• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于代謝組學(xué)分析精神分裂癥不同證型的生物學(xué)標(biāo)志物

    2023-05-30 07:06:41李琪周志強(qiáng)楊棟梁小麗王強(qiáng)石璐楊萍劉學(xué)軍
    關(guān)鍵詞:代謝組學(xué)超高效液相色譜證型

    李琪 周志強(qiáng) 楊棟 梁小麗 王強(qiáng) 石璐 楊萍 劉學(xué)軍

    〔摘要〕 目的 分析精神分裂癥(schizophrenia, SZ)患者不同證型的代謝物差異性,研究其不同中醫(yī)證型潛在標(biāo)志物,為其辨證分型提供依據(jù)。方法 納入2019年10月至2020年10月在湖南省腦科醫(yī)院精神科住院的不同證型SZ患者53例,分為痰氣郁結(jié)組(n=24)、陰虛火旺組(n=15)、心脾兩虛組(n=14);同時(shí)納入20例健康者為對(duì)照組。使用陽(yáng)性與陰性癥狀量表(positive and negative syndrome scale, PANSS)評(píng)定癥狀程度,采用超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用(ultra-high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry, UPLC-MS)技術(shù)分析SZ痰氣郁結(jié)、陰虛火旺、心脾兩虛證患者血漿代謝產(chǎn)物差異,進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析,篩選差異代謝物。結(jié)果 與對(duì)照組比較,SZ患者差異代謝物主要涉及氨基酸及脂類等代謝通路。與陰虛火旺組比較,痰氣郁結(jié)組3-羥基丁酸、天冬酰胺表達(dá)上調(diào),心脾兩虛組別膽酸、膽酸表達(dá)下調(diào)(P<0.05)。結(jié)論 SZ患者氨基酸及脂類的代謝存在異常。3-羥基丁酸、天冬酰胺、膽酸、別膽酸表達(dá)水平可作為陰虛火旺證的診斷分型指標(biāo)。

    〔關(guān)鍵詞〕 精神分裂癥;證型;超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用;代謝組學(xué);差異代謝物

    〔中圖分類號(hào)〕R25 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A ? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2023.03.024

    Analysis of biomarkers of different pattern types of schizophrenia based on metabonomics

    LI Qi1, ZHOU Zhiqiang2, YANG Dong2, LIANG Xiaoli2, WANG Qiang2, SHI Lu2, YANG Ping2*, LIU Xuejun2*

    1. The Third Hospital of Quzhou, Quzhou, Zhejiang 324003, China; 2. Hunan Provincial Brain Hospital, Changsha,

    Hunan 410000, China

    〔Abstract〕 Objective To analyze metabolite differences of different pattern types in patients with schizophrenia (SZ) and to identify the potential markers of different TCM pattern types, and to provide scientific basis for pattern identification. Methods A total of 53 participants with schizophrenia hospitalized from October 2019 to October 2020 in Psychiatry Department of Hunan Provincial Brain Hospital were divided into phlegm-qi stagnation group (n=24), yin deficiency leading to fire hyperactivity group (n=15), and heart-spleen deficiency group (n=14). The control group included 20 healthy participants. The degree of symptoms was evaluated by positive and negative symptom scale (PANSS), and ultra-high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry (UPLC-MS) was used to analyze the differences of plasma metabolites of the phlegm-qi stagnation group, yin deficiency leading to fire hyperactivity group, and heart-spleen deficiency group. Multidimensional statistical analysis was performed to screen differential metabolites. Results Compared with the control group, the differential metabolites of SZ patients mainly include the metabolic pathways involving amino acids and lipids. Compared with the yin deficiency and fire excess group, the expression of 3-hydroxybutyric acid and asparagine in the phlegm-qi stagnation group was up-regulated, and the expression of cholic acid and allocholic acid in the heart-spleen deficiency group was down-regulated (P<0.05). Conclusion The metabolism of amino acids and lipids in SZ patients is abnormal. The expression levels of 3-hydroxybutyric acid, valyl-asparagine, cholic acid and allocholic acid can be used as the diagnostic classification index of yin deficiency leading to fire hyperactivity pattern.

    〔Keywords〕 schizophrenia; pattern type; ultra-high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry; metabolomics; differential metabolites

    精神分裂癥(schizophrenia, SZ)是一種以幻覺(jué)、妄想等陽(yáng)性癥狀,以情感淡漠等陰性癥狀及行為怪異紊亂為主要表現(xiàn)的精神障礙[1]。有研究提示,SZ的終生患病率約為1%,且SZ患者的平均預(yù)期壽命比普通人群約短15年,終身自殺死亡風(fēng)險(xiǎn)為5%~10%[2]。

    SZ在中醫(yī)學(xué)歸屬于“癲狂”范疇,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為SZ發(fā)病主要因氣機(jī)逆亂,神機(jī)失用所致,癲狂分為癲證及狂證,癲則以精神抑郁、表情淡漠、沉默癡呆、靜而少動(dòng)等陰性癥狀為主,狂則以躁動(dòng)不安、喧擾不寧、毀物打罵、動(dòng)而多怒等陽(yáng)性癥狀為主要表現(xiàn)[3]。SZ的中醫(yī)辨證主要以接診醫(yī)師的個(gè)人判斷為準(zhǔn),鮮有可量化的客觀指標(biāo)作為證候判定標(biāo)準(zhǔn),不利于該領(lǐng)域中醫(yī)藥科研的發(fā)展和應(yīng)用。

