遮光處理對(duì)盆景靈芝生長發(fā)育和酶活性的影響

金鑫， 張璐， 吳鵬， 李萍， 譚偉， 桂明英*

（1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所，成都 610061； 2.云南省高原特色農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)研究院，昆明 650100； 3.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，成都 610066）

靈芝[Ganoderma lucidum（Lesyss ex Fr.）Karst]為擔(dān)子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌，作為一種重要的食藥用真菌，自古以來就是我國一味傳統(tǒng)的名貴中藥[1]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí)，靈芝主要活性物質(zhì)為靈芝多糖、三萜、可溶性蛋白、氨基酸、核苷類等，具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗衰老、保肝護(hù)肝、治療心腦血管疾病等功效[2-4]。靈芝還是吉祥如意的象征，可做成天然的觀賞品靈芝盆景，活躍花卉市場、美化環(huán)境、陶冶情操。制作靈芝盆景需要美麗的外形和鮮艷的顏色，因此，靈芝子實(shí)體外形和菌蓋顏色是培養(yǎng)出高觀賞價(jià)值靈芝盆景的關(guān)鍵。

光作為植物生長發(fā)育最重要的環(huán)境因素之一，控制并決定著植物的生長、發(fā)育和分化等過程[5]。與植物相比，靈芝主要將光作為一種外界信號(hào)，而非能量來源，在不同光照條件下靈芝子實(shí)體的生長速度、形狀、代謝產(chǎn)物含量以及各類酶活性特征會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化。夏至蘭[6]報(bào)道，在靈芝的生長期通過控制光照條件、空氣濕度等環(huán)境因素，可培育成外形美觀、喻意吉祥的觀賞植物；孫立晨等[7]通過白膜遮擋處理研究發(fā)現(xiàn)，光照強(qiáng)度越大靈芝中丙二醛含量越高；余吳夢(mèng)曉等[8]通過藍(lán)光和自然光處理栽培靈芝，發(fā)現(xiàn)藍(lán)光對(duì)靈芝子實(shí)體產(chǎn)量有明顯的促進(jìn)作用，且能夠促進(jìn)多糖的積累，提高糖代謝相關(guān)酶的活性；郝俊江等[9]研究表明，不同光質(zhì)處理對(duì)靈芝子實(shí)體產(chǎn)量和靈芝孢子粉產(chǎn)量均有影響，藍(lán)色光質(zhì)可以使靈芝子實(shí)體維持較高的抗氧化酶活性水平，促進(jìn)可溶性蛋白合成，從而增強(qiáng)靈芝代謝，延緩靈芝衰老。在靈芝生長過程中，合適的光照強(qiáng)度尤為重要，當(dāng)光照強(qiáng)度過高時(shí)，子實(shí)體生長緩慢，菌蓋表面色澤較差；當(dāng)光照強(qiáng)度較弱時(shí)，菌蓋分化困難，柄長，蓋薄，子實(shí)體細(xì)小。因此，研究不同遮光處理下靈芝生長發(fā)育及抗氧化酶的響應(yīng)，對(duì)了解盆景靈芝適應(yīng)逆境的生理機(jī)制有重要意義，本研究以盆景靈芝菌株為試驗(yàn)材料，通過不同光照強(qiáng)度處理，探討遮陽率對(duì)盆景靈芝生長及體內(nèi)酶活性的的影響，以期為盆景靈芝的生產(chǎn)栽培提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

以‘盆景靈芝3號(hào)’菌株為試驗(yàn)材料，由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 段木栽培2019年1—8月在德陽市食用菌專家大院實(shí)驗(yàn)研究基地開展盆景靈芝栽培試驗(yàn)，在研究地周邊購買櫟樹，選取直徑為8～20 cm樹木，將樹木切割成15 cm長的小原木，選取30 cm×40 cm×0.005 cm的聚丙烯有底菌袋，將原木裝入袋內(nèi)，扎緊口袋，121 ℃高壓滅菌5 h；然后進(jìn)行接種，25 ℃室內(nèi)發(fā)菌60 d，于4月上旬將發(fā)菌好的短原木下地栽培。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用黑色遮陽網(wǎng)（江蘇欽農(nóng)農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司）來控制光照強(qiáng)度，試驗(yàn)共設(shè)置4個(gè)處理，包括露天不遮光（遮陽率0%，T0）和分別采用3針加密遮陽網(wǎng)（遮陽率50%，T1）、6針加密遮陽網(wǎng)（遮陽率70%，T2）和8針加密遮陽網(wǎng)（遮陽率90%，T3）進(jìn)行遮陽處理。每個(gè)處理大棚栽培規(guī)格為：長6 m×寬4 m，高1.8 m，每個(gè)處理3次重復(fù)，共計(jì)12個(gè)栽培棚。每個(gè)棚均采用相同盆景靈芝出芝管理方法。

