蛋雞大腸桿菌病的診療和防治措施技術(shù)

王明月

中圖分類號(hào)：S856.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C文章編號(hào)：1673-1085（2023）06-0027-04

大腸桿菌病是家禽養(yǎng)殖中發(fā)病最多的一種細(xì)菌性傳染病，縱觀臨床上一些合并感染和繼發(fā)感染的病例，多數(shù)能從典型病變器官或組織中分離出大腸桿菌。大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，可感染任何日齡的蛋雞。大腸桿菌在自然環(huán)境和體內(nèi)普遍存在，當(dāng)?shù)半u受到環(huán)境衛(wèi)生差、飲水和飼料污染、換料、飼養(yǎng)密度過大、日糧營(yíng)養(yǎng)不足、通風(fēng)不良以及天氣突變、免疫應(yīng)激等刺激，產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，增加蛋雞大腸桿菌病的發(fā)生率。

目前臨床上原發(fā)性大腸桿菌少見，多為蛋雞感染沙門氏菌、馬立克氏病、支原體、新城疫、禽流感、雞傳染性支氣管炎、慢性呼吸道病等疾病，導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降而出現(xiàn)繼發(fā)性大腸桿菌病。雞大腸桿菌病對(duì)蛋雞養(yǎng)殖危害較大，在產(chǎn)蛋階段發(fā)生大腸桿菌，輕則影響產(chǎn)蛋，重則致死；種雞影響種蛋孵化率、出雛率以及健雛率低，引起巨大經(jīng)濟(jì)損失，因此做好診治和預(yù)防工作非常重要。

1 癥狀

出生雛雞感染大腸桿菌會(huì)引起臍炎、敗血癥、腸炎等，臨床可見雛雞臍部閉合不全，發(fā)炎紅腫，有血痂，腹部大，精神差，一般會(huì)在7 d內(nèi)死亡；另一種以腹瀉為主，糞便較稀，顏色灰白，有的呈綠色，食欲下降；病重者食欲廢絕，腹部腫脹、糊肛，突然倒地死亡；有的呼吸困難，最后衰竭致死。

蛋雞育雛階段和育成階段感染大腸桿菌，以混合感染和繼發(fā)感染為主，多數(shù)情況下會(huì)因應(yīng)激和合并其它疾病引起敗血癥、心包炎、肝周炎、氣囊炎等。發(fā)病后精神狀態(tài)變差，羽毛雜亂無光澤，雞冠萎縮、蒼白無血色，食欲差，嚴(yán)重的食欲廢絕，不愿活動(dòng)，體重減輕，排黃色或者白色的稀糞。

產(chǎn)蛋期的蛋雞很敏感，此階段感染大腸桿菌病，不僅引起產(chǎn)蛋性能下降，而且雞群死淘率增加，養(yǎng)殖戶損失重大。原因：一方面易受環(huán)境應(yīng)激和飼養(yǎng)管理粗放影響，大腸桿菌病以原發(fā)病為主；另一方面，一般是感染禽流感、新城疫等病毒性傳染病后繼發(fā)大腸桿菌，造成產(chǎn)蛋量不高，為60%～70%，產(chǎn)蛋高峰上不去、產(chǎn)蛋高峰維持時(shí)間短，產(chǎn)下的蛋大多為軟殼蛋、白皮蛋，癥狀嚴(yán)重的病雞在5 d內(nèi)死亡，死后腹部膨脹。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

雞繼發(fā)性大腸桿菌的診斷比較復(fù)雜，需要根據(jù)臨床表現(xiàn)和病理特點(diǎn)篩出引起特征性癥狀的疾病有哪些，然后根據(jù)血清學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)一一排除，找出致病的主要病原。蛋雞大腸桿菌病的診斷鑒定，根據(jù)臨床癥狀、病理剖檢，往往要與實(shí)驗(yàn)室技術(shù)相結(jié)合才能確診。實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)常用的有兩種，一種是最常見的細(xì)菌分離鑒定方法，另一種就是16S rRNA PCR鑒定方法，能夠快速診斷大腸桿菌。