    代謝組學(xué)源自20世紀(jì)90年代,采用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、核磁共振等技術(shù),對(duì)生物體內(nèi)源性代謝物進(jìn)行定性和定量分析,并篩選出具有特異性的生物標(biāo)志物,具有全面、高效等優(yōu)點(diǎn),有利于對(duì)疾病進(jìn)行快速及精準(zhǔn)的診斷,并高度契合中醫(yī)證型在整體觀念層面的觀點(diǎn),廣泛用于研究中醫(yī)辨證分型的本質(zhì)[4-5]。有研究提示,SZ的差異代謝物主要涉及糖代謝、氨基酸代謝和脂代謝,其通路主要與丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代謝及三羧酸循環(huán)相關(guān)[6]。然而,關(guān)于中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究以消化道疾病、心血管疾病及內(nèi)分泌代謝疾病等較為常見(jiàn),少有涉及精神類疾病[7]。因此,本研究使用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)SZ不同證型代謝物差異進(jìn)行分析,以期尋找SZ中醫(yī)辨證分型的客觀支持依據(jù)。

    本研究采用多元變量統(tǒng)計(jì)分析法篩選出健康者與SZ不同證型患者的差異代謝物,并分析代謝通路變化規(guī)律,使用超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用(ultra-high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry, UPLC-MS)技術(shù)測(cè)定健康者及SZ不同證型患者血漿代謝組學(xué)數(shù)據(jù)[8]。探討SZ患者代謝機(jī)制,為臨床SZ患者診斷及辨證分型提供科學(xué)依據(jù),探索代謝組學(xué)在精神疾病的辨證分型中的作用。

    1 資料與方法

    1.1 ?研究對(duì)象

    納入2019年10月至2020年10月在湖南省腦科醫(yī)院精神科住院的53例SZ患者,分為痰氣郁結(jié)組(n=24)、陰虛火旺組(n=15)、心脾兩虛組(n=14);同時(shí)納入湖南省腦科醫(yī)院體檢中心健康者20例為對(duì)照組。本研究已通過(guò)湖南省腦科醫(yī)院倫理審批,倫理編號(hào)為K2018020,已將試驗(yàn)情況告知所有參與者及其家屬并獲得同意。

    所有受試者均為湖南人,均以谷類為主食,進(jìn)食中等量水果、蔬菜及少量肉類,食用植物油。近兩周否認(rèn)有藥物使用史,否認(rèn)煙、酒使用史。取樣前72 h避免劇烈運(yùn)動(dòng),避免熬夜等不規(guī)則的作息節(jié)律。取樣前24 h,禁果汁飲品、含有奶酪的食物、含咖啡因的食物或飲料。

    1.2 ?診斷標(biāo)準(zhǔn)

    (1)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《疾病和有關(guān)健康問(wèn)題的國(guó)際統(tǒng)計(jì)分類》第10次修訂本中關(guān)于SZ的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9];(2)中醫(yī)診斷參照《中醫(yī)病癥診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)》中癲病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10],中醫(yī)辨證分型為痰氣郁結(jié)證、陰虛火旺證、心脾兩虛證。

    1.3 ?納入標(biāo)準(zhǔn)

    (1)符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)年齡18~60歲;(3)能配合完成所有量表;(4)獲得法定監(jiān)護(hù)人的書(shū)面知情同意。

    1.4 ?排除標(biāo)準(zhǔn)

    (1)伴腦器質(zhì)性疾病或伴有精神發(fā)育遲滯及其他嚴(yán)重軀體疾病者;(2)社會(huì)功能嚴(yán)重衰退或因精神病性癥狀不能合作者;(3)伴有高脂血癥、糖尿病、甲狀腺疾病及其他內(nèi)分泌疾病者;(4)正在進(jìn)行心理治療者。

    1.5 ?主要試劑及儀器

    甲醇、乙腈(德國(guó)CNW科技公司,批號(hào):67-56-1、75-05-8);乙酸銨(美國(guó)Sigma Aldrich試劑公司,批號(hào):631-61-8);氨水(賽默飛世爾科技有限公司,批號(hào):1336-21-6)。

    超高效液相色譜儀、高分辨質(zhì)譜、離心機(jī)(賽默飛世爾科技有限公司,型號(hào):Vanquish、Q Exactive HFX、Heraeus Fresco17);超聲儀(深圳市雷德邦電子有限公司,型號(hào):PS-60AL)。

    1.6 ?指標(biāo)檢測(cè)

    1.6.1 ?行為學(xué)觀察 ?使用陽(yáng)性與陰性癥狀量表(positive and negative syndrome scale, PANSS)評(píng)估SZ患者精神癥狀的嚴(yán)重程度,包括陽(yáng)性量表7項(xiàng)、陰性量表7項(xiàng)、一般癥狀量表16項(xiàng),按1~7級(jí)評(píng)分,總分為210分,分?jǐn)?shù)越高代表癥狀越重[11]。

    1.6.2 ?樣品采集及處理 ?進(jìn)行中醫(yī)辨證分型后第2天早晨6:00收集患者空腹靜脈血,對(duì)照組入組后采集空腹靜脈血進(jìn)行代謝組學(xué)檢測(cè)。具體步驟:EDTA采血管取受試者肘靜脈血5 mL,立即離心(4 ℃、3500 r/min,離心半徑8.6 cm)15 min。移取樣品至EP管中,于-80 ℃保存。樣品制備:樣品解凍后移取100 μL至EP管中,加入甲醇-乙腈(1∶1)400 μL,混勻30 s,予超聲冰水浴持續(xù)10 min,完成后于

    -40 ℃靜置1 h。檢測(cè)品制備:將制備好的樣品取出解凍,4 ℃、12 000 r/min離心15 min(離心半徑8.6 cm)后取上清液上機(jī)檢測(cè),同時(shí)等量吸取所有樣品上清液混合成質(zhì)控(quality control, QC)樣品上機(jī)檢測(cè)[12]。

