舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)與肺癌中醫(yī)證型、病理分型相關(guān)性研究*

張 帥,徐紅俊,安勝軍,魯 琴

(河北中醫(yī)學(xué)院,河北 石家莊 050091)

肺癌是目前我國(guó)發(fā)病率和死亡率皆高的癌癥[1]。調(diào)查發(fā)現(xiàn),2020年男性肺癌發(fā)病率居所有癌癥發(fā)病率的第一位,占14.3 %;女性肺癌發(fā)病率居所有癌癥發(fā)病率的第三位,占8.4 %[2]。肺癌屬“痞癖”、“肺積”、“咯血”、“咳嗽”、“胸痛”等范疇。中醫(yī)對(duì)肺癌治療已有幾千年歷史,在治療肺癌方面具有其獨(dú)有的特色,而舌診作為中醫(yī)望診的重要方法之一,是診斷疾病過(guò)程中辨證論治的重要客觀指標(biāo)之一。有學(xué)者[3]應(yīng)用Citespace軟件對(duì)國(guó)內(nèi)近20年(2001-2020年)腫瘤舌象研究可視化分析,主要熱點(diǎn)內(nèi)容為腫瘤中醫(yī)證候分布規(guī)律、舌象參數(shù)與理化指標(biāo)相關(guān)性研究、腫瘤舌象參數(shù)定量化研究、舌苔脫落細(xì)胞凋亡機(jī)制研究、數(shù)據(jù)挖掘及圖像處理等。本課題組前期研究表明[4-7]:腫瘤患者(尤其是肺癌)的舌象變化存在一定規(guī)律,舌苔脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)為臨床疾病診斷提供科學(xué)依據(jù)。隨著中西醫(yī)結(jié)合療法在臨床中的廣泛應(yīng)用,傳統(tǒng)中醫(yī)辨證方式已不能完全滿(mǎn)足現(xiàn)代臨床的需求,本研究通過(guò)舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)與肺癌中醫(yī)證型、病理分型相關(guān)性研究,確立舌診的量化標(biāo)準(zhǔn),為舌診客觀化在肺癌的臨床應(yīng)用做出貢獻(xiàn)。

1 對(duì)象與方法

1.1對(duì)象 選取2020年8月-2021年8月河北省第四醫(yī)院腫瘤內(nèi)科及呼吸內(nèi)科住院的152例中晚期肺癌患者,經(jīng)過(guò)細(xì)胞學(xué)或組織病理學(xué)檢查確診為肺癌,并參考《中藥新藥研究指導(dǎo)原則》對(duì)中晚期肺癌中醫(yī)證型診斷標(biāo)準(zhǔn),將納入患者進(jìn)行辨證分型分為:氣虛痰濕、氣血瘀滯、陰虛熱毒、氣陰兩虛[8]。同時(shí)選取45例健康人作為對(duì)照組。研究對(duì)象年齡均在24～66歲。

1.2實(shí)驗(yàn)方法 晨起在所有入組人員漱口以及飲食之前,由3名經(jīng)過(guò)規(guī)范化訓(xùn)練醫(yī)生分別對(duì)納入對(duì)象進(jìn)行中醫(yī)辨證分型。之后3名醫(yī)生分別使用一次性壓舌板刮取納入對(duì)象舌中部的舌苔,再用0.5 mL生理鹽水將舌苔沖入離心管中,并做好標(biāo)記。隨后用 721分光光度計(jì),單波長(zhǎng)法檢測(cè)舌苔脫落細(xì)胞的化學(xué)成份含量。

1.3觀察指標(biāo) ①比較健康對(duì)照組及觀察組之間舌象的分布情況;②比較觀察組不同證型與病理學(xué)分型的關(guān)系;③比較健康對(duì)照組、觀察組不同證型舌苔脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)指標(biāo)情況。

2 結(jié)果

2.1不同中醫(yī)證型中晚期肺癌患者及健康對(duì)照組舌象分布情況 健康對(duì)照組多見(jiàn)淡紅舌薄白苔,占82.22 %;氣虛痰濕證中晚期肺癌患者多見(jiàn)淡胖舌、白膩苔,占84.85 %;陰虛熱毒證中晚期肺癌患者多以紅絳舌、少苔為主,占69.77 %;氣陰兩虛證中晚期肺癌患者多以淡胖舌、薄白苔,且伴有齒痕為主,占82.93 %;氣血瘀滯證中晚期肺癌患者多以紫暗舌、薄白苔為主,占88.57 %。見(jiàn)表1。

