熊 碧 許文遠(yuǎn) 楊清清 唐 琳 聞 勝 李永剛
(湖北省疾病預(yù)防控制中心, 應(yīng)用毒理湖北省重點實驗室, 武漢430079)
食用菌是可供人類食用的大型真菌, 又稱蘑菇(Agaricus campestris)。 我國食用菌資源豐富, 是全球最大的食用菌生產(chǎn)國和消費國, 也是最早栽培、 利用食用菌的國家之一[1~3]。 食用菌不僅味美,而且營養(yǎng)豐富, 含有豐富的蛋白質(zhì)、 氨基酸、 維生素及礦質(zhì)元素等營養(yǎng)物質(zhì)[4~5]。 同時, 其含有高分子多糖、 三萜化合物等生物活性物質(zhì), 具有增強(qiáng)免疫力、 抗癌、 降血糖、 降血脂等保健作用, 是公認(rèn)的健康食品[6~11]。
氨基酸是蛋白質(zhì)的基本構(gòu)成單位, 是食物營養(yǎng)成分的重要指標(biāo)之一, 參與體內(nèi)眾多重要生理過程, 對維護(hù)人體的長期健康和預(yù)防慢性疾病具有非常重要的意義[12~14]。 《健康中國行動 (2019-2030年)》 指出, 近年來, 我國居民營養(yǎng)健康狀況明顯改善, 但仍面臨營養(yǎng)不足與過剩并存、 營養(yǎng)相關(guān)疾病多發(fā)等問題。 合理膳食是保證健康的基礎(chǔ), 而食物的營養(yǎng)成分分析和營養(yǎng)價值評價是合理膳食的基礎(chǔ)。 食品中氨基酸的種類、 含量與組成是評價其營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)。 食用菌是優(yōu)質(zhì)的氨基酸來源,有“植物肉” 之稱, 其氨基酸含量優(yōu)于許多果蔬和谷物[15]。
目前, 食用菌的氨基酸評價研究比較分散,尚未有系統(tǒng)研究。 且食用菌種類繁多, 不同品種、不同產(chǎn)地間的食用菌氨基酸含量差異較大[16~18]。通過營養(yǎng)價值評價, 可以精準(zhǔn)地了解不同食用菌營養(yǎng)價值所在和限制因素, 指導(dǎo)居民通過膳食搭配,彌補(bǔ)差異, 提高膳食的營養(yǎng)價值[19]。 本研究對13種常見食用菌中氨基酸組成進(jìn)行分析及營養(yǎng)評價,研究食用菌的氨基酸營養(yǎng)價值和組成特征, 以期更好地了解和掌握食用菌的營養(yǎng)特征和不同食用菌的營養(yǎng)品質(zhì)差異, 為合理膳食、 營養(yǎng)配餐和特定人群營養(yǎng)干預(yù)提供科學(xué)依據(jù)。
(一) 材料與試劑 13 種新鮮食用菌分別為花菇、 香菇、 蟲草花、 豬肚菇、 黑牛肝菌、 茶樹菇、雙孢蘑菇、 大球蓋菇、 蟹味菇、 杏鮑菇、 平菇、 白玉菇、 竹蓀。 根據(jù)產(chǎn)地和當(dāng)?shù)鼐用裣M習(xí)慣, 在湖北省武漢市、 隨州市隨機(jī)選擇超市或農(nóng)貿(mào)市場作為采樣點, 每種食用菌分別從9 個采樣點采集, 每種采集500 g。 將來自不同采樣點的同種食用菌進(jìn)行混合、縮分并勻漿混勻, 置于-20℃冰箱中冷凍保存。
(二) 儀器與設(shè)備 A300 全自動氨基酸分析儀(德國曼默博爾公司); DHG-9071A 電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱 (常州諾基儀器有限公司); AL204 萬分之一電子天平(瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司)。
