含揮發(fā)油飲片配方顆粒國家標準現(xiàn)狀與制定技術對策分析

趙劍鋒，張雪，祁進，宋宗華*

1.國家藥典委員會，北京 100061；

2.北京市藥品檢驗研究院，北京 102206

2021 年11 月1 日，為期27 年的中藥配方顆粒試點工作結束，由國家藥品監(jiān)督管理局頒布的首批160 個中藥配方顆粒國家標準同步實施。截至目前，國家藥品監(jiān)督管理局已分2批頒布了196個中藥配方顆粒的國家標準，其中連翹（青翹）、蒼術（北蒼術）、荊芥、肉桂、薄荷與其他飲片配方顆粒在制法上存在一定差異，除煎煮、濃縮、干燥、制粒等共有工序外，還涉及揮發(fā)油提取及包合工序。揮發(fā)油是廣泛存在于中藥中的一類重要揮發(fā)性物質(zhì)，在抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗病毒等方面均具有一定的作用，是中藥發(fā)揮療效的重要物質(zhì)基礎[1]。為了盡量減少揮發(fā)油的損失，中醫(yī)臨床煎煮富含揮發(fā)油的飲片時通常采取“后下”方式，縮短煎煮時間以最大化地保留揮發(fā)油成分；中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)過程中通常采用包合等制劑工藝來增加揮發(fā)油的穩(wěn)定性，減少揮發(fā)油的揮發(fā)[2]。中藥配方顆粒的提取媒介為水，僅有少數(shù)中藥飲片的煎液中能夠提取出一定量的揮發(fā)油，在大生產(chǎn)過程中，如果不單獨提取一定量揮發(fā)油并對其進行包合，經(jīng)過提取、濃縮、干燥、制粒等操作，揮發(fā)油在中藥配方顆粒中難以保留。此外，受中藥飲片質(zhì)量、生產(chǎn)設備及工藝等的影響，不同企業(yè)生產(chǎn)的中藥配方顆粒中揮發(fā)油的含量及配比可能存在一定差異[3]。因此，含有揮發(fā)油的飲片配方顆粒國家標準從制定之初就備受關注，企業(yè)及科研院所也將其質(zhì)量控制作為研究重點[4-7]。本文結合《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標準制定技術要求》（以下簡稱技術要求）中含揮發(fā)油飲片配方顆粒相關要求[8]，對揮發(fā)油在中藥配方顆粒國家標準中的現(xiàn)狀及質(zhì)量控制進行對比分析，重點針對什么情況需要收集揮發(fā)油、揮發(fā)油加入量，以及如何控制中藥配方顆粒中揮發(fā)油含量等問題進行探討，以期為更好地制定含有揮發(fā)油飲片配方顆粒國家標準提供參考。

1 何種飲片配方顆粒需要收集揮發(fā)油

目前，中藥配方顆粒標準制定的主要依據(jù)是國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的技術要求，其中“對于中藥飲片標準中規(guī)定有揮發(fā)油含量測定項目的以及中醫(yī)臨床處方規(guī)定‘后下’的含揮發(fā)油成分的中藥飲片，其煎煮液應采用適宜的揮發(fā)油含量測定方法測定煎煮液中揮發(fā)油含量”[8]。通過對比目前頒布的5 個含揮發(fā)油飲片配方顆粒的國家標準，發(fā)現(xiàn)連翹、荊芥、肉桂、薄荷均收載于《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）2020 年版（一部），且品種項下設置了揮發(fā)油含量測定項目，并規(guī)定了含量下限[9]。此外，在中醫(yī)臨床處方中規(guī)定荊芥、肉桂、薄荷“后下”，企業(yè)根據(jù)技術要求對連翹、荊芥、肉桂、薄荷標準煎液揮發(fā)油進行了表征，并將表征結果轉(zhuǎn)移到大生產(chǎn)實際工藝中，在標準制法項收集一定量的揮發(fā)油。蒼術（北蒼術）同樣收載于《中國藥典》2020 年版（一部），品種項下未對揮發(fā)油含量限度進行規(guī)定，其也不是中醫(yī)臨床處方中“后下”的品種，但是蒼術（北蒼術）配方顆粒標準制法項下規(guī)定了揮發(fā)油工序（表1）。目前，對蒼術（北蒼術）化學成分的研究主要集中在揮發(fā)油方面，其揮發(fā)油中主要含有蒼術素、茅術醇和桉葉醇等成分，具有抗炎、抑制小腸蠕動和利尿等作用[10-11]。企業(yè)在對蒼術（北蒼術）標準煎液研究時發(fā)現(xiàn)，如果蒼術（北蒼術）配方顆粒中不加入煎煮過程中同時收集的一定量揮發(fā)油，可能會影響其中蒼術素的含量，甚至有可能影響蒼術（北蒼術）配方顆粒的療效。因此，企業(yè)對蒼術（北蒼術）飲片標準煎液揮發(fā)油進行了收集和表征，蒼術（北蒼術）配方顆粒制法項下同時收集了揮發(fā)油。