表1 不同舌象在各組中所占的百分比

2.2組織病理學(xué)與中醫(yī)證型之間的關(guān)系 經(jīng)行×列表資料χ2檢驗(yàn),χ2值為71.358,P<0.01,故各組的不同病理分型差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。鱗癌中以氣虛痰濕型為主,占35.09 %;腺癌中以陰虛熱毒型為主,占58.14 %;大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌以氣血瘀滯型為主,占57.89 %;肺泡癌以氣陰兩虛型為主,占67.65 %。見(jiàn)表2。

表2 中醫(yī)證型與病理學(xué)分型的關(guān)系

2.3各證型中舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)分析 中晚期肺癌患者舌苔脫落細(xì)胞-SH含量及LDH、SDH、ACP活性較健康對(duì)照組均有明顯差異(P<0.01)。與健康對(duì)照組比較,陰虛熱毒組-SH含量及LDH、SDH、ACP活性升高,其他三種證型較健康對(duì)照組-SH含量低,LDH、SDH、ACP活性低,其中氣虛痰濕證ACP活性最低(P<0.01),氣陰兩虛證-SH含量最低,且 SDH、LDH 的活性最低(P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 各組舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)的比較

2.4肺癌組織病理學(xué)分型與舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 各組織病理學(xué)分型LDH活性與健康對(duì)照組比較均存在顯著性差異(P<0.01),腺癌-SH含量及LDH、SDH、ACP活性顯著高于對(duì)照組(P<0.01),而其他幾種類(lèi)型與對(duì)照組相比均顯著降低(P<0.01),其中,大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌LDH、SDH 、ACP活性明顯低于對(duì)照組 (P<0.01),鱗癌組-SH含量顯著低于對(duì)照組。見(jiàn)表4。

表4 中晚期肺癌病理分型和舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)的比較

3 討論

肺癌是死亡率最高、臨床上比較常見(jiàn)的惡性腫瘤,目前中西醫(yī)結(jié)合治療肺癌具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),也是臨床防治肺癌常見(jiàn)的方法。中醫(yī)治療疾病講究辨證論治,而舌診是中醫(yī)辨證論治中不可或缺的一部分,辨舌是中醫(yī)望診的重要環(huán)節(jié)?！杜R證驗(yàn)舌法》中記載:“凡內(nèi)外雜證,亦無(wú)一不呈其形,著其色于舌……據(jù)舌以分虛實(shí),而虛實(shí)不爽焉;據(jù)舌以分陰陽(yáng),而陰陽(yáng)不謬焉;據(jù)舌以分臟腑,配主方,而臟腑不差,主方不誤焉”[9]。通過(guò)觀察舌象,可判斷機(jī)體氣血陰陽(yáng)盛衰情況,辨別病邪性質(zhì),病位深淺以及疾病的轉(zhuǎn)歸。舌象的變化主要包括舌質(zhì)、舌苔兩個(gè)方面,正常舌苔是由脾胃之氣上蒸、胃津上潮而凝聚于舌面形成的,正如《形色外診簡(jiǎn)摩》中所云:“至于苔,乃胃氣之所熏蒸,五臟皆稟氣于胃,故可借以診五臟之寒熱虛實(shí)也”[10]。故通過(guò)觀察舌象的變化,能夠了解肺癌患者早期的病理變化以及肺的功能狀態(tài)及機(jī)體氣血狀態(tài)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為舌苔的成分比較復(fù)雜,主要由脫落的角化上皮、唾液、細(xì)菌、食物殘?jiān)约皾B出的白細(xì)胞組成。在生理情況下,舌黏膜上皮細(xì)胞的新陳代謝保持著動(dòng)態(tài)平衡,呈現(xiàn)薄白均勻,干濕適中狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體處于病理狀態(tài),陰陽(yáng)失衡時(shí),舌黏膜上皮細(xì)胞新陳代謝紊亂,便會(huì)呈現(xiàn)異常舌苔。

