• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    枳漆酶基因家族鑒定及其響應(yīng)鹽脅迫的表達(dá)分析

    2023-06-04 11:08:28徐小勇顧銘洲梁夢(mèng)鴿姜麗娟
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年9期
    關(guān)鍵詞:鹽脅迫進(jìn)化樹(shù)

    徐小勇 顧銘洲 梁夢(mèng)鴿 姜麗娟

    摘要:漆酶(LAC)是植物木質(zhì)素生物合成中催化木質(zhì)素單體聚合的關(guān)鍵酶,在調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和脅迫響應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。對(duì)枳漆酶基因家族進(jìn)行鑒定和分析,并探究其在鹽脅迫下的表達(dá)模式,可為進(jìn)一步研究枳漆酶基因功能提供重要的參考信息。采用生物信息學(xué)手段鑒定枳漆酶基因家族成員,對(duì)其家族成員的理化性質(zhì)、基因結(jié)構(gòu)、系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系、啟動(dòng)子順式作用元件等進(jìn)行分析,并通過(guò)qRT-PCR方法分析其鹽脅迫表達(dá)模式。結(jié)果表明,枳基因組中共有20個(gè)LAC基因家族成員,其中18個(gè)分布在5條已知染色體上,2個(gè)分布在未知染色體上,被預(yù)測(cè)定位到細(xì)胞膜和細(xì)胞核中;共有6~14個(gè)外顯子,5~13個(gè)內(nèi)含子,9~11個(gè)motif;系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示,20個(gè)枳LAC基因家族成員與17個(gè)擬南芥LAC基因家族成員共分成7個(gè)亞組,20個(gè)枳LAC基因家族成員分布在其中的6組;20個(gè)枳LAC基因家族成員與擬南芥LAC基因間存在19對(duì)共線(xiàn)性關(guān)系;啟動(dòng)子區(qū)域含有24種順式作用元件,其中厭氧誘導(dǎo)元件、干旱響應(yīng)元件和茉莉酸甲酯響應(yīng)元件數(shù)量最多;16個(gè)枳LAC基因在鹽脅迫下顯著上調(diào)表達(dá),推測(cè)枳漆酶基因參與了鹽脅迫響應(yīng)。

    關(guān)鍵詞:枳;漆酶基因;進(jìn)化樹(shù);順式作用元件;鹽脅迫

    中圖分類(lèi)號(hào):S188+.3??文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A??文章編號(hào):1002-1302(2023)09-0052-08

    基金項(xiàng)目:國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(編號(hào):2018YFD1000107);江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào):CX(21)3024]。

    作者簡(jiǎn)介:徐小勇(1979—),男,江西奉新人,博士,副教授,主要從事果樹(shù)生物技術(shù)研究。E-mail:xyxu@yzu.edu.cn。

    漆酶(Laccase,LAC,EC 1.10.3.2)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,可催化酚類(lèi)等多種底物的氧化,并將氧氣還原成水[1]。漆酶最早在1883年由日本學(xué)者Yoshida從漆樹(shù)的漆液中發(fā)現(xiàn)[2],之后在細(xì)菌、真菌、昆蟲(chóng)和其他植物中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)[3]。已有研究發(fā)現(xiàn),漆酶參與植物細(xì)胞壁木質(zhì)素生物合成途徑的最后階段,即木質(zhì)素單體的聚合[4]。因此,漆酶在植物生長(zhǎng)發(fā)育、生物和非生物脅迫響應(yīng)中具有重要的調(diào)控作用[4]。

    漆酶由多基因編碼,隨著眾多植物基因組數(shù)據(jù)的公布,不少物種已經(jīng)完成了漆酶基因家族的鑒定。例如,在模式植物擬南芥中,17個(gè)漆酶基因被鑒定出來(lái),其中AtLAC4、AtLAC11和AtLAC17與木質(zhì)素合成有關(guān)[5-6];在水稻(Oryza sativa)基因組中,共有30個(gè)LAC[7];在柳枝稷草(Panicum virgatum)中共鑒定出49個(gè)LAC[8];在梨(Pyrus bretschneideri)中共鑒定出40個(gè)LAC[9];在茶樹(shù)(Camellia sinensis)中共鑒定出43個(gè)LAC[10];在荔枝(Litchi chinensi)中共鑒定出61個(gè)LAC[11];在桃(Prunus persica)、茄(Solanum melongena)中皆鑒定出48個(gè)LAC[12-13]。值得注意的是,漆酶基因在逆境脅迫中的作用正獲得越來(lái)越多的關(guān)注。一般而言,漆酶基因在脅迫下會(huì)富集表達(dá),特別是在鹽脅迫條件下。例如,玉米ZmLAC1、擬南芥AtLAC2、水稻OsChI1和胡蘿卜DcLAC1在鹽脅迫下都顯著上調(diào)表達(dá),而過(guò)表達(dá)漆酶基因能提高植物的耐鹽性[14-17]。

