兩個(gè)八仙花品種花色苷的提取、鑒定和理化穩(wěn)定性

李清韻 唐倩雯 陳冠群 申曉輝

摘 要：為優(yōu)化八仙花花色苷提取條件，探究具有不同花色可調(diào)性的八仙花花色苷組分和理化穩(wěn)定性差異，初步解釋八仙花花色可調(diào)性存在差異的原因，該文以花色不可調(diào)的‘蒂亞娜（Tijana）和花色可調(diào)的‘拉維布蘭（Ravi Brent）八仙花（Hydrangea macrophylla）為材料，通過(guò)L9（33）正交試驗(yàn)確定超聲波法提取花色苷的最優(yōu)條件，利用UPLC－Q－TOF－MS法進(jìn)行花色苷組分的鑒定，分析離體條件下溫度、光照、金屬離子和糖類對(duì)八仙花花色苷理化穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明：（1）花色苷提取的最優(yōu)條件是‘蒂亞娜和‘拉維布蘭的乙醇濃度分別為70%和80%，料液比均為1∶20，提取時(shí)間均為20 min。（2）二者的主要花色苷組分均為飛燕草素－3－O－葡萄糖苷。（3）八仙花花色苷在溫度≤ 70 ℃暗處保存效果更好。（4）花色不可調(diào)的‘蒂亞娜八仙花花色苷對(duì)光照、糖類和大多金屬離子更穩(wěn)定；只有花色可調(diào)的‘拉維布蘭八仙花花色苷加入中低濃度（10～30 mmol·L－1）Al3+ 后由粉色變?yōu)樗{(lán)色且穩(wěn)定性提高，而 ‘蒂亞娜無(wú)此顏色變化，表明八仙花花色可調(diào)性的差異與其理化穩(wěn)定性有關(guān)。該研究結(jié)果為八仙花花色苷提取、保存、花色改良以及干燥花護(hù)色等提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 八仙花， 花色苷， 超聲提取， 鑒定， 理化穩(wěn)定性

中圖分類號(hào)：Q945

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000－3142（2023）04－0765－12

Abstract：To explain the reason for different flower color adjustabilities of Hydrangea macrophylla， non－adjustable color ‘Tijana and adjustable color ‘Ravi Brent of Hydrangea macrophylla were used as experimental materials. The extraction conditions were optimized and the components of H. macrophylla anthocyanins were measured. Their physical－chemical stabilities were also explored， aiming to explore the mechanism of flower color adjustability. The optimal extraction conditions of Hydrangea anthocyanins by the ultrasonic method were determined through L9（33）orthogonal experiments. The anthocyanin components were separated and identified by UPLC－Q－TOF－MS. And the effects of temperature， light， metal ions and sugars on the physical－chemical stabilities of H. macrophylla anthocyanins were also explored in vitro conditions. The results were as follows： （1） The optimal conditions for extraction of H. macrophylla anthocyanins were that the ethanol concentration for ‘Tijana and ‘Ravi Brent were 70% and 80% respectively; the ratio of plant material to extraction solution was both 1∶20; and the extraction time was both 20 m. （2） The main anthocyanin component of the two varieties was both Delphinidin 3－O－glucoside. （3） H. macrophylla? anthocyanins were more stable when stored below 70 ℃ and in the dark. （4） Both Cu2+ and Al3+ change the color of the anthocyanin solution， and Cu2+ specifically improved the stability of the anthocyanin of ‘Tijana. 10-90 mmol·L－1 Ca2+， Al3+ and 90 mmol·L－1 Mg2+ had significant effects on the stability of anthocyanin of both varieties. Glucose， maltose， sucrose， galactose and 8%-10% concentration of rhamnose increased the stability of the non－adjustable color ‘Tijana Hydrangea macrophlla anthocyanins. While 4%-10% concentration of rhamnose promoted the stability of adjustable color ‘Ravi Brent Hydrangea macrophylla anthocyanins. The non－adjustable color ‘Tijana of H. macrophylla anthocyanins were more stable to light， sugars and most metal ions， compared with the adjustable color ‘Ravi Brent. Only the anthocyanins of the adjustable color ‘Ravi Brent of H. macrophylla turned from pink to blue， and its stability increased after adding low medium concentration （10-30 mmol·L－1） of Al3+. However， the non－adjustable color ‘Tijana of H. macrophylla did not have this kind of color change， indicating that the difference in color adjustability of H. flowers is related to its physical－chemical stability. These results provide the theoretical reference for the extraction and observation of H. macrophlla anthocyanins， flower color improvement and dry flower color protection.

