蘇中蘇南地區(qū)高脂血癥人群ApoE基因多態(tài)性分析

尤佳,張清洋,劉佳,俞麗娟,朱業(yè)

(1揚州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)科學(xué)系,江蘇 揚州 225001;2揚州市婦幼保健院內(nèi)科,江蘇 揚州 225001;江蘇省蘇北人民醫(yī)院:3心血管內(nèi)科,5藥學(xué)部,江蘇 揚州 225001;4大連醫(yī)科大學(xué)內(nèi)科學(xué)系,遼寧 大連 116044;6蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)科,江蘇 蘇州 215006)

高脂血癥通常是指一種由于體內(nèi)脂質(zhì)在新陳代謝或體外轉(zhuǎn)運過程中存在功能異?；蚬δ苷系K,從而引起血漿中一種或多種脂質(zhì)濃度含量超出其正常范圍的一類由遺傳和環(huán)境因子共同作用的多基因遺傳疾病[1]。近年來,高脂血癥已成為嚴(yán)重危害我國各族人民群眾健康生活和命運的高發(fā)性疾病。他汀類藥物的療效與載脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因的單核甘酸多態(tài)性有關(guān)[2]。研究結(jié)果表明,ApoE三種異構(gòu)體兩兩之間僅有一個氨基酸的微小區(qū)分,這一微小區(qū)別使ApoE在功能上發(fā)生了改變[3]。ApoE及其三種異構(gòu)體是影響人體在許多重大疾病初期及發(fā)展的主要決定性因素,有研究認(rèn)為ApoE基因多態(tài)性主要是因為影響血脂水平而成為心血管疾病的一個危險因素[4]。為了解蘇中蘇南地區(qū)人群ApoE基因多態(tài)性的分布情況,本研究對蘇中蘇南地區(qū)高脂血癥患者的ApoE多態(tài)性進(jìn)行分析,為臨床合理用藥及臨床個體化診療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象

回顧性分析2019年8月至2022年1月于蘇北人民醫(yī)院或蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的676例高脂血癥患者的臨床資料。入選標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)臨床診斷確切滿足高脂血癥標(biāo)準(zhǔn);(2)肝、腎功能正常;(3)在接受他汀類藥物治療前2周內(nèi)未使用其他降脂藥物、肝藥酶抑制劑或誘導(dǎo)劑。高脂血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]:(1)總膽固醇(total cholesterol,TC)≥6.2mmol/L;(2)甘油三酯(triglyceride,TG)≥2.3mmol/L;(3)低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)≥4.1mmol/L;以上3項中滿足一項即可。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)肝功能、腎功能異常;(2)嚴(yán)重感染或患有惡性腫瘤、甲狀腺或其他血液系統(tǒng)病變;(3)研究者認(rèn)為其他各種原因不適合入組者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),所有患者均簽署知情同意書。

1.2 基因型檢測

根據(jù)說明書將所提取的DNA進(jìn)行位點檢測,使用人類ApoE基因檢測試劑盒按照說明書進(jìn)行ApoE388T>C(rs429358)、ApoE526C>T(rs7412)基因型檢測[6]。使用焦磷酸測序儀對ApoE相關(guān)基因位點進(jìn)行測序和結(jié)果判定。ApoE各種基因型的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)位點和蛋白表型差異詳見表1。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 患者基本情況

本研究將ApoE基因型分為3組:ApoE2組(包含E2/E2基因型、E2/E3基因型),ApoE3組(包含E2/E3基因型、E3/E3基因型),ApoE4組(包含E3/E4、E4/E4基因型),3組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05;表2)。

2.2 ApoE基因型和等位基因頻率分布

676例患者中,ApoE526C>T(rs7412)基因型分別為純合野生型(CC)577例(85.36%),突變型(CT)97例(14.35%),突變型(TT)2例(0.29%)。ApoE388T>C(rs429358)基因型頻率分別為純合野生型(TT)546例(80.77%),雜合突變型(TC)119例(17.60%),純合突變型(CC)11例(1.63%)。經(jīng)χ2檢驗,ApoE基因多態(tài)位點突變基因觀察值符合Hardy-weinberg遺傳平衡(P>0.05),說明所有納入患者來源于同一個孟德爾遺傳(表3)。