3.1中晚期肺癌患者的舌象特點(diǎn) 本研究發(fā)現(xiàn)健康對(duì)照組多以淡紅舌,薄白苔為主,提示氣血調(diào)和,脾胃功能正常。反之,肺癌發(fā)病多因正氣虧虛、痰濁內(nèi)阻或瘀血內(nèi)停,或陰虛熱毒,舌象也會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化。氣虛痰濕證舌質(zhì)以淡胖舌,舌苔以白膩苔為主,多因肺癌病程日久,耗傷正氣,氣虛運(yùn)化水飲無(wú)力,水濕痰飲停聚于舌面。陰虛熱毒證多以舌質(zhì)紅絳,少苔為主,因熱邪過(guò)盛,邪熱耗傷肺津,體內(nèi)陰液不足,不能濡養(yǎng)舌體,故舌質(zhì)紅絳,舌苔剝落。氣陰兩虛證以舌質(zhì)淡紅,舌面上有深淺不一、形態(tài)多樣的裂紋苔,邊有齒痕,淡胖,苔白膩,偏于陰虛,舌苔裂紋,舌質(zhì)淡紅,偏于氣虛,氣虛推動(dòng)無(wú)力,水液停聚于體內(nèi),表現(xiàn)為齒痕苔。氣血瘀滯證多以舌質(zhì)紫暗,苔薄為主,氣血不暢,氣虛無(wú)力推動(dòng)血行,血液瘀滯,故舌質(zhì)紫暗。由此可知肺癌的不同中醫(yī)證型舌象存在明顯差異,說(shuō)明舌診是臨床辨證的重要手段之一,但臨床中病情變化多,病機(jī)錯(cuò)綜復(fù)雜,也可能會(huì)出現(xiàn)舌與證不一致的現(xiàn)象。

3.2中晚期肺癌患者中醫(yī)證型和西醫(yī)病理分型的分析 中晚期肺癌當(dāng)屬本虛標(biāo)實(shí)之證,虛、毒、痰、瘀為病之四因,正虛邪戀,諸因交擾,而成肺癌,尤其是病至中晚期,加之放化療等“火毒”燔灼,耗氣傷陰的表現(xiàn)則更為突出[11]。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)鱗癌中以氣虛痰濕型為主,腺癌中以陰虛熱毒型為主,大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌以氣血瘀滯型為主,肺泡癌以氣陰兩虛型為主。從所有納入的中晚期肺癌患者觀察發(fā)現(xiàn),陰虛熱毒證和氣陰兩虛證最多見(jiàn)。臨床中肺癌病情復(fù)雜,虛實(shí)互見(jiàn),在中醫(yī)中多認(rèn)為肺癌晚期多以正虛為主,故以陰虛熱毒和氣陰兩虛為多見(jiàn),與本研究結(jié)果一致。