1.2.3 樣品采集 通過短原木大棚栽培獲得盆景靈芝子實(shí)體，將盆景靈芝生長分為4個(gè)時(shí)期：原基形成期（primordium formation stage，S1）、菌柄形成期（stipe formation stage，S2）、菌蓋分化期（cap differentiation stage，S3）和子實(shí)體成熟期（fruiting body maturity，S4）。靈芝不同生長期特征如表1和圖1所示。

圖1 盆景靈芝生長的不同時(shí)期Fig. 1 Different periods of bonsai Ganoderma lucidum growth

表1 盆景靈芝不同生長期特征Table 1 Characteristics of different growth periods of bonsai Ganoderma lucidum

1.2.4 不同生長時(shí)期靈芝子實(shí)體活性成分測(cè)定分別在靈芝生長的原基形成期（S1）、菌柄形成期（S2）、菌蓋分化期（S3）和子實(shí)體成熟期（S4）采集樣品，每個(gè)大棚隨機(jī)采集9個(gè)樣品，進(jìn)行多糖、三萜和可溶性蛋白含量的測(cè)定。多糖含量采用苯酚硫酸法測(cè)定[10-11]，三萜含量測(cè)定采用香草醛-冰乙酸-高氯酸顯色法測(cè)定[10,12]，可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定[13]。

1.2.5 盆景靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)木質(zhì)素酶活性測(cè)定 采用隨機(jī)混合取樣法，分別在靈芝生長的原基形成期、菌柄形成期、菌蓋分化期、子實(shí)體成熟期進(jìn)行取樣。每個(gè)處理采集9個(gè)樣品，隨機(jī)3個(gè)樣品1組，對(duì)每組樣品進(jìn)行酶活性測(cè)定，靈芝子實(shí)體內(nèi)錳過氧化物酶（manganese peroxidase）和漆酶（laccase）活性的測(cè)定方法參考李文濤等[14]和王學(xué)奎等[15]方法。

1.2.6 盆景靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)抗氧化酶活性的測(cè)定 靈芝樣品采集方法同1.2.5，每個(gè)樣品取0.1 g，加入4 ℃的磷酸緩沖液5 mL，研磨，在4 ℃10 000 r·min-1離心10 min，收集上清液用于酶活性測(cè)定。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性測(cè)定采用鄰苯三酚自氧化法[16]，過氧化物酶（peroxidase，POD）活性測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚法[15]，過氧化氫酶（catalase，CAT）活性的測(cè)定參照Barata等[17]的方法。

1.2.7 盆景靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量的測(cè)定 參照李合生[13]的方法，取0.1 g樣品，加入5%三氯乙酸5 mL，冰浴研磨，所得勻漿5 000 r·min-1離心10 min，取上清液2 mL，加0.67%硫代巴比妥酸2 mL，混合后100 ℃水浴30 min，冷卻后5 000 r·min-1下離心10 min。分別測(cè)定上清液在532和600 nm處吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用 Excel 2013 軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析；利用IBM SPSS 22軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，采用Origin 8.0進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝子實(shí)體生長發(fā)育的影響

盆景靈芝子實(shí)體生長發(fā)育如表2所示。4個(gè)處理的靈芝從下地后7～8 d開始見到原基生長，T0處理的出原基時(shí)間較其他處理晚1 d，可見，遮陽處理能促使靈芝提早長出原基。從原基期到菌柄形成期，T2處理的原基個(gè)數(shù)最多，達(dá)140.58個(gè)；T0處理最少，僅113.50個(gè)；遮陽處理間原基個(gè)數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。菌蓋生長階段（圖2），T0處理的子實(shí)體生長較差，生長不整齊，菌蓋形狀呈畸形、不規(guī)則，菌蓋表面顏色較淡，沒有光澤，同時(shí)易滋生蟲害；而遮陽處理（T1、T2、T3處理）的子實(shí)體均能正常生長成朵形，其中，T1處理菌蓋分化整齊度一般，菌蓋表面呈黃色，光澤度較好；T2處理菌蓋分化整齊度較好，菌蓋表面金黃色，顏色鮮亮，光澤度好；T3處理菌蓋分化整齊度較差，菌蓋邊緣白色明顯，中間呈暗褐色和紅色，光澤度一般。由此可見，光照強(qiáng)度不僅對(duì)原基形成時(shí)間、原基個(gè)數(shù)有影響，還對(duì)菌蓋形狀、顏色、光澤度有較大影響，總體來看，70%遮陽率最有利于盆景靈芝生長發(fā)育。

