變黃黑文衣, 中國黑文衣屬地衣一新記錄種

陳樂雯，何宣宣，賈濤，賈澤峰

變黃黑文衣, 中國黑文衣屬地衣一新記錄種

陳樂雯，何宣宣，賈濤，賈澤峰*

(聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東 聊城 252059)

通過對文字衣科黑文衣屬形態(tài)學(xué)、解剖學(xué)、化學(xué)與分子生物學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)中國新記錄種1種，即變黃黑文衣(Dal-Forno & Eliasaro)，該種主要特征為地衣體殼狀，表面淺黃綠色，無光澤，光滑；子囊盤彎曲,多分支，聚生于假子座中；盤緣黑色，相鄰線盤之間有小縫隙，盤面較平坦，黑色，覆有白色粉霜；子囊層無色透明，側(cè)絲頂端分支；子囊含8個子囊孢子；子囊孢子褐色，橫隔透鏡型，(4～)6胞室，大小19～25.5m×6～7m，I+紫紅色。該種分布于云南和福建，該研究豐富了對中國黑文衣屬物種組成與分布的認(rèn)知。

厚頂盤目；文字衣科；地衣型真菌；分類學(xué)

1882年，Müller Arg.綜合運(yùn)用顯微技術(shù)與化學(xué)分析方法，基于孢子褐色且細(xì)胞橫向排列的特征,以(Ach.) Müll. Arg.作為模式種建立黑文衣屬(Müll. Arg.)。Staiger結(jié)合分子生物學(xué)方法，對Müller Arg.的分類系統(tǒng)進(jìn)行修正，承認(rèn)并重新定義黑文衣屬[1]。

該屬為泛熱帶分布，隸屬于真菌界(Fungi)子囊菌門(Ascomycota)茶漬綱(Lecanoromycetes)厚頂盤亞綱(Ostropomycetidae)厚頂盤目(Ostropales)文字衣科(Graphidaceae)[2]。該屬主要特征為地衣體殼狀，表面蠟質(zhì)或粗糙；子囊盤伸長為線狀，彎曲或具有分支，少數(shù)聚生為類似子座結(jié)構(gòu)；盤唇張開, 大多覆有白色粉霜；盤被不炭化至輕微炭化；子囊含8個孢子；子囊孢子褐色，橫隔凸透鏡型或磚壁型；共生藻為橘色藻屬(sp.)[3–4]。

目前世界范圍內(nèi)報道黑文衣屬約230種，中國僅報道25種[5–10]。因此，有必要對我國黑文衣屬類群進(jìn)行進(jìn)一步研究，為我國地衣型真菌物種資源開發(fā)及利用提供基礎(chǔ)資料。

1 材料和方法

1.1 材料

本研究標(biāo)本采自福建、云南，現(xiàn)館藏于聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院地衣標(biāo)本室(LCUF)。

1.2 表型分析

使用體視顯微鏡OLYMPUS SZX16觀察地衣體外部形態(tài)特征，光學(xué)顯微鏡OLYMPUS BX53觀察解剖特征。通過滴加10% KOH溶液、NaClO飽和水溶液、P溶液(將對苯二胺溶于無水乙醇，配成5%乙醇溶液)、碘液觀察顏色反應(yīng)，薄層層析法(TLC)對地衣化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行鑒定[11–12]。

1.3 基因型分析

DNA提取、PCR擴(kuò)增、測序 使用Sigma- Aldrich REDExtract-N-AmpTM植物PCR試劑盒從子囊盤中提取基因組DNA，并采用引物mtSSU1與mtSSU3R對線粒體小亞基片段進(jìn)行擴(kuò)增[13]。PCR體系總體積為50L：2×PCR master mix 25L，ddH2O 19L，引物各2L，基因組DNA 2L；擴(kuò)增程序為：95 ℃預(yù)變性5 min；然后94 ℃變性45 s，50 ℃退火1 min，72 ℃延伸90 s，共35個循環(huán); 最后72 ℃延伸10 min。PCR完成后，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測目的產(chǎn)物，并由鉑尚生物技術(shù)(上海)有限公司測序。序列信息見表1。

表1 系統(tǒng)發(fā)育分析所用標(biāo)本信息和GenBank登錄號

*: 新測序列。下同

*：New sequence. The same below

構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹 通過SeqMan對原始序列進(jìn)行拼接處理，選擇與黑文衣屬親緣關(guān)系較近的灰線衣屬為外類群，在NCBI網(wǎng)站上下載所需的23條相關(guān)序列。將上述序列在BioEdit v. 7.0.5中利用最大似然法(Maximum-likelihood, ML)進(jìn)行多序列比對及優(yōu)化[14–15]，在Cipres Science Gateway (http://www.phylo.org)使用RAxML-HPC BlackBox v. 8.2.12構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹[16–17]，對各節(jié)點(diǎn)進(jìn)行1 000次重復(fù)以評價自展支持值，獲得的系統(tǒng)發(fā)育樹文件在FigTree v. 1.4.2中查看和編輯(圖1)。

圖1 基于SSU序列構(gòu)建的黑文衣屬系統(tǒng)發(fā)育樹

2 結(jié)果和討論

變黃黑文衣 圖2

Dal-Forno & Eliasaro, Mycotaxon 112: 16(2010)

Type: Brazil, Paraná: Pontal do Paraná. Pontal do Sul, 28. II. 2008, M. Dal-Forno 433 (Holotype UPCB).