Key words： Hydrangea macrophylla， anthocyanins， ultrasonic extraction， identification， physical－chemical stability

八仙花（Hydrangea macrophylla）別名繡球，為虎耳草科（Saxifragaceae）八仙花屬（Hydrangea）落葉灌木，品種繁多且花色豐富，是切花、盆花及園林景觀中的重要觀賞植物。目前，對(duì)于八仙花花色的研究多集中于單個(gè)品種的花色苷提?。▌詵|等，2011）、穩(wěn)定性分析（賈洪菊，2011）或某些品種間的花色苷組分鑒定（龔仲幸等，2017；Li et al.， 2019; Yoshida et al.， 2021）等。八仙花花色豐富且在人工栽培條件下具有一定的可調(diào)性。藍(lán)色八仙花多由粉色品種轉(zhuǎn)變而成，此類八仙花稱為花色可調(diào)（刁春武等，2017；楊娟等，2019）；另一部分粉色八仙花的花色始終為粉色，即花色不可調(diào)（鄧衍明等，2018）。Oyama等（2015）和 Kodama等（2016）均發(fā)現(xiàn)，在pH 4.0條件下，Al3+、1， 5－O－咖啡?？鼘幩帷?， 5－O－香豆?？鼘幩崤c飛燕草素－3－O－葡萄糖苷（Delphinidin－3－O－glucoside）形成藍(lán)色復(fù)合物；Li等（2019）發(fā)現(xiàn)在含鋁的酸性土壤中，這種藍(lán)色復(fù)合物的產(chǎn)生使得八仙花由紅色變?yōu)樗{(lán)色; Yoshida等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，不同花色的八仙花具有相同的花色苷組分，花色的差異源自液泡內(nèi)pH 和金屬離子等因素的差異。

目前，已有研究初步揭示了八仙花存在花色可調(diào)的現(xiàn)象，而對(duì)其不同品種間花色可調(diào)性差異的機(jī)制還缺乏較為系統(tǒng)深入的研究。因此，本文選擇花色不可調(diào)的‘蒂亞娜（Tijana）八仙花和花色可調(diào)的‘拉維布蘭（Ravi Brent）八仙花作為研究材料，通過(guò)L9（33）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定超聲波法提取花色苷的最優(yōu)條件，利用液質(zhì)聯(lián)用（UPLC－Q－TOF－MS）法進(jìn)行花色苷組分的鑒定，通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定吸光度探究離體條件下溫度、光照、金屬離子和糖類對(duì)八仙花花色苷理化穩(wěn)定性的影響，擬探討以下問(wèn)題：（1）超聲波法提取八仙花花色苷的最優(yōu)條件是什么；（2）花色可調(diào)/不可調(diào)性的八仙花花色苷組分有何差異；（3）影響八仙花花色苷穩(wěn)定性的因素在花色可調(diào)/不可調(diào)性之間有無(wú)差異。以期為八仙花花色改良、花色苷保存應(yīng)用和干燥花護(hù)色提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料采集與預(yù)處理

2020年1月于上海市閔行區(qū)某鮮花店購(gòu)買花色不可調(diào)和可調(diào)為藍(lán)色的粉色系八仙花品種‘蒂亞娜（圖1：A）和‘拉維布蘭（圖1：B）切花作為研究材料。各選取5支花色相同、形態(tài)相似且完全盛開的花枝，隨機(jī)選取不同花枝上性狀相似的萼片，每份稱取鮮重1.000 g。

1.2 方法

1.2.1 花色苷提取條件的優(yōu)化 利用L9（33）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)乙醇濃度（%）、料液比（八仙花萼片樣品鮮重與提取液體積的比，g·mL－1）、提取時(shí)間（超聲時(shí)間+間隔時(shí)間，其中每超聲10 s間隔10 s，min），在不高于55 ℃的提取溫度下優(yōu)化八仙花花色苷的最佳提取條件（表1）。

提取參照孫衛(wèi)等（2010）和Park等（2014）的方法并略作修改。將八仙花樣品在液氮中研磨成粉末后，按表1中的提取條件進(jìn)行超聲法提取，得到花色苷提取液。

采用pH示差法對(duì)八仙花花色苷提取液中花色苷含量進(jìn)行測(cè)定，參照徐文秀和劉?。?020）的方法并略作修改，利用Fuleki 公式（1968）計(jì)算花色苷含量。

