三種腎陰虛證動(dòng)物模型造模方法比較研究

王志鑫，崔艷艷，宋婷婷，高田田，申 琦，戚語(yǔ)宸，李敏潔，王杰瓊

（山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355）

陰虛是臨床上諸多病證的基本病機(jī)［1］，腎陰虛證指腎陰虧損，失于滋養(yǎng)，虛熱內(nèi)擾，以五心煩熱、腰膝酸軟、形體消瘦、口干舌燥、眩暈耳鳴等為常見癥的證候［2］。 腎陰虛證造模方法多種多樣，通過(guò)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，目前最常用的造模方法有三種，分別以甲狀腺片、甲狀腺片聯(lián)合利血平及腎上腺皮質(zhì)激素氫化可的松注射液灌胃［3］，造模結(jié)束后，均能表現(xiàn)腎陰虛證的主要癥狀，但三種造模方法哪種更加穩(wěn)定可靠，鮮見研究。 本文通過(guò)比較三種模型制備方法，探究腎陰虛證的最佳模型制備方案，旨在為腎陰虛證的研究提供可靠穩(wěn)定的動(dòng)物模型。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)雌性KM 種小鼠40 只，6～8 周齡，體質(zhì)量（20±2）g；SPF 級(jí)雌性SD 大鼠60只，6～8 周齡，體質(zhì)量（200±20）g。 大鼠、小鼠均購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)SCXK（京）2016-0011。 動(dòng)物入室后常規(guī)飼養(yǎng)于獨(dú)立通氣籠（IVC）環(huán)境中，使用許可證號(hào)SYXK（魯）20170022。 動(dòng)物自由飲食飲水，12/12 h 光暗照射，室溫（22±3）℃，相對(duì)濕度為40%～60%。 涉及到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)的內(nèi)容和程序都已通過(guò)山東中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)審批（審批號(hào)：DWSY201703013）。

1.2 藥物和試劑

甲狀腺片（上海中華藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H31022151）；復(fù)方利血平片（亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H14023613）；氫化可的松注射液（天津金耀藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H12020887）；生理鹽水（辰欣藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H3702 2336）；Mouse cAMP ELISA KIT（江蘇科晶生物科技有限公司，批號(hào)KJ-2757B）；Mouse cGMP ELISA KIT（江蘇科晶生物科技有限公司，批號(hào)KJ-3280B）；大鼠環(huán)磷酸腺苷（cAMP）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)H164-1-2）；大鼠環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)H163-1-2）。

1.3 主要儀器

歐普士MS 紅外測(cè)溫儀（深圳市歐普士電子技術(shù)有限公司，型號(hào)粵制00000573），高速冷凍離心機(jī)［賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司，型號(hào)YZB/GER 1841-2014］，酶聯(lián)免疫分析儀（BIOBASE，山東博科干細(xì)胞應(yīng)用研究院有限公司，型號(hào)BK-EL10C），基因研究型超純水機(jī)（青島富勒姆科技有限公司，型號(hào)FJY1002-UVF-P）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 三種腎陰虛證小鼠模型制備

2.1.1 造模及取材

2.1.1.1 動(dòng)物造模［4-8］

適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后，將40 只KM 種小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、甲狀腺片組、甲狀腺片聯(lián)合利血平組（聯(lián)合組）、氫化可的松組4 組，每組10 只。 灌胃給藥量為每只0.2 mL·10 g-1，對(duì)照組給予等量生理鹽水14 d；甲狀腺片組給予甲狀腺片混懸液160 mg·kg-1，給藥14 d；聯(lián)合組灌胃甲狀腺片150 mg·kg-1及利血平1 mg·kg-1混懸液，給藥7 d；氫化可的松灌胃組灌胃50 mg·kg-1，給藥4 d。

2.1.1.2 取材

4 組小鼠造模結(jié)束后摘眼球取血，血清于室溫靜置0.5 h，離心，分離血清，同時(shí)頸椎脫臼處死各組小鼠，取卵巢、子宮、腎上腺，測(cè)量臟器指數(shù)。

2.1.2 檢測(cè)指標(biāo)

