廣葉繡球菌多糖對(duì)鉛致小鼠骨骼鈣代謝紊亂的調(diào)節(jié)作用

喬澤寧，翟 晨，曹謹(jǐn)玲，云少君，程艷芬，程菲兒，馮翠萍

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，山西 太谷 030801）

鉛是一種環(huán)境中普遍存在的有毒重金屬，由于鉛在環(huán)境中不可降解且長期蓄積，其可通過水、空氣、土壤和食物鏈進(jìn)入人體[1]。鉛進(jìn)入機(jī)體后，約95%蓄積在骨骼之中，影響骨骼的新陳代謝和功能發(fā)揮，鉛中毒與骨骼發(fā)育畸形、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎等多種疾病密切相關(guān)[2]。鉛可以取代機(jī)體內(nèi)鈣、鋅、鐵二價(jià)礦物元素的位置，從而影響其他二價(jià)礦物元素的代謝，破壞其在機(jī)體內(nèi)的平衡[3-4]。鉛可以作為鈣離子的類似物，直接影響鈣代謝并阻礙骨骼發(fā)育，還可以通過間接途徑影響骨代謝，主要表現(xiàn)為對(duì)一些與骨代謝有關(guān)激素的影響[5-7]。并且鉛在骨骼中的沉積還會(huì)對(duì)其形態(tài)結(jié)構(gòu)、硬度、體積和厚度等產(chǎn)生影響，對(duì)骨骼造成損傷[8-9]。目前，對(duì)鉛中毒的治療主要是利用螯合劑，如乙二胺四乙酸鹽和二巰基琥珀酸等，但同時(shí)會(huì)帶來一系列的副作用[10]。

通過攝入天然食品組分，進(jìn)而對(duì)鉛進(jìn)行干預(yù)是預(yù)防慢性鉛損傷的發(fā)展趨勢。孟靜等[11]利用熒光定量PCR技術(shù)檢測了骨骼TRPV通路相關(guān)基因，發(fā)現(xiàn)適量鈣的補(bǔ)充可減輕鉛暴露對(duì)骨骼TRPV通路的干擾。李茜[12]研究表明，杏鮑菇多肽能夠顯著降低骨骼中鉛含量，調(diào)控TRPV通路相關(guān)基因的表達(dá)，從而改善染鉛導(dǎo)致的大鼠骨骼損傷。多糖是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，還能直接影響機(jī)體的物質(zhì)和能量代謝[13-14]。姬松茸多糖[15]、海藻多糖[16]等均有促進(jìn)排鉛的作用，但是多糖對(duì)染鉛小鼠骨骼鈣代謝的影響還鮮少報(bào)道，并且多糖的促排鉛作用與骨骼鈣代謝之間的聯(lián)系還有待進(jìn)一步研究。

廣葉繡球菌（Sparassis latifolia）是一種珍稀的食藥用菌，多糖含量可達(dá)39.3%～43.6%，為菇類之最[17-18]。研究表明，廣葉繡球菌多糖（Sparassis latifoliapolysaccharides，SLPs）具有免疫調(diào)節(jié)[19]、抑菌[20]、降血脂[21]、抗炎癥[22]和抗氧化[23]等作用。山西農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院食品營養(yǎng)與安全課題組前期對(duì)廣葉繡球菌多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，分離純化廣葉繡球菌多糖后，可以得到一種分子質(zhì)量為6456 u、主鏈為β-（1→3）-D-葡聚糖、支 鏈 為β-（1→6）-D-葡聚糖的β-葡聚糖[24]。基于此，本試驗(yàn)以染鉛小鼠模型為基礎(chǔ)，通過研究小鼠骨骼中二價(jià)礦物質(zhì)元素的含量、鈣代謝相關(guān)激素和酶水平、骨組織形態(tài)以及鈣代謝相關(guān)基因表達(dá)情況的影響，進(jìn)而探究SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼鈣代謝的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料及動(dòng)物