A=（ Ax-A700） pH 1.0-（ Ax-A700 ） pH 4.5（1）

C = A/ε/L×M×DF×V/W（2）

式中： A為吸光度，Ax、A700分別為最大吸收波長(zhǎng)和700 nm 處的吸光度；C為花色苷含量（mg·g－1 FW）；ε為矢車菊素－3－O－葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù)（26 900）；L為光程（1 cm）；M為花色苷分子質(zhì)量（449.2）；DF為稀釋倍數(shù)；V為體積（mL）；W為樣品質(zhì)量（g）。

1.2.2 花色苷組分分離鑒定 花色苷組分的分離鑒定參照郁晶晶等（2020）的方法并略作修改。采用超高效液相色譜-離子淌度-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀（ACQUITY I class UPLC / 2D H class & Vion IMS QTOF MS，上海沃特世科技有限公司）對(duì)八仙花花色苷組分進(jìn)行鑒定分析。含有矢車菊素－3－O－葡萄糖苷（Cyanidin－3－O－glucoside）和飛燕草素－3－O－葡萄糖苷等13種花色苷的混合標(biāo)準(zhǔn)品（European Pharmacopoeia Reference Standard）購(gòu)自法國(guó) EDQM公司。

UPLC分析條件：柱溫45 ℃，流速0.4 mL·min－1，進(jìn)樣體積3 μL；流動(dòng)相A液：0.1%甲酸溶液（V甲酸∶V水=0.1∶99.9）；流動(dòng)相B液：含0.1% 甲酸乙腈（V甲酸∶V乙腈=0.1∶99.9）。梯度洗脫程序：0 min，95% A，5% B；3 min，80% A，20% B；10 min，0% A，100% B；12 min，0% A，100% B；15 min，5% A，95% B；19 min，5% A，95% B。

質(zhì)譜分析條件：電噴霧電離，正離子檢測(cè)模式，掃描范圍為 50 ～ 1 000 m·z－1，掃描速度為0.2 s；毛細(xì)管電壓 2 000 V，錐孔電壓 40 V，霧化氣溫度450 ℃，霧化氣流量 900 L·h－1，錐孔反吹氣 50 L·h－1，離子源溫度115 ℃。

1.2.3 花色苷穩(wěn)定性的影響因素分析 基于1.2.1的優(yōu)化條件進(jìn)行兩個(gè)八仙花品種花色苷的提?。换ㄉ盏睦砘€(wěn)定性分析參照賈洪菊（2011）和昝立峰等（2017）的方法并略作修改。為排除金屬離子和糖類改變花色苷結(jié)構(gòu)而影響最大吸收波長(zhǎng)，先在500～600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行各處理組掃描，根據(jù)吸光度A確定最大吸收波長(zhǎng)。

1.2.3.1 溫度對(duì)花色苷穩(wěn)定性的影響 利用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)定室溫條件下花色苷提取液的吸光度A0；將花色苷提取液分別置于30～100 ℃水浴鍋中加熱1 h，測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度AT，計(jì)算保存率并繪制成圖。

保存率（%）=（ AT/A0）×100（3）

式中：AT為在溫度T下處理1 h后的吸光度；A0為室溫下的吸光度。

1.2.3.2 光照對(duì)花色苷穩(wěn)定性的影響 將花色苷提取液置于室內(nèi)自然光（光照強(qiáng)度為1 000 Lx）和黑暗（黑布包裹）環(huán)境下，于0、1、2、4、8、16 d后測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度，計(jì)算保存率并繪制成圖。

保存率（%）=（ At/A0）×100（4）

式中：At為在時(shí)間t時(shí)的吸光度；A0為在時(shí)間0時(shí)的吸光度。

1.2.3.3 金屬離子對(duì)花色苷穩(wěn)定性的影響 向花色苷提取液中加入等體積的4個(gè)濃度（0、10、30、90 mmol·L－1）MgCl2、CaCl2、AlCl3、CuCl2溶液，觀察溶液顏色變化并測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度，計(jì)算保存率并繪制成圖。

保存率（%）=（ Ac/A0）×100（5）

式中：Ac為加入濃度為c的金屬離子溶液后的吸光度；A0為等體積純水后的吸光度。

1.2.3.4 糖類對(duì)花色苷穩(wěn)定性的影響 向花色苷提取液中加入等體積的不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)（0、2%、4%、6%、8%和10%）葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、半乳糖和鼠李糖溶液，觀察溶液顏色變化并測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度，計(jì)算保存率并繪制成圖。

