論篇》載“清氣在下，則生飧泄，濁氣在上，則生?脹”；《素問病機氣宜保命集》云：“脾不能行氣于肺胃，結而不散，則為痞?！逼⑹Ы∵\，胃納不振，升降失司，則出現(xiàn)痞滿不適之癥。其病多因飲食勞倦、七情內傷所致，初期以邪氣盛為主要矛盾，邪氣久羈，則易出現(xiàn)虛實夾雜證候，如《景岳全書·雜證謨·非風》所言“肝邪之見，本由脾腎之虛，使脾胃不虛，則肝木雖強，必無乘脾之患”，因此，當首辨虛實，以恢復肝脾胃三臟功能為要。《血證論·臟腑病機》有“木之性主于疏泄，食氣入胃，全賴于肝木之氣以疏泄之，而水谷乃化”，肝疏泄條達，脾胃升降有度，方能健運不息，正如《素問·寶命全形論篇》言“土需木疏，土得木而達”。若肝疏泄太過，肝強凌弱，橫逆脾土；若疏泄不及，木不疏土，則脾失健運。

當代醫(yī)家認為FD的基本病機為脾虛氣滯，胃失和降[18-20]，病位在胃，涉及肝脾兩臟。目前，F(xiàn)D的證候大致分為脾虛氣滯證、脾胃濕熱證、脾胃虛弱證、寒熱錯雜證、脾胃虛寒證五型[21]。單兆偉教授認為，內因和外因合而致病是導致FD發(fā)生主要病因，中虛內傷，肝胃氣滯，加之飲食七情失宜久而成痞[22]，治療上主張顧護中焦、疏理肝氣，強調情志疏導、移情易性的重要性。張聲生教授重視中焦為斡旋之樞，強調脾胃氣機升降平衡有賴于臟腑協(xié)同，因此，在臨床治療時以運脾升清，和胃降濁為法，亦不忽視他臟他腑的作用，兼顧痰濁、濕熱及瘀血等病理產(chǎn)物的生成，形成特有的“升清降濁”辨治體系[23]。呂林等[24]從“脾主運化水液”角度著手，認為FD脾虛的源頭為濕邪困脾，如《素問經(jīng)注節(jié)解》所云：“脾本濕土而性則喜燥，蓋濕極則氣滯不能運化矣。”其癥狀如胃脘部脹滿、疼痛，大便稀溏、黏膩難下等均為濕邪作祟。治療上重視虛實，病程久者補益脾胃，初期兼以化痰、理氣、瀉熱。

脾虛氣滯，胃失通降是FD病情纏綿，遷延難愈的宿根，濕、熱、痰、瘀等病理產(chǎn)物貫穿FD發(fā)病的中末期，從而進一步引起氣機阻滯，影響脾胃升降，導致胃腸功能障礙。其治療多著眼于疏肝健脾、升清降濁，兼顧去除病理產(chǎn)物的堆積。一方面，通過疏肝健脾和胃、調暢氣機，能夠有效促進胃腸動力，緩解患者疼痛癥狀；另一方面，去除痰、濕、熱、瘀等邪氣，有助于改善胃腸黏膜低度炎癥狀態(tài)。

3 中醫(yī)調控SCF/c-kit 信號通路干預功能性消化不良機制研究

目前中醫(yī)治療FD取得一定進展，臨床療效確切。研究表明，中藥復方、單味藥及提取物及針灸等傳統(tǒng)方式能夠調控SCF/c-kit信號通路，干預ICC增殖分化，維持ICC表型和生長發(fā)育，從而恢復ICC起搏功能，促進胃腸動力。