供試廣葉繡球菌由清徐縣太和食用菌栽培基地提供。

3周齡SPF級(jí)雄性昆明小鼠，購于斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0010，飼養(yǎng)于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物管理中心，許可證號(hào)：SYXK（晉）2020-0003。試驗(yàn)飼料、墊料及動(dòng)物飲水等均符合SPF級(jí)動(dòng)物使用標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 主要試劑及儀器

EDTA脫鈣液：EDTA-2Na 100 g加PBS緩沖液（pH值7.2）至1000 mL，加NaOH （10～15 g）攪拌溶解后用1 mol/L HCl調(diào)pH值為7.2～7.4。配置液經(jīng)高溫殺菌后使用。

BGP、PHT、CT酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒（上海江萊生物公司）；AKP試劑盒、總蛋白定量試劑盒（南京建成生物工程研究所）；蘇木精染液、伊紅染液（山西百奧生物科技有限公司）；切片石蠟（上海華申康復(fù)器材有限公司）；中性樹膠（北京索萊寶科技有限公司）；RNAiso Plus試劑盒、Prime ScriptTMRT Master Mix試 劑 盒、SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ試劑盒（TaKaRa公司）；引物合成（太原奧科鼎盛生物公司）；醋酸鉛、氯化鈉、檸檬酸鈉等均為國產(chǎn)分析純。

GD12 石墨消解儀（奧普樂儀器有限公司）；Optima5300 DV型電感耦合等離子發(fā)射光譜儀（美國PE公司）；切片機(jī)、展片機(jī)、攤片機(jī)（徠卡顯微系統(tǒng)（上海）貿(mào)易有限公司）；IX3顯微鏡（北京順能電子儀器有限公司）；-80 ℃冰箱（日本松下公司）；5417-R高速冷凍離心機(jī)、5804 R型高速低溫臺(tái)式離心機(jī)、核酸蛋白測定儀（德國Eppendorf股份公司）；Mx3000P熒光定量PCR儀（美國Stratagene公司）；SpectraMax i3x多功能酶標(biāo)儀（美谷分子儀器（上海）有限公司）；MyCyclerTMThermal Cycler PCR擴(kuò)增儀（美國Bio-Rad公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 SLPs的提取 根據(jù)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院食品營養(yǎng)與安全課題組前期方法[25]提取廣葉繡球菌多糖，將廣葉繡球菌子實(shí)體置于35 ℃烘箱中干燥，切片粉碎并過0.074 mm篩，按照1∶40 （g/mL）的料液比添加蒸餾水，攪拌均勻，75 ℃水浴3 h后，5000 r/min離心15 min，旋蒸濃縮上清液至黏稠狀，加入3倍體積無水乙醇混勻后，4 ℃過夜，5000 r/min離心10 min收集沉淀，用丙酮和乙醚清洗沉淀直到洗液澄清，將沉淀用適量蒸餾水溶解后加入適量中性蛋白酶45 ℃水浴8 h并定時(shí)攪拌，滅酶后再次離心，取上清加入1/3體積Sevage溶劑（三氯甲烷∶正丁醇=4∶1），磁力攪拌30 min，離心取上層溶液并反復(fù)操作，用大孔樹脂純化后真空冷凍干燥后得到廣葉繡球菌多糖，苯酚硫酸法測定廣葉繡球菌多糖的純度為88.3%。