圖2 不同處理下盆景靈芝的生長Fig. 2 Growth of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

表2 不同處理下盆景靈芝子實(shí)體的生長發(fā)育Table 2 Growth and development of bonsai Ganoderma lucidum fruiting bodies under different treatments

2.2 光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝子實(shí)體農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量的影響

在盆景靈芝子實(shí)體成熟階段對(duì)靈芝菌蓋直徑、菌蓋厚度、菌柄長度和第一潮子實(shí)體干產(chǎn)量進(jìn)行測(cè)量，結(jié)果（表3）表明，T2處理的菌蓋直徑、菌蓋厚度、菌柄長度和產(chǎn)量均表現(xiàn)最好；T1處理次之；而T0處理表現(xiàn)最差；不同處理間均存在顯著差異（P＜0.05）。由此表明，當(dāng)陽光直曬時(shí)，盆景靈芝的菌蓋小、薄，菌柄短，產(chǎn)量低；當(dāng)遮陽率為50%時(shí)，菌蓋的直徑和厚度及菌柄長度、產(chǎn)量顯著增加；當(dāng)遮陽率達(dá)到70%時(shí)，菌蓋的直徑和厚度及菌柄、產(chǎn)量表現(xiàn)最優(yōu)；然而繼續(xù)增加遮陽率，當(dāng)遮陽率達(dá)到90%時(shí)，菌蓋的直徑和厚度及菌柄長度、產(chǎn)量則顯著降低。可見，盆景靈芝的生長期需要適宜的遮陽率，以70%遮陽率對(duì)靈芝的生長效果最佳。

表3 不同處理下盆景靈芝的農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量Table 3 Agronomic characteristics and yield of bonsai Ganodermalucidum under different treatments

2.3 光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝不同生長期子實(shí)體內(nèi)活性成分含量的影響

由表4可知，不同處理盆景靈芝子實(shí)體在原基期、菌柄期、菌蓋期、成熟期多糖和三萜含量的變化趨勢(shì)相同，都表現(xiàn)為在原基期含量最低，然后逐漸升高，在成熟期達(dá)到峰值；而可溶性蛋白含量在原基期最低，然后逐漸升高，在菌蓋期達(dá)到峰值，至成熟期又逐漸下降。多糖含量在靈芝生長的4個(gè)時(shí)期中均表現(xiàn)為遮陽處理顯著高于T0處理；在遮陽處理中，在原基期和菌柄期，不同處理間多糖含量差異不顯著，而在菌蓋期和成熟期，T2處理顯著高于T1處理，與T3處理差異不顯著，可見，陽光直曬會(huì)降低靈芝子實(shí)體中的多糖含量，一定程度的遮陽有利于提高子實(shí)體多糖含量。4個(gè)處理靈芝子實(shí)體的三萜含量均在原基期最低，成熟期最高；在原基期，T2含量最高，T0處理次之，T3處理最低；在菌柄期，T1處理最高，T2處理次之，T3處理最低；在菌蓋期和成熟期，T2處理最高，T1處理次之，T3處理最低，可見，遮光率為90%時(shí)，靈芝子實(shí)體三萜含量較低，不利于子實(shí)體內(nèi)三萜的合成，遮光率在0%～70%時(shí)，光照對(duì)靈芝子實(shí)體內(nèi)三萜含量的影響較小。4個(gè)處理靈芝子實(shí)體內(nèi)的可溶性蛋白含量均在原基期最低，菌蓋期最高；且4個(gè)時(shí)期均表現(xiàn)為T0處理最高，T1處理次之，T3處理最低，可見，陽光直曬能提高靈芝子實(shí)體內(nèi)可溶性蛋白含量，隨著遮陽率的增加，子實(shí)體內(nèi)可溶性蛋白含量逐漸降低。