2.1 細(xì)菌分離鑒定方法

2.1.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 確保取樣和接種過程在無菌條件下進(jìn)行。先取出患病蛋雞的肝、腎、心、脾，用接種環(huán)分別從上述病料切口處插入2～3 cm勾取少量，劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，做好標(biāo)記，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果。若在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上有菌落生長(zhǎng)，且呈灰白色或淡黃色圓形、半透明、表面光滑，可初步判定符合大腸桿菌菌落特征。

2.1.2 鑒別培養(yǎng) 將上述分離菌選2～3個(gè)典型的接種于麥康凱培養(yǎng)基和伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h。在麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)圓形的桃紅色菌落，且菌落中心顏色較周圍顏色深；在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上菌落為深紫色，帶有金屬光澤，可進(jìn)一步增加分離菌是大腸桿菌的可能性。

2.1.3 涂片鏡檢 將2.1.1和2.1.2分離的菌落涂片、革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察，為兩端粗短、中等大小的革蘭氏陰性桿菌，無莢膜或芽孢，符合大腸桿菌的形態(tài)特征。此時(shí)基本就可斷定分離菌為大腸桿菌。

2.1.4 生化鑒定 分離菌接種于蔗糖、葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇等糖發(fā)酵生化管、三糖鐵培養(yǎng)基、M.R試驗(yàn)、V.P試驗(yàn)等，37℃培養(yǎng)24～48 h。若發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、乳糖，且產(chǎn)酸；三糖鐵培養(yǎng)基底部變黃，有少量氣體；M.R試驗(yàn)陽(yáng)性，V.P試驗(yàn)陰性。根據(jù)伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)，生化特性符合大腸桿菌特征，可確診為大腸桿菌。

2.2 16S rRNA PCR鑒定方法

引物設(shè)計(jì)按照GenBank中公布的大腸桿菌16S rRNA通用引物設(shè)計(jì)，由專門的生物公司合成。使用試劑盒法提取細(xì)菌DNA，PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系和反應(yīng)條件可參考李蘊(yùn)玉等[1]或徐睿等[2]的文章，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠檢測(cè)目的條帶，將PCR產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定，測(cè)序結(jié)果與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中登錄基因序列進(jìn)行同源性分析，當(dāng)同源性為99%以上時(shí)，從分子生物學(xué)角度即證實(shí)分離菌株為大腸桿菌。

3 治療方法

一般采用中西結(jié)合的方式對(duì)患病雞群進(jìn)行藥物治療，治療同時(shí)要額外給病雞補(bǔ)充多種維生素，提高機(jī)體抵抗力，還要同步加強(qiáng)環(huán)境消毒和帶雞消毒強(qiáng)度，每天糞便一清，每隔3 d帶雞消毒一次，根據(jù)具體情況適時(shí)更換消毒藥。

3.1 抗生素治療

藥物仍是養(yǎng)雞生產(chǎn)上控制大腸桿菌的主要手段，但部分養(yǎng)殖戶用藥盲目，導(dǎo)致病情不見好轉(zhuǎn)。建議有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)一定在治療前進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，考慮本場(chǎng)飼養(yǎng)雞群日齡、經(jīng)濟(jì)條件、用藥史、發(fā)病程度，首選價(jià)廉質(zhì)優(yōu)、廣譜、高敏藥物進(jìn)行治療。常用的治療抗生素藥物和用法：阿莫西林，每升水60 mg，飲水給藥；氨芐西林60 mL配水1 L，飲水給藥；氟苯尼考1 g拌料2.5 kg，混勻拌料飼喂；丁胺卡那霉素6 mg/kg體重肌注；鹽酸多西環(huán)素1 g拌料1 kg，混勻拌料飼喂。以上五種藥物可選擇其中兩種交替使用，需連續(xù)用藥4 d。為鞏固療效，可多用藥2 d。