    柑橘是世界第一大果樹(shù),也是我國(guó)栽培面積最大、經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的果樹(shù)。然而柑橘以露地栽培為主且對(duì)環(huán)境條件要求較高,易受多種生物、非生物逆境脅迫的影響,極大程度地限制了我國(guó)柑橘產(chǎn)業(yè)的良性健康發(fā)展。因此,亟待開(kāi)展柑橘抗逆基因挖掘與鑒定研究[18-21]。枳是蕓香科枳屬小喬木,具有抗寒、抗旱、適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),是我國(guó)目前應(yīng)用最多、最廣的柑橘砧木。本研究根據(jù)已公布的枳基因組數(shù)據(jù)[22],采用生物信息學(xué)手段鑒定枳漆酶基因家族成員,分析其理化特征、基因結(jié)構(gòu)、系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系、啟動(dòng)子順式作用元件和鹽脅迫表達(dá)模式,以期挖掘與鹽脅迫響應(yīng)相關(guān)的漆酶基因,為枳LAC基因功能研究提供理論基礎(chǔ)。

    1?材料與方法

    1.1?試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

    本試驗(yàn)于2022年3月在揚(yáng)州大學(xué)園藝園林學(xué)院實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成。

    1.2?枳漆酶基因家族的鑒定

    枳(Poncirus trifoliata L.)基因組序列、蛋白質(zhì)序列及其注釋信息均下載自CPBD數(shù)據(jù)庫(kù)(http://citrus.hzau.edu.cn/)。從植物參考基因組數(shù)據(jù)庫(kù)Ensembl(http://plants.ensembl.org)中下載擬南芥的基因組相關(guān)數(shù)據(jù)(基因組序列和注釋信息)。

    以擬南芥的17個(gè)LAC蛋白序列作為查詢(xún)序列,設(shè)置檢索閾值(E-value)為10-5,通過(guò)TBtools軟件的BLAST功能搜索枳蛋白數(shù)據(jù)庫(kù),獲得候選枳LAC蛋白序列,通過(guò)NCBI、SMART數(shù)據(jù)庫(kù)(http://smart.embl-heidelberg.de/)進(jìn)行蛋白保守結(jié)構(gòu)域的鑒定。通過(guò)在線(xiàn)工具Expasy-ProtParam(https://web.expasy.org/protparam/)對(duì)枳LAC基因家族成員進(jìn)行蛋白質(zhì)理化性質(zhì)預(yù)測(cè)。使用在線(xiàn)軟件Plant-mPLoc(http://www.csbio.sjtu.edu.cn/bioinf/plant-multi/)對(duì)枳LAC蛋白家族進(jìn)行亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)。

    1.3?枳LAC基因家族基因結(jié)構(gòu)和motif 分析

    通過(guò)在線(xiàn)工具M(jìn)EME(https://meme-suite.org/meme/tools/meme)進(jìn)行motif分析,motif數(shù)目設(shè)置為10個(gè),其他均為默認(rèn)值,利用TBtools軟件對(duì)基因結(jié)構(gòu)和motif數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化作圖。

    1.4?枳和擬南芥LAC基因家族的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析

    使用枳、擬南芥的LAC蛋白序列,用Mega X進(jìn)行多序列比對(duì),并用最大似然法(Maximum likelihood,ML)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù),Bootstrap參數(shù)設(shè)置為1 000,其他參數(shù)選擇默認(rèn)值。用Evolview在線(xiàn)軟件對(duì)系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)進(jìn)行編輯和美化。

    1.5?枳和擬南芥LAC基因家族的共線(xiàn)性分析

    用MCScanX 程序?qū)﹁?、擬南芥的基因組信息進(jìn)行比對(duì),并通過(guò)TBtools軟件的Multiple SystenyPlot工具分析其共線(xiàn)性關(guān)系。

    1.6?枳LAC基因啟動(dòng)子順式作用元件分析

    選取枳LAC基因轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)上游2 000 bp的序列作為啟動(dòng)子區(qū)域,利用在線(xiàn)工具PlantCARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)獲得每個(gè)枳LAC基因啟動(dòng)子區(qū)域中所有的順式作用元件,并篩選出重要的響應(yīng)元件,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    1.7?植物材料和鹽脅迫處理

    選擇發(fā)育一致的45日齡枳幼苗,將幼苗在含有300 mmol/L氯化鈉的溶液中進(jìn)行鹽脅迫處理,處理后0~5 d采收根系。所有樣本直接收集到液氮中,于-80 ℃保存,直至提取RNA。每個(gè)試驗(yàn)設(shè)3個(gè)生物學(xué)重復(fù),每個(gè)重復(fù)采5株幼苗樣品。

    1.8?RNA提取和qRT-PCR檢測(cè)