表4 不同處理下盆景靈芝額活性成分含量Table 4 Contents of active ingredients of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

2.4 光照強(qiáng)度對(duì)靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)木質(zhì)素酶活性的影響

錳過氧化物酶和漆酶是靈芝生長發(fā)育過程中2種重要的木質(zhì)素降解酶，其活性高低對(duì)靈芝木質(zhì)素的降解能力和靈芝品質(zhì)具有重要影響。由圖3可知，光照強(qiáng)度對(duì)靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)錳過氧化物酶、漆酶活性有顯著影響。錳過氧化物酶在原基期活性最高，然后緩慢降低，到菌蓋期其活性出現(xiàn)急劇下降，成熟期時(shí)其活性相對(duì)平穩(wěn)；而漆酶在原基期活性最低，然后急劇升高，在菌蓋期活性最高，成熟期時(shí)其活性又顯著降低。不同處理間進(jìn)行比較（圖3），T0處理的錳過氧化物酶、漆酶活性均顯著低于遮陽處理；T2處理的錳過氧化物酶、漆酶活性最高，顯著高于其他處理。4個(gè)時(shí)期盆景靈芝子實(shí)體的錳過氧化物酶、漆酶活性均表現(xiàn)為T2＞T1＞T3＞T0?？梢?，陽光直曬和高遮陽率都會(huì)降低子實(shí)體內(nèi)錳過氧化物酶和漆酶活性，而適度遮陽有利于錳過氧化物酶和漆酶活性的提高，以70%遮陽率為宜。

圖3 不同處理下盆景靈芝的木質(zhì)素酶活性Fig. 3 Ligninase activity of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

2.5 光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝不同生長期體內(nèi)抗氧化酶活性的影響

超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、過氧化物酶（POD）是植物抵御外界傷害的重要抗氧化酶，能夠維持體內(nèi)的活性氧代謝平衡。

2.5.1 SOD活性變化 如圖4所示，盆景靈芝在4個(gè)時(shí)期均表現(xiàn)為T2處理的SOD活性最高，T3處理最低。靈芝從原基期到成熟期，4個(gè)處理的SOD活性均表現(xiàn)為先上升后降低，其中，T0處理的增幅最大，T3處理次之，T2處理最小。在原基期，T2和T1處理的SOD活性顯著高于T0和T3處理，T3又顯著低于T0處理。在菌柄期和菌蓋期，T2處理的SOD活性顯著高于其他處理，較T0處理分別顯著增加23.94%和32.52%?？梢?，強(qiáng)光和弱光均對(duì)盆景靈芝細(xì)胞產(chǎn)生了脅迫，使其體內(nèi)積累了大量的自由基，而70%遮陽率在一定程度上緩解或解除了逆境脅迫，有利于盆景靈芝生長。另外，盆景靈芝處在成熟期時(shí)，體內(nèi)SOD活性均呈降低趨勢(shì)，這可能是由于盆景靈芝成熟后，體內(nèi)細(xì)胞呼吸作用逐漸減弱，逆境脅迫對(duì)其造成的影響逐漸變小，從而導(dǎo)致體內(nèi)SOD活性逐漸降低。

圖4 不同處理下盆景靈芝的SOD活性Fig. 4 SOD activity of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

2.5.2 CAT活性變化 CAT可將H2O2分解為O2和H2O，是一種重要的抗氧化酶。如圖5所示，隨著靈芝的生長發(fā)育，體內(nèi)CAT活性逐漸升高，在菌柄期達(dá)到峰值，然后急劇下降，到成熟期降至最低。不同處理間進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，在整個(gè)生長周期內(nèi)T2處理的CAT活性均最高，顯著高于其他處理，T3處理的CAT活性最低；且T2處理CAT活性在不同時(shí)期間的變幅也較大。在原基期、菌柄期、菌蓋期和成熟期，T2處理CAT活性較T3處理分別顯著提高68.41%、69.56%、62.50%和50.00%?？梢?，適度遮陽有利于提高盆景靈芝的CAT活性。

圖5 不同處理下盆景靈芝的CAT活性Fig. 5 CAT activity of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

