Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀在截癱留置導尿管患者尿路感染檢查中的應用效果

王立軍

山東省泰安榮軍醫(yī)院 （山東泰安 271099）

截癱多是由于外傷、感染、腫瘤等因素導致的脊髓損傷平面以下感覺、運動功能全部或部分障礙。截癱患者多需長期留置導尿管，極大增加了尿路感染風險[1]。截癱患者因感覺功能障礙，尿路感染發(fā)現(xiàn)時通常較為嚴重，且尿路感染后病情進展快。尿液細菌定量培養(yǎng)為當前診斷尿路感染的金標準，但報告周期長、時效性不足[2]。Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀可快速提供尿液有形成分的定量結(jié)果和圖片信息，但在截癱留置導尿管患者尿路感染檢查中的應用較少。本研究旨在探討Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀在截癱留置導尿管患者尿路感染檢查中的應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018 年2 月至2019 年6 月于我院住院的長期留置導尿且疑有尿路感染的68 例截癱患者作為研究對象，均為男性，年齡45～82 歲，年齡中位數(shù)67，病程7～33 年，平均病程21 年。納入標準：患者根據(jù)美國脊髓損傷協(xié)會（American Spinal Injury Association, ASIA）脊髓損傷分級D 級以上；留取尿標本期間均未使用抗生素、損害腎功能藥物和免疫抑制劑。排除標準：診斷有菌血癥或正在使用抗生素；診斷有腎臟疾病、糖尿病、惡性腫瘤；持續(xù)性尿路感染尚未治愈者。

1.2 儀器與試劑

Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀（德國科寶公司）、Urilyzer Auto 尿液干化學分析儀（德國科寶公司）、HERACELL 240i 二氧化碳培養(yǎng)箱（賽默飛）、TDR-200B 細菌鑒定及藥敏分析儀（湖南長沙天地人生物科技有限公司）、Olympus CX41 光學顯微鏡、科寶尿沉渣檢測計數(shù)板（型號：Cobio C1）、科寶尿液干化學試紙條（11SYS Plus）、90 mm 哥倫比亞血瓊脂平板、90 mm 腸道菌瓊脂培養(yǎng)基（中國藍瓊脂平板）、90 mm MH 瓊脂培養(yǎng)基、1 μl 一次性接種環(huán)（晶安生物）、葡萄球菌生化藥敏鑒定卡TDR STRAPH-64（湖南長沙天地人生物科技有限公司）、非發(fā)酵菌生化藥敏鑒定卡TDR NF-64（湖南長沙天地人生物科技有限公司）、發(fā)酵菌生化藥敏鑒定卡TDR F-64（湖南長沙天地人生物科技有限公司）、多項目尿液化學質(zhì)控品（18030202）（上海伊華）。

1.3 方法

所有患者用一次性無菌尿杯留取中段尿約10 ml，0.5 h 內(nèi)送至實驗室；充分混勻尿液，用1 μl 定量接種環(huán)蘸取尿液分別在血瓊脂平板和中國藍瓊脂平板上十字劃線，5%二氧化碳培養(yǎng)箱35 ℃培養(yǎng)18～24 h，觀察有無菌落生長并進行菌落計數(shù)。當菌落計數(shù)革蘭陽性菌≥104cfu/ml，革蘭陰性菌≥105cfu/ml 時，判定細菌培養(yǎng)陽性，使用TDR-200B細菌鑒定儀鑒定菌株。

尿液接種完后，將其移至尿液定量分析專用管中，按照全自動尿液分析儀和Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀操作說明進行尿液檢驗。記錄每份尿標本人工審核前的紅細胞（red blood cell，RBC）、白細胞（white blood cell，WBC）、細菌總數(shù)、球狀菌和桿狀菌值，由從事尿液檢驗工作15 年以上、經(jīng)驗豐富的2 名主管技師對標本視圖進行審核，記錄最終報告的RBC、WBC、細菌總數(shù)、球狀菌值和桿狀菌值，臨床報告以人工審核結(jié)果為準。

1.4 觀察指標

以尿細菌定量培養(yǎng)結(jié)果為診斷尿路感染標準，記錄陽性標本數(shù)和菌種。

1.5 統(tǒng)計學處理

利用SPSS 20.0 軟件處理數(shù)據(jù)，尿液有形成分定量分析人工審核前后結(jié)果比較采用配對t檢驗；以尿液細菌定量培養(yǎng)結(jié)果為金標準，制作尿白細胞、細菌總數(shù)及桿狀菌診斷尿路感染的受試者工作特征曲線（receiver operator characteristic curve，ROC曲線），以WBC、細菌總數(shù)及桿狀菌各自約登指數(shù)（即靈敏度+特異度-1）最大時的值作為診斷截癱留置導尿管患者尿路感染的最佳陽性判斷值。

2 結(jié)果

2.1 尿液有形成分定量分析結(jié)果對比

疑有尿路感染的截癱留置導尿管患者的尿液標本68 份，尿液定量培養(yǎng)陽性58 例，其中革蘭陰性桿菌感染48 例，球菌感染10 例；尿液結(jié)晶10 例，結(jié)晶尿比例為14.7%。通過對比人工視圖審核前后檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，視圖審核后，Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀檢測結(jié)果中尿WBC、RBC、桿狀菌水平均顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；細菌總數(shù)和球狀菌濃度則在人工審核后有顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 尿液有形成分定量分析結(jié)果比較（u/μl，±s）

表1 尿液有形成分定量分析結(jié)果比較（u/μl，±s）

注：RBC 為紅細胞，WBC 為白細胞

時間 例數(shù) RBC WBC 細菌總數(shù) 桿狀菌 球狀菌人工審核前 68 25.19±13.1 62.6±41.8 780.3±153.6 124.2±73.8 656.1±145.5人工審核后 68 37.37±12.6 95.3±55.4 645.7±164.9 496.3±68.7 102.4±63.20 t 7.61 6.82 4.06 14.65 17.37 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 尿細菌定量培養(yǎng)與尿液有形成分定量分析結(jié)果