3.1 中藥復方

中藥復方的多成分特性賦予其治療作用多樣性的特點，目前，中醫(yī)藥治療的靶向作用研究繁多，其中，以分子信號通路為切入點闡明中醫(yī)藥的作用機制是目前的主要研究方式。多項研究認為SCF/c-kit信號通路調控ICC結構和數(shù)目的變化是FD發(fā)病的重要病理生理學基礎，中醫(yī)藥在干預SCF/c-kit信號通路治療FD方面取得了一定的進展。王立等[25]利用胃腸舒泰顆粒治療肝郁脾虛氣滯型FD模型大鼠，發(fā)現(xiàn)中藥組大鼠胃竇組織SCF、c-kit表達升高，表明胃腸舒泰顆粒能夠調控SCF/c-kit信號通路，介導ICC分化增殖過程，從而促進胃腸動力。和胃理氣方是王垂杰教授臨床治療FD的經(jīng)驗方劑，基礎研究發(fā)現(xiàn)該方能夠促進胃腸動力，姜巍等[26]給予治療組和胃理氣方，通過免疫組織化學實驗發(fā)現(xiàn)，c-kit、SCF陽性細胞光密度值升高，胃排空和小腸推進率顯著增加，表明和胃理氣方能夠調節(jié)SCF/c-kit系統(tǒng)相關因子影響胃腸運動。高穎等[27]納入142例脾虛氣滯證FD患者，經(jīng)安胃一號治療后，臨床總有效率達81.4%，乏力、惡心嘔吐、排便無力等癥狀顯著減輕，且患者血清中胃動素、SCF水平顯著升高，顯著優(yōu)于對照組。王敏等[28]基于對疏肝和胃方的實驗研究發(fā)現(xiàn)，該方可明顯改善肝郁脾虛型FD大鼠的精神行為不適癥狀，并通過免疫組化法檢測大鼠胃竇區(qū)c-kit及SCF表達，結果顯示中藥組表現(xiàn)出與促胃腸動力相同的效應，均能升高c-kit和SCF表達及下調ICC凋亡率，從而改善胃腸動力。柴胡疏肝散是臨床治療FD的經(jīng)典名方，鄧靜等[29]運用此方，通過比較各組大鼠胃竇組織ICC超微結構及SCF、c-kit表達水平，發(fā)現(xiàn)中藥低、中、高劑量組ICC內細胞器及結構較模型組完整，并推測其機制與柴胡疏肝散調控SCF/c-kit通路有關。連俊蘭等[30]通過調中湯干預脾虛肝旺型FD 幼鼠后，發(fā)現(xiàn)調中湯能顯著升高血清SCF含量，從而恢復胃腸道內ICC數(shù)目及結構，改善胃腸功能紊亂。周恒等[31]基于舒胃湯的研究發(fā)現(xiàn)，該方能夠提高SCF 表達，促進ICC再生和網(wǎng)絡樣結構修復，從而恢復膽堿能神經(jīng)-ICC-平滑肌細胞（SMC）網(wǎng)絡結構。朱貞敏等[32]發(fā)現(xiàn)，加味腎氣丸可糾正大鼠SCF/c-kit信號通路的負向作用引起的ICC 數(shù)量減少，進而促進胃腸道活動。孔夢夢等[33]研究發(fā)現(xiàn)黃芪建中湯可上調SCF/c-kit途徑相關蛋白表達量，以恢復ICC變性及網(wǎng)絡結構受損。系列研究可見，中藥復方治療FD臨床療效顯著，用藥局限性較小，并具有靶向調節(jié)SCF/c-kit 通路，修復ICC結構的作用，對于恢復FD發(fā)展過程中造成的腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）-ICC-SMC網(wǎng)絡受損，具有積極意義。

3.2 單味藥及成分

目前，單味藥及其成分干預SCF/c-kit通路的研究較少，研究方向多涉及理氣藥厚樸、枳實、白術、姜黃及相關成分（厚樸酚、白術內酯-1、姜黃素），其機制與促進胃腸動力有關，與中醫(yī)“氣機失調致病”理論相吻合。單味藥及其成分藥的組成較中藥復方單一，在體內的作用途徑相對明確，是研究中藥作用機制和靶向調控作用的重要路徑之一。

厚樸酚是從厚樸中提取出的疏水性烯丙基聯(lián)苯酚類化合物，具有抗炎、抗氧化應激等作用[34]。王振奮等[35]發(fā)現(xiàn)厚樸酚能夠顯著改善FD小鼠食欲及活動狀態(tài)，通過ELISA檢測血清中胃腸激素，結果表明厚樸酚組胃腸激素含量顯著升高，具有明顯促胃腸動力效應，并提出該效應與SCF/c-kit通路相關。Miao等[36]指出厚樸酚的干預機制與調節(jié)該通路上下游相關因子的表達狀態(tài)，從而改善ICC結構和數(shù)目有關。王紅陽[37]通過對嶺南特色炮制飲片制枳殼的研究發(fā)現(xiàn)，制枳殼能顯著提高FD大鼠血漿中胃動素和腦腸肽含量，協(xié)同調節(jié)胃腸動力，并從分子層面揭示制枳殼改善胃腸動力的機制與增加c-kit、SCF表達水平，修復ICC的超微形態(tài)和網(wǎng)絡結構密切相關。枳實是臨床治療FD的常用藥物，其功效為破氣消積、化痰散痞。研究發(fā)現(xiàn)，枳實改善胃腸功能紊亂的機制與厚樸相似，通過改善SCF/c-kit通路活化引起的ICC形態(tài)結構異常發(fā)揮生物學效應[38]。同時，枳實水煎液可降低血清IL-6水平，改善炎癥刺激胃腸道神經(jīng)元引起的上腹部疼痛等癥狀[39]。Li等[6]發(fā)現(xiàn)白術內酯-1能夠改善胃輕癱大鼠胃腸動力，可能與其激活SCF/c-kit信號通路調節(jié)氧化應激反應，并抑制ICC 凋亡有關。白術破壁飲片可升高SCF、c-kit蛋白含量，誘導ICC發(fā)育，改善胃腸電慢波節(jié)律，并調節(jié)神經(jīng)遞質釋放，促進胃腸排空[40]。Jin等[41]研究表明，姜黃素可通過調控SCF/c-kit信號通路恢復ICC表型和可塑性，并阻斷氧化應激、抑制NF-κB活化水平，發(fā)揮保護ICC的效應。黃芪甲苷可增加胃固有肌層中c-kit蛋白表達水平，促進恢復ICC梭狀形態(tài)及數(shù)量[42]。上述單味藥及提取物為臨床治療FD常用藥，以理氣藥為主，具有激活SCF/c-kit 通路、促進ICC結構修復效應，部分研究發(fā)現(xiàn)單味藥對炎癥及神經(jīng)癥狀亦有改善。