    1.6.3 ?樣品檢測(cè) ?通過(guò)Waters ACQUITY UPLCBEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)液相色譜柱對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行色譜分離。液相色譜A相為水相,含25 mmol/L乙酸銨和25 mmol/L氨水,B相為乙腈。樣品盤(pán)溫度4 ℃,進(jìn)樣體積2 μL,樣本流速0.5 mL/min。

    用質(zhì)譜儀在控制軟件的控制下進(jìn)行一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)的采集[13]。詳細(xì)參數(shù)如下:鞘氣為30 Arb;輔助氣為25 Arb;離子傳輸管溫度為350 ℃;全掃分辨率為60 000;二級(jí)分辨率為7500;NCE模式下碰撞能為10、30、60 eV;電離電壓為3.6 kV(正極)或-3.2 kV(負(fù)極)。

    1.7 ?數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    使用自主編寫(xiě)的R程序包(內(nèi)核為XCMS)進(jìn)行峰識(shí)別、峰提取、峰對(duì)齊和積分等處理,數(shù)據(jù)處理后,進(jìn)行中心化格式化處理及自動(dòng)建模分析,包括無(wú)監(jiān)督主成分分析(PCA)、有監(jiān)督正交偏最小二乘法判別分析(OPLS-DA)、單維統(tǒng)計(jì)分析,然后與BiotreeDB(V2.1)自建二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)匹配進(jìn)行物質(zhì)注釋,Cutoff值設(shè)為0.3[12,14]。

    采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以“x±s”表示,滿足正態(tài)性及方差齊性者采用單因素方差分析及多重比較,不滿足正態(tài)性者,采用多樣本秩和檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 ?各組一般情況及PANSS量表評(píng)分比較

    與對(duì)照組相比,SZ各組年齡、病程及PANSS評(píng)分差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見(jiàn)表1。

    2.2 ?各組血清樣本總離子圖比較

    結(jié)果提示儀器保留時(shí)間重現(xiàn)性較好,從離子流圖可以看出不同組別之間的差異,但具體差異仍需進(jìn)一步分析。詳見(jiàn)圖1—2。

    2.3 ?質(zhì)量監(jiān)測(cè)

    在樣品檢測(cè)中實(shí)時(shí)對(duì)QC樣品進(jìn)行檢測(cè),以評(píng)價(jià)分析系統(tǒng)的穩(wěn)定性,確保數(shù)據(jù)的質(zhì)量。結(jié)果提示,QC樣本緊密聚集,表明分析方法穩(wěn)定,具有良好的可重復(fù)性。詳見(jiàn)圖3。

    2.4 ?多元變量統(tǒng)計(jì)分析

    各組血漿樣品經(jīng)LC-MS分析得到數(shù)據(jù),采用PCA分析各組血漿的代謝譜圖,獲得散點(diǎn)分布圖,對(duì)照組與痰氣郁結(jié)組、陰虛火旺組、心脾兩虛組樣本之間表現(xiàn)出一定的分離趨勢(shì)。詳見(jiàn)圖4。

    基于PCA模型及PLS模型分析,因結(jié)果可能會(huì)受到相關(guān)變量影響,導(dǎo)致其有差異的變量會(huì)分散至其他主成分之上,故使用OPLS-DA方法行進(jìn)一步分析。結(jié)果提示OPLS-DA模型對(duì)受試者代謝物差異的預(yù)測(cè)能力較好。從OPLS-DA得分圖橫坐標(biāo)可看出組間的差異。詳見(jiàn)圖5。

    通過(guò)7折交叉驗(yàn)證得到R2Y(模型對(duì)分類變量Y的可解釋性)、R2X(模型對(duì)分類變量X的可解釋性)和Q2(模型的可預(yù)測(cè)性),用置換檢驗(yàn)方法可隨機(jī)改變分類變量Y的排列順序,多次(200次)建立對(duì)應(yīng)的OPLS-DA模型以獲取隨機(jī)模型的R2和Q2值。此方法在避免檢驗(yàn)?zāi)P偷倪^(guò)擬合以及評(píng)價(jià)模型的統(tǒng)計(jì)顯著性上有重要作用[8,15]。對(duì)照組與SZ各組對(duì)比模型圖及其R2值和Q2值表明該模型不存在過(guò)擬合,可靠性良好。詳見(jiàn)圖6、表2。

    2.5 ?單變量統(tǒng)計(jì)分析

    采用學(xué)生t檢驗(yàn)P<0.05的標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)滿足OPLS-DA模型中第一主成分的變量投影重要度(VIP)大于1的條件,選出不同組別間差異代謝物(即同時(shí)滿足VIP>1,P<0.05)[13]。以各組間樣本代謝物濃度的差異倍數(shù)(fold change, FC)來(lái)評(píng)價(jià)SZ患者痰氣郁結(jié)組、陰虛火旺組、心脾兩虛組與對(duì)照組間代謝物變化的顯著性。FC>1說(shuō)明代謝物顯著上調(diào)(火山圖紅色圈),反之,則提示代謝物顯著下調(diào)(火山圖藍(lán)色圈)。詳見(jiàn)圖7。

    通過(guò)分析提示所得到的差異代謝物在不同組間存在相似或相反的表達(dá)特征,并對(duì)所得到的差異代謝物進(jìn)行聚類分析,分別得到對(duì)照組與SZ不同組別的熱圖(見(jiàn)圖8)。結(jié)果表明,對(duì)照組與痰氣郁結(jié)組、陰虛火旺組、心脾兩虛組分兩類聚集,代謝物篩選合理。