1.3.2 動(dòng)物模型的建立和樣品采集 將70只3周齡的SPF級(jí)雄性昆明小鼠，在恒溫（（25±0.5）℃）、恒濕（50%±5%）的環(huán)境下適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，隨機(jī)分為5組：對(duì)照組（NC）、染鉛組（Pb）、低劑量多糖組（100 mg/kg·bw，L-SLPs）、中劑量多糖組（200 mg/kg·bw，M-SLPs）、高劑量多糖組（400 mg/kg·bw，H-SLPs），每組14只，均給予普通飼料，NC組給予去離子水，其余各組給予1.84 g/L醋酸鉛溶液。SLPs低、中、高劑量組小鼠每天灌胃一次，灌胃量根據(jù)小鼠當(dāng)天的體質(zhì)量計(jì)算，空白組和染鉛組每天灌胃等量生理鹽水。期間小鼠自由飲水?dāng)z食，記錄小鼠每天的體質(zhì)量變化情況。飼養(yǎng)56 d后，采集骨骼組織稱質(zhì)量。一部分右側(cè)股骨浸泡于4%多聚甲醛溶液中用作骨骼切片，其余在液氮中速凍后保存于-80 ℃冰箱待用。

1.3.3 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼中二價(jià)礦物質(zhì)元素含量的影響 參考GB 5009.12—2017標(biāo)準(zhǔn)[26]測定小鼠骨骼中二價(jià)礦質(zhì)元素Pb2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+的含量。取約0.2 g骨骼，稱質(zhì)量后放于加有玻璃珠的消化管中，加入10 mL的濃硝酸和0.5 mL的高氯酸，室溫靜置過夜，于石墨消解儀上進(jìn)行消化，待消化液澄清透明后用1%稀硝酸定容至10 mL即為待測樣品。使用電感耦合等離子發(fā)射光譜儀測定待測樣品中Pb2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+的含量。

1.3.4 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨代謝相關(guān)激素和酶含量的影響 按照甲狀旁腺激素（PTH）、骨鈣素（BGP）、降鈣素（CT）及堿性磷酸酶（AKP）試劑盒說明書測定。

1.3.5 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼組織形態(tài)的影響 將小鼠股骨置于4%的多聚甲醛溶液中浸泡48 h后，用PBS緩沖液水洗5次，修整、去除多余肌肉組織后，將固定好的股骨置于EDTA脫鈣液中脫鈣，脫鈣液3 d一換，最少1個(gè)月，以大頭針可穿過時(shí)即可。將脫鈣后的股骨取出，自來水沖洗過夜后，經(jīng)乙醇梯度脫水、二甲苯中透明、浸蠟和石蠟包埋后，固定于切片機(jī)切成厚度為4 μm的組織片（靠近脛骨端1/3處進(jìn)行冠狀縱切）。攤片、烤片后進(jìn)行HE染色，使用顯微鏡觀察骨骼組織結(jié)構(gòu)的變化并拍照。

1.3.6 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼鈣代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響 稱取100 mg骨骼組織，放到預(yù)先冷凍在-80 ℃的研缽中，立即加入液氮，加速研磨成粉末后轉(zhuǎn)移至1.5 mL EP管中，并加入1 mL RNAiso Plus，按照試劑盒說明書提取總RNA，使用核酸蛋白儀測定RNA濃度。按照Prime ScriptTMRT Master Mix說明書將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。使用TB Green?Premix ExTaqTMⅡ（Tli RNaseH Plus）試劑盒在熒光定量PCR儀進(jìn)行qRT-PCR，反應(yīng)體系為：1 μL cDNA、5 μL TB Green?Premix ExTaqⅡ、上游引物與下游引物各0.4 μL、3.2 μL ddH2O。反應(yīng)條件為：95 ℃ 90 s，95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，95 ℃15 s，60 ℃ 1 min，95 ℃ 15 s，95 ℃ 5 s和60 ℃ 30 s進(jìn)行45個(gè)循環(huán)，每組重復(fù)3次。以β-actin為內(nèi)參基因，通過2-ΔΔCt法計(jì)算各目的基因的相對(duì)表達(dá)量。具體引物信息如表1所示。

表1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列Tab.1 Primer sequences of qRT-PCR

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)使用SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用one-way ANOVA和Duncan檢驗(yàn)進(jìn)行多組樣本間的差異顯著性分析，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著，利用 Graphpad prism 8.0.1軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 SLPs對(duì)染鉛小鼠體質(zhì)量變化的影響