2.1.2.1 一般情況觀察

觀察各組小鼠一般活動(dòng)情況及其皮毛色澤、進(jìn)食量、大便形態(tài)等。

2.1.2.2 小鼠體質(zhì)量和體溫變化［9-10］

每天上午9∶00 給藥前測(cè)定小鼠體質(zhì)量，至造模結(jié)束取材前，并計(jì)算小鼠體質(zhì)量變化率，公式為：在給藥后半小時(shí)內(nèi)測(cè)定小鼠面溫、尾溫，平行測(cè)定3 次，取平均值進(jìn)行顯著性分析。

2.1.2.3 血清cAMP、cGMP 含量檢測(cè)

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清cAMP、cGMP 含量，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行測(cè)定。

2.1.2.4 小鼠臟器指數(shù)檢測(cè)

頸椎脫臼處死小鼠，剖腹取出子宮、卵巢及腎上腺，生理鹽水沖洗表面血漬后，吸水紙吸干殘留水分，稱定重量，依照下式計(jì)算各臟器指數(shù)。

臟器指數(shù)= 臟器濕重/體質(zhì)量×100%。

2.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用GraphPad Prism 8.3 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，各組計(jì)量數(shù)據(jù)均以表示，采用單因素方差分析，取α=0.05 作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2.2 腎陰虛證大鼠模型驗(yàn)證

根據(jù)小鼠模型研究（具體見“實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 項(xiàng)下”），發(fā)現(xiàn)甲狀腺片灌胃及甲狀腺片聯(lián)合利血平灌胃兩種造模方法效果比較好。 基于此，進(jìn)一步驗(yàn)證大鼠腎陰虛模型最佳造模方法，以適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)研究的需求，具體方法如下。

2.2.1 大鼠造模［6，11］

適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后，將60 只SD 雌性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、甲狀腺片組、聯(lián)合組3 組，每組20 只。于每日上午8∶30 灌胃，各組分別灌胃純水、甲狀腺片混懸液（160 mg·kg-1）、甲狀腺片聯(lián)合利血平混懸液（150 mg·kg-1+1 mg·kg-1），灌胃體積為1 mL·100 g-1。對(duì)照組及甲狀腺片組灌胃14 d，聯(lián)合組灌胃7 d。

2.2.2 指標(biāo)檢測(cè)

觀察大鼠一般情況、體質(zhì)量變化、體溫變化及血清cAMP、cGMP 含量，檢測(cè)方法同2.1.2 項(xiàng)下所列內(nèi)容。

2.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

同2.1.3 項(xiàng)下所列方法。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 三種腎陰虛證小鼠模型比較研究結(jié)果

3.1.1 一般情況

對(duì)照組小鼠一般狀況良好，攝食、飲水正常，毛色光潔，反應(yīng)靈敏，活動(dòng)自如，體質(zhì)量顯著增加。 模型組小鼠毛色黃且無(wú)光澤，飲食量減少，大便干燥，小便發(fā)黃，抓握時(shí)反應(yīng)劇烈，易激惹。

3.1.2 各組小鼠體質(zhì)量變化率比較

與對(duì)照組比較，三種模型制備方法造模完成后，各組小鼠體質(zhì)量變化率均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組小鼠體質(zhì)量變化率比較（，%）

表1 各組小鼠體質(zhì)量變化率比較（，%）

注：與同時(shí)段對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

第4 天 第7 天 第14 天對(duì)照組 10 25.97±5.15 31.00±5.63 42.67±11.15甲狀腺片組 10 18.48±2.97＊25.95±6.55 29.87±6.25＊聯(lián)合組 10 12.22±4.01＊22.20±6.99＊ -氫化可的松組 10 20.26±3.65＊ - -組別 只數(shù)

3.1.3 各組小鼠面溫變化情況

造模結(jié)束后，甲狀腺素組小鼠面溫較對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其他組小鼠面溫與對(duì)照組比較，具有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 見圖1、表2。

圖1 不同造模方法各組小鼠面溫與對(duì)照組比較

表2 各組小鼠面溫變化比較（，℃）

表2 各組小鼠面溫變化比較（，℃）

注：與同時(shí)段對(duì)照組比較，*P＜0.05。

組別 只數(shù) 第4 天 第7 天 第14 天對(duì)照組 10 28.99±0.97 29.20±0.39 29.41±0.31甲狀腺片組 10 30.06±0.67* 29.81±0.53* 30.49±0.26*聯(lián)合組 10 29.23±0.61 29.67±0.34 -氫化可的松組 10 29.56±0.53 - -

