外周血SHP-1、Sestrin2 水平與缺血性腦卒中患者頸動脈斑塊的相關(guān)性分析

單青婷，徐 元

（蘇州市第九人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇 蘇州 215000）

缺血性腦卒中（cerebral ischemic stroke，CIS）是一種臨床上常見的卒中類型，其發(fā)病率、致殘率、死亡率、復(fù)發(fā)率均較高，給人類健康帶來巨大威脅[1]。動脈粥樣硬化為CIS 發(fā)病的危險因素之一，當(dāng)頸動脈硬化斑塊不穩(wěn)定時，會出現(xiàn)斑塊潰瘍、破裂等癥狀，引起動脈內(nèi)血栓的形成，誘發(fā)CIS[2-3]。臨床上尚缺乏預(yù)測CIS患者頸動脈斑塊是否穩(wěn)定的實驗室指標(biāo)，因此尋求安全有效的實驗室指標(biāo)探討其與CIS 患者頸動脈斑塊的相關(guān)性對于指導(dǎo)臨床實踐具有重要意義。蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）為一種調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)與炎癥反應(yīng)的重要蛋白，其可通過去磷酸化靶分子，從而達到調(diào)控細胞反應(yīng)的作用[4]。已有研究[5]證實，SHP-1 在心血管疾病、腫瘤等發(fā)揮著重要作用。Sestrin 2 為一種高度保守的蛋白，主要由應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生，為代謝的重要調(diào)節(jié)者[6]。SHIREMAN 等[7]研究證實，Sestrin 2 與急性缺血性腦卒中具有顯著相關(guān)性。然而，目前國內(nèi)尚缺乏有關(guān)外周血SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊的相關(guān)性研究。鑒于此，本研究特取85 例CIS 患者，旨在明確SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年7 月－2021 年9 月蘇州市第九人民醫(yī)院收治的85 例CIS 患者為試驗組，另選擇我院同時間段體檢健康人群73 例為對照組。該研究已獲取醫(yī)學(xué)倫理委員會審批。納入標(biāo)準(zhǔn)：1）參照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[8]，患者均符合缺血性腦卒中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)顱腦CT、磁共振成像等影像學(xué)確診，且均為首次確診者；2）頭顱磁共振血管造影與頸部血管彩色超聲證實頸部存在斑塊；3）年齡＞18 歲；4）近半年內(nèi)未服用他汀類藥物；5）均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）嚴(yán)重的肝腎功能損害者；2）近期嚴(yán)重外傷者；3）合并呼吸系統(tǒng)疾?。?）合并惡性腫瘤者；5）妊娠期或哺乳期女性；6）有腦卒中病史；7）無法配合頸動脈超聲檢查者；8）合并急慢性感染性疾病者。

1.2 研究方法

1.2.1 頸動脈斑塊穩(wěn)定性判定 采用日立阿洛卡HI VISION Avius 檢測頸動脈斑塊類型與內(nèi)中膜厚度（inner media thickness，IMT），85 例患者均取仰臥位，使得頸部充分暴露，在頸動脈竇近心端檢測IMT，左右兩側(cè)各檢測3 次，結(jié)果取平均值。正常頸動脈內(nèi)膜：IMT ≤1.0 mm；頸動脈內(nèi)膜增厚：1.0 mm ＜IMT ＜1.2 mm，IMT ≥1.2 mm 為斑塊形成。超聲下根據(jù)形態(tài)和回聲特點，斑塊可分為：1）低回聲脂質(zhì)斑塊；2）中等回聲富含膠原蛋白組織的纖維性扁平斑塊；3）強回聲伴聲影的鈣化性斑塊；4）回聲強弱不等的潰瘍性混合斑塊。將低回聲、扁平斑和混合斑診斷為不穩(wěn)定性斑塊；將強回聲斑塊診斷為穩(wěn)定性斑塊。根據(jù)頸動脈斑塊是否穩(wěn)定分為穩(wěn)定組（59 例）與不穩(wěn)定組（26 例）[9]。

1.2.2 外周血SHP-1、Sestrin2 水平的檢測 體檢當(dāng)天采集對照組靜脈血4 mL，入院次日清晨采集試驗組4 mL 空腹靜脈血，通過TD6M 臺式低速離心機（鹽城市凱特實驗儀器有限公司），以半徑為6 cm，轉(zhuǎn)速為3 000 r·min-1離心15 min，取上清液，于-20℃條件下保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測2 組血清SHP-1、Sestrin2 水平，試劑盒均購自武漢楚銳科藥業(yè)科技有限公司。