從圖1可以看出，在飼養(yǎng)56 d時(shí)間里，各組小鼠體質(zhì)量均呈現(xiàn)增長趨勢。并且在同一時(shí)間內(nèi)，各組小鼠之間體質(zhì)量差異不顯著（P>0.05）。

圖1 SLPs對(duì)染鉛小鼠體質(zhì)量變化的影響Fig.1 Effects of SLPs on weight in lead contaminated mice

2.2 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼Pb2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+含量的影響

SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼組織Pb2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+含量的影響如圖2所示。

圖2 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼組織Pb2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+含量的影響Fig.2 Effects of SLPs on the contents of Pb2+，Ca2+，F(xiàn)e2+，Cu2+，Zn2+，Mn2+，and Mg2+ in bones of lead contaminated mice

從圖2可以看出，與對(duì)照組相比，染鉛組骨骼組織中Pb2+含量升高了3948.78%，差異達(dá)極顯著（P<0.01），Ca2+、Fe2+、Cu2+、Mn2+含量分別降低了27.04%、43.00%、55.04%、72.34%，差異達(dá)極顯著（P<0.01），Mg2+、Zn2+含量下降，但差異不顯著。與染鉛組相比，高劑量SLPs組Pb2+含量降低了21.66%，差異顯著（P<0.05），Ca2+含量升高了26.65%，差異極顯著（P<0.01）；中劑量SLPs組Fe2+含量升高了40.74%，差異極顯著（P<0.01）；低、中、高劑量SLPs組在骨骼組織中Cu2+、Zn2+、Mg2+含量上升，但差異不顯著。

2.3 SLPs對(duì)染鉛小鼠鈣代謝相關(guān)激素含量和酶活性的影響

由圖3可知，與對(duì)照組相比，染鉛組骨骼中PTH含量升高了10.61%，差異極顯著（P<0.01），BGP、CT含量和AKP活性分別下降了12.42%、15.25%和26.03%，差異極顯著（P<0.01）；與染鉛組相比，各劑量SLPs組骨骼中PTH含量均有所下降，其中，高劑量SLPs組PTH含量降低了8.63%，差異顯著（P<0.05），低、中、高劑量SLPs組骨骼中BGP含量均有所上升，但差異不顯著，中、高劑量SLPs組骨骼中CT含量分別升高了7.73%和11.11%，差異極顯著（P<0.01），高劑量SLPs組AKP活性升高了25.54%，差異顯著（P<0.05）。

2.4 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼組織形態(tài)的影響

SLPs對(duì)染鉛小鼠股骨組織形態(tài)的影響如圖4所示。

圖4 SLPs對(duì)染鉛小鼠股骨組織形態(tài)的影響（HE，×150）Fig.4 Effects of SLPs on the femur histomorphology in lead contaminated mice（HE，×150）

由圖4可知，對(duì)照組的股骨組織切片中的骨小梁正常，呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，光滑飽滿、粗細(xì)一致，骨細(xì)胞分布均勻，清晰可見，可見正常的髓腔；染鉛組的骨小梁稀疏不均，分布紊亂，部分區(qū)域骨小梁出現(xiàn)中斷甚至消失，且骨小梁邊緣出現(xiàn)了陷窩。與染鉛組相比，高劑量SLPs組的骨小梁分布較均勻，骨小梁邊緣陷窩較少，可見部分正常的髓腔。

2.5 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼中鈣代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響