    采用乙二胺四乙酸(EDTA)法提取總RNA,用凝膠電泳和生物分析儀檢測(cè)RNA質(zhì)量,用TransScript逆轉(zhuǎn)錄酶(TaKaRa公司產(chǎn)品),具體操作參照制造商的說(shuō)明書(shū)。qRT-PCR的基因特異性引物序列見(jiàn)表1。以2 μL cDNA為模板,用SYBR Premix Ex TaqTMⅡ Plus (2×)(TaKaRa公司產(chǎn)品)進(jìn)行25 μL PCR反應(yīng),每個(gè)引物濃度為10 μmol/L。采用CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(BIO-RAD)進(jìn)行qRT-PCR檢測(cè),以柑橘β肌動(dòng)蛋白基因(ACTB)為內(nèi)控基因。反應(yīng)過(guò)程如下:95 ℃預(yù)變性 3 min;95 ℃延伸時(shí)間30 s,根據(jù)特定引物設(shè)置的退火溫度(T)下退火30 s,共40個(gè)循環(huán)。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)束后,于65~95 ℃進(jìn)行熔化曲線(xiàn)分析。所有qRT-PCR分析重復(fù)3次。采用2ΔΔCT法評(píng)估基因的表達(dá)水平。

    2?結(jié)果與分析

    2.1?LAC基因家族成員鑒定及其對(duì)應(yīng)蛋白的理化性質(zhì)預(yù)測(cè)

    通過(guò)BLAST和保守結(jié)構(gòu)域鑒定方法,共在枳基因組中發(fā)現(xiàn)20個(gè)LAC基因成員(表2),根據(jù)其在染色體的分布將其命名為PtrLAC1~PtrLAC20(圖1)。其中,PtrLAC1位于3號(hào)染色體上,PtrLAC2、PtrLAC3位于4號(hào)染色體上,PtrLAC4、PtrLAC5位于5號(hào)染色體上,PtrLAC6~PtrLAC13位于6號(hào)染色體上,PtrLAC14~PtrLAC18位于8號(hào)染色體上,PtrLAC19、PtrLAC20位于未知染色體上。枳LAC基因編碼的氨基酸長(zhǎng)度介于553~1 112之間,相對(duì)分子量介于60.55~120.82之間,等電點(diǎn)介于5.02~9.88之間,親水性介于-0.247~0.000之間。此外,枳LAC蛋白的不穩(wěn)定系數(shù)位于26.00~38.14范圍,都低于40.00,表明這20個(gè)LAC基因成員都是穩(wěn)定的。用在線(xiàn)軟件Plant-mPLoc進(jìn)行亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè),結(jié)果顯示,所有枳LAC蛋白都位于細(xì)胞膜上,此外,發(fā)現(xiàn)PtrLAC7位于細(xì)胞核上。這揭示枳LAC蛋白可能參與細(xì)胞壁的木質(zhì)素合成。

    2.2?枳PtrLAC基因結(jié)構(gòu)和motif分析

    如圖2所示,枳LAC基因共有6~14個(gè)外顯子、5~13個(gè)內(nèi)含子??傮w而言,基因之間的基因結(jié)構(gòu)差異較小,多數(shù)為6個(gè)外顯子、5個(gè)內(nèi)含子。基因結(jié)構(gòu)比較特殊的基因?yàn)镻trLAC7、PtrLAC13,有較多外顯子、內(nèi)含子。Motif分析發(fā)現(xiàn),枳LAC蛋白含有 9~11個(gè)motif。除PtrLAC7、PtrLAC13外,所有枳LAC蛋白具有相同Motif。有趣的是,PtrLAC13缺失motif 2,而PtrLAC7相較于其他枳LAC基因家族成員多1個(gè)motif 8。

    2.3?系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)及共線(xiàn)性分析

    為了探究枳PtrLAC基因與模式植物擬南芥的進(jìn)化關(guān)系,構(gòu)建它們的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)(圖3)。根據(jù)進(jìn)化樹(shù)的結(jié)果,將其分為7個(gè)亞組。PtrLAC10、PtrLAC11、PtrLAC12、PtrLAC14、PtrLAC15、PtrLAC16、PtrLAC19和PtrLAC20在第1組;PtrLAC3、PtrLAC6、PtrLAC13和PtrLAC17在第2組;PtrLAC1在第4組;PtrLAC7、PtrLAC8和PtrLAC9在第5組;PtrLAC4在第6組;PtrLAC2、PtrLAC5和PtrLAC18在第7組。上述結(jié)果表明,枳LAC基因家族可能存在功能多樣性。共線(xiàn)性分析結(jié)果顯示,枳和擬南芥LAC基因間存在19對(duì)共線(xiàn)性關(guān)系(圖4),暗示這些LAC基因?qū)赡軄?lái)自共同的祖先,具有相似的功能。

    2.4?啟動(dòng)子區(qū)域順式作用元件分析

    順式作用元件分析結(jié)果表明,枳LAC基因啟動(dòng)子區(qū)域共有24種順式作用元件,包括生長(zhǎng)發(fā)育元件、激素響應(yīng)元件和逆境響應(yīng)元件三大類(lèi)型(圖5)。其中逆境響應(yīng)元件類(lèi)型最多,共有11個(gè)。生長(zhǎng)發(fā)育元件主要有分生組織特異性元件(CAT-box,70% LAC成員)和玉米醇溶蛋白代謝調(diào)控元件(O2-site,35% LAC成員)。激素響應(yīng)元件主要有茉莉酸甲酯響應(yīng)元件(CGTCA-motif或TGACG-motif,90% LAC成員)、脫落酸響應(yīng)元件(ABRE,80% LAC成員)和生長(zhǎng)素響應(yīng)元件(AuxRR-core,50% LAC成員),表明枳LAC基因可能受到多種激素的調(diào)控表達(dá)。逆境響應(yīng)元件主要有厭氧誘導(dǎo)元件(ARE,所有LAC成員)、干旱響應(yīng)元件(MBS,90% LAC成員)和低溫響應(yīng)元件(LTR,50% LAC成員),暗示枳LAC基因可能響應(yīng)多種逆境脅迫。