保存率（%）=（ Ac/A0）×100（6）

式中：Ac為加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為c的糖類溶液后的吸光度；A0為加入等體積純水后的吸光度。

1.3 數(shù)據(jù)分析

每個(gè)處理進(jìn)行3次生物學(xué)重復(fù)。采用Microsoft Office Excel 2016軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理、分析，采用IBM SPSS Statistics 25 軟件進(jìn)行正交試驗(yàn)極差分析、方差分析和估算邊際平均值計(jì)算，采用GraphPad Prism 8軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩個(gè)八仙花品種花色苷超聲波法最佳提取條件的優(yōu)化

表2-4結(jié)果表明，處理組合1（60%乙醇+1∶20料液比+20 min提取時(shí)間）為正交試驗(yàn)中的最佳提取條件，‘蒂亞娜和‘拉維布蘭八仙花花色苷含量最高可達(dá)63.678 μg·g－1 FW和149.177 μg·g－1 FW；3個(gè)提取條件對(duì)花色苷提取量的影響順序依次是料液比>提取時(shí)間>乙醇濃度。其中，料液比對(duì)花色苷含量的影響最大，達(dá)到極顯著差異；提取時(shí)間的影響達(dá)到顯著或極顯著差異；乙醇濃度對(duì)‘蒂亞娜八仙花花色苷含量影響不顯著。

由表2和表3可知，‘蒂亞娜八仙花花色苷的最優(yōu)提取條件組合是A2B1C1，即乙醇濃度為70%，料液比為1∶20，提取時(shí)間為20 min；而‘拉維布蘭八仙花花色苷提取的最優(yōu)條件則是A3B1C1，即乙醇濃度為80%，料液比為1∶20，提取時(shí)間為20 min；與表2的差異在于乙醇濃度由60%提高至80%。依據(jù)圖2估算的最優(yōu)組合條件進(jìn)行3次重復(fù)性驗(yàn)證并取平均值，測(cè)得‘蒂亞娜的花色苷含量為70.135 μg·g－1 FW，‘拉維布蘭的花色苷含量高達(dá)153.630 μg·g－1 FW，均超過(guò)了表2中已知的最佳組合A1B1C1，驗(yàn)證了估算結(jié)果的正確性。

2.2 兩個(gè)八仙花品種花色苷的組分鑒定

根據(jù)紫外-可見光譜吸收特征，在520 nm處檢測(cè)得1種花色苷類物質(zhì)；利用花色苷混合標(biāo)準(zhǔn)品和UPLC－Q－TOF－MS鑒定為飛燕草素－3－O－葡萄糖苷（圖3）。說(shuō)明這兩種八仙花的花色苷組分無(wú)差異，均只含飛燕草素－3－O－葡萄糖苷。

2.3 離體條件下4種因素對(duì)兩個(gè)八仙花品種花色苷理化穩(wěn)定性的影響

基于2.1正交試驗(yàn)篩選出的最佳提取條件 （70% 和80%乙醇濃度，1∶20料液比，20 min提取時(shí)間），獲得‘蒂亞娜和‘拉維布蘭八仙花花色苷提取液；利用單因素隨機(jī)區(qū)組實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究4種因素（溫度、光照和添加金屬離子、糖分）對(duì)花色苷理化穩(wěn)定性的影響。

2.3.1 溫度 以室溫下的八仙花提取液中的花色苷保存率為100% （對(duì)照），‘蒂亞娜和‘拉維布蘭八仙花提取液中的花色苷在30～100 ℃保存率變化趨勢(shì)基本相同，如圖4所示。在≤40 ℃水浴中放置1 h時(shí)保持穩(wěn)定，在40～70 ℃范圍內(nèi)略有下降，當(dāng)溫度≥ 80 ℃時(shí)則迅速下降至100 ℃差異不顯著，表明兩個(gè)品種八仙花的花色苷熱穩(wěn)定性相近，并隨著溫度的升高穩(wěn)定性下降，其中以70 ℃以下保存最為適宜。

2.3.2 光照條件 如圖5所示，不論是光照還是避光條件下，兩個(gè)八仙花品種的花色苷保存率均隨時(shí)間延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，而‘蒂亞娜明顯高于‘拉維布蘭，表明花色不可調(diào)的‘蒂亞娜 的花色苷較花色可調(diào)的‘拉維布蘭更穩(wěn)定。兩個(gè)八仙花品種的花色苷避光保存時(shí)的保存率顯著高于自然光照，其中‘蒂亞娜花色苷避光保存16 d時(shí)的保存率比室內(nèi)自然光照下高出16.92%，而‘拉維布蘭則高出44.11%，表明花色可調(diào)的‘拉維布蘭較花色不可調(diào)的‘蒂亞娜 花色苷對(duì)光照更敏感。