    2.6 ?差異代謝物篩選

    以VIP>2、P<0.001、FC>2或<0.2為篩選條件,與對(duì)照組比較,SZ患者血漿中共篩選出8個(gè)差異代謝物(正離子模式6個(gè),負(fù)離子模式2個(gè))。苯乙酰甘氨酸、N-乙?;?D-絲氨酸、甘油-L-脯氨酸、N-亞硝基-L-脯氨酸、L-阿拉伯糖醇、甘氨酰-L-丙氨酰代謝物均上調(diào),?;撬嵯抡{(diào)。詳見(jiàn)表3。

    2.7 ?差異代謝物的代謝通路分析

    被篩選出的差異代謝物在PubChem、KEGG等相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行映射,在成功匹配差異代謝物信息后,搜索對(duì)應(yīng)物種Homo sapiens(human)通路數(shù)據(jù)庫(kù),進(jìn)一步分析其代謝通路。通過(guò)對(duì)對(duì)照組與SZ患者差異代謝物通路的富集、拓?fù)浞治?,繼而對(duì)差異代謝物的通路行進(jìn)一步挑選,選出與差異代謝物具有相關(guān)性的代謝通路。

    以P<0.05且impact值>0.1為條件,篩選出6條與對(duì)照組及SZ患者之間差異代謝物相關(guān)性較高的代謝通路。負(fù)離子模式主要有苯丙氨酸代謝、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝、牛磺酸和次?;撬岽x以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝通路,正離子模式下主要有精氨酸和脯氨酸代謝及亞油酸代謝通路。詳見(jiàn)圖9。

    2.8 ?組間差異代謝物篩選結(jié)果

    以P<0.05為篩選條件,將痰氣郁結(jié)組與陰虛火旺組對(duì)比,正離子模式下有12個(gè)差異代謝物,負(fù)離子模式下有16個(gè)差異代謝物;將痰氣郁結(jié)組與心脾兩虛組對(duì)比,正離子模式下有21個(gè)差異代謝物,負(fù)離子模式下有17個(gè)差異代謝物;將陰虛火旺組與心脾兩虛組對(duì)比,正離子模式下有12個(gè)差異代謝物,負(fù)離子模式下有7個(gè)差異代謝物。3組之間的差異代謝物主要富集在煙酸和煙酰胺代謝、?;撬岷痛闻;撬岽x、甘油磷脂代謝、半乳糖代謝、脂肪酸和初級(jí)膽汁酸生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸代謝及纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸生物合成通路上。詳見(jiàn)圖10。

    以P<0.05、VIP>2、FC>2或<0.2為條件,對(duì)上述差異代謝物進(jìn)一步篩選,結(jié)果提示與陰虛火旺組比較,痰氣郁結(jié)組負(fù)離子模式下3-羥基丁酸上調(diào),正離子模式下天冬酰胺上調(diào);心脾兩虛組負(fù)離子模式下別膽酸下調(diào),正離子模式下膽酸下調(diào)。

    3 討論

    SZ中醫(yī)辨證分型主要依靠臨床經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行四診合參,尚缺乏具有客觀依據(jù)的中醫(yī)分型標(biāo)準(zhǔn),但中藥在精神疾病的治療上獨(dú)具優(yōu)勢(shì)和特色。經(jīng)專家討論,癲證最常見(jiàn)的證型為陰虛火旺證、心脾兩虛證、痰氣郁結(jié)證[15],故本研究通過(guò)代謝組學(xué)的方法,分析健康者與SZ陰虛火旺證、心脾兩虛證、痰氣郁結(jié)證患者差異代謝物,以期為SZ診斷及分型提供客觀的依據(jù)。

    本研究從正離子和負(fù)離子模式下系統(tǒng)全面地分析健康者和SZ患者差異代謝物,篩選出8個(gè)差異代謝物,并對(duì)差異代謝物通路進(jìn)行進(jìn)一步分析。健康者與SZ患者差異代謝物主要涉及各類氨基酸代謝、亞油酸代謝以及?;撬岷痛闻;撬岽x通路。有研究表明,各類氨基酸在SZ發(fā)展的大多數(shù)途徑(如線粒體功能障礙、炎癥、脂質(zhì)氧化、氧化應(yīng)激和凋亡)中作為底物和中間產(chǎn)物起著重要作用[16],SZ患者體內(nèi)天冬酰胺、谷氨酰胺、脯氨酸、鳥(niǎo)氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、?;撬岬却x有顯著改變[17]。SZ的發(fā)生與脂質(zhì)代謝紊亂相關(guān),研究提示磷脂等可通過(guò)影響乙酰膽堿對(duì)SZ患者的認(rèn)知功能障礙、陽(yáng)性癥狀及陰性癥狀的發(fā)生產(chǎn)生影響[18-19]。亞油酸是一種不飽和脂肪酸,在體內(nèi)代謝可產(chǎn)生長(zhǎng)鏈脂肪酸。研究證實(shí),SZ患者血漿中的活性長(zhǎng)鏈脂肪酸通過(guò)參與脂類代謝影響SZ的病理過(guò)程[20]。