3.3 針灸療法

針灸作為傳統(tǒng)的中醫(yī)特色治療手段，臨床應用廣泛，具有“簡便驗廉”的特點。目前，針灸作用于人體的效應機制逐漸被深入挖掘，針灸的靶向治療作用同樣是研究的重點。針灸治療FD常用腧穴有足三里、太沖及背俞穴等。王計雨等[43]采用夾尾刺激+不規(guī)則喂養(yǎng)+冰生理鹽水灌胃的復合多因素方法制備FD大鼠模型，電針刺激模型大鼠“足三里”后，ICC超微結構趨于正?；译娽樈M中SCF和c-kit mRNA表達升高，表明電針刺激“足三里”可調控SCF/c-kit信號通路，從而修復ICC網(wǎng)絡功能，調節(jié)胃腸動力。陳峭等[44]結合“以俞調樞”理論，通過針刺足太陽膀胱經(jīng)背俞穴發(fā)現(xiàn)，針刺不僅能夠靶向調控SCF/c-kit通路，升高該通路相關因子蛋白和mRNA表達，還能顯著增加模型胃排空和小腸推進率，降低胃內殘留物。縫隙連接蛋白43（Cx43）是ICC與SMC相互溝通的橋梁，ICC中的電偶聯(lián)將興奮性或抑制性信號通過縫隙連接蛋白傳入SMC，刺激SMC舒縮，產(chǎn)生持續(xù)性動力。張曉明等[45]研究發(fā)現(xiàn)，電針刺激“后三里”“太沖”能明顯促進大鼠胃腸動力，其機制可能與有效地增加胃竇組織中SCF、c-kit 和Cx43 蛋白表達有關，SCF/c-kit 通路的異常激活是ICC結構和數(shù)目減少，引起胃腸動力障礙的直接誘因。韓永麗等[46]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸“足三里”能調節(jié)細胞間質內通訊，并刺激經(jīng)絡信息傳導效應，發(fā)揮增殖活化ICC作用，其機制可能與艾灸調控SCF/c-kit通路，增加ICC/Cx43、SCF蛋白表達密切相關。胡舒寧等[47]將針刺與艾灸“足三里”進行對照，得到相似結論，且2種療法的作用效果相似。潘小麗等[48]發(fā)現(xiàn)miR-221-3p具有負向調節(jié)c-kit的作用，通過電針刺激“足三里”和“太沖”能夠抑制miR-221-3p的靶向調節(jié)作用，激活SCF/c-kit和加速纖維肉瘤蛋白（Raf）/細胞外信號調節(jié)激酶（ERK）信號通路，促進ICC增殖和Cx43表達，從而增強ICC內部及與SMC之間的信息交流。

4 不足與展望

綜上所述，中醫(yī)在改善患者臨床癥狀和恢復組織病理改變方面的優(yōu)勢顯著。隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化的發(fā)展，中醫(yī)對FD的認知更為深刻，并借助現(xiàn)代科學技術平臺，結合現(xiàn)代醫(yī)學理論，挖掘中醫(yī)方劑、單味藥成分及針灸的治療機制，使中醫(yī)體系更加科學化。中醫(yī)療法不僅可有效改善患者臨床癥狀，而且可促進胃腸動力、改善十二指腸炎癥及恢復內臟敏感性等，其機制可能與干預SCF/c-kit信號通路密切相關。

胃腸動力障礙是FD發(fā)生的病理學基礎，但并非唯一機制，胃腸動力受神經(jīng)、免疫和微炎癥等多種因素影響，因此，相關細胞（ICC、NC、MC）的功能正常是維持胃腸動力的關鍵，研究發(fā)現(xiàn)，SCF/c-kit通路可通過調控ICC、NC、MC內相關因子及信號通路傳導（TRPV1、SP、NK1；PLCβ-IP3、PI3K/AKT、RAS/ERK、JAK/STAT；NF-κB、TNF-α、IL-1β/6等）和形態(tài)結構變化，促進胃腸動力，恢復內臟敏感性，減少炎癥損傷。

目前，中醫(yī)療法干預SCF/c-kit通路作用的靶向細胞研究尚有局限性，多項研究聚焦于調控ICC，以胃腸動力的起搏細胞為切入點，忽略了FD發(fā)生中ICC、NC和MC的協(xié)同作用。通過SCF/c-kit通路調控NC、MC治療FD 的研究尚無報道，我們推測NC、MC 也是SCF/c-kit通路的靶向細胞，在FD的發(fā)生發(fā)展中具有重要的病理生理學意義，亟待今后的研究論證，其中涉及的靶向細胞及分子信號通路可為后續(xù)研究提供新的思路。