地衣體殼狀，樹皮生，表面淺黃綠色，無光澤，光滑。

子囊盤彎曲，多分支，長0.5～1 mm，寬0.4～ 0.5 mm，聚生于假子座中，假子座圓形至不規(guī)則卵圓形；盤緣黑色，相鄰線盤之間有小縫隙；盤唇不明顯，張開；盤面較寬，平坦，黑褐色，覆有白色粉霜；盤被未炭化，褐色，厚8～18m；囊層被黑色，厚15～20m；子囊層無色，清晰狀，厚80～90m;囊層基黃色，厚30～38m；側(cè)絲具有橫隔，頂端分支，寬1.0～1.5m；子囊棒狀，含8個子囊孢子;子囊孢子褐色，卵圓形，橫隔透鏡型，(4～)6胞室,大小19～25.5m×6～7m，I+紫紅色。

化學(xué)反應(yīng)：K+淺黃色，C–，KC+淺黃色，P–；含有斑點(diǎn)酸 (TLC)。

基物：樹皮。

圖2 Phaeographis flavescens (L.W. Chen FJ211760)。A: 地衣體和子囊器; B: 子囊盤橫切面; C: 子囊; D: 子囊孢子。標(biāo)尺: A=1.0 mm; B=200 μm; C=20 μm; D=20 μm

研究標(biāo)本：云南：西雙版納，勐?？h，哈尼文化園，海拔1 190 m，2015年12月14日，賈澤峰YN15061 (LCUF)。福建：武夷山，桐木村，三港，海拔720 m，2021年10月22日，賈澤峰FJ211286 (LCUF)；武夷山國家公園科技樓附近，海拔700 m，2021年10月24日，賈澤峰FJ211741 (LCUF)，陳樂雯，F(xiàn)J211759、FJ211760、FJ211761、FJ211763、FJ211764、FJ211765、FJ211766 (LCUF)。

世界分布：巴西[18]；中國福建、云南。

討論：根據(jù)分子數(shù)據(jù)分析，該種與屬其他物種明顯分開，且與聚為一獨(dú)立分支，支持值高達(dá)98%，綜合以上特征鑒定為。本研究標(biāo)本與模式標(biāo)本(Brazil)特征基本一致，但假子座顏色相對更淺，呈白色；另外，本研究只檢測出斑點(diǎn)酸，而模式標(biāo)本描述中還含有其他微量未知酸。其分類特征類似于Redinger.，后者子囊盤灰白色，彎曲，不規(guī)則分支，聚集為星狀，孢子4～6室，但地衣化學(xué)物質(zhì)不同, 含有新三錐酸[19]。該種形態(tài)學(xué)特征與(Nyl.) Müll. Arg.相似，不同之處在于后者子囊盤呈放射狀或大量不規(guī)則分支，線盤較細(xì)長, 盤面在發(fā)育后期常發(fā)生匯合，從而形成較寬的中部區(qū)域；I+紅褐色，含降斑點(diǎn)酸[20–21]。該種與Redinger.也較相似，不同之處在于后者子囊孢子較小，(12～)15～18m[22]。

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, A New Record of the Lichen Genusin China

CHEN Lewen, HE Xuanxuan, JIA Tao, JIA Zefeng*

(College of Life Sciences, Liaocheng University,Liaocheng 252059, Shandong, China)

Based on the methods of morphology, anatomy, chemistry and molecular,Dal-Forno & Eliasaro (Graphidaceae) is recorded as new to China. It is characterized by crustose thallus, surface pale yellowish green, dull, smooth; ascomata flexuose, branched, immersed in pseudostromata; the lirellae have a narrow, brown-black edge, with small lateral cracks; disc flat, black, with white pruina; hymenium colorless, paraphyses with branched tips; ascospores 8 per ascus, brown, with transverse septa, (4–)6 locular, 19–25.5m× 6–7m, I+ wine-red. The species is found in Yunnan and Fujian provinces, and the study enriches our understanding of thecomposition and distribution in China.

Ostropales; Graphidaceae; Lichenized fungi; Taxonomy

10.11926/jtsb.4625

2022–02–24

2022–03–09

國家自然科學(xué)基金項目(31750001)資助

This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant No. 31750001).

陳樂雯(1997年生)，女，碩士研究生，研究方向為地衣生物學(xué)，E-mail: 978064405@qq.com

. E-mail: zfjia2008@163.com