CTA檢查聯(lián)合血清GRP78檢測對(duì)心肌缺血性冠心病的診斷價(jià)值＊

李小玲 黃文榮 李開成

1.海南西部中心醫(yī)院放射科 (海南 儋州 571700)

2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院放射科 (上海 200011)

心肌缺血性冠心病又叫做缺血性心肌病，是一種由冠心病引起的嚴(yán)重心肌功能失常[1]。該病起病隱匿，大多數(shù)患者在進(jìn)行就診時(shí)已經(jīng)發(fā)生嚴(yán)重心功能障礙和心臟擴(kuò)大，嚴(yán)重威脅患者生命安全[2]。冠狀動(dòng)脈造影是診斷冠心病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但它屬于有創(chuàng)操作，且費(fèi)用昂貴，因此在臨床應(yīng)用存在局限性[3-4]。隨著影像學(xué)技術(shù)的進(jìn)步以及醫(yī)學(xué)水平的提高，CT血管造影(computed tomographic angiography，CTA)、心臟磁共振(CMR)、超聲心電圖等已成為診斷和治療心肌缺血性冠心病的常用方法。其中CTA憑借準(zhǔn)確性高、創(chuàng)傷性小等優(yōu)點(diǎn)得到廣泛應(yīng)用[5]，若聯(lián)合血清標(biāo)志物將有助于提高對(duì)疾病的診斷準(zhǔn)確性。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)是一種免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白，參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[6]。研究表明GRP78在癌癥、炎癥和免疫疾病以及動(dòng)脈粥樣硬化等各種疾病的發(fā)展中發(fā)揮重要作用[7]。近年研究已發(fā)現(xiàn)GRP78表達(dá)升高與心肌缺血性冠心病的發(fā)生密切相關(guān)[8]。本研究旨在分析血清GRP78水平聯(lián)合CTA檢測對(duì)心肌缺血性冠心病的診斷價(jià)值，為提高心肌缺血性冠心病的早期診斷率和生存率提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象選取2020年1月-2021年12月在本院進(jìn)行治療的115例心肌缺血性冠心病患者作為觀察組，其中男63例，女52例，年齡48～76歲，平均(62.61±5.24)歲。同時(shí)選取來本院進(jìn)行健康體檢的志愿者100例作為對(duì)照組，男55例，女45例，年齡47～79歲，平均(62.36±5.35)歲，兩組年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)實(shí)驗(yàn)室、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查等確診為心肌缺血性冠心病[9]；均存在心律失常、胸悶、胸痛、氣短等典型心肌缺血性冠心病的癥狀；均接受冠狀動(dòng)脈造影及CTA檢查；對(duì)照組既往無心肌缺血性冠心病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：有冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)史；造影劑過敏及肝腎功能嚴(yán)重不全者；有急性心肌梗死、心肌炎、風(fēng)濕性心臟病、擴(kuò)張型心臟病等患者；合并自身免疫性疾病患者；有嚴(yán)重心律失常的患者；精神異常或無法自控者；排除臨床資料不完整者。本研究樣品采集均獲得受試者及家屬知情且同意，符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》。

1.2 方法

1.2.1 血清標(biāo)本采集 觀察組于入院后次日、對(duì)照組于體檢當(dāng)天采集5mL空腹靜脈血，采用3000r/min進(jìn)行4℃低溫離心處理10min后，收集上層血清，于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清GRP78水平 使用ELISA試劑盒(上海雅吉生物科技有限公司)檢測血清GRP78水平，檢測步驟嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。檢測步驟：于室溫下，將ELISA試劑、微孔反應(yīng)板靜置約30 min，隨后將待檢血清樣本加入微孔反應(yīng)板，37℃孵育30 min，PBS沖洗5次，加入TMB試劑顯色，37℃避光顯色15min后，加入終止液終止反應(yīng)，采用MA-96A型酶標(biāo)儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療有限公司)讀取光密度(OD)值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出GRP78水平。

1.2.3 CTA檢查 采用64層螺旋CT掃描儀進(jìn)行CTA檢查。所有患者的CTA掃描取仰臥位，雙腳朝向機(jī)架，掃描前需先進(jìn)行碘過敏試驗(yàn)。掃描參數(shù)如下：管電流350 mA/s、管電壓120 kV，層厚3 mm，層矩1.5 mm。增強(qiáng)掃描前靜脈注射60～80mL碘造影劑，注射速度5mL/s，掃描結(jié)束后進(jìn)行后期電腦三維重建，應(yīng)用專用軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果由一名經(jīng)驗(yàn)豐富的心臟病專家和一名放射科醫(yī)生進(jìn)行分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布均以()表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用例(n)表示，進(jìn)行卡方(χ2)檢驗(yàn)；利用受試者工作特征(ROC)曲線評(píng)價(jià)血清中GRP78表達(dá)水平對(duì)心肌缺血性冠心病的診斷價(jià)值。一致性采用Kappa分析。P＜0.05，代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中GRP78水平比較心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組血清中GRP78表達(dá)水平比較

2.2 GRP78對(duì)心肌缺血性冠心病的診斷價(jià)值以心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表達(dá)水平繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清GRP78診斷心肌缺血性冠心病發(fā)生的曲線下面積為0.830(95%CI：0.773～0.878)，截?cái)嘀禐椋?.931，對(duì)應(yīng)的敏感度為79.13%，特異度為85.00%%。見圖1。

