豬脾轉(zhuǎn)移因子對肉雞免疫效果的影響研究

程征　王永強　錢明珠　王海棚

關(guān)鍵詞：豬脾轉(zhuǎn)移因子；肉雞；免疫

我國是養(yǎng)禽業(yè)大國，禽的飼養(yǎng)量、出欄量和人均消耗量已連續(xù)多年位居世界首位。隨著養(yǎng)禽業(yè)的不斷擴大，疾病已成為困擾禽業(yè)健康生產(chǎn)的重要因素。隨著人們健康意識的不斷提高，綠色環(huán)保藥物已成為動物疾病防治的首選。轉(zhuǎn)移因子（Transfer Factor，TF） 是T淋巴細胞所釋放的一類小分子物質(zhì)。TF攜帶有致敏淋巴細胞的特異性免疫信息，在受者體內(nèi)能夠誘導T細胞轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋灾旅袅馨图毎虼耍軌蛱禺愋缘貙⒐┱叩募毎庖弑粍拥剞D(zhuǎn)移到受者體內(nèi)，使受者獲得特異性細胞免疫功能，即轉(zhuǎn)移和擴大細胞的免疫力。被廣泛應用于人與動物病毒病、細菌病、真菌病和寄生蟲病乃至腫瘤等疫病的預防和治療，還可提高弱毒疫苗和滅活疫苗免疫后的抗體水平[1]。

一、試驗材料與方法

（一） 試驗材料

豬脾轉(zhuǎn)移因子為河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學院牧業(yè)工程學院實驗室制作。其制作過程為：取成年健康豬的新鮮脾臟，用純凈蒸餾水清洗血跡和污漬，剝掉系膜、脂肪等結(jié)締組織，以滅菌生理鹽水沖洗3～5次，剪碎或用機器絞碎，加1～2倍滅菌生理鹽水混勻，倒入滅菌容器內(nèi)，在－20℃左右凍存，反復凍融3～5次（反復凍融是將組織有效成份全部釋解出來），融化溫度不超過37℃，然后離心取上清液，將上清液倒入透析袋中透析，兌入體積比為1∶2 的滅菌生理鹽水，透析48～72h，收集透析液即為轉(zhuǎn)移因子原液，滅菌、分裝、冷藏備用。其制作嚴格按照《中國生物制品規(guī)程》進行無菌檢驗、熱源檢驗和過敏試驗，并且檢驗結(jié)果均為陰性，所制備的豬脾轉(zhuǎn)移因子可以用于臨床試驗[2]。

（二） 試驗雞群分組

試驗在商丘市寧陵縣某肉雞廠進行，2020年4月6日新進一批雛雞，品種為艾維因白羽肉雞，飼養(yǎng)方式為籠養(yǎng)。為保證試驗數(shù)據(jù)的真實性和可對比性，本次試驗的3000只肉雞均為同一批次、同一棟雞舍的雞群。即同日齡、同品種，其他飼養(yǎng)條件完全相同。

（三） 試驗方法

本試驗在肉雞的一個完整飼養(yǎng)周期內(nèi)進行，對照組A按肉雞群正常免疫程序進行免疫（見表1），實驗組B1除正常免疫程序外，加入1份量TF，通過飲水的方式進行免疫接種，實驗組B2除正常免疫程序外，加入0.5份量TF，通過飲水的方式進行免疫接種。

（四） 試驗數(shù)據(jù)處理及分析

采用Excel 2007數(shù)據(jù)分析工具進行單因素方差分析，并用Duncan氏新復極差法進行多重復比較分析，所有測定結(jié)果用平均值和標準誤來表示。

