5種殺菌劑對蠶豆赤斑病菌的室內(nèi)毒力測定及田間防效

張建榮,楊富位,馬生彪,呂昭龍,楊曉明,劉小娟,李繼平,鄭 果,王 立,惠娜娜

(1.靜寧縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心,甘肅靜寧 743400;2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所,蘭州 730070; 3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,蘭州 730070;4.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 作物研究所,蘭州 730070;5.定西市植保植檢站,甘肅定西 743000)

蠶豆集蔬菜、飼料及工業(yè)原料生產(chǎn)為一身,屬糧食、經(jīng)濟(jì)兼用型作物。中國是世界上蠶豆種植面積最大的國家,同時(shí)也是蠶豆消費(fèi)大國之一,僅2019年中國蠶豆市場需求量達(dá)190.26萬t[1],蠶豆主要在甘肅、青海、湖北、云南、四川等地種植[2]。甘肅是中國春播蠶豆種植的適宜區(qū),常年播種面積9.6萬hm2,約占全國春播蠶豆面積的40%左右[3]。蠶豆赤斑病(BotrytisfabaeonViciafaba)是一種毀滅性真菌病害,由灰葡萄孢(Botrytiscinerea)、蠶豆葡萄孢(Botrytisfabae)和擬蠶豆葡萄孢(Botrytisfabiopsis)3種病原菌引起[4-5]。據(jù)報(bào)道蠶豆赤斑病一旦發(fā)生,則貫穿蠶豆整個(gè)生育期,能減產(chǎn)5%～50%[6]。該病害主要靠風(fēng)雨傳播侵染,在低溫、多雨等條件下,病原菌容易侵入蠶豆葉片而致病,調(diào)查發(fā)現(xiàn)空氣濕度大,氣溫在18～22 ℃時(shí)病菌大量侵染,病葉病斑增多,病害加重[7-8]。蠶豆赤斑病菌侵染后葉片至莖稈出現(xiàn)紅色斑點(diǎn),由小及大,莢果上也會(huì)出現(xiàn)病斑,嚴(yán)重的甚至無莢果,直至植株發(fā)黑死亡[9]。

近年來,隨著全球氣候變化和人類活動(dòng)等各種因素的影響,蠶豆種植產(chǎn)區(qū)各種病蟲害問題日益凸顯,造成的產(chǎn)量損失非常嚴(yán)重[10],特別是蠶豆赤斑病呈逐年加重趨勢[11],尤其在感病品種上已經(jīng)成為影響產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素。目前,筆者在甘肅省靜寧縣蠶豆種植田分離出一種赤斑病病原菌,為蠶豆葡萄孢(Botrytisfabae),為此,本研究選用25%吡唑醚菌酯懸浮劑、225 g/L異菌脲懸浮劑、40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑、400 g/L嘧霉胺懸浮劑、43%腐霉利懸浮劑等5種殺菌劑,開展室內(nèi)毒力測定和田間藥效試驗(yàn),以期為當(dāng)?shù)匦Q豆赤斑病的防控提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)毒力測定

1.1.1 供試培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂13 g,加水定容至1 000 mL[12]。

1.1.2 供試菌株 蠶豆赤斑病蠶豆葡萄孢(Botrytisfabae),由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所經(jīng)濟(jì)作物病害研究室分離并保存。

1.1.3 供試藥劑 供試藥劑分別為;25%吡唑醚菌酯懸浮劑(北京中保綠農(nóng)科技集團(tuán)有限公司)、225 g/L異菌脲懸浮劑(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)、40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑(山東青島翰生生物科技股份有限公司)、400 g/L嘧霉胺懸浮劑(河北中保綠農(nóng)作物科技有限公司)、43%腐霉利懸浮劑(上海悅聯(lián)生物科技有限公司)。

1.1.4 試驗(yàn)方法 采用生長速率法進(jìn)行室內(nèi)毒力測定[13-16]。在預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上,用無菌水將5種藥劑分別稀釋成5個(gè)不同質(zhì)量濃度的母液,每種藥劑質(zhì)量濃度設(shè)定見表1,將母液分別加至50 ℃左右50 mL PDA培養(yǎng)基中,搖勻,平均倒入直徑為90 mm的3個(gè)培養(yǎng)皿中,備用,每個(gè)濃度重復(fù)3次,設(shè)置無菌水為空白對照(CK),置于25 ℃恒溫黑暗條件下培養(yǎng)5 d后,挑取菌落邊緣的菌絲轉(zhuǎn)接到PDA平板進(jìn)行純化,將純化好的參試菌株,用直徑為5 mm的打孔器打取菌餅,轉(zhuǎn)移至上述備用PDA平板上,25 ℃下恒溫培養(yǎng)7 d,用十字交叉法測量菌落生長直徑,以濃度的對數(shù)值(X)和平均抑制菌落生長百分率的機(jī)率值(Y)求取各種藥劑對參試菌株的毒力回歸方程Y= aX+b,并計(jì)算出決定系數(shù)(R2)、EC50值和95%置信區(qū)間等,從而比較供試殺菌劑對供試菌株的毒力大小,計(jì)算抑菌率,公式如下:

