不同藥物在種植體早期感染預(yù)防作用及對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響

經(jīng)海永，何平，高健文，周弘

（1.河南省商丘市中心醫(yī)院口腔科，河南 商丘 476000；2.商丘醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)?？谇会t(yī)學(xué)院，河南 商丘 476000；3.河南省口腔醫(yī)院口腔種植科，河南 鄭州 450000）

口腔種植術(shù)是使用人工牙根修復(fù)牙體缺失的外科手術(shù)方式[1]。種植體早期感染是術(shù)后并發(fā)癥之一，也是造成種植失敗的主要因素之一。相關(guān)研究顯示，抗菌性漱口液的使用可抑制口腔致病菌的繁殖，減少牙菌斑的形成，預(yù)防種植體早期感染的發(fā)生[2]。預(yù)防種植體早期感染仍是口腔種植關(guān)注的重點(diǎn)。氯已定為復(fù)方氯己定含漱液中的有效成分，可附著在粘膜及牙齒表面，發(fā)揮強(qiáng)大的殺菌作用[3]。西吡氯銨可降低口腔黏膜的附著能力，抑制菌斑的形成[4]。西帕依固齦液是由沒(méi)食子加工而成的混合制劑，對(duì)牙周組織疾病的治療有較好的效果[5]。目前已有研究闡明三種藥物在預(yù)防早期感染中的作用，但偏向細(xì)菌培養(yǎng)、炎癥方向，關(guān)于對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響鮮有報(bào)道。本研究旨在探討復(fù)方氯己定含漱液、西吡氯銨含片、西帕依固齦液對(duì)種植術(shù)后感染的預(yù)防作用及對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年2 月至2020 年3 月商丘市中心醫(yī)院口腔科收治的144 例行擇期種植術(shù)的患者，其中男性60 例，女性84 例，年齡18～65歲，平均年齡（41.51±10.23）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）身體健康，既往無(wú)牙周病史；（2）單個(gè)后牙缺失，年齡≥18 歲；（3）骨質(zhì)水平狀況良好；（4）簽署知情同意且自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者1 月內(nèi)進(jìn)行過(guò)抗真菌感染、免疫功能調(diào)節(jié)等相關(guān)治療；（2）過(guò)敏體質(zhì)或長(zhǎng)期使用鈣拮抗劑者；（3）精神異?；蛑橇Φ拖抡?。144 例患者按照隨機(jī)數(shù)表法分為4 組，每組36例，各組患者性別、年齡、種植部位等一般資料無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。本研究經(jīng)商丘市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意進(jìn)行研究。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組 A 組：種植術(shù)后每日早晚使用復(fù)方氯己定含漱液（深圳南粵藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H10920104）漱口，持續(xù)使用一周。B 組：種植術(shù)后每日使用西吡氯銨含片 （四川健能制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字A14202325314），1 片/次，每日3～4 次，持續(xù)使用一周。C 組：種植術(shù)后每日使用西帕依固齦液（新奇康藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z65020012）漱口，每次口腔含漱3～5 min，每日3～5 次，持續(xù)使用一周。D 組：種植術(shù)后每日飯后及睡前使用生理鹽水各漱口1 次，持續(xù)使用一周。