3.3舌苔脫落細(xì)胞化學(xué)指標(biāo)與中醫(yī)證型及病理分型間的相關(guān)性 LDH位于胞漿,是細(xì)胞內(nèi)葡萄糖酵解途徑的重要酶類(lèi),可直觀反映舌上皮細(xì)胞無(wú)氧酵解的水平,故舌上皮細(xì)胞無(wú)氧代謝水平與LDH活性正相關(guān)[12]。而SDH是線粒體內(nèi)的標(biāo)志酶,可反映有氧代謝的狀態(tài)。ACP是細(xì)胞內(nèi)溶酶體的標(biāo)志酶,代表著細(xì)胞角化剝脫的速度。-SH是一種與蛋白質(zhì)結(jié)合的基團(tuán),與細(xì)胞代謝密切相關(guān),反映舌上皮細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及角化脫落的速度[13]。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)健康對(duì)照組舌苔脫落細(xì)胞內(nèi)LDH、SDH、ACP活躍,-SH含量豐富,這是因?yàn)榻】等巳宏庩?yáng)平和,氣血充足,舌上皮細(xì)胞新陳代謝旺盛,其生長(zhǎng)和角化脫落維持著動(dòng)態(tài)平衡;陰虛毒熱證和腺癌較健康對(duì)照組-SH含量高,LDH、SDH、ACP活性也較高,可能與肺癌熱毒熏蒸,陰虛陽(yáng)盛,火熱逼迫促使機(jī)體處于病理性亢奮狀態(tài),舌上皮細(xì)胞代謝加速,故-SH含量高。同時(shí)機(jī)體陰血不足,提供給舌上皮細(xì)胞新陳代謝所需的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)均不足,舌上皮細(xì)胞退化、脫落的速度比其生長(zhǎng)、分化的速度更快,因而LDH、SDH、ACP活性明顯高于健康對(duì)照。腺癌大多為周?chē)头伟?臨床早期多無(wú)癥狀,發(fā)現(xiàn)時(shí)多已毒熱陰傷,且多發(fā)生轉(zhuǎn)移,多以陰虛毒熱證為主,故-SH含量以及LDH、SDH、ACP指標(biāo)與陰虛毒熱證的變化趨勢(shì)一致。氣虛痰濕證、氣陰兩虛證、氣血瘀滯證三種證型的LDH、SDH、ACP 的活性均低于健康對(duì)照組,-SH含量也較低,均低于健康對(duì)照組,表明此三種證型的舌苔脫落細(xì)胞的代謝過(guò)程均較健康對(duì)照緩慢,分析可能的原因是以上三種證型皆因正氣衰弱,或邪實(shí)阻滯所致。氣虛痰濕組患者機(jī)體氣虛,體內(nèi)津液輸布異常,則水濕凝聚成痰,痰液粘膩?zhàn)璧K氣機(jī),使得舌上皮細(xì)胞角化、脫落過(guò)程減慢;氣陰兩虛患者以氣陰兩虛,故提供舌上皮細(xì)胞的代謝所需的物質(zhì)基礎(chǔ)匱乏;氣血瘀滯證因氣血凝滯,運(yùn)行不暢,氣血運(yùn)行受阻,從而減緩細(xì)胞的代謝速度。氣血不足導(dǎo)致機(jī)體正常新陳代謝所需的物質(zhì)和能量缺乏或邪實(shí)阻滯影響了機(jī)體正常的氣血精微運(yùn)行,阻礙了舌上皮細(xì)胞正常的代謝過(guò)程,舌苔的代謝速度明顯比健康的人群緩慢。鱗癌、大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌及肺泡癌LDH、SDH、ACP 活性低于健康對(duì)照組,-SH含量也低于健康對(duì)照組。但大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌及氣陰兩虛型LDH、SDH活性最低,可能由于大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌癌細(xì)胞惡性程度高,侵襲力強(qiáng),遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移快,病情進(jìn)展迅速,正氣損耗快,且氣陰兩虛型多為病久傷正,正氣虧虛,機(jī)體出現(xiàn)極度耗損,氣血不能上榮于舌,故舌上皮細(xì)胞的代謝的能量及物質(zhì)均不足,導(dǎo)致細(xì)胞的有氧代謝及無(wú)氧代謝均較差。

綜上,通過(guò)對(duì)中晚期肺癌患者的中醫(yī)證型、病理分型以及舌苔脫落細(xì)胞的研究,表明中晚期肺癌患者舌脫落細(xì)胞LDH、SDH、ACP活性、-SH含量與肺癌組織病理學(xué)分型和所表現(xiàn)的中醫(yī)證型均有密切關(guān)系。準(zhǔn)確的舌診不僅對(duì)于觀察患者病情進(jìn)展有一定的幫助,同時(shí)對(duì)于治療效果的判斷也有一定的指導(dǎo)作用?？陀^化的指標(biāo)在一定程度上反映中醫(yī)的舌診證候特征,使舌診的評(píng)價(jià)通過(guò)更加客觀的指標(biāo)呈現(xiàn),為中醫(yī)在肺癌的診斷、治療以及對(duì)肺癌治療的療效評(píng)估等方面提供了更為準(zhǔn)確的方法學(xué)支持。因此臨床中通過(guò)舌苔脫落細(xì)胞的化學(xué)指標(biāo)可輔助判斷中晚期肺癌中醫(yī)證型和西醫(yī)病理分型,同時(shí)為探討舌象形成的機(jī)理提供了新的思路。