從圖5可以看出，與對(duì)照組相比，染鉛組小鼠骨骼組織中TRPV5、TRPV6和NCX1mRNA表達(dá)量分別下降了90.81%、73.03%和44.68%，差異極顯著（P<0.01），PMCA1bmRNA表達(dá)量升高了157.75%，差異極顯著（P<0.01）。與染鉛組相比，高劑量SLPs組中TRPV5mRNA表達(dá)量升高了439.59%，差異極顯著（P<0.01）；高劑量SLPs組PMCA1bmRNA表達(dá)量下降了63.79%，差異極顯著(P<0.01)；中、高劑量SLPs組中TRPV6mRNA表達(dá)量分別升高了90.53%和116.06%，差異極顯著（P<0.01），各劑量SLPs組NCX1mRNA表達(dá)量均有上升，但差異不顯著（P>0.05）。

圖5 SLPs對(duì)染鉛小鼠骨骼中TRPV5、TRPV6、PMCA1b和NCX1 mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響Fig.5 Effects of SLPs on the relative expression levels of TRPV5，TRPV6，PMCA1b and NCX1 mRNA in bones of lead contaminated mice

3 結(jié)論與討論

鉛是一種有毒重金屬，由于其不可降解，很容易通過食物鏈沉積在人和動(dòng)物體內(nèi)，從而對(duì)血液、腸道、免疫、骨骼等系統(tǒng)造成危害[27-29]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，染鉛組小鼠骨骼中鉛含量極顯著升高，說明鉛暴露引起小鼠骨骼中鉛的蓄積，也證明了本試驗(yàn)造模成功。同時(shí)鉛引起小鼠骨骼中鈣、鐵、銅、錳元素失衡，這可能是由于Pb2+與這些二價(jià)元素共用一個(gè)離子通道并存在競爭拮抗作用，且鉛與骨骼組織的親和性更強(qiáng)[4]。而染鉛小鼠在攝入SLPs后可有效調(diào)節(jié)骨骼中鉛、鈣、鐵含量，其機(jī)制可能是多糖以分子形式進(jìn)入機(jī)體，提供氨基、硫酸基等官能團(tuán)與鉛結(jié)合促進(jìn)鉛的排出，同時(shí)SLPs與Ca2+、Fe2+等形成復(fù)合物從而抑制腸腔吸收，進(jìn)而影響鈣、鐵的代謝，但其具體作用機(jī)制還有待探究[3,30]。

PTH是調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)鈣、磷平衡的重要激素之一，CT是PTH的拮抗物，可降低血鈣，促進(jìn)骨細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，降低破骨細(xì)胞活性和數(shù)量，從而促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育[31-32]。BGP和AKP均由成骨細(xì)胞合成，BGP會(huì)與Ca2+結(jié)合促進(jìn)骨礦化，二者常用來評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞生成骨質(zhì)情況[33]。本研究發(fā)現(xiàn)，鉛可顯著降低小鼠骨骼中BGP、CT含量和AKP活性，顯著升高PTH含量，與李茜[12]的研究結(jié)果一致。AKP活性的降低可能是由于體內(nèi)微量元素失衡引起的。鉛暴露導(dǎo)致的骨骼中BGP含量和AKP活性的降低，使成骨細(xì)胞凋亡增加，從而影響骨的礦化和成骨細(xì)胞正常功能的發(fā)揮，對(duì)骨骼造成了損傷，表現(xiàn)為骨小梁稀疏不均，分布紊亂，且骨小梁邊緣出現(xiàn)了陷窩。同時(shí)，機(jī)體鈣含量的降低促進(jìn)了PTH的合成和分泌，以維持機(jī)體鈣平衡[34]。CT與PTH拮抗，CT含量降低，減緩生骨細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)換的過程，破壞了機(jī)體正常骨形成和代謝。而高劑量SLPs可以有效逆轉(zhuǎn)這種趨勢，緩解鉛致骨骼系統(tǒng)功能的失衡，維持機(jī)體的骨代謝平衡，改善鉛致小鼠骨組織結(jié)構(gòu)的損傷，使骨小梁分布更均勻，骨小梁邊緣陷窩較少。