(三) 實驗方法 依據(jù)GB 5009.3-2016 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定》 測定水分含量; 依據(jù)GB 5009.124-2016 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測定》 測定天冬氨酸、 蘇氨酸、 絲氨酸、 谷氨酸、 脯氨酸、 甘氨酸、 丙氨酸、 纈氨酸、 蛋氨酸、 異亮氨酸、 亮氨酸、 酪氨酸、 苯丙氨酸、 組氨酸、 賴氨酸和精氨酸等16 種氨基酸的含量。 每種樣品平行測定3 次, 結(jié)果以 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)差” 表示。
(四) 營養(yǎng)評價方法 氨基酸評分 (Amino acid score, AAS) 根據(jù)世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織 (World Health Organization/Food and Agriculture Organization of the United Nations,WHO/FAO) 提出的方法計算[20]; 氨基酸比值系數(shù)(Ratio coefficient of amino acid, RC) 和比值系數(shù)分 (Score of RC, SRC) 根據(jù)朱圣陶和吳坤[21]提出的方法計算。
AAS 是指待測樣品中的某一氨基酸含量與WHO/FAO 提出的理想模式中的相應(yīng)氨基酸含量相比較, AAS 越接近100, 蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值就越高。 AAS 值低于100 的為限制氨基酸, 最低的為第一限制氨基酸。 AAS 按照公式(1) 計算。
氨基酸比值是指一定量食物中氨基酸含量相當(dāng)于模式氨基酸的多少倍。 由于各氨基酸的比值不同, 可計算各氨基酸比值均數(shù), 并計算RC 和SRC。 氨基酸比值、 RC 和SRC 分別按照公式(2)~(4) 計算。 當(dāng)氨基酸組成比例與WHO/FAO 氨基酸模式越接近時, 則RC 越接近1; 當(dāng)氨基酸相對過剩時, 則RC 大于1; 當(dāng)氨基酸含量不足時, 則RC 小于1, RC 最小的為第一限制氨基酸。 SRC 越接近100, 則食物蛋白質(zhì)的氨基酸組成與WHO/FAO 氨基酸模式越接近, 蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值就越高。 根據(jù)RC 和SRC, 可直觀評價食物蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值[21]。
(五) 數(shù)據(jù)處理 采用Microsoft Excel 2010 進(jìn)行數(shù)據(jù)整理, 采用SPSS 19.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和系統(tǒng)聚類分析。