    2.5?鹽脅迫處理對(duì)枳LAC基因表達(dá)的影響

    已有研究發(fā)現(xiàn),多種植物的LAC基因在鹽脅迫下誘導(dǎo)表達(dá)[14-17]。因此,本研究采用qRT-PCR方法分析所有枳LAC基因在鹽脅迫處理下的表達(dá)模式。如圖6所示,鹽脅迫處理使得80%的枳LAC基因在不同時(shí)間點(diǎn)顯著上調(diào)表達(dá),其中多數(shù)集中在處理后第1天(PtrLAC3、PtrLAC5、PtrLAC6、PtrLAC10、PtrLAC11、PtrLAC13、PtrLAC15和PtrLAC18)和第5天(PtrLAC1、PtrLAC4、PtrLAC9、PtrLAC14和PtrLAC19),僅PtrLAC2、PtrLAC7、PtrLAC12、PtrLAC17的相對(duì)表達(dá)量出現(xiàn)下調(diào)。值得注意的是,PtrLAC9的相對(duì)表達(dá)量在處理5 d時(shí)急劇升高(約為初始值的47倍)。由此推測(cè),PtrLAC9基因是鹽脅迫響應(yīng)的關(guān)鍵LAC基因之一。

    3?討論與結(jié)論

    植物漆酶參與木質(zhì)素單體的聚合,從而影響木質(zhì)素合成和組分,在植物的生長(zhǎng)和發(fā)育、應(yīng)答生物或非生物脅迫反應(yīng)中具有重要調(diào)控作用。迄今,尚未見(jiàn)關(guān)于枳漆酶基因家族的研究報(bào)道。本研究通過(guò)生物信息學(xué)方法在枳中共鑒定出20個(gè)LAC基因(PtrLAC1~PtrLAC20)。但對(duì)多數(shù)植物而言,枳LAC基因成員的數(shù)目較少[7-13]。枳LAC基因在染色體上的分布不均勻,較集中在第6號(hào)、8號(hào)染色體上,與甜橙LAC基因的染色體定位一致[23];共有6~14個(gè)外顯子、9~11個(gè)motif,主要定位在細(xì)胞膜上,這些特征在不同物種之間的差異較大[7-13,23]。值得注意的是,PtrLAC7定位到細(xì)胞膜和細(xì)胞核上,且多1個(gè)motif 8,暗示該基因可能具有特殊功能。

    在本研究中,枳LAC基因啟動(dòng)子區(qū)域的順式作用元件分析結(jié)果顯示,其啟動(dòng)子區(qū)域含有24種順式作用元件,包括生長(zhǎng)發(fā)育元件、激素響應(yīng)元件和逆境響應(yīng)元件,暗示著枳LAC基因可能受到多種植物激素和環(huán)境逆境誘導(dǎo) 并參與植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程調(diào)

    控。對(duì)于不同植物而言,LAC基因啟動(dòng)子區(qū)域的順式作用元件在數(shù)量、種類(lèi)上具有一定差異,尤其是富集的順式作用元件種類(lèi)[8,10,24]。例如,茶樹(shù)LAC基因主要富集厭氧誘導(dǎo)響應(yīng)元件、茉莉酸甲酯和乙烯響應(yīng)元件[10];多數(shù)柳枝稷草LAC基因存在脫落酸響應(yīng)元件、茉莉酸甲酯響應(yīng)元件和干旱響應(yīng)元件[8];枳LAC基因富含干旱響應(yīng)元件、厭氧誘導(dǎo)響應(yīng)元件和茉莉酸甲酯響應(yīng)元件。但上述預(yù)測(cè)的順式作用元件有待通過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證。

    系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析將20個(gè)枳LAC基因家族成員與17個(gè)擬南芥LAC基因家族成員分成7個(gè)亞組,與前人的研究結(jié)果[9,23]一致。同一亞組的枳LAC基因與擬南芥LAC基因可能具有相同或相似的功能??紤]到AtLAC4、AtLAC11和AtLAC17與木質(zhì)素合成有關(guān),筆者推測(cè)PtrLAC6和PtrLAC17(與AtLAC4聚類(lèi))、PtrLAC13(與AtLAC11聚類(lèi))及PtrLAC14和PtrLAC15(與AtLAC17聚類(lèi))參與枳木質(zhì)素生物合成。此外,AtLAC7、AtLAC8和AtLAC9這3個(gè)基因在缺鐵、創(chuàng)傷或鹽脅迫下上調(diào)表達(dá)[25]。因此,我們預(yù)測(cè)同一亞組下的PtrLAC7、PtrLAC8和PtrLAC9可能與脅迫響應(yīng)相關(guān)。本研究的qRT-PCR分析結(jié)果顯示,PtrLAC8、PtrLAC9在鹽脅迫下顯著上調(diào)表達(dá),而PtrLAC7顯著下調(diào)表達(dá),可見(jiàn)這3個(gè)基因確實(shí)與鹽脅迫響應(yīng)相關(guān),但它們是否參與枳鹽脅迫響應(yīng)調(diào)控尚不清楚。目前筆者所在本課題組正在進(jìn)行PtrLAC9的功能鑒定研究,有望進(jìn)一步揭示其功能。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Giardina P,F(xiàn)araco V,Pezzella C,et al. Laccases:a never-ending story[J]. Cellular and Molecular Life Sciences,2020,67(3):369-385.