1.2.2 觀察指標(biāo) （1）疼痛情況及傷口愈合情況：采用視覺(jué)模擬評(píng)分法（VAS）[6]記錄患者術(shù)后2 d 疼痛情況，總分為10 分，0 度疼痛為0 分，Ⅰ度疼痛為（1～3）分，Ⅱ度疼痛為（4～6）分，Ⅲ度疼痛為（7～10）分。術(shù)后7 d 拆線時(shí)評(píng)價(jià)傷口愈合情況，良好為傷口無(wú)紅腫熱痛。一般為傷口有輕微的紅腫、疼痛感。不良為傷口未愈合，壓痛明顯。（2）牙周指標(biāo)：一周后使用改良菌斑指數(shù) （Modified plaque index,mPLI)、改良牙齦指數(shù) （Modified gingival index,mGI）、改良齦溝出血指數(shù)（Modified sulcus bleeding index,mSBI）對(duì)牙周狀態(tài)進(jìn)行評(píng)價(jià)。mPLI 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[7]：0 分為無(wú)菌斑，1 分為少量薄層菌斑，2 分為中量菌斑，3 分為大量菌斑。mGI 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[8]：0 分為牙齦質(zhì)地、顏色正常，1 分為牙齦伴隨輕度炎癥、水腫，2 分為牙齦伴隨中度炎癥，探針出血，3 分為牙齦肉眼可見(jiàn)出血、紅腫。mSBI 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[9]：0 分為牙齦健康，1 分為牙齦輕微水腫，無(wú)出血現(xiàn)象，2 分為探針點(diǎn)狀出血，3 分為探針線狀出血，4 分為自發(fā)出血。（3）細(xì)菌培養(yǎng)情況：術(shù)后7 d，采用一次性菌環(huán)提取齦下菌斑，送交實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。送檢樣本稀釋1 000 倍后取10 μL 稀釋液接種于牛心腦培養(yǎng)基，對(duì)不同形態(tài)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算原液中的菌落數(shù)量，分別挑選不同形態(tài)的菌落接種于含有氯化血紅素和維生素K1 的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，并生化鑒定。（4）齦溝液炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)：術(shù)后一周，選擇受試牙遠(yuǎn)中、近中、中央3 個(gè)區(qū)域中牙周袋最深處作為采樣點(diǎn)，使用濾紙條（上海必泰生物科技有限公司生產(chǎn)）插入牙周底袋獲取齦溝液樣本。將濾紙條置于干凈的EP 管內(nèi)，加入緩沖液后離心收集上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定炎癥指標(biāo)[白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、基質(zhì)金屬蛋白酶 （Matrix metalloproteinase-8,MMP-8）]和氧化應(yīng)激指標(biāo)[超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione peroxidase,GP-x)、丙二醛（Malondialdehvde，MDA）]，試劑盒購(gòu)自美國(guó)ThermoFisher 公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用（±s）表示，多組間行單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩分析行LSD-t 檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4 組患者種植體感染率比較 術(shù)后4 周對(duì)144例患者的種植體進(jìn)行根尖X 線片檢查，結(jié)果顯示，僅D 組有2 例出現(xiàn)種植體周?chē)浗M織充血、腫脹、感染，根尖X 線片發(fā)現(xiàn)種植體周?chē)鸁o(wú)投射區(qū)，感染率為5.56%。A、B、C 組患者的種植體穩(wěn)定，與骨結(jié)合良好。各組種植體感染率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 4 組患者疼痛情況及傷口愈合度比較結(jié)果 見(jiàn)表1。

表1 4 組患者疼痛情況及傷口愈合度比較

2.3 4 組患者牙周指標(biāo)比較結(jié)果 見(jiàn)表2。

表2 4 組患者牙周指標(biāo)比較(±s，分)

表2 4 組患者牙周指標(biāo)比較(±s，分)

注：與A、B、C 組比較，*P＜0.05。

組別n A 組B 組C 組D 組36 36 36 36 mPLImGI 0.60±0.48 0.59±0.47 0.55±0.45 1.24±0.40*0.65±0.52 0.61±0.48 0.59±0.42 0.72±0.51 mSBI 0.62±0.40 0.65±0.44 0.66±0.41 0.59±0.43

2.4 4 組患者種植體周?chē)?xì)菌培養(yǎng)情況比較結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 4 組患者種植體周?chē)?xì)菌培養(yǎng)情況比較(±s，CFU/mL)

表3 4 組患者種植體周?chē)?xì)菌培養(yǎng)情況比較(±s，CFU/mL)

注：與A、B、C 組比較，*P＜0.05。

組別n A 組B 組C 組D 組36 36 36 36專(zhuān)性厭氧菌 兼性厭氧菌1.98±0.65 2.10±0.53 2.19±0.57 2.92±0.71*5.53±1.32 5.47±1.30 5.22±1.28 5.45±1.29需氧菌1.65±0.56 1.73±0.60 1.70±0.62 1.49±0.52

2.5 4 組患者齦溝液炎癥及氧化應(yīng)激因子水平比較 結(jié)果見(jiàn)表4—5。

表4 4 組患者齦溝液炎癥水平比較（±s）

表4 4 組患者齦溝液炎癥水平比較（±s）

注：與A、B、C 組比較，*P＜0.05；與B、C 組比較，#P＜0.05。

組別n IL-6（ng/mL）TNF-α（ng/mL）MMP-8（pg/mL）用藥前A 組B 組C 組D 組用藥后A 組B 組C 組D 組36 36 36 36 3.72±0.65 3.66±0.72 3.75±0.63 3.64±0.69 4.46±0.83 4.39±0.75 4.52±0.66 4.40±0.63 552.18±42.56 557.39±50.12 549.86±48.71 540.93±47.53 36 36 36 36 2.57±0.30#2.84±0.32 2.89±0.34 3.57±0.78*3.02±0.42#3.16±0.45 3.18±0.41 4.25±0.74*378.50±38.24#384.67±40.15 386.52±40.16 533.24±52.17*

表5 4 組患者齦溝液氧化應(yīng)激因子水平比較（±s，ng/mL）

表5 4 組患者齦溝液氧化應(yīng)激因子水平比較（±s，ng/mL）

注：與A、B、C 組比較，*P＜0.05；與B、C 組比較，#P＜0.05。

組別n SODGP-x MDA用藥前A 組B 組C 組D 組用藥后A 組B 組C 組D 組36 36 36 36 205.46±18.77 210.45±20.18 207.55±16.35 208.42±15.39 156.49±23.45 152.36±25.78 160.48±20.35 154.42±21.33 5.88±1.12 5.60±1.08 5.69±1.30 5.49±1.27 36 36 36 36 245.18±19.57#230.32±17.28 231.18±17.57 218.17±16.62*220.65±20.73#210.47±19.68 208.65±29.73 179.62±21.41*6.30±1.04 5.97±1.24 6.13±1.08 6.02±1.35