繪制Cobio S120 尿液有形成分分析儀檢測中WBC、細菌總數(shù)和桿狀菌診斷截癱長期留置導尿管患者尿路感染的ROC 曲線，WBC 最佳陽性判斷值為68.57 u/μl、細菌總數(shù)最佳陽性判斷值為145.10 u/μl、桿狀菌最佳陽性判斷值為75.61 u/μl。WBC、細菌總數(shù)、桿狀菌ROC 曲線下面積、95%可信區(qū)間和最佳陽性判斷值見表2；WBC、細菌總數(shù)、桿狀菌檢測效果評價見表3；WBC、細菌總數(shù)和桿狀菌作為判斷尿路感染指標的ROC 曲線圖，見圖1。

圖1 Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀檢測結(jié)果ROC 曲線

表2 WBC、細菌總數(shù)、桿狀菌的診斷效能

3 討論

Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀依照顯微鏡檢原理設(shè)計，將定量尿液充入一次性計數(shù)板，離心沉淀后拍照，由智能圖像識別軟件進行計數(shù)報告，同時還可提供圖像供人工審核。這種圖文報告結(jié)果直觀、形象、快速，可供檢驗人員在儀器屏幕上鏡檢。有經(jīng)驗的尿液檢驗人員審核時可借助圖像直接標記修正，減少漏報、誤報；圖像不易辨認時，可將尿液離心后涂片、染色[3]以提高辨識度。本研究中人工視圖審核不僅可以避免細胞漏報，還可以顯著減少細菌總數(shù)和球狀菌數(shù)誤報，明顯提升桿狀菌數(shù)?？梢姡珻obio S120 尿液有形成分定量分析儀報告前需進行人工審核，圖像清晰的標本人工審核后可不必再涂片鏡檢，提高檢驗效率，減少不必要的人工操作。

圖像識別尿液有形成分也存在一些不足，尿中RBC、WBC 易受滲透壓、體外降解等多種因素影響發(fā)生形態(tài)改變[4]，當細胞形態(tài)不典型時圖像識別軟件可能會無法準確辨識，此時需人工視圖審核予以糾正。細菌體積微小、質(zhì)量輕，有形成分定量分析儀尿液計數(shù)板的離心力無法將細菌有效沉降[5]，大部分細菌仍懸浮于計數(shù)池中。且計數(shù)板深度為1～2 mm，智能圖像識別軟件只能依據(jù)在景深±5 μm層面辨別靜態(tài)圖像上微小顆粒的二維平面信息。球狀菌（0.5～2.0 μm）與某些鹽類結(jié)晶、非結(jié)晶型尿酸鹽、細胞崩解產(chǎn)物等雜質(zhì)大小接近，短桿菌、球桿菌與計數(shù)板中直立或斜立的長桿菌在二維圖像上均接近球狀菌，圖像識別軟件易誤報為球狀菌，使球狀菌數(shù)過高。人工顯微鏡檢時遇到在單個圖像層面無法準確識別的成分，可通過調(diào)節(jié)細準焦螺旋獲取不同層面的圖像信息，避免誤判誤診。所以，尿液有形成分定量分析儀廠商可通過深度模仿人工鏡檢，將細準焦螺旋調(diào)節(jié)下的圖像予以清晰錄像，為圖像識別軟件和檢驗審核人員提供更充足的信息，減少誤判。

根據(jù)ROC 曲線分析，WBC 最佳陽性判斷值為68.57 u/μl，遠超廠家推薦的參考范圍（0～10 u/μl），遠高于普通患者診斷尿路感染的WBC 最佳陽性判斷值[6-7]?？梢姡肳BC 診斷尿路感染時，要考慮截癱留置導尿管患者的特殊性，避免直接參照普通尿路感染患者數(shù)據(jù)。本研究中革蘭陰性桿菌引起截癱患者尿路感染的比例高達84.5%，與既往研究[8-9]的截癱患者尿路感染中革蘭陰性桿菌比例接近，高比例革蘭陰性桿菌感染是將尿液有形成分中桿狀菌濃度直接作為診斷尿路感染的理論基礎(chǔ)。本研究中，桿狀菌對截癱留置導尿管患者尿路感染檢測的最佳陽性判斷值為75.61 u/μl，遠低參考閾值上限（130 u/μl），而此時桿狀菌的特異度和陽性預測值均較高，完全可以作為篩檢截癱留置導尿管患者尿路感染的指標；細菌總數(shù)的最佳陽性判斷值為150.40 u/μl，與參考閾值上限（130 u/μl）接近。對比以上3 個指標發(fā)現(xiàn)，細菌總數(shù)的總符合率最高為92.6%；桿狀菌的特異性最高為98.8%，陽性預測值最高為99.0%；WBC 則在靈敏度和陰性預測值上較有優(yōu)勢。

綜上所述，Cobio S120 尿液有形成分定量分析儀可快速提供尿液有形成分的定量結(jié)果和可視化信息，檢驗人員可借助圖像直接審核，減少了手工涂片復檢的工作量；但尿液有形成分定量分析仍有很大的改進空間，可繼續(xù)深度模仿人工鏡檢，為檢驗人員提供更豐富的判斷信息。截癱留置導尿管患者中細菌總數(shù)和桿狀菌與尿路感染符合率高、特異性強、陽性預測值高，兩者均可作為較為理想的篩檢指標，用于快速診斷截癱患者尿路感染情況，指導臨床開展相關(guān)治療。