    通過(guò)對(duì)不同證型SZ患者代謝物比較發(fā)現(xiàn),與陰虛火旺組相比,心脾兩虛組患者膽酸、別膽酸下調(diào)(P<0.05)。膽酸、別膽酸、甘膽酸參與膽汁的生成,是體內(nèi)多種脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收不可或缺的物質(zhì),研究提示,滋陰清熱法可調(diào)節(jié)甘膽酸治療陰虛火旺證[21]。此結(jié)果也驗(yàn)證了SZ患者脂類代謝異常及陰虛火旺證患者膽酸類物質(zhì)的代謝異常。與陰虛火旺組比較,痰氣郁結(jié)組患者天冬酰胺、3-羥基丁酸表達(dá)上調(diào)(P<0.05),而將痰氣郁結(jié)組與心脾兩虛組比較,二者代謝物則無(wú)顯著差異。天冬酰胺與天冬氨酸相關(guān),是一種非必需氨基酸,是動(dòng)物體內(nèi)氮代謝的參與者。而天冬氨酸作為腦內(nèi)興奮性神經(jīng)遞質(zhì),與大腦的識(shí)別、記憶、智能、情緒和警覺(jué)性有關(guān)[22]。3-羥基丁酸是由肝臟代謝長(zhǎng)鏈脂肪酸產(chǎn)生,作為酮體大量存在外周血中,與代謝性疾病有密切關(guān)系,與認(rèn)知功能、記憶力紊亂等癥狀有關(guān)[23]。研究提示,肝郁以肌酸、乳酸、3-羥基丁酸、谷氨酸等物質(zhì)改變?yōu)榇x組學(xué)特征,脾虛則以纈氨酸、亮氨酸、甘氨酸等氨基酸代謝改變?yōu)橹鱗24]。而肝郁氣滯,久郁傷脾,脾失健運(yùn)則生痰,痰氣相互郁結(jié),故痰氣郁結(jié)及心脾兩虛證皆以脾虛為機(jī)制,或可解釋為何二者代謝物無(wú)顯著差異。

    本研究將SZ的中醫(yī)證型與代謝組學(xué)技術(shù)結(jié)合,通過(guò)對(duì)比分析篩選出不同證型中具有普遍性及顯著性差異的代謝物及其通路,為SZ診斷及辨證分型提供可能的客觀依據(jù)。同時(shí),本研究也存在一定的局限性,如目前試驗(yàn)各組樣本量有限,下一步需擴(kuò)大樣本量,對(duì)不同證型分組差異代謝物進(jìn)行定量研究。

    參考文獻(xiàn)

    [1] WRIGHT M. Schizophrenia and schizophrenia spectrum disorders[J]. JAAPA: Official Journal of the American Academy of Physician Assistants, 2020, 33(6): 46-47.

    [2] MCCUTCHEON R A, REIS M TIAGO, HOWES O D. Schizophrenia-An overview[J]. JAMA Psychiatry, 2020, 77(2): 201-210.

    [3] 潘秀娟,尹曉莉,李康寧.癲狂夢(mèng)醒湯加減聯(lián)合阿立哌唑治療精神分裂癥肝郁痰結(jié)證的療效以及對(duì)血脂代謝、超敏C反應(yīng)蛋白的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2021,39(12):175-178.

    [4] 馮苗苗.代謝組學(xué)在中醫(yī)藥治療NAFLD中的應(yīng)用[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2022,32(11):1044-1048.

    [5] 李緣緣,高碧珍.基于組學(xué)技術(shù)探討微觀指標(biāo)在中醫(yī)證研究中的價(jià)值[J].中華中醫(yī)藥雜志,2022,37(10):5564-5567.

    [6] 劉 ?娟,劉 ?壯,王 ?菲.精神分裂癥患者的差異代謝物篩選方法研究及應(yīng)用[J].中國(guó)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì),2021,38(03):374-377.

    [7] 陶嘉磊,汪受傳,姜茗宸,等.中醫(yī)證候代謝組學(xué)臨床研究進(jìn)展與困境[J].中華中醫(yī)藥雜志,2020,35(8):3799-3803.

    [8] 周亞男,楊 ?棟,羅銀利,等.重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)甲基苯丙胺依賴代謝的影響[J].精神醫(yī)學(xué)雜志,2020,33(6):405-411.

    [9] GAEBEL W, KERST A, STRICKER J. Classification and diagnosis of schizophrenia or other primary psychotic disorders: Changes from ICD-10 to ICD-11 and implementation in clinical practice[J]. Psychiatria Danubina, 2020, 32(3-4): 320-324.

    [10] 李界興,劉祥芹.癲狂夢(mèng)醒湯對(duì)精神分裂癥患者癥狀及血清膽堿酯酶的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2021,30(12):1333-1336.

    [11] 肖慧瓊,李冬鳳,梁小麗,等.氯氮平聯(lián)合穴位埋線法對(duì)精神分裂癥頑固性幻聽(tīng)患者的代謝影響及臨床療效[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2020,40(8):981-986.

    [12] 唐雅妮.張力平衡針?lè)?lián)合頭針治療痙攣型腦癱患兒的療效評(píng)價(jià)及對(duì)血清代謝組學(xué)的影響[D].長(zhǎng)沙:湖南中醫(yī)藥大學(xué),2021:18-25.

    [13] 李亞楠.基于宏基因組學(xué)及代謝組學(xué)探究慢性HBV感染免疫耐受期特殊腸道菌群在NK細(xì)胞功能耗竭中的作用及機(jī)制[D].福州:福建醫(yī)科大學(xué),2021:30-51.

    [14] 尹春園,孫明謙,金 ?龍,等.基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的心肌缺血大鼠血清和心肌組織代謝組學(xué)[J].色譜,2020,38(2):206-211.

    [15] 柳春旺,張宏耕.精神分裂癥中醫(yī)常見(jiàn)證候類型標(biāo)準(zhǔn)第一輪專家問(wèn)卷分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2009,28(14):51-52.

    [16] MEDNOVA I A, CHERNONOSOV A A, KASAKIN M F, et al. Amino acid and acylcarnitine levels in chronic patients with schizophrenia: A preliminary study[J]. Metabolites, 2021, 11(1): 34.

    [17] 張傳波,李鳳良,聶紀(jì)偉,等.首發(fā)精神分裂癥患者血漿游離氨基酸水平及與糖脂代謝指標(biāo)相關(guān)性分析[J].精神醫(yī)學(xué)雜志,2019,32(4):281-284.