表1 已頒布5個含揮發(fā)油飲片配方顆粒標準對比情況

此外，筆者發(fā)現(xiàn)即使《中國藥典》2020 年版中部分品種飲片項下明確規(guī)定了揮發(fā)油限度，但是相應的配方顆粒標準中卻未提取、收集揮發(fā)油。例如，《中國藥典》2020 年版規(guī)定，干姜揮發(fā)油質(zhì)量分數(shù)測定不得少于0.8%，但是干姜標準煎液中揮發(fā)油含量非常低，甚至提取不到。因此，干姜配方顆粒制法項下未同時收集干姜揮發(fā)油。揮發(fā)油也并不一定都是有效成分，甚至有一定毒性[12]，如《中國藥典》2020 年版細辛藥材項下收載了揮發(fā)油含量測定項目，但是據(jù)文獻研究表明細辛揮發(fā)油具有一定毒性[13-14]，因此在細辛配方顆粒標準煎液研究中，即使其中能提取出一定量揮發(fā)油，也不再考慮收集揮發(fā)油加入清膏中，以此降低細辛配方顆粒的毒性。這類品種在未來中藥配方顆粒標準研究中應予以重視，是未來中藥配方顆粒標準研究中值得重點關注的問題。

2 含揮發(fā)油配方顆粒標準中揮發(fā)油加入量的確定

技術要求中明確“對于中藥飲片含揮發(fā)油且其傳統(tǒng)煎煮需‘后下’的，商業(yè)規(guī)模生產(chǎn)時可先行提取揮發(fā)油，然后按‘標準湯劑’中揮發(fā)油含量轉(zhuǎn)移率范圍，計算出揮發(fā)油加入量，按比例重新加入?！盵8]為提高中藥配方顆粒中揮發(fā)油的含量與穩(wěn)定性，目前含揮發(fā)油飲片配方顆粒均采用環(huán)糊精對揮發(fā)油進行包合，盡量與標準湯劑中揮發(fā)油限度保持一致。從已頒布的5 個含揮發(fā)油飲片的中藥配方顆粒標準比較來看，連翹（青翹）和蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒揮發(fā)油加入量最為明確，制粒連翹配方顆粒1000 g 需加入同時收集的揮發(fā)油0.7 mL；蒼術（北蒼術）配方顆粒制法項下規(guī)定：揮發(fā)油加入量為飲片量（每生產(chǎn)配方顆粒1000 g 需投料飲片2700 g）的0.04%，即需加入揮發(fā)油1.08 g。由于連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）配方顆粒國家標準均未設置揮發(fā)油含量測定項目，因此在制法項下明確了揮發(fā)油具體用量。荊芥配方顆粒、肉桂配方顆粒、薄荷配方顆粒國家標準制法均未明確揮發(fā)油加入量，不同企業(yè)根據(jù)實際生產(chǎn)工藝確定揮發(fā)油加入量。

目前，不同中藥配方顆粒企業(yè)生產(chǎn)設備、生產(chǎn)工藝均存在差異，對揮發(fā)油提取和包合都有一定的影響。各企業(yè)應結合實際生產(chǎn)情況，對標準煎液揮發(fā)油含量及包合、干燥等工藝影響因素進行考察，從而確定揮發(fā)油加入量。連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）配方顆粒中揮發(fā)油加入量也應當根據(jù)不同企業(yè)工藝適當調(diào)整，而并非明確具體用量，但前提是應該通過含量測定等方法控制中藥配方顆粒中揮發(fā)油的質(zhì)量。本文以薄荷配方顆粒為例，介紹了含揮發(fā)油飲片配方顆粒國家標準中揮發(fā)油加入量的確定過程。企業(yè)提供的薄荷標準湯劑數(shù)據(jù)顯示，18 批薄荷標準湯劑揮發(fā)油質(zhì)量分數(shù)實測值為0.075%～0.250%（以飲片量計，mL·g–1），均值為0.133%；以出膏率計揮發(fā)油質(zhì)量分數(shù)為0.25%～1.01%，均值為0.58%，揮發(fā)油轉(zhuǎn)移率實測值為9.38%～33.78%，均值為17.90%（表2）。企業(yè)結合標準湯劑關鍵參數(shù)及包合工藝中包合率、包合產(chǎn)率，取飲片量相當?shù)膿]發(fā)油，用β-環(huán)糊精等配料包合，形成包合物。

