CircASH2L調(diào)節(jié)miR-128-3p/MKNK2軸對(duì)卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的影響

莫 蕊,陳燕娥,吳 穎,陳 綿

(海口市婦幼保健院婦產(chǎn)科,?？?570203)

卵巢癌是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,病死率很高,早期不易確診,就診時(shí)多為晚期,此時(shí)主要依靠化療緩解腫瘤進(jìn)展,但因癌細(xì)胞化療耐藥性的獲得,療效并不理想,且易復(fù)發(fā)。紫杉醇作為一種廣譜抗癌化學(xué)藥物,是晚期卵巢癌的治療首選,盡量減輕卵巢癌的紫杉醇耐藥性,可有效改善患者預(yù)后[1-3]。環(huán)狀RNA(circular RNA,circRNA)在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用,其中缺失-小同源異形-2樣蛋白(Absent-Small-Homeotic-2-Like protein,ASH2L)在其中起到致癌作用,其高表達(dá)水平與腫瘤的惡性程度相關(guān),可促進(jìn)胰腺腫瘤侵襲、增殖和血管生成[4]。CircASH2L還可介導(dǎo)卵巢癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后,敲除CircASH2L基因可抑制卵巢癌細(xì)胞的侵襲和生長(zhǎng),并抑制異種移植的血管和淋巴管生成,發(fā)揮抗癌作用[5],但CircASH2L在腫瘤的紫衫醇耐藥及卵巢癌發(fā)生發(fā)展中具有何種作用目前還沒有明確。

miR-128-3p是一種腫瘤抑制因子,上調(diào)其表達(dá)可在體外顯著抑制大腸癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲和凋亡抵抗性,并在體內(nèi)阻礙實(shí)體腫瘤生長(zhǎng)[6],還可抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的活性、增殖、遷移、侵襲和多藥耐藥相關(guān)蛋白1(resistance-associated protein 1,MRP1)表達(dá),恢復(fù)其對(duì)替莫唑胺的敏感性[7]。研究顯示,miR-128-3p在卵巢癌組織和細(xì)胞中表達(dá)減少,過表達(dá)miR-128-3p可顯著誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡,降低其細(xì)胞活力和遷移侵襲能力[8]。MAP激酶相互作用絲氨酸/蘇氨酸激酶2(MAP kinase interacting serine/threonine kinase 2,MKNK2)作為一種重要的腫瘤調(diào)控因子,在化療耐藥卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)顯著上調(diào),與耐藥卵巢癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān),敲除MKNK2基因可顯著降低卵巢癌細(xì)胞的化療耐藥性,抑制其增殖[9]。以上文獻(xiàn)提示miR-128-3p和MKNK2均是減弱卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的潛在靶點(diǎn)。由生物信息學(xué)分析可知CircASH2L可能通過miR-128-3p調(diào)控MKNK2表達(dá),因而預(yù)測(cè)CircASH2L可能通過調(diào)節(jié)miR-128-3p/MKNK2軸影響卵巢癌細(xì)胞的紫杉醇耐藥性,本文通過敲低體外培養(yǎng)的人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SKOV3-TR30中CircASH2L表達(dá),對(duì)此預(yù)測(cè)做驗(yàn)證研討。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器 人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3、人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞SKOV3-TR30(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤細(xì)胞庫(kù)研究所);含雙抗RPMI 1640培養(yǎng)基(YC-1003S,上海語(yǔ)純);LipofectamineTM2000(invitrogen);野生型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒、CircASH2L過表達(dá)質(zhì)粒、突變型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒、野生型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒、突變型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒、miR-128-3p mimics、miR-128-3p mimics陰性對(duì)照、miR-128-3p inhibitor、miR-128-3p inhibitor陰性對(duì)照、CircASH2L siRNA質(zhì)粒、CircASH2L空載質(zhì)粒、miR-128-3p及CircASH2L、MKNK2、多重耐藥1(multidrug resistance 1,MDR1)、MRP5、β-actin、U6引物(上海吉瑪);紫杉醇、MTT試劑盒/細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒、雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(北京索萊寶);一步法反轉(zhuǎn)錄熒光定量試劑盒、Trizol試劑、Annexin V凋亡檢測(cè)試劑盒(上海生工);兔源抗人β-actin、MRP5、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、MKNK2一抗(美國(guó)Abcam公司)等。熒光定量PCR儀、酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司;流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)BECKMAN COULTE公司;電泳儀電源、迷你雙垂直電泳槽、迷你雙垂直轉(zhuǎn)印電泳槽購(gòu)自上海江美;化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀購(gòu)自北京森西賽智科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞中miR-128-3p與CircASH2L、MKNK2表達(dá) 解凍復(fù)蘇的SKOV3和SKOV3-TR30細(xì)胞,用RPMI 1640(含雙抗)細(xì)胞完全培養(yǎng)基(加10%胎牛血清)培養(yǎng),傳代后收集兩種細(xì)胞。Trizol試劑提取細(xì)胞中總RNA,采用一步法反轉(zhuǎn)錄熒光定量試劑盒進(jìn)行PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),具體方法和反應(yīng)條件參考說明書。miR-128-3p以U6為內(nèi)參,CircASH2L、MKNK2以β-actin為內(nèi)參。引物序列,miR-128-3p:F-5'-TGCGGCAGTGGTTTTACCCTATG-3',R-5'-CCAGTGCAGGGTCCGAGGT-3';U6:F-5'-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3',R-5'-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3';CircASH2L:F-5'-GCTGGGCAGGAAAACCTATT-3',R-5'-TTTCCCAGGTCTCTGTCTGG-3';MKNK2:F-5'-TCATGCAAGCTTATGTGGAGCTGGAAG-3',R-5'-TTGATGCTAGATCAGCGGCGTTTGAGT-3';MDRl:F-5'-AAAAGATCAACTCGTAGGAGTG-3',R-5'-GCACAAAATACACCAACAA-3';MRP5:F-5'-GCTGTTCAGTGGCACTGTCAG-3',R-5'-TCAGCCCTTGACAGCGACCTT-3';β-actin:F-5'-CCGTACCACTGGCATCGTG-3',R-5'-GCCATCTCTTGCTCGAAG-3'。以2-ΔΔCt方法分析基因相對(duì)表達(dá)量。