    [18] 徐秋鳳,張家歡,方 ?興.脂代謝異常與血管性認(rèn)知障礙相關(guān)性的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2022,19(33):177-180.

    [19] 謝侃侃,李 ?瓊,史戰(zhàn)明.精神分裂癥中的毒蕈堿受體表達(dá)研究進(jìn)展[J].神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生,2021,21(5):375-380.

    [20] 王瑩瑩.精神分裂癥患者外周血脂肪酸組成及分解代謝酶的變化[D].新鄉(xiāng):新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院,2021:6-34.

    [21] 吳平平,葉 ?麗,邵雅婕,等.知柏地黃湯通過(guò)調(diào)節(jié)ARE信號(hào)通路激活細(xì)胞抗氧化反應(yīng)治療陰虛火旺證的機(jī)制研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2020,44(4):316-323.

    [22] 漆 ?明.氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)與智力及癲癇的關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)信息,2019,32(20):33-36.

    [23] 魏大巧.環(huán)境微生物代謝產(chǎn)物3-羥基丁酸甲酯對(duì)兩種癡呆模型小鼠空間學(xué)習(xí)能力影響及其分子機(jī)制[D].昆明:昆明理工大學(xué),2015:3-101.

    [24] 郭心甜,俞仲毅.應(yīng)用核磁共振波譜研究中醫(yī)藥代謝組學(xué)的現(xiàn)狀分析[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2017,31(4):92-98.

    〔收稿日期〕2022-12-05

    〔基金項(xiàng)目〕湖南省衛(wèi)生健康委科研計(jì)劃項(xiàng)目(20201050,D202319017874,20200599);湖南省自然科學(xué)基金科衛(wèi)聯(lián)合項(xiàng)目(2019JJ80025);湖南省中醫(yī)藥科研計(jì)劃項(xiàng)目(202032);湖南省創(chuàng)新研發(fā)項(xiàng)目(2019875-25);湖南省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目(2020SK2123)。

    〔第一作者〕李 ?琪,女,碩士研究生,研究方向:中西醫(yī)結(jié)合精神病學(xué)。

    〔通信作者〕*楊 ?萍,女,博士研究生,碩士研究生導(dǎo)師,副主任醫(yī)師,E-mail:cuteping12384@126.com;劉學(xué)軍,女,碩士,碩士研究生導(dǎo)師,主任醫(yī)師,E-mail:707151907@qq.com。