    [2]Yoshida H. LXIII.-Chemistry of lacquer (Urushi). Part Ⅰ. communication from the chemical society of Tokio[J]. Journal of the Chemical Society,Transactions,1883,43:472-486.

    [3]Janusz G,Pawlik A,Swiderska-burek U,et al. Laccase properties,physiological functions,and evolution[J]. International Journal of Molecular Sciences,2020,21(3):25.

    [4]Wang J H,F(xiàn)eng J J,Jia W T,et al. Lignin engineering through laccase modification:a promising field for energy plant improvement[J]. Biotechnology for Biofuels,2015,8:145.

    [5]Berthet S,Demont-Caulet N,Pollet B,et al. Disruption of LACCASE4 and 17 results in tissue-specific alterations to lignification of Arabidopsis thaliana stems[J]. The Plant Cell,2011,23(3):1124-1137.

    [6]Zhao Q,Nakashima J,Chen F,et al. LACCASE is necessary and nonredundant with PEROXIDASE for lignin polymerization during vascular development in Arabidopsis[J]. The Plant Cell,2013,25(10):3976-3987.

    [7]Liu Q Q,Luo L,Wang X X,et al. Comprehensive analysis of rice laccase gene (OsLAC) family and ectopic expression of OsLAC10 enhances tolerance to copper stress in Arabidopsis[J]. International Journal of Molecular Sciences,2017,18(2):e209.

    [8]Li R,Zhao Y,Sun Z,et al. Genome-wide identification of switchgrass laccases involved in lignin biosynthesis and heavy-metal responses[J]. International Journal of Molecular Sciences,2022,23:6530.

    [9]Lu C Y,Yang T Y,Zhang Y W,et al. Genome-wide analyses and expression patterns under abiotic stress of LAC gene family in pear (Pyrus bretschneideri)[J]. Plant Biotechnology Reports,2021,15(3):403-416.

    [10]Yu Y C,Xing Y X,Liu F J,et al. The laccase gene family mediate multi-perspective trade-offs during tea plant (Camellia sinensis) development and defense processes[J]. International Journal of Molecular Sciences,2022,22(22):12554.

    [11]李鄭華,姜成東,王?鵬,等. 荔枝漆酶(LAC)基因家族鑒定及表達(dá)分析[J/OL]. 分子植物育種,2022:1-22. [2022-11-03].https://kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.s.20220507.1344.008.html.

    [12]Qui K,Zhou H,Pan H,et al. Genome-wide identification and functional analysis of the peach (P. persica) laccase gene family reveal members potentially involved in endocarp lignification[J]. Trees,2022,36:1477-1496.

    [13]Wan F X,Zhang L Q,Tan M Y,et al. Genome-wide identification and characterization of laccase family members in eggplant (Solanum melongena L.)[J]. Peer J,2022,10:e12922.

    [14]Liang M X,Haroldsen V,Cai X N,et al. Expression of a putative laccase gene,ZmLAC1,in maize primary roots under stress[J]. Plant Cell and Environment,2006,29(5):746-753.

    [15]Cai X N,Davis E J,Ballif J,et al. Mutant identification and characterization of the laccase gene family in Arabidopsis[J]. Journal of Experimental Botany,2006,57(11):2563-2569.

    [16]Cho H Y,Lee C,Hwang S G,et al. Overexpression of the OsChI1 gene,encoding a putative laccase precursor,increases tolerance to drought and salinity stress in transgenic Arabidopsis[J]. Gene,2014,552(1):98-105.

    [17]Ma J,Xu Z S,Wang F,et al. Isolation,purification and characterization of two laccases from carrot (Daucus carota L.) and their response to abiotic and metal ions stresses[J]. Protein Journal,2015,34(6):444-452.

    [18]Huang X S,Wang W,Zhang Q,et al. A basic helix-loop-helix transcription factor,PtrbHLH,of Poncirus trifoliata confers cold tolerance and modulates peroxidase-mediated scavenging of hydrogen peroxide[J]. Plant Physiology,2013,162(2):1178-1194.

    [19]Dai W S,Wang M,Gong X Q,et al. The transcription factor FcWRKY40 of Fortunella crassifolia functions positively in salt tolerance through modulation of ion homeostasis and proline biosynthesis by directly regulating SOS2 and P5CS1 homologs[J]. New Phytologist,2018,219(3):972-989.

    [20]Khan M,Hu J B,Dahro B,et al. ERF108 from Poncirus trifoliata (L.) Raf. functions in cold tolerance by modulating raffinose synthesis through transcriptional regulation of PtrRafS[J]. Plant Journal,2021,108(3):705-724.