2.3.3 金屬離子 向兩個(gè)八仙花品種的花色苷提取液中加入等體積90 mmol·L－1 MgCl2、CaCl2、AlCl3和CuCl2溶液，觀察金屬離子對(duì)花色苷顏色的影響。只有加入Cu2+ 后才會(huì)由粉色變?yōu)榫G色；加入Al3+ 會(huì)使‘蒂亞娜提取液由淺粉色變?yōu)辄S色，‘拉維布蘭提取液由深粉色變?yōu)樗{(lán)紫色（表5）。

由于花色苷類物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)一般在500～600 nm范圍內(nèi)，因此在500～600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)處理后的兩種八仙花花色苷提取液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，以確定最大吸收波長(zhǎng)并測(cè)量吸光度，結(jié)果如圖6所示，‘蒂亞娜（花色不可調(diào)）提取液加入Mg2+ 后最大吸收波長(zhǎng)仍為560 nm；而加入Ca2+、Cu2+ 和Al3+ 后，最大吸收波長(zhǎng)均為565 nm。

花色可調(diào)的‘拉維布蘭八仙花提取液中的花色苷在加入Mg2+ 和Ca2+ 后最大吸收波長(zhǎng)沒有改變，仍為540 nm，但加入Cu2+ 后吸光度維持在一個(gè)較低的水平且無(wú)明顯的吸收峰，表明花色苷與Cu2+螯合使其共軛體系發(fā)生了改變，吸收波長(zhǎng)也發(fā)生了改變，從而使顏色發(fā)生改變；加入Al3+ 后長(zhǎng)波方向的吸收范圍增大導(dǎo)致提取液呈藍(lán)色（圖7），這一結(jié)果與表5的觀察結(jié)果相一致。

由圖8可知，4種金屬離子對(duì)兩種八仙花花色苷穩(wěn)定性的影響具有差異性。高濃度（90 mmol·L－1）Mg2+ 和Ca2+ 均有助于提高兩者的穩(wěn)定性；

Al3+ 對(duì)‘蒂亞娜花色苷穩(wěn)定性的影響呈現(xiàn)先降低、后升高的變化趨勢(shì)，顯著提升了‘拉維布蘭八仙花花色苷的穩(wěn)定性。Cu2+ 對(duì)兩者的影響效果恰恰相反，其中高濃度時(shí)可顯著提高‘蒂亞娜的花色苷穩(wěn)定性，而使‘拉維布蘭八仙花花色苷的穩(wěn)定性降至最低，表明Cu2+ 可特異性地提升‘蒂亞娜花色苷的穩(wěn)定性。

2.3.4 糖類 加入5種糖類后兩個(gè)八仙花品種的花色苷溶液顏色均不變；對(duì)其進(jìn)行500～600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的全波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)，只有加入葡萄糖溶液才使‘蒂亞娜提取液的最大吸收波長(zhǎng)變?yōu)?65 nm；其他條件下的最大吸收波長(zhǎng)仍保持在540 nm。添加5種糖類對(duì)‘蒂亞娜八仙花花色苷的穩(wěn)定性整體優(yōu)于‘拉維布蘭八仙花；葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、半乳糖和高濃度（8%～10%）鼠李糖均可以增加花色不可調(diào)的‘蒂亞娜八仙花花色苷的穩(wěn)定性；除中高濃度（4%～10%）鼠李糖促進(jìn)花色可調(diào)的‘拉維布蘭八仙花花色苷的穩(wěn)定性、高濃度（10%）半乳糖破壞其穩(wěn)定性外，其他3種糖類對(duì)此均無(wú)影響（圖9）。

3 討論與結(jié)論

本研究首先利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化了八仙花花色苷提取條件，確定了超聲波法提取花色苷的最優(yōu)條件是‘蒂亞娜為乙醇（pH 2.0）濃度70%，料液比1∶20，提取時(shí)間20 min；‘拉維布蘭為乙醇（pH 2.0）濃度80%，料液比1∶20，提取時(shí)間20 min，這與劉曉東等（2011）同類研究相比耗時(shí)更短，效率更高。此外，提取溫度、pH值和提取方法等均會(huì)影響花色苷含量，后續(xù)可以通過(guò)增加多因素、多水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)一步優(yōu)化提取方法。