    猜你喜歡
    代謝組學(xué)超高效液相色譜證型
    基于因子分析及聚類分析的241例感染后咳嗽中醫(yī)證素證型研究
    治咽炎要分清證型
    不同證型糖尿病的調(diào)理
    基于自適應(yīng)矩估計(jì)的BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對(duì)中醫(yī)痛經(jīng)證型分類的研究
    基于UPLC—Q—TOF—MS技術(shù)的牛血清白蛋白誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)的代謝組學(xué)研究
    基于UPLC—Q—TOF—MS技術(shù)的牛血清白蛋白誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)的代謝組學(xué)研究
    藥用植物代謝組學(xué)研究
    超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定豬尿液中30種不同種類“瘦肉精”藥物殘留
    醋酸艾司利卡西平片在比格犬體內(nèi)的相對(duì)生物利用度
    UPLC—MS/MS法同時(shí)測(cè)定葡萄中4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑研究
    日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 女人久久www免费人成看片| 岛国毛片在线播放| 成人永久免费在线观看视频 | 久久香蕉激情| 夜夜爽天天搞| 午夜福利免费观看在线| 国产三级黄色录像| 亚洲精品一二三| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲av成人一区二区三| 老熟女久久久| 国产精品av久久久久免费| 91国产中文字幕| 婷婷丁香在线五月| 曰老女人黄片| 国产xxxxx性猛交| 俄罗斯特黄特色一大片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产成人啪精品午夜网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 中文字幕精品免费在线观看视频| 激情在线观看视频在线高清 | 国产在视频线精品| 丁香六月天网| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 黄色毛片三级朝国网站| av线在线观看网站| 99国产综合亚洲精品| bbb黄色大片| 久久青草综合色| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美在线黄色| 日韩人妻精品一区2区三区| 老司机福利观看| 一本大道久久a久久精品| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 女人久久www免费人成看片| 中文字幕人妻熟女乱码| 丝袜美足系列| 99久久人妻综合| 成人免费观看视频高清| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲成人手机| 纯流量卡能插随身wifi吗| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 高清在线国产一区| 亚洲精品国产区一区二| 国产精品二区激情视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 黄色毛片三级朝国网站| 丝袜喷水一区| 夜夜爽天天搞| 午夜免费鲁丝| 婷婷成人精品国产| 午夜福利在线免费观看网站| 操美女的视频在线观看| 精品高清国产在线一区| 三上悠亚av全集在线观看| 99在线人妻在线中文字幕 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久国产精品影院| 精品乱码久久久久久99久播| 久久午夜亚洲精品久久| 中文字幕高清在线视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 老司机影院毛片| 国产麻豆69| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久中文看片网| 黄片大片在线免费观看| 日日夜夜操网爽| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产精品.久久久| 99久久国产精品久久久| 久久久久网色| 国产精品国产av在线观看| 亚洲精品自拍成人| 精品国内亚洲2022精品成人 | 新久久久久国产一级毛片| 免费高清在线观看日韩| 欧美一级毛片孕妇| 美女国产高潮福利片在线看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 欧美大码av| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲,欧美精品.| 久久午夜亚洲精品久久| 黑人操中国人逼视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 精品欧美一区二区三区在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 成人影院久久| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女高潮到喷水免费观看| 99热国产这里只有精品6| 一区二区三区国产精品乱码| 男女午夜视频在线观看| 夜夜爽天天搞| 首页视频小说图片口味搜索| 在线播放国产精品三级| 亚洲午夜理论影院| 久久久久久久国产电影| 日韩欧美免费精品| 亚洲精品国产色婷婷电影| 天堂俺去俺来也www色官网| av视频免费观看在线观看| 国产在线免费精品| 精品乱码久久久久久99久播| 香蕉久久夜色| 色老头精品视频在线观看| 中文亚洲av片在线观看爽 | 国产一区二区三区视频了| 国产成人欧美| 丝袜在线中文字幕| 久久久国产精品麻豆| 国产成人免费观看mmmm| 在线观看免费视频日本深夜| 老汉色av国产亚洲站长工具| aaaaa片日本免费| 国产在视频线精品| 国产精品免费一区二区三区在线 | 操美女的视频在线观看| 成年人午夜在线观看视频| 一区福利在线观看| 成人手机av| 久久青草综合色| av天堂在线播放| 国产免费福利视频在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲精品国产区一区二| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲欧美激情在线| 大香蕉久久网| 大片电影免费在线观看免费| 激情视频va一区二区三区| 国产精品.久久久| 亚洲成国产人片在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| www.999成人在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 9色porny在线观看| 国产成人系列免费观看| 欧美精品一区二区大全| 黄片播放在线免费| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久中文字幕人妻熟女| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 12—13女人毛片做爰片一| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲综合色网址| 亚洲五月色婷婷综合| 一二三四社区在线视频社区8| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 不卡一级毛片| 久久久久久久精品吃奶| 日日爽夜夜爽网站| 午夜福利乱码中文字幕| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 757午夜福利合集在线观看| a级片在线免费高清观看视频| 最黄视频免费看| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 男女之事视频高清在线观看| 无人区码免费观看不卡 | 欧美黑人精品巨大| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 69精品国产乱码久久久| 精品少妇内射三级| 老司机靠b影院| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 欧美日韩视频精品一区| 午夜免费鲁丝| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 天天添夜夜摸| 久久久久国产一级毛片高清牌| 9热在线视频观看99| 99re在线观看精品视频| 麻豆av在线久日| 成人三级做爰电影| 不卡av一区二区三区| 久久久欧美国产精品| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久人妻av系列| 丝袜在线中文字幕| 国产精品九九99| 免费在线观看黄色视频的| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 涩涩av久久男人的天堂| 久久国产精品大桥未久av| 精品一区二区三区四区五区乱码| 搡老熟女国产l中国老女人| 丁香六月天网| 精品福利永久在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲色图av天堂| 国产欧美日韩一区二区三| 高清毛片免费观看视频网站 | 在线观看一区二区三区激情| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美精品一区二区免费开放| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 黄片播放在线免费| 一区二区三区激情视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 老司机午夜十八禁免费视频| 无限看片的www在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 嫁个100分男人电影在线观看| 制服人妻中文乱码| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一个人免费看片子| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产日韩欧美视频二区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 黄片大片在线免费观看| 精品一区二区三区av网在线观看 | 免费黄频网站在线观看国产| 国产男女超爽视频在线观看| 日本一区二区免费在线视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲七黄色美女视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲视频免费观看视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久久久久久国产电影| 免费看十八禁软件| 国产精品国产高清国产av | 美女主播在线视频| 国产亚洲一区二区精品| videosex国产| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久99热这里只频精品6学生| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 巨乳人妻的诱惑在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲国产中文字幕在线视频| 在线观看免费视频日本深夜| 午夜福利,免费看| 免费在线观看黄色视频的| 色播在线永久视频| 久久精品国产a三级三级三级| videosex国产| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 精品国产乱子伦一区二区三区| 午夜视频精品福利| 国产精品九九99| 久久这里只有精品19| 美国免费a级毛片| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 丝袜在线中文字幕| 国产精品九九99| 国产区一区二久久| 下体分泌物呈黄色| 他把我摸到了高潮在线观看 | 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 伦理电影免费视频| 久久久久久久国产电影| 久久人妻福利社区极品人妻图片| av网站在线播放免费| 妹子高潮喷水视频| 久久人妻福利社区极品人妻图片| www.