表3 ApoE等位基因型頻率和等位基因頻率分布及Hardy-Weinberg平衡檢驗Table 3 Genotype and allele gene frequency distribution and Hardy-Weinberg equilibrium test (n=676)

2.3 ApoE基因型分布結(jié)果及不同性別之間差異

本研究676例患者ApoE基因型分布由多到少分別為E3/E3、E3/E4、E2/E3、E4/E4、E2/E4和E2/E2。其中男性患者479例,由多到少分別為E3/E3、E3/E4、E2/E3、E4/E4、E2/E4和E2/E2。女性患者197例,由多到少分別為E3/E3、E3/E4、E2/E3、E2/E4和E4/E4。ApoE基因型在不同性別之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.62;表4)。性別之間 ApoE 基因多態(tài)性位點 388T>C、526C>T分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05;表5)。

表4 不同性別患者ApoE基因表型分布Table 4 Phenotypic distribution of ApoE gene in patients with different gender [n(%)]

表5 不同性別患者ApoE基因多態(tài)性頻率分布的比較Table 5 Frequency distribution of ApoE genotypes in patients with different gender [n(%)]

3 討 論

高脂血癥的發(fā)生發(fā)展受到了外在環(huán)境因素和內(nèi)在遺傳因素及二者之間相互作用的共同影響[7]。由于ApoE三種異構(gòu)體兩兩之間僅一個氨基酸的微小差異使ApoE在功能上發(fā)生改變,這正是ApoE各亞型受體親和力不同及對機(jī)體的血脂代謝能力強(qiáng)弱存在差異的原因[8]。

本研究發(fā)現(xiàn)不同性別間ApoE基因單核苷酸多態(tài)性位點388T>C、526C>T分布及表型分布在蘇中蘇南地區(qū)無統(tǒng)計學(xué)差異。ApoE2基因表型中男性明顯高于女性,以往的文獻(xiàn)報道中河北地區(qū)、安徽地區(qū)及北京地區(qū)漢族人群不同性別心腦血管疾病患者ApoE基因多態(tài)性的分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義[9],提示ApoE基因多態(tài)性與性別無關(guān)。

本研究結(jié)果顯示,蘇中蘇南地區(qū)高脂血癥患者中,ApoE基因型中分布最高的基因型為E3/E3(67.75%),其次分別為E3/E4、E2/E3、E4/E4、E2/E4及E2/E2。而華中地區(qū)分析發(fā)現(xiàn)E3型為70.48%,E2型為13.17%,E4型為16.34%[10],基因型分布比例高度近似,說明我國ApoE基因型分布在不同地域間無顯著差別。ApoE基因型以E3基因型為主,顯示大部分高脂血癥患者可考慮使用常規(guī)的阿托伐他汀治療方案。既往文獻(xiàn)表明,ApoE2可降低膽固醇水平;而ApoE4可導(dǎo)致高LDL-C和高膽固醇血癥[11];E2/E2基因型、E2/E3基因型為ApoE保護(hù)類基因型。ApoE2基因型患者使用阿托伐他汀時療效較好,可以考慮使用,是他汀類降脂藥的最佳受益人群。ApoE4基因型他汀類治療療效欠佳。ApoE4基因型攜帶者發(fā)生心腦血管疾病的年齡早于其他基因型攜帶者[12],E3/E4、E4/E4基因型為ApoE風(fēng)險類基因型。本研究結(jié)果顯示E3/E4、E4/E4型比例達(dá)17.75%,使用阿托伐他汀時,療效會有所下降,因此,需要對此類人群給予重點關(guān)注,及早防治,可適當(dāng)調(diào)整用藥劑量或治療方案。

綜上所述,蘇中蘇南地區(qū)高脂血癥人群ApoE的基因多態(tài)性分布不均勻,在不同性別中無顯著差異,ApoE基因多態(tài)性分布特點對臨床精準(zhǔn)調(diào)脂治療具有一定的參考價值。