二、結(jié)果與分析

（一） ND、IB、IBD抗體檢測

為進一步證實轉(zhuǎn)移因子在肉雞生產(chǎn)中的作用，尤其對疫苗免疫增效效果，對上述三組雞群同時進行ND （新城疫）抗體檢測、IB（傳染性支氣管炎） 抗體檢測、IBD（傳染性法氏囊） 抗體檢測，分別于14日齡、21日齡、28日齡、35日齡在三組雞群中隨機采血取樣，進行以上抗體效價檢測，檢測結(jié)果見表2、表3和表4（A組為正常免疫；B1組為正常免疫加1 份量TF 飲水；B2 組為正常免疫加0.5 份量TF 飲水；表中數(shù)值為平均值±標準差）。

（二） 雞脾臟、法氏囊重量測定

出欄時隨機抽取對照組A和實驗組B1、B2各6只體重和體型均等的肉雞，其活體重在2.5～2.7kg，宰殺后取其脾臟和法氏囊，立即稱重，結(jié)果見表5和表6。

（三） 試驗表觀效果統(tǒng)計

三組雞群試驗過程中，除抗體水平、抗病力有所不同，其他表觀現(xiàn)象也有明顯差別，分別從出欄時間、平均體重、料肉比、成活率等方面進行比較（見表7）。

三、結(jié)論與討論

由表2、表3和表4得出，試驗組B1和B2在ND抗體檢測、IB抗體檢測、IBD抗體檢測中顯著高于對照組A，差異顯著（P＜0.05），試驗組B1 和試驗組B2 之間差異不顯著（P＞0.05），試驗組的抗體效價明顯高于對照組，證明轉(zhuǎn)移因子具有免疫增效作用，可提高其抗體水平。實驗組B1和試驗組B2的數(shù)據(jù)也說明TF與疫苗聯(lián)合使用時，TF的劑量與抗體效價有一定關(guān)系，但不完全是正相關(guān)。徐磊等研究了豬脾轉(zhuǎn)移因子提高LaSota株雞新城疫弱毒疫苗的免疫保護率，結(jié)果表明，TF 可增強IFN－γ、IL－12 介導的細胞免疫和IL－4介導的體液免疫，提高LaSota株弱毒疫苗的免疫保護率，降低疫苗PD50，在抵抗NDV F48E9強毒攻擊時，聯(lián)合免疫組的免疫保護率明顯高于單獨免疫組[3]。

由表5和表6中的數(shù)據(jù)可以看出，實驗組B1、B2組雞脾臟、法氏囊的重量明顯高于對照組A， 差異顯著（P＜0.05）；且實驗組B1、B2組雞只的脾臟、法氏囊重量有一定差異，但差異不顯著（P＞0.05），說明TF對免疫器官有刺激作用，對其增重作用比較明顯。由表7可知，三組雞群同時在42d出欄，用料量相差不大，出欄總重量差別較大，其中，B1組與A組相差185.8kg，B2組與A組相差157.3kg，B1組與B2組相差28.5kg，顯然，實驗組B1、B2的經(jīng)濟效益明顯大于對照組A。說明在肉雞不同免疫時間添加轉(zhuǎn)移因子，對提高雞群整齊度，提高肉雞成活率和日增重等效果明顯。王樹平等對出欄時綜合比較發(fā)現(xiàn)，TF試驗組與對照組相比具有明顯的促生長和抗病作用[4]。

總之，TF可刺激免疫器官增長，增強免疫效果，提高免疫抗體水平，降低傳染病發(fā)生率，達到增加養(yǎng)殖效益的目的，在家禽疾病防治中可以作為疫苗的免疫佐劑。TF對于目前抗體不足或者抗生素無法有效控制的傳染病及免疫缺陷疾病的預防都有重要作用，可以提高肉雞的細胞免疫水平和體液免疫水平[5]。TF來源廣泛，在臨床上可應用于各種動物，無藥物殘留、無抗原性、無毒副作用、無種屬特異性，屬新型而又安全的免疫制劑。

作者簡介：程征（1977-），男，河南南陽人，碩士，講師，研究方向：臨床獸醫(yī)。