3.1.4 各組小鼠尾溫變化情況

造模結(jié)束后，甲狀腺片組小鼠尾溫較對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而其他組小鼠尾溫有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 見圖2、表3。

圖2 不同造模方法組小鼠尾溫與對(duì)照組比較

表3 各組小鼠尾溫變化比較（，℃）

表3 各組小鼠尾溫變化比較（，℃）

注：與同時(shí)段對(duì)照組比較，*P＜0.05。

組別 只數(shù) 第4 天 第7 天 第14 天對(duì)照組 10 31.06±0.42 30.56±0.67 31.67±0.23甲狀腺片組 10 30.95±0.66 31.00±0.44 32.65±0.49*聯(lián)合組 10 30.50±0.38 30.69±0.60 -氫化可的松組 10 31.32±0.47 - -

3.1.5 各組小鼠血清cAMP、cGMP 含量比較

與對(duì)照組比較，甲狀腺片組小鼠血清cAMP 含量顯著升高（P＜0.05），符合腎陰虛證臨床癥狀，氫化可的松組小鼠血清cAMP 含量有上升趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 與對(duì)照組比較，甲狀腺片組小鼠cGMP 含量有上升趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，聯(lián)合組小鼠血清cGMP 含量降低（P＜0.05），符合腎陰虛證臨床癥狀。 見表4。

表4 各組小鼠血清cAMP、cGMP 含量比較（，pg/mL）

表4 各組小鼠血清cAMP、cGMP 含量比較（，pg/mL）

注：cAMP 為環(huán)磷酸腺苷，cGMP 為環(huán)磷酸鳥苷。與對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

組別 只數(shù) cAMP cGMP對(duì)照組 10 7.016±4.334 1.044±1.040甲狀腺片組 10 27.630±16.300＊ 2.139±0.670聯(lián)合組 10 4.677±0.870 0.081±0.020＊?dú)浠傻乃山M 10 18.400±15.490 0.205±0.196

3.1.6 各組小鼠臟器指數(shù)比較

與對(duì)照組比較，甲狀腺片組卵巢和腎上腺指數(shù)變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但子宮指數(shù)降低（P＜0.05）；聯(lián)合組小鼠卵巢和腎上腺臟器指數(shù)均升高（P＜0.05），子宮指數(shù)降低（P＜0.05）；氫化可的松組卵巢指數(shù)顯著升高（P＜0.05），但子宮和腎上腺指數(shù)顯著降低（P＜0.05）。見表5。

表5 各組小鼠卵巢、子宮及腎上腺臟器指數(shù)比較（，%）

表5 各組小鼠卵巢、子宮及腎上腺臟器指數(shù)比較（，%）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

組別 只數(shù) 卵巢指數(shù) 子宮指數(shù) 腎上腺指數(shù)對(duì)照組 10 0.032±0.007 0.456±0.150 0.031±0.004甲狀腺片組 10 0.025±0.005 0.249±0.129＊ 0.037±0.007聯(lián)合組 10 0.066±0.010＊ 0.243±0.088＊ 0.038±0.006＊?dú)浠傻乃山M 10 0.058±0.012＊ 0.191±0.077＊ 0.023±0.002＊

綜合各造模方法下小鼠一般情況及體溫（面溫、尾溫）、血清指標(biāo)（cAMP、cGMP）、臟器指數(shù)等結(jié)果，給予小鼠灌服甲狀腺片及甲狀腺片聯(lián)合利血平兩種方法造模結(jié)果較為良好。 所以，將在大鼠上進(jìn)行這兩種造模方法的復(fù)測(cè)與比較。 結(jié)果如下。

3.2 腎陰虛證大鼠模型驗(yàn)證結(jié)果

3.2.1 各組大鼠體質(zhì)量變化率比較

與對(duì)照組比較，甲狀腺片組及聯(lián)合組大鼠體質(zhì)量變化率顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表6。

表6 各組大鼠體質(zhì)量變化率比較（，%）

表6 各組大鼠體質(zhì)量變化率比較（，%）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

第7 天 第14 天對(duì)照組 20 11.48±1.67 16.44±1.53甲狀腺片組 20 9.21±1.67 10.60±1.53＊聯(lián)合組 20 -0.96±1.67＊ -組別 只數(shù)