表1 供試藥劑濃度設(shè)定Table 1 Setting of concentration of test agent

抑菌率=[(對照菌落直徑-0.5)-(處理菌落直徑-0.5)]/(對照菌落直徑-0.5)×100%

1.2 田間藥效試驗(yàn)

1.2.1 試驗(yàn)地條件 試驗(yàn)地位于甘肅省靜寧縣司橋鄉(xiāng),海拔2 375.40 m,年平均氣溫為4～ 5 ℃,無霜期為120 d以上,年降水量400 mm以上,降水主要集中在7-9月,溫度適宜蠶豆赤斑病常年流行。土壤多為黃綿土,播種方式為機(jī)械覆膜人工點(diǎn)播,播種前撒施撒可富復(fù)合肥(中國-阿拉伯化肥有限公司,氮磷鉀占比均為15%) 40 kg和尿素(劉化(集團(tuán))有限責(zé)任公司)40 kg。

1.2.2 供試品種 試驗(yàn)蠶豆品種為凌西1寸 (日本)。

1.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 于蠶豆赤斑病發(fā)生初期施藥。試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)處理:25%吡唑醚菌酯懸浮劑2 000倍液、225 g/L異菌脲懸浮劑800倍液、40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑800倍液、400 g/L嘧霉胺懸浮劑 1 000倍液、43%腐霉利懸浮劑1 000倍液、清水對照(CK)。每個(gè)處理重復(fù)3次,每個(gè)小區(qū)15 m2,小區(qū)之間隨機(jī)排列。于2021-06-17第1次施藥,6月25日第2次施藥,7月13日第3次噴藥。施藥器械為徐州藍(lán)藝植保器械有限公司生產(chǎn)的3WBD-20L型背負(fù)式電動(dòng)噴霧器,工作壓力為 0.7 Mpa,均勻噴濕蠶豆葉片正反面、莖稈和 莢果。

1.2.4 調(diào)查方法和時(shí)間 施藥前進(jìn)行第1次病情調(diào)查,第3次藥后第7天進(jìn)行最后的病情調(diào)查,收獲期進(jìn)行產(chǎn)量調(diào)查。調(diào)查方法為每小區(qū)對角線5點(diǎn)取樣,每個(gè)點(diǎn)調(diào)查5株,調(diào)查全部葉片,以病斑面積占整個(gè)葉面積的百分率來分級(表2)。采用孫廣宇等[17]的方法計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。

表2 蠶豆赤斑病病害等級劃分標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Classification standard for broad bean red spot disease

病情指數(shù)=[∑(各級病葉數(shù)×相對級數(shù)值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×9)]×100

防治效果=[1-(CK0×PT1)/(CK1×PT0)]×100%

式中:CK0為空白對照區(qū)施藥前病情指數(shù);CK1為空白對照區(qū)施藥后病情指數(shù);PT0為藥劑處理區(qū)施藥前病情指數(shù);PT1為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

1.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法 室內(nèi)毒力測定數(shù)據(jù)和田間藥效試驗(yàn)數(shù)據(jù)分別采用Excel和SPSS 23.0分析各處理濃度的對數(shù)值(X)和菌絲生長抑制率幾率值(Y),求毒力回歸方程和決定系數(shù),比較各藥劑的EC50值,不同藥劑對蠶豆赤斑病的田間防效和對產(chǎn)量的影響用方差分析法進(jìn)行顯著性差異 分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定結(jié)果

從表3可見,225 g/L異菌脲懸浮劑和25%吡唑醚菌酯懸浮劑對蠶豆葡萄孢抑菌效果最好,EC50分別為0.172 1 μg/mL和2.534 0 μg/mL,43%腐霉利懸浮劑、400 g/L嘧霉胺懸浮劑和40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑的抑菌效果一般,EC50分別為3.828 0 μg/mL、5.858 1 μg/mL和7.348 1 μg/mL。

表3 5種殺菌劑對蠶豆赤斑病菌的毒力Table 3 Regression equations of five fungicides on growth inhibition of Botrytis fabae on Vicia faba