    [21]Zhang Y,Ming R H,Khan M,et al. ERF9 of Poncirus trifoliata (L.) Raf. undergoes feedback regulation by ethylene and modulates cold tolerance via regulating a glutathione S-transferase U17 gene[J]. Plant Biotechnol Journal,2022,20(1):183-200.

    [22]Huang Y,Xu Y T,Jiang X L,et al. Genome of a citrus rootstock and global DNA demethylation caused by heterografting[J]. Horticulture Research,2021,8 (1):69.

    [23]Xu X Y,Zhou Y P,Wang B,et al. Genome-wide identification and characterization of laccase gene family in Citrus sinensis[J]. Gene,2019,689:114-123.

    [24]Sun Z,Zhou Y,Hu Y,et al. Identification of wheat LACCASEs in response to Fusarium graminearum as potential deoxynivalenol trappers[J]. Frontiers in Plant Science,2022,13:832800.

    [25]Turlapati P V,Kim K W,Davin L B,et al. The laccase multigene family in Arabidopsis thaliana:towards addressing the mystery of their gene function(s)[J]. Planta,2011,233(3):439-470.

    猜你喜歡
    鹽脅迫進(jìn)化樹(shù)
    基于心理旋轉(zhuǎn)的小學(xué)生物進(jìn)化樹(shù)教學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
    常見(jiàn)的進(jìn)化樹(shù)錯(cuò)誤概念及其辨析*
    福州2009—2014年甲型H1N1流感病毒株HA基因進(jìn)化分析
    外源氯化鈣對(duì)大蒜幼苗鹽脅迫傷害的緩解作用
    艾草白粉病的病原菌鑒定
    外源NO對(duì)NaCl脅迫下高粱幼苗生理響應(yīng)的調(diào)節(jié)
    外源NO對(duì)NaCl脅迫下高粱幼苗生理響應(yīng)的調(diào)節(jié)
    花生Clp家族成員的篩選、聚類(lèi)和鹽脅迫響應(yīng)分析
    淺談鹽脅迫對(duì)紫穗槐生理指標(biāo)的影響
    六株湖北省ALV—J地方分離株的gp85基因序列分析
    男女无遮挡免费网站观看| 香蕉久久夜色| 欧美另类亚洲清纯唯美| 1024视频免费在线观看| 国产在线视频一区二区| 国产精品久久久av美女十八| 女同久久另类99精品国产91| 久久 成人 亚洲| 国产97色在线日韩免费| 久久亚洲真实| 日韩视频一区二区在线观看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 悠悠久久av| 亚洲一区中文字幕在线| 一级毛片女人18水好多| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲久久久国产精品| 男女午夜视频在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 在线观看舔阴道视频| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | av有码第一页| 国产在线观看jvid| 黄色 视频免费看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 午夜福利视频在线观看免费| 中文亚洲av片在线观看爽 | 久久久久精品国产欧美久久久| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 1024视频免费在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 人妻 亚洲 视频| 亚洲精品国产区一区二| 9热在线视频观看99| 精品国产乱子伦一区二区三区| 久久久国产一区二区| 亚洲av美国av| 9色porny在线观看| 在线观看免费高清a一片| 精品欧美一区二区三区在线| 久久久国产一区二区| 天堂动漫精品| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美精品av麻豆av| 日韩人妻精品一区2区三区| 成人免费观看视频高清| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久国产精品影院| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 成人18禁在线播放| 国产激情久久老熟女| 最新在线观看一区二区三区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 丝袜人妻中文字幕| 午夜福利在线免费观看网站| 91精品三级在线观看| 精品人妻在线不人妻| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美日韩亚洲高清精品| 757午夜福利合集在线观看| 黑人操中国人逼视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲欧洲日产国产| 中文字幕色久视频| 免费不卡黄色视频| 日韩有码中文字幕| 大香蕉久久成人网| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产亚洲精品久久久久5区| 日韩视频一区二区在线观看| 国产在线免费精品| 十八禁网站免费在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产一区二区三区综合在线观看| 午夜福利,免费看| 国产精品久久久av美女十八| 97在线人人人人妻| 好男人电影高清在线观看| 蜜桃国产av成人99| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产精品亚洲一级av第二区| 在线观看66精品国产| 久久久久网色| 午夜日韩欧美国产| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品免费大片| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 女人精品久久久久毛片| 久9热在线精品视频| 夜夜爽天天搞| 免费看十八禁软件| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产成人精品无人区| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产伦理片在线播放av一区| a级片在线免费高清观看视频| 人妻 亚洲 视频| 午夜福利一区二区在线看| 两个人免费观看高清视频| 亚洲成人免费av在线播放| 亚洲美女黄片视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲全国av大片| 韩国精品一区二区三区| 美女视频免费永久观看网站| 国产精品久久久久久精品古装| 国产亚洲一区二区精品| 老司机在亚洲福利影院| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 丝袜在线中文字幕| 超碰97精品在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲精品中文字幕在线视频| 午夜视频精品福利| 欧美 日韩 精品 国产| 免费在线观看影片大全网站| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 97人妻天天添夜夜摸| 在线观看66精品国产| 天堂俺去俺来也www色官网| 少妇粗大呻吟视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| videos熟女内射| 国产日韩欧美在线精品| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 少妇精品久久久久久久| 国产成人影院久久av| 亚洲少妇的诱惑av| 午夜视频精品福利| 国产又色又爽无遮挡免费看| 久久av网站| 免费在线观看完整版高清| 深夜精品福利| 欧美激情极品国产一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产免费现黄频在线看| 