1.2.3 收集可能引起CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定的影響因素 包括年齡、性別、吸煙史、病變部位、飲酒史、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、既往病史（高血壓史、冠心病史、糖尿病史）、腦卒中家族史，入院時相關(guān)實驗室指標(biāo)：總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（high Density Lipoprotein-C，HDL-C）、載脂蛋白B1、三酰甘油、載脂蛋白A1、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein-C，LDL-C）、空腹血糖、糖化血紅蛋白、白細胞計數(shù)、尿酸、高敏C 反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、血清SHP-1、Sestrin2水平。

1.3 觀察指標(biāo)

1）比較對照組與試驗組的一般資料：包括年齡、性別構(gòu)成、BMI、血清SHP-1、Sestrin2 水平；2）比較穩(wěn)定組與不穩(wěn)定組的臨床資料；3）分析CIS患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定的影響因素；4）分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成的相關(guān)性；5）分析入院時血清SHP-1、Sestrin2水平及二者聯(lián)合對CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊的預(yù)測價值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS 19.0 軟件分析數(shù)據(jù)，正態(tài)分布計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以百分比（%）表示，χ2檢驗，理論頻數(shù)＜5 則采用校正χ2。多因素分析采用Logistic回歸分析。以受試者工作特征（receiver operating characteristics，ROC）曲線下面積（area under the curve，AUC）評估預(yù)測價值，采用Spearman 分析相關(guān)性，r值越大代表相關(guān)性越強。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組與試驗組的一般資料比較

2 組年齡、性別構(gòu)成、BMI 比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），試驗組血清SHP-1 水平低于對照組（P＜0.05），試驗組血清Sestrin2 水平高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 對照組與試驗組的一般資料比較（±s ）

表1 對照組與試驗組的一般資料比較（±s ）

組別 例數(shù)年齡/歲性別[例（%）]BMI/（kg·m-2）SHP-1/（ng·mL-1） Sestrin2/（ng·mL-1）男女對照組 7362.35±9.1243（58.90） 30（41.10）23.81±2.751.65±0.3611.26±2.92試驗組 8562.67±9.2551（60.00） 34（40.00）23.62±2.830.62±0.1915.13±3.48 t/ χ2 0.2180.0200.42622.9287.500 P 0.8280.8890.671＜0.001＜0.001

2.2 穩(wěn)定組與不穩(wěn)定組的臨床資料比較

不穩(wěn)定組入院時載脂蛋白A1、LDL-C、空腹血糖、hs-CRP、尿酸、血清Sestrin2水平高于穩(wěn)定組（P＜0.05），不穩(wěn)定組入院時血清SHP-1 水平低于穩(wěn)定組（P＜0.05）。見表2。

表2 穩(wěn)定組與不穩(wěn)定組的臨床資料比較（±s ） 例

表2 穩(wěn)定組與不穩(wěn)定組的臨床資料比較（±s ） 例

臨床資料不穩(wěn)定組（26 例）穩(wěn)定組（59 例）t/ χ2 P年齡/歲62.46±9.2162.76±9.330.1370.891性別男17（65.38）34（57.63）0.4530.501女9（34.62）25（42.37）吸煙史12（46.15）28（47.46）0.0120.912病變部位左側(cè)12（46.15）27（45.76）0.0010.973右側(cè)14（53.85）32（54.24）飲酒史10（38.46）24（40.68）0.0370.848 BMI/（kg·m-2）23.51±2.7923.67±2.850.2400.811既往病史高血壓史15（57.69）26（44.07）1.3420.247冠心病史12（46.15）22（37.29）0.5910.442糖尿病史 8（30.77）15（25.42）0.2610.609腦卒中家族史 5（19.23） 6（10.17）1.1350.299入院時相關(guān)實驗室指標(biāo)TC/（mmol·L-1） 4.73±0.62 4.58±0.571.0880.280 HDL-C/（mmol·L-1） 1.46±0.29 1.39±0.261.1040.273載脂蛋白B1/（g·L-1） 1.12±0.18 1.14±0.170.4910.625三酰甘油/（mmol·L-1） 1.32±0.28 1.36±0.300.5780.565載脂蛋白A1/（g·L-1） 2.45±0.38 1.52±0.2413.652＜0.001 LDL-C/（mmol·L-1） 3.98±0.72 3.21±0.535.510＜0.001空腹血糖/（mmol·L-1） 7.16±1.78 5.83±1.423.675＜0.001糖化血紅蛋白/% 5.96±1.32 5.34±1.052.3140.023白細胞計數(shù)（×109·L-1） 7.14±1.72 7.25±1.830.2600.796尿酸/（μmol·L-1）412.36±45.74381.25±40.363.1430.002 hs-CRP/（mg·L-1） 4.12±0.65 2.33±0.3915.735＜0.001 SHP-1/（ng·mL-1） 0.42±0.11 0.71±0.226.365＜0.001 Sestrin2/（ng·mL-1）17.35±4.6114.15±3.173.710＜0.001