(一) 13 種常見食用菌的氨基酸組成分析 按照GB 5009.124-2016 方法, 使用全自動氨基酸分析儀測定所采集的13 種常見食用菌的氨基酸含量,并通過水分含量折算為干重, 結(jié)果見表1~表2。13 種食用菌的蛋白質(zhì)含量、 氨基酸總量 (Total amino acid, TAA)、 必需氨基酸 (Essential amino acid, EAA) 總量、 非必需氨基酸 (Nonessential amino acid, NEAA) 總量、 鮮味氨基酸 (Umami amino acid, UAA) 總量、 必需氨基酸總量與氨基酸總量的比值(EAA/TAA)、 必需氨基酸總量與非必需氨基酸總量的比值(EAA/NEAA) 和鮮味氨基酸總量與氨基酸總量的比值 (UAA/TAA) 見表3。結(jié)果顯示, 13 種食用菌均含有16 種氨基酸, 且氨基酸總量在8.54~21.46 g/100 g 之間 (以干重計)。13 種食用菌按其氨基酸總量高低排序為: 雙孢蘑菇>茶樹菇>蟲草花>香菇>花菇>豬肚菇>大球蓋菇>白玉菇>黑牛肝菌>平菇>蟹味菇>竹蓀>杏鮑菇。
表1 13 種常見食用菌的必需氨基酸含量 (g/100 g)
表2 13 種常見食用菌的非必需氨基酸含量 (g/100 g)
表3 13 種常見食用菌的蛋白質(zhì)含量、 各類氨基酸總量及占比
13 種食用菌的必需氨基酸總量在3.13~8.16 g/100 g 之間, 其中必需氨基酸總量最高的食用菌是雙孢蘑菇, 最低的食用菌是杏鮑菇。 13 種食用菌按其必需氨基酸總量高低排序為: 雙孢蘑菇>蟲草花>茶樹菇>香菇>豬肚菇>白玉菇>大球蓋菇>花菇>平菇>黑牛肝菌>竹蓀>蟹味菇>杏鮑菇。 在必需氨基酸中, 花菇和大球蓋菇中含量最高的是賴氨酸, 豬肚菇中纈氨酸含量最高, 蟲草花和雙孢蘑菇中蘇氨酸含量最高, 其他食用菌中含量最高的均為亮氨酸。 除竹蓀中含量最低的必需氨基酸是苯丙氨酸外, 其他食用菌中含量最低的必需氨基酸是蛋氨酸。 13 種食用菌的非必需氨基酸總量在5.41~14.35 g/100 g 之間, 其中非必需氨基酸總量最高的食用菌是茶樹菇, 最低的食用菌是杏鮑菇。 可見不同食用菌雖然均含有16 種氨基酸, 但不同種類之間氨基酸含量差異明顯。
13 種食用菌中EAA/TAA 在23.3%~38.0%之間, 其中EAA/TAA 最高的食用菌是雙孢蘑菇, 最低的食用菌是花菇。 13 種食用菌中EAA/NEAA 在30.5%~61.3%之間, 其中EAA/NEAA 最高的食用菌是雙孢蘑菇, 最低的食用菌是花菇。 除花菇的EAA/NEAA 為30.5%外, 其他所有食用菌的EAA/NEAA 均大于40%, 高于甘藍(lán)、 菜花、 芹菜等常見蔬菜, 低于部分豆類蔬菜[17,22~24], 說明食用菌是比較優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源。
(二) 13 種常見食用菌的鮮味氨基酸分析 食用菌以味道鮮美著稱, 這是因為食用菌含有鮮味活性物質(zhì), 鮮味氨基酸就是其中的一類, 游離的鮮味氨基酸對食用菌的呈鮮特性具有十分重要的作用[25~27]。 谷氨酸和天冬氨酸是鮮味氨基酸中的特征氨基酸, 其中谷氨酸在食鹽存在下形成谷氨酸鈉,能呈現(xiàn)出較強(qiáng)的鮮味; 天冬氨酸的鈉鹽有特殊味感, 因此食用菌在烹調(diào)后食用都表現(xiàn)出鮮美味道。由樣品測定結(jié)果可知, 在13 種食用菌中, 含量最高的氨基酸均為谷氨酸, 含量在1.046 ~4.865 g/100g 之間, 占氨基酸總量的12.3%~28.1%。 13 種食用菌中鮮味氨基酸總量在1.82~6.36 g/100g 之間, 占氨基酸總量的20.9%~35.5%, 其中鮮味氨基酸總量最高的食用菌是茶樹菇, 其次是香菇、 花菇、 雙孢蘑菇、 蟲草花、 豬肚菇和大球蓋菇, 最低的是杏鮑菇。 馮濤等[28]和王小紅等[29]分別綜述了不同食用菌鮮味氨基酸的含量, 發(fā)現(xiàn)食用菌中谷氨酸含量是最高的, 其次是天冬氨酸。 另有陳萬超等[30]對5 個產(chǎn)地3 種市售干香菇進(jìn)行分析, 發(fā)現(xiàn)鮮味氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸) 含量最高, 占氨基酸總量的11.8%~39.9%。 食用菌鮮味氨基酸的差異和特征, 使得不同食用菌呈現(xiàn)出不同風(fēng)味, 同時, 食用菌普遍具有鮮味氨基酸含量高的特性, 在開發(fā)食用菌風(fēng)味加工食品、 調(diào)味品上具有較好的應(yīng)用前景。