国产精品av久久久久免费| 久久精品国产亚洲av高清一级| 18禁美女被吸乳视频| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产免费福利视频在线观看| 夜夜爽天天搞| 精品国产一区二区久久| 女人精品久久久久毛片| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 日韩中文字幕视频在线看片| 伦理电影免费视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 一本久久精品| 国产精品免费视频内射| 中文亚洲av片在线观看爽 | 成年版毛片免费区| 久久久精品区二区三区| 亚洲伊人色综图| h视频一区二区三区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 一个人免费在线观看的高清视频| 欧美在线一区亚洲| 欧美精品一区二区免费开放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 女人精品久久久久毛片| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲色图综合在线观看| 99九九在线精品视频| 激情在线观看视频在线高清 | 午夜激情av网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 好男人电影高清在线观看| 天天影视国产精品| 日韩欧美三级三区| 成人免费观看视频高清| 欧美在线一区亚洲| 国产黄频视频在线观看| 一区二区av电影网| 亚洲avbb在线观看| 久久青草综合色| 黑人操中国人逼视频| 国产精品免费视频内射| 超碰97精品在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久中文看片网| 国产精品九九99| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲av成人一区二区三| 欧美精品亚洲一区二区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 精品亚洲成国产av| 人妻 亚洲 视频| 五月开心婷婷网| av超薄肉色丝袜交足视频| 99香蕉大伊视频| aaaaa片日本免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 怎么达到女性高潮| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 999精品在线视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 人妻 亚洲 视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美国产精品一级二级三级| 国产99久久九九免费精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲五月色婷婷综合| 国产在线一区二区三区精| 午夜福利一区二区在线看| 大香蕉久久网| 久久亚洲真实| 久9热在线精品视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | av电影中文网址| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲精品美女久久av网站| 国产成人精品无人区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 在线观看66精品国产| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 免费看a级黄色片| 国产精品二区激情视频| 69av精品久久久久久 | 热99国产精品久久久久久7| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲伊人色综图| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲av电影在线进入| 十八禁人妻一区二区| av网站在线播放免费| 免费在线观看日本一区| 老司机亚洲免费影院| 亚洲国产成人一精品久久久| av欧美777| 欧美日本中文国产一区发布| 最近最新中文字幕大全免费视频| 成人黄色视频免费在线看| 国产精品免费大片| 中文字幕高清在线视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 久久免费观看电影| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产精品 欧美亚洲| 精品少妇内射三级| 亚洲三区欧美一区| 日本欧美视频一区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美精品一区二区大全| 国产一区二区在线观看av| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲熟女毛片儿| 午夜免费成人在线视频| 久久av网站| 男女免费视频国产| 免费在线观看黄色视频的| 国产精品免费大片| 亚洲国产欧美网| 999久久久精品免费观看国产| 国产成人系列免费观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av | 亚洲精品自拍成人| 免费不卡黄色视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 在线看a的网站| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久青草综合色| 日本黄色视频三级网站网址 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| www.999成人在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| av国产精品久久久久影院| 亚洲五月色婷婷综合| 97在线人人人人妻| 五月开心婷婷网| 久久精品成人免费网站| 女人精品久久久久毛片| 精品少妇久久久久久888优播| 老司机在亚洲福利影院| 午夜福利视频在线观看免费| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美日韩成人在线一区二区| 美女扒开内裤让男人捅视频| 99国产精品一区二区三区| 涩涩av久久男人的天堂| 在线天堂中文资源库| 国产精品成人在线| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 黑丝袜美女国产一区| 久久久国产成人免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 精品一区二区三卡| 性色av乱码一区二区三区2| 精品一区二区三区四区五区乱码| 人人澡人人妻人| 亚洲三区欧美一区| 精品乱码久久久久久99久播| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 香蕉丝袜av| e午夜精品久久久久久久| 国产成人av激情在线播放| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 成年动漫av网址| 51午夜福利影视在线观看| 国产一区二区在线观看av| 丰满少妇做爰视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产精品熟女久久久久浪| 国产不卡一卡二| 亚洲一码二码三码区别大吗| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 热99久久久久精品小说推荐| 中文字幕人妻丝袜制服| 黄频高清免费视频| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美成人免费av一区二区三区 | 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 欧美日韩黄片免| 日本黄色日本黄色录像| 波多野结衣一区麻豆| 日本av手机在线免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 色综合婷婷激情| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产成人精品无人区| 在线播放国产精品三级| 国产亚洲一区二区精品| 高清视频免费观看一区二区| 操出白浆在线播放| 久久国产亚洲av麻豆专区| 97在线人人人人妻| 男女免费视频国产| 婷婷丁香在线五月| 97人妻天天添夜夜摸| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 黄频高清免费视频| 亚洲综合色网址| 又紧又爽又黄一区二区| 久久av网站| 一进一出抽搐动态| 午夜福利影视在线免费观看| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | netflix在线观看网站| av线在线观看网站| 国产伦人伦偷精品视频| 精品欧美一区二区三区在线| 女同久久另类99精品国产91| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲av片天天在线观看| 精品人妻1区二区| 精品免费久久久久久久清纯 | 中文字幕色久视频| 美女国产高潮福利片在线看| 午夜福利一区二区在线看| 大香蕉久久成人网| 男男h啪啪无遮挡| 三上悠亚av全集在线观看| 99国产综合亚洲精品| 亚洲国产av新网站| 老司机深夜福利视频在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久精品91无色码中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久久久久久大尺度免费视频| 香蕉丝袜av| 欧美成人免费av一区二区三区 | 欧美乱妇无乱码| xxxhd国产人妻xxx| 午夜免费成人在线视频| 国产福利在线免费观看视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲,欧美精品.