1.2.2 SKOV3-TR30細(xì)胞分組處理及收集標(biāo)本 SKOV3-TR30細(xì)胞進(jìn)行傳代后,接種在無(wú)菌24孔板培養(yǎng),24h后隨機(jī)分為對(duì)照組、紫杉醇組、紫杉醇+陰性對(duì)照組、紫杉醇+CircASH2L敲低組、紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組。對(duì)照組不進(jìn)行干預(yù)處理,紫杉醇組加20nmol/L紫杉醇處理[10],紫杉醇+陰性對(duì)照組加20nmol/L紫杉醇處理同時(shí)使用LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染miR-128-3p inhibitor陰性對(duì)照和空載質(zhì)粒(具體轉(zhuǎn)染步驟參考LipofectamineTM2000說明書),紫杉醇+CircASH2L敲低組加20nmol/L紫杉醇處理同時(shí)以同法轉(zhuǎn)染CircASH2L siRNA,紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組細(xì)胞加20nmol/L紫杉醇處理同時(shí)以同法轉(zhuǎn)染CircASH2L siRNA和miR-128-3p inhibitor,各組都于轉(zhuǎn)染及藥物處理24h后收集細(xì)胞備用。

1.2.3 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況 SKOV3-TR30細(xì)胞進(jìn)行傳代后,按10000細(xì)胞/孔接種于無(wú)菌96孔板,24h后按1.2.2中方法分組處理,24h后每孔加適量MTT工作液急性培養(yǎng)4h,吸出上清,以二甲基亞砜溶解底部結(jié)晶,混勻后以酶標(biāo)儀測(cè)量每孔吸光值。細(xì)胞增殖率=實(shí)驗(yàn)處理組吸光值/對(duì)照組吸光值×100%。