(三) 13 種常見食用菌的氨基酸營養(yǎng)評價
1. 13 種常見食用菌的必需氨基酸含量與FAO/WHO 氨基酸模式比較。 蛋白質(zhì)和氨基酸的營養(yǎng)價值, 與必需氨基酸的組成有關(guān)。 13 種常見食用菌的必需氨基酸含量與WHO/FAO 提出的標(biāo)準(zhǔn)氨基酸模式的比較結(jié)果見表4。 從表4 中可以看出, 蟲草花、 白玉菇、 平菇和竹蓀的必需氨基酸含量高于或等于WHO/FAO 模式, 其他9 種食用菌的必需氨基酸含量低于WHO/FAO 模式。 對于單個必需氨基酸而言, 所有食用菌的異亮氨酸含量均低于WHO/FAO 模式。 楊旭昆等[31]研究發(fā)現(xiàn)異亮氨酸在7 種云南野生菌中均表現(xiàn)為相對不足; 顏孫安等[17]研究發(fā)現(xiàn)閔產(chǎn)食用菌中異亮氨酸嚴(yán)重不足; 左家信等[18]研究發(fā)現(xiàn)5 種湖南產(chǎn)食用菌的限制氨基酸均為苯丙氨酸+酪氨酸或異亮氨酸, 這些發(fā)現(xiàn)與本研究結(jié)果基本一致, 表明食用菌中相對缺乏異亮氨酸。 除竹蓀外, 其他12 種食用菌的蛋氨酸含量均低于WHO/FAO 模式。 綜上可以得出, 異亮氨酸和蛋氨酸是食用菌中相對缺乏的氨基酸。
表4 13 種常見食用菌的必需氨基酸含量與FAO/WHO 模式比較結(jié)果 (mg/g 蛋白)
2. 基于ASS 的評價。 采用AAS 法對13 種常見食用菌的氨基酸組成進(jìn)行營養(yǎng)評價, 結(jié)果見表5。 結(jié)果顯示, 所有食用菌的異亮氨酸AAS 均小于100, 賴氨酸AAS 在47~109 之間, 纈氨酸AAS在69~121 之間, 蘇氨酸AAS 在88~203 之間,苯丙氨酸+ 酪氨酸AAS 在59~161 之間, 蛋氨酸AAS 在9~132 之間, 亮氨酸AAS 在56~131 之間。 該結(jié)果表明, 13 種食用菌的氨基酸組成差異較大, 對于不同食用菌, 不足和過剩的氨基酸不盡相同。 不同食用菌也表現(xiàn)出一些共性特征, 如除竹蓀的第一限制氨基酸為賴氨酸外, 其他食用菌的第一限制氨基酸均為蛋氨酸。
表5 13 種常見食用菌的AAS 評價結(jié)果
3.基于RC 的評價。 本研究也采用RC 法對13種常見食用菌的氨基酸組成進(jìn)行營養(yǎng)評價, 各必需氨基酸的RC 見表6。 從表6 中可以看出, 13 種食用菌的蘇氨酸RC 均大于1, 說明其含量相對過剩; 除竹蓀外的12 種食用菌的蛋氨酸RC 均小于1, 在0.10~0.38 之間, 說明其含量不足, 是12 種食用菌的第一限制氨基酸; 賴氨酸、 纈氨酸、 苯丙氨酸+酪氨酸、 異亮氨酸和亮氨酸的RC 不盡相同,在部分食用菌中相對不足, 而在另外一部分食用菌中相對過剩。
表6 13 種常見食用菌的RC 評價結(jié)果