圖1 血清GRP78診斷心肌缺血性冠心病發(fā)生的ROC曲線

2.3 GRP78、CTA單一診斷及聯(lián)合診斷心肌缺血性冠心病的結(jié)果比較115例心肌缺血性冠心病患者均經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診。115例患者在接受CTA掃描檢查診斷后，確診為心肌缺血性冠心病患者共計(jì)95例，根據(jù)GRP78檢出心肌缺血性冠心病患者91例。其中CTA聯(lián)合GRP78檢查的陽性例數(shù)最高，單項(xiàng)檢查中CTA檢查的陽性例數(shù)最高。見表2。

表2 GRP78、CTA單一診斷及聯(lián)合診斷心肌缺血性冠心病的結(jié)果比較

2.4 GRP78、CTA單一診斷及聯(lián)合診斷心肌缺血性冠心病的診斷效能CTA聯(lián)合GRP78檢測診斷心肌缺血性冠心病的準(zhǔn)確率為89.30%，敏感度為94.78%，特異性為83.00%，高于CTA檢測和GRP78檢測，Kappa值=0.783，一致性較好。各檢查方式診斷效能見表3。

表3 GRP78、CTA單一診斷及聯(lián)合診斷心肌缺血性冠心病的診斷效能

3 討論

心肌缺血性冠心病主要是由心肌硬化或者是心肌纖維化引起的心肌供血長期不足。臨床特點(diǎn)是心臟逐漸擴(kuò)大，發(fā)生心律失常和心力衰竭，嚴(yán)重者甚至?xí)l(fā)生猝死[10]。近年來，隨著人們生活習(xí)慣及飲食結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)病率逐年增加且趨于年輕化[11]。目前，CTA也是診斷心肌缺血性冠心病的常用影像學(xué)檢查手段。為了提高其臨床診斷的準(zhǔn)確性，往往會(huì)聯(lián)合其他指標(biāo)共同檢測[12]。在本研究中，115例患者在接受CTA掃描檢查診斷后，確診為心肌缺血性冠心病患者共計(jì)95例，準(zhǔn)確率為75.81%，敏感度為82.61%，特異度為68.00%，結(jié)果顯示CTA掃描診斷心肌缺血性冠心病患者比較容易出現(xiàn)假陽性或假陰性，可能受患者心率、心臟搏動(dòng)、對(duì)比劑、血管壁鈣化等多種因素影響[13]，臨床可以與血清學(xué)指標(biāo)檢測聯(lián)合應(yīng)用，能有效提高疾病診斷準(zhǔn)確率和質(zhì)量。

GRP78也稱為BiP和SPA5，主要定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)，有越來越多的研究表明GRP78在異常病理?xiàng)l件及正常生理?xiàng)l件下的心臟中發(fā)揮重要作用[14]。研究顯示冠狀動(dòng)脈阻塞、粥樣硬化等導(dǎo)致的心肌組織缺血可以引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，恰當(dāng)?shù)膬?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可以保護(hù)心肌細(xì)胞，而長期且較嚴(yán)重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激會(huì)促進(jìn)心肌細(xì)胞的凋亡并加重組織損傷[15]。GRP78作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)重要的分子伴侶，其高表達(dá)可破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的穩(wěn)定，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[16]，因此推測GRP78在心肌缺血性冠心病中發(fā)揮重要作用。已有研究表明GRP78在心力衰竭的大鼠模型中表達(dá)增加，參與心力衰竭的發(fā)生[17]。劉晨等[18]研究也表明GRP78在心肌梗死患者血清中異常高表達(dá)，其表達(dá)與患者心功能密切相關(guān)。在本研究中，心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表達(dá)水平升高，表明GRP78與心肌缺血性冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程密切相關(guān)，可能是因?yàn)镚RP78是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的標(biāo)志蛋白，一旦機(jī)體處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)，GRP78過度表達(dá)進(jìn)一步促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡[19]；ROC曲線結(jié)果顯示，血清GRP78水平可在一定程度作為診斷心肌缺血性冠心病發(fā)生的潛在標(biāo)志物，特異度和準(zhǔn)確率均高于CTA檢測，敏感度低于CTA檢測，但依然存在假陽性和假陰性。進(jìn)一步研究顯示，CTA聯(lián)合GRP78檢測診斷心肌缺血性冠心病的準(zhǔn)確率為89.30%，敏感度為94.78%，特異性為83.00%，高于CTA單獨(dú)檢測或GRP78單獨(dú)檢測(75.81%/81.86%、82.61%/79.13%、68.00%/85.00%)，Kappa值=0.783，一致性較好。結(jié)果表明，二者聯(lián)合檢測對(duì)心肌缺血性冠心病的診斷具有準(zhǔn)確率高、敏感度高，特異度高等優(yōu)點(diǎn)，可以提高心肌缺血性冠心病的檢出率，為早期診斷治療心肌缺血性冠心病提供重要參考依據(jù)。

綜上所述，采用CTA掃描聯(lián)合血清GRP78檢測對(duì)臨床心肌缺血性冠心病患者的早期診斷和治療具有重要價(jià)值。但本研究上仍存在不足之處，納入樣本量較少，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)較為簡單，有待進(jìn)一步的深入探討，為臨床診斷心肌缺血性冠心病的發(fā)生提供更可靠的依據(jù)。