1.2.4 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況 SKOV3-TR30細(xì)胞進(jìn)行傳代后,接種在無(wú)菌24孔板培養(yǎng)24h,按1.2.2中方法分組處理,24h后以胰酶消化收集各組細(xì)胞后計(jì)數(shù),每組取約1×106個(gè)細(xì)胞,PBS洗滌,采用Annexin V凋亡檢測(cè)試劑盒通過FITC/PI雙染法檢測(cè)每組細(xì)胞凋亡情況,具體轉(zhuǎn)染步驟參考試劑盒說明書。

1.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞miR-128-3p與CircASH2L、MKNK2、MDR1、MRP5表達(dá) 收集各組細(xì)胞中總RNA,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),具體按1.2.1中方法進(jìn)行。

1.2.6 免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞MKNK2、P-gp、MRP5表達(dá) 以高強(qiáng)度RIPA裂解液裂解提取各組細(xì)胞中總蛋白,以改良型BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)量其濃度,具體方法參考說明書。根據(jù)蛋白濃度測(cè)定結(jié)果每組取出20μg總蛋白進(jìn)行變性、電泳分離、濕轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移處理,以脫脂牛奶封閉其非特異位點(diǎn)后裁下各目的蛋白MKNK2、β-actin、P-gp、MRP5,孵育一抗、二抗后顯色,采集顯色后蛋白條帶圖像,以Image J軟件定量各蛋白灰度值后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以β-actin作為內(nèi)參,得到其相對(duì)表達(dá)。

1.2.7 檢測(cè)MKN-45細(xì)胞中CircASH2L對(duì)miR-128-3p及miR-128-3p對(duì)MKNK2的靶向調(diào)控 SKOV3-TR30細(xì)胞進(jìn)行傳代后,接種在無(wú)菌24孔板中培養(yǎng)24h,隨機(jī)分為miR-128-3p突變+CircASH2L空載組(轉(zhuǎn)染突變型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒+空載質(zhì)粒)、miR-128-3p突變+CircASH2L過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染突變型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒+CircASH2L過表達(dá)質(zhì)粒)、miR-128-3p野生+CircASH2L空載組(轉(zhuǎn)染野生型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒+空載質(zhì)粒)、miR-128-3p野生+CircASH2L過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染野生型miR-128-3p報(bào)告質(zhì)粒+CircASH2L過表達(dá)質(zhì)粒)、MKNK2突變+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染突變型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照)、MKNK2突變+miR-128-3p mimics組(轉(zhuǎn)染突變型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒+miR-128-3p mimics)、MKNK2野生+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染野生型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照)、MKNK2野生+miR-128-3p mimics組(轉(zhuǎn)染野生型MKNK2 3'-UTR報(bào)告質(zhì)粒+miR-128-3p mimics),按1.2.2中方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染,24h后采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒測(cè)量各組細(xì)胞雙熒光素酶相對(duì)活性,具體方法參考試劑盒說明書。

2 結(jié) 果

2.1 CircASH2L、miR-128-3p、MKNK2在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá) 與SKOV3細(xì)胞相比,SKOV3-TR30細(xì)胞中CircASH2L與MKNK2 mRNA表達(dá)升高,miR-128-3p表達(dá)降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖1。

圖1 各組細(xì)胞miR-128-3p與CircASH2L、MKNK2 mRNA表達(dá)

2.2 SKOV3-TR30細(xì)胞中CircASH2L對(duì)miR-128-3p的靶向調(diào)節(jié)及miR-128-3p對(duì)MKNK2的靶向調(diào)節(jié) 查詢數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)CircASH2L和miR-128-3p之間有結(jié)合位點(diǎn),見圖2。與miR-128-3p野生+CircASH2L空載組比較,miR-128-3p野生+CircASH2L過表達(dá)組相對(duì)熒光素酶活性降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);miR-128-3p突變+CircASH2L空載組與miR-128-3p突變+CircASH2L過表達(dá)組之間相對(duì)熒光素酶活性無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見圖3。

圖2 miR-128-3p和MKNK2、CircASH2L的結(jié)合位點(diǎn)