熟女人妻精品国产| 亚洲专区中文字幕在线| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产精品一区二区在线不卡| 精品福利观看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 大陆偷拍与自拍| 十分钟在线观看高清视频www| 99九九在线精品视频| 啦啦啦免费观看视频1| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产成人欧美在线观看 | av国产精品久久久久影院| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲视频免费观看视频| 久久久久久久久久久久大奶| 色综合欧美亚洲国产小说| 欧美国产精品va在线观看不卡| 极品少妇高潮喷水抽搐| 黄色视频不卡| 美女主播在线视频| 9色porny在线观看| 亚洲熟女毛片儿| 人妻一区二区av| 99riav亚洲国产免费| 成人影院久久| 不卡av一区二区三区| 涩涩av久久男人的天堂| 国产伦理片在线播放av一区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲欧美激情在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 在线天堂中文资源库| 99热网站在线观看| 国产av国产精品国产| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 热99久久久久精品小说推荐| 99riav亚洲国产免费| 美女扒开内裤让男人捅视频| 一本综合久久免费| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 一个人免费看片子| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久香蕉激情| 99国产精品99久久久久| 丁香欧美五月| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲成人手机| 欧美在线黄色| 电影成人av| 黄色a级毛片大全视频| 妹子高潮喷水视频| av有码第一页| 大片电影免费在线观看免费| 国产又色又爽无遮挡免费看| 中文字幕色久视频| 在线观看一区二区三区激情| 婷婷丁香在线五月| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 少妇粗大呻吟视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 日韩欧美免费精品| 淫妇啪啪啪对白视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 最黄视频免费看| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产欧美日韩一区二区三| 国产av又大| 制服人妻中文乱码| 国产深夜福利视频在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美国产精品一级二级三级| 热re99久久精品国产66热6| 天堂中文最新版在线下载| 久久ye,这里只有精品| 中文字幕高清在线视频| 精品国产国语对白av| 极品少妇高潮喷水抽搐| 老鸭窝网址在线观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 视频在线观看一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 天堂动漫精品| 正在播放国产对白刺激| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| www.999成人在线观看| 桃花免费在线播放| 国产精品熟女久久久久浪| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲国产欧美在线一区| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 天天添夜夜摸| 在线av久久热| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 成年人黄色毛片网站| 精品少妇久久久久久888优播| 国产高清视频在线播放一区| 五月开心婷婷网| 热99re8久久精品国产| 亚洲欧美一区二区三区久久| 午夜免费成人在线视频| 亚洲九九香蕉| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲色图av天堂| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲色图av天堂| 亚洲视频免费观看视频| 久久性视频一级片| 精品国内亚洲2022精品成人 | 大型av网站在线播放| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久天堂一区二区三区四区| 久久九九热精品免费| xxxhd国产人妻xxx| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久中文字幕一级| av网站在线播放免费| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 老熟妇仑乱视频hdxx| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲成国产人片在线观看| 欧美日韩av久久| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲国产欧美网| 国产xxxxx性猛交| 99riav亚洲国产免费| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美在线一区亚洲| 9色porny在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 欧美另类亚洲清纯唯美| 女同久久另类99精品国产91| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 一进一出抽搐动态| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 电影成人av| 色尼玛亚洲综合影院| 搡老岳熟女国产| 少妇的丰满在线观看| 精品亚洲成国产av| 午夜精品久久久久久毛片777| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久99一区二区三区| 91九色精品人成在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产男女超爽视频在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲三区欧美一区| 叶爱在线成人免费视频播放| 大码成人一级视频| 老司机靠b影院| av网站免费在线观看视频| 99九九在线精品视频| 另类亚洲欧美激情| 亚洲精华国产精华精| 91九色精品人成在线观看| 久久毛片免费看一区二区三区| 性少妇av在线| 国产一区二区三区视频了| av网站免费在线观看视频| 天堂8中文在线网| 啦啦啦免费观看视频1| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 动漫黄色视频在线观看| 人人妻人人澡人人看| 国产精品久久久av美女十八| 国产片内射在线| 亚洲熟妇熟女久久| netflix在线观看网站| 国产成人精品无人区| 亚洲成人免费电影在线观看| 操出白浆在线播放| 国产一区有黄有色的免费视频| 在线播放国产精品三级| 国产欧美亚洲国产| 老司机深夜福利视频在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 妹子高潮喷水视频| 99riav亚洲国产免费| av免费在线观看网站| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲男人天堂网一区| 国产精品欧美亚洲77777| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产麻豆69| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲人成77777在线视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲色图综合在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲欧美激情在线| 国产麻豆69| 国产主播在线观看一区二区| 免费在线观看日本一区| 免费观看av网站的网址| 亚洲五月色婷婷综合| 黄色片一级片一级黄色片| 国产不卡一卡二| 黄色怎么调成土黄色| 中文字幕人妻丝袜制服| 天堂俺去俺来也www色官网| 极品人妻少妇av视频| 精品视频人人做人人爽| 亚洲 欧美一区二区三区| 天堂中文最新版在线下载| 天堂俺去俺来也www色官网| aaaaa片日本免费| 午夜福利一区二区在线看| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产精品一区二区在线不卡| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 操出白浆在线播放| av欧美777| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲av日韩在线播放| 国产一区二区三区视频了| 成人国语在线视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 成人永久免费在线观看视频 | 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费av中文字幕在线| 成人免费观看视频高清| 九色亚洲精品在线播放| 三级毛片av免费| 国产av一区二区精品久久| 在线观看免费高清a一片| 免费观看av网站的网址| 9热在线视频观看99| 中亚洲国语对白在线视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 日韩有码中文字幕| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美精品一区二区大全| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 免费看十八禁软件| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲精品自拍成人| 国产精品熟女久久久久浪| 最近最新免费中文字幕在线| 成人特级黄色片久久久久久久 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美大码av| 欧美激情 高清一区二区三区| 精品少妇久久久久久888优播| av有码第一页| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 黄色视频在线播放观看不卡| 免费人妻精品一区二区三区视频| 老司机靠b影院| 91老司机精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久ye,这里只有精品| 一进一出好大好爽视频| 黄色a级毛片大全视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲中文日韩欧美视频| 极品教师在线免费播放| 超碰成人久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 日本黄色视频三级网站网址 | 日本wwww免费看| 亚洲美女黄片视频| 高清av免费在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲精品久久午夜乱码| 91成年电影在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 一级片免费观看大全| 亚洲成人免费电影在线观看| 99香蕉大伊视频| 午夜免费成人在线视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 99re在线观看精品视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲男人天堂网一区| 男男h啪啪无遮挡| 免费观看av网站的网址| 午夜激情av网站| 成年人黄色毛片网站| 18禁观看日本| 国产单亲对白刺激| 在线永久观看黄色视频| xxxhd国产人妻xxx| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 丰满少妇做爰视频| 久久人妻熟女aⅴ| 水蜜桃什么品种好| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久亚洲精品不卡| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲熟妇熟女久久| 一区二区三区乱码不卡18| 夜夜爽天天搞| 国产精品久久久久久精品古装| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 在线观看一区二区三区激情| 久久久精品94久久精品| 十八禁网站网址无遮挡| 精品久久久精品久久久| 老鸭窝网址在线观看| 超碰97精品在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年|