本研究利用液-質(zhì)聯(lián)用法從兩個(gè)八仙花品種的花色苷提取液中只鑒定出飛燕草素－3－O－葡萄糖苷，而龔仲幸等（2017）以矢車菊－3，5－雙葡萄糖苷為外標(biāo)，通過(guò)液-質(zhì)聯(lián)用法在‘藍(lán)色媽媽八仙花中檢測(cè)到了芍藥花素－3－葡萄糖苷、飛燕草素－3－葡萄糖苷、飛燕草素－3－戊糖－5－葡萄糖苷等12種花色苷， 推測(cè)這一結(jié)果差異除了受設(shè)備檢測(cè)條件、添加花色苷混合標(biāo)樣的最低檢出限影響以外，還可能與采集的八仙花品種、生境與發(fā)育階段有關(guān)。

兩個(gè)八仙花品種具有相同的花色苷主組分，由此判定花色可調(diào)性不僅與花色苷種類有關(guān)，更重要的是受其結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性及呈色條件影響。本研究中，兩個(gè)八仙花品種的花色苷在70 ℃以下均具有較好的熱穩(wěn)定性，在溫度≤ 70 ℃保存效果更好，這與賈洪菊（2011）的研究結(jié)論一致。這是因?yàn)楦邷貢?huì)促進(jìn)花色苷結(jié)構(gòu)中糖苷的水解，使其失去對(duì)花色素的保護(hù)作用，從而加速花色素的降解（Laleh et al.， 2006）。本研究中，八仙花花色苷在避光條件下保存率更高。在粗梗稠李（Padus napaulensis）（李曉嬌等，2020）、白杜（Euonymus maackii）（宋鵬等，2019）等花色苷中也有類似的發(fā)現(xiàn)。這是由于光照下花色苷降解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)，因此比避光條件下的降解顯著加快（Ochoa et al.， 2001）。但是，花色可調(diào)的‘拉維布蘭八仙花花色苷較花色不可調(diào)的‘蒂亞娜對(duì)光照更敏感，可見花色可調(diào)的八仙花花色苷結(jié)構(gòu)更不穩(wěn)定。本研究中，葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、半乳糖和高濃度（8%～10%）鼠李糖均可以增加花色不可調(diào)的‘蒂亞娜八仙花花色苷的穩(wěn)定性，只有中高濃度（4%～10%）鼠李糖才促進(jìn)花色可調(diào)的‘拉維布蘭 八仙花花色苷的穩(wěn)定性。這表明花色可調(diào)的八仙花花色苷較花色不可調(diào)者更不穩(wěn)定。

當(dāng)‘拉維布蘭八仙花花色苷加入中低濃度（10～30 mmol·L－1）Al3+ 后，花色苷穩(wěn)定性顯著提高，顏色由粉色變?yōu)樗{(lán)色；而 ‘蒂亞娜無(wú)此顏色變化，這可能是導(dǎo)致兩個(gè)八仙花品種花色可調(diào)性存在差異的根本原因。Kosaku等（1985，1990）早期研究發(fā)現(xiàn)，3－咖啡?？崴峄?－對(duì)－香豆酰基奎寧酸能夠與Al3+ 和飛燕草素－3－葡萄糖苷在體外形成藍(lán)色絡(luò)合物；Oyama等（2015）的研究也佐證了這一推測(cè)，飛燕草素－3－O－葡萄糖苷與Al3+ 形成了藍(lán)色的復(fù)合物，使得部分八仙花萼片由粉色轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色。在花色不可調(diào)的‘蒂亞娜八仙花中，飛燕草素－3－O－葡萄糖苷可能更穩(wěn)定且不易與Al3+ 結(jié)合，使花色始終保持粉色；而在花色可調(diào)的‘拉維布蘭八仙花中，飛燕草素－3－O－葡萄糖苷可能更易與Al3+ 螯合形成更穩(wěn)定的藍(lán)色絡(luò)合物，使花色由粉色轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色。

由于本研究?jī)H局限于體外花色苷提取液的部分穩(wěn)定性影響因素的單一實(shí)驗(yàn)，因此研究還有待于通過(guò)多因素正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)驗(yàn)證各因素間的交互作用，以及在室外盆栽試驗(yàn)或園林景觀綠化工程中開展環(huán)境條件與花色苷形成、穩(wěn)定性及花色可調(diào)性機(jī)制的研究，才能為開發(fā)八仙花花色可調(diào)性提供更加堅(jiān)實(shí)的科學(xué)依據(jù)。

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（責(zé)任編輯 李 莉）