3.2 中草藥治療

中醫(yī)認(rèn)為蛋雞大腸桿菌病屬“疫疬”范疇，認(rèn)為其是因疫毒內(nèi)侵、肺胃熱盛、血瘀氣滯所引發(fā)的，因此在治療時(shí)要遵循清熱解毒、活血行氣的原則和要求，進(jìn)而達(dá)到清肺胃熱、涼血止痢的目的。蛋雞臨床上大部分都是繼發(fā)或混合感染，治療中要辨證施治。

治療時(shí)，可用加味三黃湯治療，取大黃20 g+黃芪30 g+黃連30 g，加入適量水煎熬成藥液去渣溫服，每只病雞服用10 mL，早晚各1次，連服3～5 d，治愈率高達(dá)95%以上?；蛑饕煞譃樵X子、魚腥草、穿心蓮、黃芩、白頭翁、金銀花提取物等組成的康養(yǎng)寶，500 g兌水4 000 kg，全天飲水，連用4 d；后期每隔一月飲一次，可有效預(yù)防大腸桿菌。

3.3 治療提醒

如果蛋雞反復(fù)出現(xiàn)用藥就好、停藥即犯的情況，并且開產(chǎn)還有軟殼蛋和白殼蛋、采食略低的情況，剖解死雞腸系膜發(fā)黑，肌胃發(fā)黑。說明前期治療沒有找到主要的病因，或者沒有消除原發(fā)病，因此會(huì)導(dǎo)致大腸桿菌病頻繁復(fù)發(fā)。這時(shí)要注意原發(fā)病因素，如霉菌及其毒素、溫和型流感、非典型新城疫等的影響。

4 預(yù)防措施

4.1 優(yōu)質(zhì)種源是基礎(chǔ)

優(yōu)質(zhì)的種源是保證后期大腸桿菌病少發(fā)的一個(gè)基礎(chǔ)。母雞體內(nèi)攜帶大腸桿菌，會(huì)通過蛋直接傳給下一代雛雞。因此，不要貪圖便宜，應(yīng)優(yōu)先從質(zhì)量可靠、信譽(yù)高、大腸桿菌凈化較好的種雞場(chǎng)選苗，不然后期增加藥費(fèi)和其它附帶的損失要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于少花的雞苗錢。

4.2 良好管理是核心

大腸桿菌是條件性致病菌，良好的飼養(yǎng)管理是保證該病少發(fā)的核心所在。采用全進(jìn)全出的飼養(yǎng)方法，可有效避免交叉感染；盡可能采用封閉式管理，減少或杜絕雞群與大腸桿菌的污染物接觸。及時(shí)做好防寒保暖和避暑工作，避免冷熱應(yīng)激，給產(chǎn)蛋雞營(yíng)造舒適的環(huán)境，保持最適舍內(nèi)溫度19～22℃、濕度65%左右。結(jié)合蛋雞日齡靈活調(diào)整密度，避免過度擁擠。保持圈舍安靜，減輕噪音應(yīng)激，確保蛋雞健康生長(zhǎng)。定時(shí)清理雞糞，保持場(chǎng)地整潔，糞便統(tǒng)一堆放發(fā)酵處理；時(shí)刻保持雞舍通風(fēng)良好，防止氨氣濃度升高損傷雞呼吸道黏膜。定期對(duì)場(chǎng)區(qū)道路、雞舍內(nèi)、器具等進(jìn)行徹底消毒，對(duì)種雞場(chǎng)孵化車間、設(shè)備、種蛋、水槽、料槽、墻面、地面等進(jìn)行全面消毒，降低蛋雞大腸桿菌發(fā)病概率。污染嚴(yán)重或常發(fā)病雞場(chǎng)適當(dāng)增加消毒頻次， 一般3～5 d要進(jìn)行一次徹底消毒。