2.3 分析CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定的影響因素

以入院時載脂蛋白A1、LDL-C、空腹血糖、hs-CRP、血清Sestrin2 水平、尿酸、血清SHP-1 水平為自變量（賦值情況：均為連續(xù)變量），以CIS 患者頸動脈斑塊是否穩(wěn)定為因變量（否= 1，是= 0）進行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，入院時載脂蛋白A1、尿酸、血清SHP-1、Sestrin2 水平均為CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定的影響因素（P＜0.05）。見表3。

2.4 分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成的相關(guān)性

Spearman 分析結(jié)果顯示，血清SHP-1 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成呈負相關(guān)（P＜0.05），血清Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成的相關(guān)性

2.5 分析入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯(lián)合對CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊的預(yù)測價值

入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯(lián)合預(yù)測CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊AUC 值分別為0.818、0.824、0.868（P＜0.05）。見表5。ROC 曲線見圖1。

圖1 入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯(lián)合預(yù)測CIS患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊的ROC 曲線

表5 分析入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯(lián)合對CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊的預(yù)測價值

3 討論

CIS 的發(fā)生發(fā)展與諸多因素密切相關(guān)，其中頸動脈不穩(wěn)定斑塊為CIS 的重要致病因素，且相比于頸動脈狹窄，其危險性更高[10]。相關(guān)研究[11]指出，不穩(wěn)定斑塊會誘導(dǎo)腦血栓的形成，從而使得腦局部供血區(qū)血流中止，造成腦組織缺氧、缺血，甚至引起壞死軟化。因此，臨床常以阻礙頸動脈斑塊的形成來防止CIS 的發(fā)生。但臨床上尚缺乏特異性的指標(biāo)用于分析與CIS 患者頸動脈斑塊的相關(guān)性，因此早期診斷、預(yù)測CIS 患者頸動脈斑塊穩(wěn)定性對于臨床擬定治療方案具有重要的臨床意義。

本研究結(jié)果顯示，相比于正常人群，CIS 患者血清 SHP-1 水平更低，而血清Sestrin2 水平更高，提示CIS 患者血清SHP-1、Sestrin2 水平異常。本研究中Logistic回歸分析結(jié)果顯示，入院時載脂蛋白A1、尿酸、血清SHP-1、Sestrin2 水平均為CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定的影響因素，建議臨床應(yīng)根據(jù)上述危險因素進行早期干預(yù)來降低CIS 患者形成頸動脈不穩(wěn)定斑塊的風(fēng)險。相關(guān)研究[12]指出，載脂蛋白A1 可促進單核細胞與血小板活化，增加機體內(nèi)單核細胞與血小板間的黏附，從而誘導(dǎo)頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成。國外有研究[13]指出，年齡≥75 歲的中國人群血清尿酸水平升高可能與頸動脈粥樣硬化的發(fā)生和進展獨立且顯著相關(guān)。相關(guān)研究[14-15]指出，SHP-1 主要存在于造血細胞，可脫磷酸化處理下游信號蛋白分子磷酸酪氨酸，從而調(diào)控抗原受體復(fù)合物、酪氨酸激酶等多個信號通路，從而調(diào)控造血干細胞的凋亡與增殖，當(dāng)SHP-1 基因突變或失活會影響造成的信號通路，從而誘發(fā)多種疾病。此外，SHP-1 是STAT3 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負調(diào)控因子，在肝癌、胃癌等多種惡性腫瘤中發(fā)揮抑癌功能[16]。國內(nèi)有研究[17]指出，慢性髓性白血病患者SHP-1mRNA 較高，可其能夠促進疾病進展。相關(guān)研究[18]指出，機體應(yīng)激狀態(tài)會影響Sestrin2 的表達水平，其與機體的各種代謝密切相關(guān)。國內(nèi)有研究[19]指出，急性缺血性腦卒中患者血清Sestrin2 水平異常升高，且監(jiān)測血清Sestrin2 水平可用于評估患者病情及預(yù)后評估。本研究ROC 曲線結(jié)果顯示，入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯(lián)合預(yù)測CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊的AUC 值分別為0.818、0.824、0.868，提示監(jiān)測血清SHP-1、Sestrin2 水平可有助于預(yù)測CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊，且二者聯(lián)合具有更高的預(yù)測價值。

綜上所述，血清SHP-1 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成呈負相關(guān)，血清Sestrin2 水平與CIS患者頸動脈斑塊不穩(wěn)定形成呈正相關(guān)，二者可用于預(yù)測CIS 患者發(fā)生頸動脈不穩(wěn)定斑塊，且二者聯(lián)合預(yù)測的價值更高，可進一步推廣。