從食物營養(yǎng)角度分析, 雖然竹蓀的氨基酸總量較低, 但是其氨基酸組成最為均衡。 同時, 本研究和楊旭昆等[31]、 陳巧玲等[32]、 姜萍萍等[33]學(xué)者的研究均發(fā)現(xiàn), 食用菌具有低蛋氨酸特征。 蛋氨酸限制飲食(MRD)具有許多有益于機(jī)體健康的生理功能,尋找和開發(fā)天然低蛋氨酸的食品或低蛋氨酸的蛋白質(zhì)是實現(xiàn)MRD 的可行策略[34~35]。 在本研究中, 除竹蓀外的12 種食用菌的第一限制氨基酸均為蛋氨酸, 說明食用菌可作為天然的MRD 食材, 用于開發(fā)MRD 健康產(chǎn)品, 為MRD 的實現(xiàn)提供新思路。
4. 基于SRC 的評價。 經(jīng)計算得出, 13 種食用菌的SRC 在42.6~75.0 之間, 由高到低依次為:竹蓀(75.0) >黑牛肝菌(66.5) >白玉菇(62.4) >杏鮑菇(57.7)=豬肚菇(57.7)>大球蓋菇 (57.3) >蟹味菇(55.4) >茶樹菇(55.2) >香菇(53.7) >平菇(53.6) >雙孢蘑菇(50.0) >花菇(49.2) >蟲草花 (42.6)。 可見, 13 種食用菌中竹蓀蛋白質(zhì)營養(yǎng)最為均衡。 除花菇和蟲草花外, 其他食用菌的SRC 均超過50。 花菇和蟲草花因不同氨基酸含量差異較大 (RC 分別在0.14~1.71 和0.17~1.93 之間), 變異系數(shù)較大, 導(dǎo)致其SRC 較低。
(四) 13 種食用菌的氨基酸組成聚類分析 聚類分析能在多維空間或模式空間發(fā)現(xiàn)隱藏的結(jié)構(gòu),從而可以直觀地進(jìn)行相似品種及組分信息的綜合比較[17]。 采用組間連接法對13 種食用菌的氨基酸總量、 必需氨基酸含量、 SRC 進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析,結(jié)果見圖1。 從歐式距離6 處, 可將13 種食用菌分為4 類: 竹蓀為一類, 其氨基酸總量較低, 但SRC 評分較高; 蟲草花為一類, 其SRC 評分較低,氨基酸總量較高; 香菇、 茶樹菇、 花菇、 雙孢蘑菇為一類, 它們的氨基酸總量和必需氨基酸含量較高; 其他7 種食用菌為一類, 它們的氨基酸總量和SRC 評分居中。 13 種食用菌中, 竹蓀為鬼筆目,蟲草花為肉座菌目, 其他食用菌均為傘形目, 聚類分析結(jié)果顯示食用菌的氨基酸組成特征與食用菌的分類相關(guān)。
圖1 13 種食用菌的氨基酸組成聚類分析圖
本研究對13 種常見新鮮食用菌的氨基酸組成進(jìn)行測定, 結(jié)果顯示, 13 種食用菌中均含有16 種氨基酸, 其中雙孢蘑菇的氨基酸總量和必需氨基酸總量最高, 花菇因谷氨酸等非必需氨基酸含量相對較高, 所以其EAA/NEAA 低于40%, 而其他食用菌的EAA/NEAA 均高于40%, 說明食用菌是比較優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源。
通過氨基酸評分和氨基酸比值系數(shù)法進(jìn)行營養(yǎng)評價, 發(fā)現(xiàn)不同食用菌的氨基酸營養(yǎng)價值存在差異, 但是也有一些共性特點。 竹蓀是氨基酸最為均衡的食用菌品種。 13 種食用菌中蘇氨酸比較豐富,而蛋氨酸相對不足, 除竹蓀的第一限制氨基酸為賴氨酸外, 其他食用菌的第一限制氨基酸均為蛋氨酸, 表明食用菌可作為潛在的天然MRD 食材, 用于開發(fā)MRD 健康產(chǎn)品。 聚類分析結(jié)果顯示, 食用菌的氨基酸組成特征與食用菌的分類相關(guān)。 本研究對食用菌的氨基酸組成進(jìn)行了測定和分析, 依據(jù)氨基酸營養(yǎng)價值評價方法對其進(jìn)行評價, 為進(jìn)一步研究利用食用菌資源、 針對不同人群構(gòu)建合理膳食提供了理論依據(jù)。