4.3 均衡營(yíng)養(yǎng)的日糧和潔凈的飲水是關(guān)鍵

均衡營(yíng)養(yǎng)的日糧和潔凈的飲水是提高雞群體質(zhì)、保證大腸桿菌少發(fā)的關(guān)鍵措施。雞群采食劣質(zhì)、低水平、營(yíng)養(yǎng)成分不平衡的日糧，抵抗力便會(huì)下降，尤其蛋雞采食受污染的飼料，感染大腸桿菌的患病率更高。因此，加強(qiáng)飼料的采購(gòu)、貯存和加工等環(huán)節(jié)的衛(wèi)生管理，從源頭上防止飼料發(fā)霉、變質(zhì)，減少大腸桿菌的污染。結(jié)合蛋雞日齡，選優(yōu)質(zhì)預(yù)混料，合理配制日糧，保證營(yíng)養(yǎng)均衡，滿足蛋雞生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求，并提高蛋雞的體質(zhì)和抗病力。

飲水不潔是誘發(fā)蛋雞大腸桿菌病的另一重要因素，因此選擇自來水、深井水作為蛋雞飲用水源。定期監(jiān)測(cè)水質(zhì)，經(jīng)常清理水井、水塔和水箱等儲(chǔ)水設(shè)施以及輸水管道，用醛類、碘類等刺激性小的消毒劑適時(shí)消毒，尤其要注意除去水線里的生物膜。

4.4 投藥預(yù)防是難點(diǎn)

定期投藥是預(yù)防大腸桿菌一個(gè)不可缺少的有效措施，也是一個(gè)難點(diǎn)。要根據(jù)獸醫(yī)專家的建議，根據(jù)不同日齡、不同發(fā)病史和不同流行季節(jié)合理科學(xué)用藥，切不可濫用。冬季和春季是蛋雞大腸桿菌病的高發(fā)季節(jié)，養(yǎng)殖場(chǎng)戶應(yīng)在獸醫(yī)建議下結(jié)合飼養(yǎng)條件、發(fā)病情況制定可行的投藥預(yù)防計(jì)劃，定期給予高效價(jià)廉無殘留或低殘留的中西藥拌料或飲水預(yù)防細(xì)菌性疾病，同時(shí)每隔半個(gè)月給2～3 d的多種維生素，在飼料中長(zhǎng)期拌入雙歧桿菌、酵母菌、乳酸菌等微生態(tài)制劑，維持和有效調(diào)節(jié)蛋雞腸道菌群平衡，提升蛋雞抵抗力。注意預(yù)防性用藥和治療性用藥的區(qū)別，避免耐藥性發(fā)生。

4.5 免疫接種是保障

大腸桿菌有多種血清型，目前市場(chǎng)在售的大腸桿菌疫苗還做不到涵蓋每一個(gè)血清型，因此了解本地區(qū)流行的大腸桿菌血清型，接種適合本場(chǎng)大腸桿菌血清型的疫苗，結(jié)合本場(chǎng)實(shí)際制定完善的免疫程序，并嚴(yán)格執(zhí)行，可實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸桿菌病的有效防控。當(dāng)前常用疫苗包括大腸桿菌病滅活疫苗、大腸桿菌病多價(jià)蜂膠疫苗等，推薦使用大腸桿菌蜂膠二聯(lián)滅活疫苗，蛋雞在1～2月齡時(shí)首免，肌注0.5 mL；開產(chǎn)前復(fù)免，肌注0.5 mL。接種疫苗后1周內(nèi)產(chǎn)生抗體，免疫保護(hù)期為1年，確保整個(gè)產(chǎn)蛋周期內(nèi)均有較強(qiáng)的免疫力。對(duì)大腸桿菌已污染的雞場(chǎng)可以用本場(chǎng)分離的大腸桿菌菌株制作滅活菌苗進(jìn)行免疫接種。同時(shí)加強(qiáng)其它疾病的預(yù)防接種，防止繼發(fā)大腸桿菌感染。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李蘊(yùn)玉，葛成，焦賀靜，等.秦皇島地區(qū)育成雞大腸桿菌血清型鑒定及耐藥性分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2019，55 （08）：71-76.

[2] 徐睿，季芳，李夢(mèng)龍.雞致病性大腸桿菌16S rRNA PCR鑒定方法的建立[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2016（07）：1-5.