2.5.3 POD活性變化 由圖6可知，POD活性的變化趨勢(shì)與SOD、CAT不同，在原基期，POD活性較低；到菌柄期逐漸下降；而到菌蓋期則急劇上升；之后至到成熟期又呈下降趨勢(shì)。在原基期、菌蓋期和成熟期均表現(xiàn)為T2處理的POD活性最高，顯著高于其他處理；T0處理最低。在菌柄期，T2處理的POD活性最高，與T1處理差異不顯著，但顯著高于T0和T3處理；T3處理最低?？梢姡诠馓幚韺?duì)盆景靈芝體內(nèi)POD活性有較大影響。

圖6 不同處理下盆景靈芝的POD活性Fig. 6 POD activity of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

2.6 光照強(qiáng)度對(duì)靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)MDA含量的影響

由圖7可知，在盆景靈芝整個(gè)生長發(fā)育過程中，其體內(nèi)MDA含量呈上升趨勢(shì)，在原基期最低，成熟期最高。從原基期到菌蓋期，靈芝體內(nèi)MDA含量表現(xiàn)為T3＞T0＞T1＞T2，且處理間均存在顯著差異；在成熟期，靈芝體內(nèi)MDA含量表現(xiàn)為T0＞T3＞T1＞T2，且T0和T3處理顯著高于T1和T2處理。在原基期，T3處理的MDA含量最高，T2處理最低，可見，在原基期時(shí)盆景靈芝需要較多的光照，過度遮陰對(duì)靈芝生長影響較大。綜上所述，過度遮陰和過度直曬都嚴(yán)重影響靈芝的生長發(fā)育，只有適度遮陰才能減緩光照強(qiáng)度對(duì)細(xì)胞膜的損傷，促進(jìn)靈芝生長發(fā)育。

圖7 盆景靈芝不同生長期MDA含量Fig. 7 MDA content of bonsai Ganoderma lucidum under different treatments

3 討論

3.1 光照強(qiáng)度對(duì)靈芝活性成分的影響

食用菌生長發(fā)育過程中，光照是重要的環(huán)境因素，食用菌不同種類或同一種類不同生長發(fā)育時(shí)期對(duì)光照條件的需求不同[18]。在靈芝栽培的發(fā)菌階段，光照過強(qiáng)不僅會(huì)抑制菌絲的生長，還會(huì)導(dǎo)致菌絲分泌色素體提前老化；而在靈芝子實(shí)體生長階段則需要適度的光照作為誘導(dǎo)。光強(qiáng)作為關(guān)鍵的環(huán)境因素之一，不僅影響靈芝子實(shí)體的形態(tài)特征，還對(duì)靈芝的生長發(fā)育和代謝物質(zhì)形成有著重要影響。袁學(xué)軍等[19]研究發(fā)現(xiàn)，靈芝中多糖、三萜和蛋白質(zhì)含量受光照強(qiáng)度影響較大，自然光照強(qiáng)度下蛋白質(zhì)含量較高、多糖含量較低，適度遮陽處理提高了三萜含量，降低了蛋白質(zhì)含量。孫恬等[20]通過覆蓋不同顏色的光膜來改變靈芝栽培大棚的光照強(qiáng)度，弱光照強(qiáng)度處理子實(shí)體的多糖和三萜含量顯著高于強(qiáng)光照處理。本研究通過覆蓋不同密度遮陽網(wǎng)研究了不同光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝生長發(fā)育及體內(nèi)活性成分含量的影響，結(jié)果顯示，無遮陽處理時(shí)靈芝子實(shí)體的多糖含量較低，可溶性蛋白含量較高；遮陽率為70%時(shí)多糖含量較高；遮陽率為90%時(shí)，三萜含量較低，與前人研究結(jié)果一致。由此可見，光照強(qiáng)度不僅影響靈芝的生長發(fā)育，還會(huì)影響靈芝內(nèi)次生代謝物含量。因此，明確具體的遮光度對(duì)于提高盆景靈芝性狀具有重要的理論和實(shí)踐意義。光照強(qiáng)度對(duì)靈芝生長發(fā)育的作用機(jī)制十分復(fù)雜，并受外部多種環(huán)境因素影響，其具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.2 光照強(qiáng)度對(duì)靈芝木質(zhì)素酶活性的影響