| 国产极品粉嫩免费观看在线| 成人精品一区二区免费| 老熟女久久久| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 精品国产乱码久久久久久男人| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 一级a爱视频在线免费观看| 国产不卡av网站在线观看| av片东京热男人的天堂| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲精品美女久久av网站| 狂野欧美激情性xxxx| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲九九香蕉| 中文字幕最新亚洲高清| 韩国精品一区二区三区| 男女下面插进去视频免费观看| 一级毛片女人18水好多| 一个人免费看片子| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 99九九在线精品视频| 亚洲,欧美精品.| 久久这里只有精品19| 少妇 在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产亚洲精品久久久久5区| 青青草视频在线视频观看| 在线观看人妻少妇| 成人手机av| 热99国产精品久久久久久7| 99国产精品免费福利视频| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 99香蕉大伊视频| 成人永久免费在线观看视频 | 亚洲综合色网址| 亚洲精品在线观看二区| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产成人精品久久二区二区免费| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美日韩成人在线一区二区| 久久精品国产综合久久久| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 日韩人妻精品一区2区三区| 99国产精品99久久久久| kizo精华| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 飞空精品影院首页| 电影成人av| 看免费av毛片| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 欧美精品亚洲一区二区| 露出奶头的视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99re在线观看精品视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品.久久久| 国产一区二区 视频在线| 国产又色又爽无遮挡免费看| 三级毛片av免费| 一级a爱视频在线免费观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产av国产精品国产| 午夜福利一区二区在线看| 国产成人免费观看mmmm| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久精品成人免费网站| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲精品美女久久av网站| 黄色丝袜av网址大全| 午夜免费成人在线视频| 最近最新免费中文字幕在线| 无限看片的www在线观看| av有码第一页| 最近最新中文字幕大全电影3 | 欧美激情高清一区二区三区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 首页视频小说图片口味搜索| 中文字幕制服av| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美日韩精品网址| 久久中文字幕人妻熟女| 精品国内亚洲2022精品成人 | 少妇 在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 香蕉久久夜色| 女人久久www免费人成看片| 青青草视频在线视频观看| 午夜福利一区二区在线看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产在线一区二区三区精| 男人操女人黄网站| 麻豆成人av在线观看| 满18在线观看网站| 香蕉久久夜色| 成人亚洲精品一区在线观看| 窝窝影院91人妻| 国产在线视频一区二区| 国产精品一区二区在线不卡| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 中亚洲国语对白在线视频| 757午夜福利合集在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 精品国产国语对白av| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲av美国av| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲第一av免费看| 亚洲成国产人片在线观看| 97在线人人人人妻| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产一区二区三区综合在线观看| 制服人妻中文乱码| 国产av一区二区精品久久| 午夜激情久久久久久久| 日本欧美视频一区| 中文字幕色久视频| 丝袜喷水一区| 亚洲免费av在线视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 热99re8久久精品国产| 好男人电影高清在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 精品国产乱子伦一区二区三区| 99国产精品免费福利视频| 怎么达到女性高潮| 蜜桃在线观看..| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美黑人精品巨大| 国产精品久久电影中文字幕 | 欧美乱码精品一区二区三区| 国产三级黄色录像| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲久久久国产精品| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产av国产精品国产| 国产在线免费精品| 国产1区2区3区精品| 国产一区二区激情短视频| 热re99久久国产66热| 国产精品.久久久| 色综合婷婷激情| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av | a级毛片黄视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 九色亚洲精品在线播放| 免费看十八禁软件| 在线观看www视频免费| 久久性视频一级片| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲人成电影免费在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲成a人片在线一区二区| 在线观看人妻少妇| 欧美一级毛片孕妇| 久久狼人影院| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 成人18禁在线播放| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产一区二区 视频在线| 捣出白浆h1v1| 久久 成人 亚洲| 免费高清在线观看日韩| 成人永久免费在线观看视频 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 丝袜人妻中文字幕| 国产视频一区二区在线看| 青草久久国产| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 无人区码免费观看不卡 | 99香蕉大伊视频| 大型黄色视频在线免费观看| av片东京热男人的天堂|