TRPV5及TRPV6與鈣離子代謝有關(guān)，在腸道、腎臟、骨骼等器官中均有表達(dá)，NCX1和PMCA1b是細(xì)胞內(nèi)鈣離子運(yùn)出相關(guān)的通道[35-37]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，染鉛組的TRPV5、TRPV6和NCX1mRNA表達(dá)量均極顯著下降，而PMCA1bmRNA表達(dá)量極顯著上升，以前的研究[11]支持本研究的結(jié)果。TRPV5和TRPV6mRNA表達(dá)量的下降，可能是由于TRPV5、TRPV6通路具有高度的鈣選擇性，當(dāng)細(xì)胞外鈣離子濃度較低時(shí)，受到鈣依賴性反饋調(diào)節(jié)的作用，將鈣離子向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。同時(shí)，染鉛小鼠骨骼中鉛取代鈣主要以磷酸鉛的形式蓄積，為維持機(jī)體內(nèi)骨鈣和血鈣平衡，骨骼組織中的鈣釋放進(jìn)入血液，鈣的排出量增大，使PMCA1bmRNA表達(dá)量上升。而在PMCA1bmRNA表達(dá)量極顯著上升的同時(shí)NCX1mRNA表達(dá)下降，二者之間在轉(zhuǎn)運(yùn)運(yùn)出鈣過程中的具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。染鉛小鼠攝入SLPs后，上調(diào)了TRPV5及TRPV6mRNA的表達(dá)量，促進(jìn)了機(jī)體對(duì)鈣離子的吸收，增加了骨骼的鈣含量，而骨鈣的增加減少了鈣向血液流動(dòng)，PMCA1bmRNA表達(dá)量下調(diào)，使骨骼組織對(duì)鈣的運(yùn)出減少。

綜上，SLPs可以促進(jìn)機(jī)體對(duì)鉛的排泄，降低骨骼中鉛的含量，改善骨骼鈣鐵元素失衡，使骨骼中PTH水平降低、CT含量和AKP活性提高，同時(shí)會(huì)提高鈣離子向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)通道TRPV5和TRPV6mRNA表達(dá)量，使細(xì)胞內(nèi)吸收的鈣離子增加。鈣離子進(jìn)入細(xì)胞后，鈣結(jié)合蛋白會(huì)與其立即結(jié)合，將鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)至基底外側(cè)膜，并通過PMCA1b將鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞外。SLPs降低了PMCA1bmRNA表達(dá)量，減少了鈣離子向細(xì)胞外轉(zhuǎn)運(yùn)，從而提高了骨骼中鈣離子的含量，促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育，有效緩解了鉛致小鼠骨骼組織結(jié)構(gòu)的損傷，調(diào)節(jié)小鼠骨骼鈣代謝紊亂。

本研究表明，鉛暴露導(dǎo)致小鼠骨骼中鉛蓄積，降低了Ca2+、Fe2+、Cu2+、Mn2+元素含量、BGP、CT含量和AKP活性，升高了AKP含量；小鼠骨骼組織結(jié)構(gòu)損傷，骨小梁稀疏不均，分布紊亂，TRPV5、TRPV6和NCX1mRNA表達(dá)量下調(diào)，PMCA1bmRNA表達(dá)量上調(diào)。而SLPs可以逆轉(zhuǎn)這種趨勢，能夠促進(jìn)機(jī)體對(duì)鉛的排泄，降低骨骼中Pb2+的含量，提高骨骼中Ca2+和Fe2+的含量，有效改善鉛致骨骼中鈣鐵元素失衡，降低骨骼中PTH水平，提高CT含量和AKP活性，從而促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育，有效緩解鉛對(duì)小鼠骨組織結(jié)構(gòu)的損傷，促進(jìn)TRPV5、TRPV6mRNA表 達(dá)，抑 制PMCA1bmRNA表達(dá)，調(diào)控鈣代謝相關(guān)基因，提示SLPs可有效緩解鉛致小鼠骨骼鈣代謝紊亂。