圖3 各組SKOV3-TR30細(xì)胞相對(duì)熒光素酶活性值比較

miR-128-3p和MKNK2之間有結(jié)合位點(diǎn),見圖2。與MKNK2野生+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照組比較,MKNK2野生+miR-128-3p mimics組相對(duì)熒光素酶活性降低(P<0.05);MKNK2突變+miR-128-3p mimics陰性對(duì)照組與MKNK2突變+miR-128-3p mimics組之間相對(duì)熒光素酶活性無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見圖4。

圖4 各組SKOV3-TR30細(xì)胞相對(duì)熒光素酶活性值比較

2.3 各組細(xì)胞增殖率比較 與對(duì)照組、紫杉醇組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低組的細(xì)胞增殖率降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與紫杉醇+CircASH2L敲低組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組的細(xì)胞增殖率升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖5。

圖5 各組細(xì)胞增殖率比較

2.4 各組細(xì)胞凋亡率比較 與對(duì)照組、紫杉醇組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低組的細(xì)胞凋亡率升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與紫杉醇+CircASH2L敲低組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組的細(xì)胞凋亡率降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖6。

圖6 各組細(xì)胞凋亡率比較

2.5 各組細(xì)胞miR-128-3p與CircASH2L、MKNK2、MDR1、MRP5 mRNA表達(dá) 與對(duì)照組、紫杉醇組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低組細(xì)胞CircASH2L、MKNK2、MDR1、MRP5 mRNA表達(dá)降低,miR-128-3p表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與紫杉醇+CircASH2L敲低組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組細(xì)胞CircASH2L mRNA表達(dá)無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),MKNK2、MDR1、MRP5 mRNA表達(dá)升高,miR-128-3p表達(dá)降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖7。

圖7 各組細(xì)胞miR-128-3p及CircASH2L、MKNK2、MDR1、MRP5 mRNA水平比較

2.6 Western blot法檢測(cè)細(xì)胞中MKNK2與耐藥相關(guān)蛋白P-gp、MRP5表達(dá) 與對(duì)照組、紫杉醇組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低組細(xì)胞MKNK2、P-gp、MRP5蛋白表達(dá)降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與紫杉醇+CircASH2L敲低組相比,紫杉醇+CircASH2L敲低+miR-128-3p inhibitor組細(xì)胞MKNK2、P-gp、MRP5蛋白表達(dá)升高(P<0.05),見圖8。

圖8 各組細(xì)胞MKNK2、P-gp、MRP5蛋白相對(duì)表達(dá)水平比較

3 討 論

化療是晚期卵巢癌患者的主要治療手段,紫杉醇作為順鉑之后的新一代抗癌藥,在卵巢癌臨床治療中得到廣泛應(yīng)用,但耐藥性的產(chǎn)生極大減弱了其療效。盡量減輕卵巢癌的紫杉醇耐藥性已成為臨床腫瘤研究的重點(diǎn)[3,11-12]。CircASH2L可調(diào)控細(xì)胞周期、生長(zhǎng)、凋亡、遷移和侵襲,敲除CircASH2L基因可觸發(fā)細(xì)胞周期阻滯,抑制成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,并促進(jìn)其凋亡[13]。CircASH2L作為一種環(huán)狀RNA還具有明顯致癌活性,能增強(qiáng)胰腺癌和卵巢癌的增殖、侵襲、血管生成和體內(nèi)成瘤性,延緩兩種腫瘤的惡性進(jìn)展[4-5]。本研究結(jié)果顯示,相比卵巢癌細(xì)胞株SKOV3,其紫杉醇耐藥細(xì)胞株SKOV3-TR30中CircASH2L表達(dá)升高,表明CircASH2L介導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥過程,以20nmol/L紫杉醇處理SKOV3-TR30細(xì)胞,不影響其細(xì)胞增殖率及凋亡率,而以CircASH2L siRNA質(zhì)粒敲低SKOV3-TR30細(xì)胞中CircASH2L表達(dá),可降低紫杉醇處理的SKOV3-TR30細(xì)胞中耐藥基因MDR1、MRP5 mRNA表達(dá)及其翻譯蛋白P-gp、MRP5表達(dá),并降低細(xì)胞增殖率,升高其凋亡率。表明敲低CircASH2L表達(dá)可抑制SKOV3-TR30細(xì)胞耐藥性,增強(qiáng)紫杉醇對(duì)其的殺傷力,揭示CircASH2L可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性產(chǎn)生,敲低其表達(dá)可增強(qiáng)其對(duì)紫杉醇的敏感性。