靈芝作為一種重要的白腐真菌，可分泌漆酶和錳過氧化物酶。漆酶不僅能夠降解環(huán)境中的木質(zhì)素，還具有聚合木質(zhì)素的作用，單獨(dú)存在時(shí)降解木質(zhì)素的效率較低，與錳過氧化物酶等共同作用才能實(shí)現(xiàn)較高的木質(zhì)素降解效率[21]。漆酶和錳過氧化物酶作為靈芝分泌的胞外酶，在靈芝生長發(fā)育過程中通過降解環(huán)境中的木質(zhì)素為靈芝提供營養(yǎng)成分，促進(jìn)靈芝的生長發(fā)育及形態(tài)建成。研究表明，在靈芝的生長過程中，只有胞外酶活性的動(dòng)態(tài)變化符合其生長發(fā)育規(guī)律才能使靈芝由菌絲體階段向子實(shí)體階段轉(zhuǎn)變[22]。光作為靈芝子實(shí)體生長階段重要的外部環(huán)境因素之一，不僅會(huì)影響靈芝子實(shí)體的活性代謝物質(zhì)，還對(duì)靈芝生理生化反應(yīng)具有調(diào)控作用，研究表明，當(dāng)光照條件適宜植物生長時(shí)，其木質(zhì)素酶活性較穩(wěn)定，當(dāng)光照條件對(duì)植物生長造成脅迫時(shí)，木質(zhì)素酶活性則發(fā)生較大變化，這種應(yīng)變性使植物能更好地適應(yīng)外部環(huán)境[23]。本研究通過覆蓋不同密度遮陽網(wǎng)研究了光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝不同生長時(shí)期體內(nèi)木質(zhì)素酶活性的影響，結(jié)果表明，光照強(qiáng)度對(duì)盆景靈芝子實(shí)體內(nèi)漆酶和錳過氧化物酶活性有顯著影響，隨著遮陽率的加重，錳過氧化物酶活性逐漸降低，而漆酶活性先升高后降低。其中漆酶在原基期時(shí)活性最低，然后急劇升高，在菌蓋期活性最高，到成熟期活性又顯著降低；而錳過氧化物酶在原基期活性最高，然后逐漸降低到菌柄期，到菌蓋期活性急劇降低，成熟期相對(duì)平穩(wěn)。綜上所述，過度光強(qiáng)和過度遮陽均會(huì)降低盆景靈芝子實(shí)體內(nèi)錳過氧化物酶和漆酶活性。

3.3 光照強(qiáng)度對(duì)靈芝抗氧化酶活性的影響

抗氧化酶系統(tǒng)是生物應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫時(shí)重要的防御體系，由超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、過氧化物酶（POD）等組成，能夠有效地緩解環(huán)境脅迫對(duì)其造成的損傷。為探討光照對(duì)靈芝抗氧化酶系統(tǒng)的影響，王立華等[24]研究發(fā)現(xiàn)不同光質(zhì)處理靈芝的抗氧化酶活性差異較大，綠光處理下POD活性變化較大，白光處理下CAT活性較高，黑暗處理下SOD活性較高；郝俊江[25]研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)色可使靈芝子實(shí)體維持較高的抗氧化酶活性水平。由此表明，靈芝生長需要一定的光照。然而這些研究主要集中于不同光質(zhì)對(duì)靈芝菌絲體、子實(shí)體生長的影響。本研究采用不同光照強(qiáng)度處理盆景靈芝，研究了其不同生育期抗氧化酶活性的變化，結(jié)果表明，不同光照強(qiáng)度處理下靈芝體內(nèi)抗氧化酶活性存在顯著差異，當(dāng)遮陽率為70%時(shí)，盆景靈芝體內(nèi)的SOD、CAT和POD活性均最高，可見，70%遮陽率時(shí)的光照強(qiáng)度對(duì)靈芝生長最有利，此時(shí)體內(nèi)活性氧積累較少，酶活性最高；另外，不同光強(qiáng)處理下，雖然靈芝體內(nèi)抗氧化酶活性在整個(gè)生長周期內(nèi)的變化規(guī)律基本保持一致，但酶活變化最大的節(jié)點(diǎn)卻出現(xiàn)在不同時(shí)期，這表明在靈芝子實(shí)體的生長過程中除光照強(qiáng)度對(duì)靈芝生長造成的影響之外，抗氧化酶活性可能還與子實(shí)體發(fā)育間存在某種內(nèi)在的調(diào)控機(jī)制。