表2 18批薄荷標準湯劑中揮發(fā)油含量及轉(zhuǎn)移率

3 中藥配方顆粒中揮發(fā)油質(zhì)量控制現(xiàn)狀

揮發(fā)油是中藥發(fā)揮療效的一類重要活性成分，但其含量低且提取過程影響因素眾多，因此是中藥質(zhì)量控制的難題之一[15]?！吨袊幍洹?020年版（四部）收載了揮發(fā)油測定法（通則2204），采用水蒸氣蒸餾法直接從煎煮液中蒸餾出揮發(fā)油，通過讀取揮發(fā)油量計算揮發(fā)油的含量，根據(jù)揮發(fā)油相對密度分為甲法和乙法[16]。為了更好地控制中藥制劑中揮發(fā)油質(zhì)量，《中國藥典》2020 年版（一部）收載了指紋圖譜及氣相色譜法含量測定等方法。近年來，氣相色譜法在含揮發(fā)油的中藥質(zhì)量控制應用中也越來越普及[17-19]。目前，中藥配方顆粒國家標準揮發(fā)油質(zhì)量控制主要應用《中國藥典》2020 年版中收載的揮發(fā)油測定法。荊芥、肉桂及薄荷飲片配方顆粒在制法項下均未明確揮發(fā)油加入量，但是在含量測定項下規(guī)定了揮發(fā)油含量的上、下限。連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒在制法項下均明確了揮發(fā)油加入量，但由于配方顆粒生產(chǎn)過程中加入揮發(fā)油量過少，導致容量法測定配方顆粒中揮發(fā)油含量需較大樣本量，因此在含量測定項未制定揮發(fā)油含量測定方法。為防止中藥配方顆粒出現(xiàn)揮發(fā)油添加量不足或者不添加等問題，對中藥配方顆粒國家標準制法項明確加入揮發(fā)油的應當采用適當技術方法對其質(zhì)量進行合理控制。例如，研究發(fā)現(xiàn)蒼術（北蒼術）煎液中蒼術素與揮發(fā)油含量存在一定的相關性，因此，對蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒中蒼術素進行含量測定的同時，還可以達到間接控制蒼術（北蒼術）中揮發(fā)油含量的目的。據(jù)文獻報道，連翹揮發(fā)油具有重要的生物活性，可以探索采用有機溶劑萃取結合氣相色譜-質(zhì)譜法對連翹揮發(fā)油中某種相對穩(wěn)定的成分（如β-蒎烯）進行含量測定，實現(xiàn)對連翹配方顆粒中揮發(fā)油的間接控制[20]。

揮發(fā)油在中藥配方顆粒中的作用應當引起重視。在以標準湯劑為基準衡量的基礎上，應當堅持“傳承精華、守正創(chuàng)新”，在中醫(yī)藥理論指導下，將相關科研成果轉(zhuǎn)化為中藥配方顆粒國家標準，通過現(xiàn)代科學技術應用更合理地開展含揮發(fā)油飲片配方顆粒標準的制定工作。但在現(xiàn)有科學證據(jù)不充足的條件下，應當堅持中醫(yī)臨床用藥特點，重點關注中藥飲片標準中規(guī)定有揮發(fā)油含量測定項目的及中醫(yī)臨床處方規(guī)定“后下”的含揮發(fā)油成分的中藥飲片，堅持以標準湯劑為核心依據(jù)，按照“應加盡加”的原則，盡量還原中藥傳統(tǒng)煎煮工藝。國家藥典委員會應當進一步發(fā)揮國家藥品標準引領作用，適時制定含有揮發(fā)油飲片配方顆粒質(zhì)量控制指導原則，持續(xù)引導企業(yè)發(fā)揮國家藥品標準制定主體作用[21]，加強飲片標準煎劑研究、完善生產(chǎn)工藝、健全含有揮發(fā)油配方顆粒質(zhì)量控制體系、制定揮發(fā)油內(nèi)控標準，逐步完善含揮發(fā)油飲片配方顆粒國家藥品標準，確保中藥配方顆粒國家藥品標準可以更好地服務于產(chǎn)業(yè)發(fā)展。