3.2.2 各組大鼠面溫、尾溫比較

造模第7 天時(shí)，與對(duì)照組比較，甲狀腺片組及聯(lián)合組大鼠面溫、尾溫均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 造模第14 天時(shí)，與對(duì)照組比較，甲狀腺片組大鼠面溫和尾溫均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表7。

表7 各組大鼠面溫、尾溫比較（s，℃）

表7 各組大鼠面溫、尾溫比較（s，℃）

注：與同時(shí)段對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

組別 只數(shù) 面部溫度 尾部溫度第7 天 第14 天 第7 天 第14 天對(duì)照組 20 30.99±1.05 31.78±0.36 25.57±1.09 27.32±1.05甲狀腺片組 20 32.35±0.40＊ 33.00±0.33＊ 26.98±1.02＊ 30.05±1.17＊聯(lián)合組 20 32.51±0.31＊ - 30.13±1.36＊ -

3.2.3 各組大鼠血清cAMP、cGMP 含量比較

造模結(jié)束后，與對(duì)照組比較，甲狀腺片組血清cAMP 含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），符合腎陰虛證臨床癥狀。 與對(duì)照組比較，聯(lián)合組血清cGMP 含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），符合腎陰虛證臨床癥狀。 見表8。

表8 各組大鼠血清cAMP、cGMP 含量比較（，mol/mL）

表8 各組大鼠血清cAMP、cGMP 含量比較（，mol/mL）

注：cAMP 為環(huán)磷酸腺苷，cGMP 為環(huán)磷酸鳥苷。與對(duì)照組比較，＊P＜0.05。

組別 只數(shù) cAMP cGMP對(duì)照組 20 54.44±9.33 60.95±29.31甲狀腺片組 20 63.43±13.02＊ 53.52±32.74聯(lián)合組 20 50.57±10.40 95.42±25.19＊

4 討論

腎陰虛證作為中醫(yī)基本證型之一，多見于骨質(zhì)疏松癥、2 型糖尿病及原發(fā)性高血壓等疾?。?2］。 腎陰虛的形成常見以下幾種原因：稟賦不足，腎陰素虧；或情志內(nèi)傷，五志過(guò)極，化火傷陰；或失血耗液，過(guò)服壯陽(yáng)溫燥之品，耗傷腎陰。 《素問(wèn)·六節(jié)藏象論》曰：“腎者，主蟄，封藏之本，精之處也，其華在毛，其充在皮。”腎陰不足，使機(jī)體失去濡養(yǎng)，則表現(xiàn)為毛發(fā)枯燥，形體消瘦；腎陰虧虛，陰虛不能制陽(yáng)，陽(yáng)氣上亢而虛熱內(nèi)生，虛邪在里，發(fā)為潮熱，手足濈濈汗出，五心煩熱，顴紅面赤；陰虛火旺，膀胱化源不足，則見小便短赤；陰液不足，大腸失去濡潤(rùn)，則大便干結(jié)。