2.2 田間防治效果

5種殺菌劑對蠶豆赤斑病的田間防治效果表明(表4),第3次藥后第7天,25%吡唑醚菌酯懸浮劑2 000倍液對蠶豆赤斑病防治效果最好,防效為79.03%,顯著高于其他4種藥劑(P< 0.05);40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑800倍液和225 g/L異菌脲懸浮劑800倍液的防效分別69.31%、 68.93%,相互間防效差異不顯著,二者防效顯著高于400 g/L嘧霉胺懸浮劑1 000倍液和43%腐霉利懸浮劑1 000倍液的防效(依次為64.87%、61.08%)。

表4 5種殺菌劑對蠶豆赤斑病的田間防治效果Table 4 Field control effect of 5 fungicides on broad bean red spot disease

2.3 不同殺菌劑對蠶豆產(chǎn)量的影響

5種殺菌劑防治蠶豆赤斑病后對蠶豆產(chǎn)量均有較好的保產(chǎn)效果(表5),其中25%吡唑醚菌酯懸浮劑2 000倍液,百粒質(zhì)量為179.0 g,顯著高于其他4種藥劑(P<0.05),小區(qū)產(chǎn)量為 15.8 g,較對照增產(chǎn)5.60%,較225 g/L異菌脲懸浮劑800倍液處理差異不顯著,顯著高于其他處理;225 g/L異菌脲懸浮劑800倍液處理和40%嘧菌環(huán)胺懸浮劑800倍液百粒質(zhì)量分別為176.1 g、174.5 g,二者相互間差異不顯著,顯著高于400 g/L嘧霉胺懸浮劑1 000倍液和腐霉利懸浮劑 1 000倍液處理,小區(qū)產(chǎn)量分別為14.4 kg、13.8 kg,增產(chǎn)率分別為3.75%、2.94%,相互間差異不顯著。400 g/L嘧霉胺懸浮劑1 000倍液藥劑處理和43%腐霉利懸浮劑1 000倍液處理的百粒質(zhì)量分別為172.2 g和170.0 g,二者具有顯著差異,而小區(qū)產(chǎn)量二者差異不顯著。除腐霉利懸浮劑1 000倍液處理外,其他4個(gè)處理的百粒質(zhì)量、小區(qū)產(chǎn)量均顯著高于對照處理。

表5 不同殺菌劑對蠶豆產(chǎn)量的影響Table 5 Influence of different fungicides on broad bean yield'

3 討 論

本研究針對蠶豆赤斑病,開展了室內(nèi)毒力測定和田間藥效試驗(yàn),篩選出25%吡唑醚菌酯懸浮劑的抑菌活性和田間防效最好,并有較好的保產(chǎn)增產(chǎn)功效。湯云霞等[18]的研究表明,25%吡唑醚菌酯乳油2 000倍液噴施2次,末次藥后7 d對蠶豆赤斑病防效為55.70%,與本研究中噴施3次25%吡唑醚菌酯懸浮劑2 000倍液,7 d后的防效(79.03%)差距較大,這與施藥時(shí)期、施藥次數(shù)及施藥前的病情有關(guān),或與吡唑醚菌酯劑型有關(guān)。李龍等[19]報(bào)道,噴施50%異菌脲可濕性粉劑1 000倍液3次后,7 d后對蠶豆赤斑病防效為 68.80%。張敏[20]報(bào)道,噴施50%異菌脲懸浮劑1 000倍液3次后,9 d后蠶豆赤斑病防效為 67.60%?；九c本研究田間3次藥后7 d防效 (68.93%)一致,說明50%異菌脲可濕性粉劑(或懸浮劑)1 000倍液對蠶豆赤斑病防效比較穩(wěn)定,噴施3次后,7～9 d的防效基本達(dá)67%～69%。

本研究采用5種殺菌劑噴施防控蠶豆赤斑病,均具有一定的增產(chǎn)效果,且增產(chǎn)率隨蠶豆赤斑病防效提高而增加。據(jù)報(bào)道蠶豆赤斑病造成蠶豆感病品種產(chǎn)量損失高達(dá)61%,抗病品種產(chǎn)量損失達(dá)34%[21-22],因此可知,所選殺菌劑的增產(chǎn)功效主要源于減少病害的直接損失,嚴(yán)格意義上不是增產(chǎn)功效,而是保產(chǎn)功效。關(guān)于43%腐霉利懸浮劑1 000倍液處理,防治效果達(dá)到61.08%,但在產(chǎn)量指標(biāo)上和對照處理無顯著性差異和復(fù)配殺菌劑對蠶豆赤斑病的防效等這些現(xiàn)象有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。