通過查詢Starbase數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析可推測(cè)CircASH2L可能通過下調(diào)miR-128-3p調(diào)控MKNK2表達(dá)。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果證實(shí)CircASH2L可靶向下調(diào)SKOV3-TR30細(xì)胞中miR-128-3p表達(dá),miR-128-3p可靶向下調(diào)SKOV3-TR30細(xì)胞中MKNK2表達(dá),且敲低SKOV3-TR30細(xì)胞CircASH2L可升高其miR-128-3p表達(dá),降低MKNK2 mRNA及蛋白表達(dá)。表明CircASH2L可通過靶向下調(diào)miR-128-3p而增強(qiáng)MKNK2表達(dá),從而促使卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性產(chǎn)生。miR-128-3p是具有抗癌活性的RNA分子,可抑制腫瘤耐藥產(chǎn)生,過表達(dá)miR-128-3p可抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤生長(zhǎng)并誘導(dǎo)其凋亡,增強(qiáng)其對(duì)替莫唑胺的敏感性[14]。miR-128-3p可減輕大腸癌化療耐藥性,增加其細(xì)胞內(nèi)奧沙利鉑的積累,在體內(nèi)外提升大腸癌的化療效果[15]。上調(diào)miR-128-3p可顯著抑制卵巢癌細(xì)胞增殖和遷移侵襲,并誘導(dǎo)其大量凋亡[8]。MKNK2是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、凋亡和血管生成的蛋白激酶超家族成員,可介導(dǎo)腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和耐藥性,抑制其表達(dá)可發(fā)揮顯著抗腫瘤作用,抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤體內(nèi)增殖及前列腺癌細(xì)胞體外生長(zhǎng)、上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和進(jìn)展[16-17],還能提高前列腺癌患者對(duì)恩扎魯胺的敏感性,減輕其耐藥性[18]。阻斷MKNK2信號(hào)可抑制黑色素瘤從增殖狀態(tài)到侵襲狀態(tài)的表型轉(zhuǎn)換,增強(qiáng)抗PD-1免疫療法敏感性[19],顯著減輕卵巢癌化療耐藥細(xì)胞的增殖活性和耐藥性[11]。本研究結(jié)果顯示,相比SKOV3細(xì)胞,SKOV3-TR30細(xì)胞中miR-128-3p表達(dá)降低,MKNK2 mRNA表達(dá)升高,表明miR-128-3p和MKNK2可介導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的產(chǎn)生;敲低CircASH2L和miR-128-3p,相比僅敲低CircASH2L,紫杉醇處理的SKOV3-TR30細(xì)胞中MKNK2及MDR1、MRP5 mRNA表達(dá)升高,MKNK2及P-gp、MRP5蛋白表達(dá)升高,增殖率增加,凋亡率降低。表明下調(diào)miR-128-3p可減弱敲低CircASH2L對(duì)MKNK2及耐藥相關(guān)基因表達(dá)的降低作用,拮抗其對(duì)紫杉醇?xì)Φ脑鰪?qiáng)作用,最終逆轉(zhuǎn)敲低CircASH2L對(duì)卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的抑制作用,揭示CircASH2L減弱卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性是通過上調(diào)miR-128-3p實(shí)現(xiàn)的。

綜上所述,CircASH2L在卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SKOV3-TR30中高表達(dá),并可通過靶向下調(diào)miR-128-3p而升高M(jìn)KNK2表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇產(chǎn)生耐藥性,敲低CircASH2L可通過上調(diào)miR-128-3p而降低MKNK2表達(dá),從而抑制卵巢癌細(xì)胞的紫杉醇耐藥性,增強(qiáng)紫杉醇對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞的殺傷力。本文探索發(fā)現(xiàn)了調(diào)控卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的新型作用靶點(diǎn)和分子機(jī)制,有利于減輕卵巢癌臨床治療中的耐藥性,改進(jìn)提升其化療療效。