目前，腎陰虛證模型制備方法有甲狀腺素類激素、腎上腺素類激素、溫燥性中藥灌胃以及行勞傷陰等方法［13-15］，且實(shí)驗(yàn)對(duì)象多為嚙齒類哺乳動(dòng)物［16］，又因臨床腎陰虛證患者多為女性［17］，故本實(shí)驗(yàn)采用雌性小鼠、大鼠作為模型載體進(jìn)行研究。 溫燥性中藥灌胃造模是最為符合中醫(yī)病因的造模方法，制備的模型為病因模型，但因其造模時(shí)間比較長(zhǎng)，造模后體溫升高不明顯等原因，在實(shí)際應(yīng)用中該造模方法使用較少［16］。行勞傷陰法制備腎陰虛模型主要是利用長(zhǎng)時(shí)期超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)，造成動(dòng)物體內(nèi)陰氣大量損耗，陰不制陽(yáng)，陽(yáng)氣亢盛，從而表現(xiàn)出體溫升高、體質(zhì)量降低、大便干燥等癥狀。 該造模方法在病因上比較符合臨床，且人為干擾較少，但由于造模時(shí)間難以把控，且容易出現(xiàn)陽(yáng)虛現(xiàn)象，故而限制了該造模方法的應(yīng)用［18］。 大劑量給予甲狀腺素或腎上腺皮質(zhì)激素等激素造模方法屬于病理模型制備方法，此兩種造模方法制備的模型可以反映出臨床腎陰虛癥狀，且具有造模時(shí)間短、操作方便、模型穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，在實(shí)際應(yīng)用中較為普遍［19］。因此，本研究針對(duì)上述兩種腎陰虛模型制備方法進(jìn)行比較。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，各組小鼠分別灌胃甲狀腺片、甲狀腺片聯(lián)合利血平以及氫化可的松后，均能引起小鼠體質(zhì)量降低，且體質(zhì)量變化率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 同時(shí)，給予大鼠甲狀腺片及甲狀腺片聯(lián)合利血平后，體質(zhì)量同樣明顯降低。 這可能是因?yàn)轶w內(nèi)高甲狀腺素含量，使得機(jī)體蛋白質(zhì)、糖原和脂肪分解增加，基礎(chǔ)代謝率升高，身體產(chǎn)熱量增加，小鼠體質(zhì)量下降，體溫顯著升高［20］。 小鼠和大鼠面溫及尾溫實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給予甲狀腺片能夠很好地模擬出臨床腎陰虛患者潮熱汗出的現(xiàn)象，但給予氫化可的松后，小鼠面溫和尾溫變化不明顯，未能表現(xiàn)出腎陰虛證潮熱顴紅、五心煩熱的癥狀。 給予小鼠甲狀腺片及利血平灌胃可能會(huì)引起小鼠子宮、卵巢和腎上腺臟器指數(shù)發(fā)生變化，這可能與腎上腺能神經(jīng)介質(zhì)水平降低，負(fù)反饋性調(diào)節(jié)體內(nèi)性激素水平升高，促使卵巢分泌更多的性激素，導(dǎo)致卵巢生理性增大相關(guān)［21］。 過(guò)量皮質(zhì)激素可能會(huì)導(dǎo)致腎上腺組織發(fā)生皮質(zhì)變薄、球狀帶和束狀帶變小、體積縮小、部分壞死等不良反應(yīng)，故而實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示氫化可的松組腎上腺臟器指數(shù)降低［7］。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，腎陰虛與下丘腦-垂體-靶腺軸（甲狀腺、腎上腺）有關(guān)，環(huán)核苷酸（cAMP，cGMP）是細(xì)胞間第二信使，正常機(jī)體中cAMP 和cGMP 相互拮抗、相互制約，處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，參與調(diào)節(jié)生物體不同的生理活動(dòng)及生化代謝［22-24］。cAMP、cGMP 的平衡失調(diào)，會(huì)引起細(xì)胞功能明顯改變，導(dǎo)致疾病的發(fā)生［25］。 血清cAMP 和cGMP 含量變化是目前判斷腎陰虛證最常用的客觀指標(biāo)［9，26］。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，甲狀腺片組小鼠和大鼠血清cAMP 含量顯著上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 聯(lián)合組小鼠血清cAMP含量變化無(wú)明顯差異，但cGMP 含量顯著降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 在大鼠實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血清cGMP 含量顯著升高，從而反映了聯(lián)合組造模雖然可以減少模型制備時(shí)間，但模型穩(wěn)定性有降低的風(fēng)險(xiǎn)。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，小鼠給予氫化可的松灌胃后，血清cAMP、cGMP 含量雖有升高及降低趨勢(shì)，但與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故而氫化可的松灌胃制備的腎陰虛證模型表征較差，且氫化可的松制備腎陰虛模型需要注意給藥劑量及給藥時(shí)間，低劑量可造成腎陽(yáng)虛模型，而高劑量可制備腎陰虛動(dòng)物模型［3，27］。 同時(shí)，腎上腺皮質(zhì)類藥物制備腎陰虛動(dòng)物模型時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)前期表現(xiàn)為腎陰虛而后期表現(xiàn)為腎陽(yáng)虛的現(xiàn)象，具有模型穩(wěn)定性差的隱患［28］。

綜上所述，甲狀腺片灌胃小鼠、大鼠均可以較好地制備腎陰虛動(dòng)物模型，腎陰虛模型表征明顯，穩(wěn)定性高，操作簡(jiǎn)單，且對(duì)子宮、卵巢、腎上腺等臟器影響較小，而甲狀腺片聯(lián)合利血平及氫化可的松灌胃造模具有一定的局限性。 因此，甲狀腺片灌胃小鼠、大鼠是一種比較理想的腎陰虛模型制備方法，可用于中醫(yī)藥相關(guān)領(lǐng)域的深入研究。