3 討論

種植體植入后局部處于缺氧環(huán)境中，有利于口腔內(nèi)厭氧細(xì)菌的附著和存活，種植體炎癥患者齦下菌群以革蘭氏陰性（G-）厭氧菌居多，G-厭氧菌繁殖的過(guò)程中可分解糖類(lèi)物質(zhì)產(chǎn)酸并釋放毒素，引起宿主的免疫炎性反應(yīng)[10]。有效的抗菌藥物治療可在種植體周?chē)纬梢志琳?，預(yù)防種植體周?chē)浻步M織病變。鑒于抗生素濫用造成的耐藥性問(wèn)題，目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者在口腔疾病的防治上越來(lái)越青睞使用局部抗菌制劑。含漱療法具有局部藥物濃度高、藥效持久等優(yōu)點(diǎn)。復(fù)方氯己定含漱液能增加細(xì)菌細(xì)胞壁與細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)致菌體破裂死亡；牢固獲得性膜，阻止牙菌斑的形成。西帕依固齦液的主要成分為沒(méi)食子，沒(méi)食子具有抑菌消炎、解熱鎮(zhèn)痛等作用，還對(duì)多種球桿菌有明顯的的抑制作用。

本研究將以上三種藥物用于種植術(shù)早期口腔感染的預(yù)防，與生理鹽水對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后A、B、C 組疼痛程度低于D 組，傷口愈合程度優(yōu)于D組，說(shuō)明三種藥物可減輕種植術(shù)后口腔疼痛，促進(jìn)傷口愈合。4 組的牙周指標(biāo)及細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示，A、B、C 組mPLI 顯著低于D 組，專(zhuān)性厭氧菌計(jì)數(shù)也顯著低于D 組，提示口腔局部使用三種藥物可抑制厭氧菌定植，減少菌斑的形成。本研究結(jié)果提示，口腔菌體感染與種植體周?chē)装Y密切相關(guān)。三種藥物通過(guò)抑制口腔厭氧菌定植，降低了種植體早期感染的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。復(fù)方氯己定含漱液、西吡氯銨含片、西帕依固齦液在降低種植體早期感染發(fā)生的有效性已得到肯定。本研究針對(duì)種植體牙周指標(biāo)和種植體周?chē)?xì)菌培養(yǎng)的結(jié)論與既往研究相符，但不同的是，本研究還重點(diǎn)關(guān)注了齦溝液炎癥因子和氧化應(yīng)激水平。齦溝液變化對(duì)牙周疾病的判斷及預(yù)后具有重要意義。IL-6 是一種多效性的細(xì)胞因子，在感染的早期快速升高，可促進(jìn)炎癥的發(fā)生。TNF-α 是一種多向性的促炎因子，是介導(dǎo)細(xì)菌感染免疫應(yīng)答的關(guān)鍵因素。MMP-8 可促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，達(dá)到破壞牙周組織的目的[11]。本研究結(jié)果還顯示，術(shù)后7 d，A、B、C 組齦溝液IL-6、TNF-α、MMP-8 水平顯著低于D 組，提示局部藥物的使用可顯著降低口腔炎癥水平。牙周炎性因子的聚集可導(dǎo)致炎性細(xì)胞釋放大量自由基，大量超氧化物陰離子、氫氧自由基等活性成分的聚集損傷牙周組織，還能誘導(dǎo)破骨細(xì)胞活化，造成牙槽骨吸收，加重炎癥反應(yīng)，形成惡性循環(huán)。SOD、GP-x可作為機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)的標(biāo)記物。本研究中，術(shù)后A、B、C 組齦溝液SOD、GP-x 水平顯著高于D組，說(shuō)明D 組氧化應(yīng)激水平較高，種植體周?chē)a(chǎn)生較多自由基，大量的抗氧化酶在清除自由基的過(guò)程中不斷被消耗，因而齦溝液SOD、GP-x 水平降低。A、B、C 組齦溝液指標(biāo)比較發(fā)現(xiàn)，A 組IL-6、TNF-α、MMP-8 水平顯著低于B、C 組，SOD、GP-x水平高于B、C 組，考慮原因可能為復(fù)方氯己定含漱液為目前抗菌效力最強(qiáng)的口腔含漱劑，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性/陰性菌均有較好的抑菌效果，可顯著減輕種植體炎性水平，炎性水平的降低改善了口腔微環(huán)境，因而氧化應(yīng)激水平更低。

綜上所述，復(fù)方氯己定含漱液、西吡氯銨含片、西帕依固齦液對(duì)種植體周?chē)缙诟腥居休^好的預(yù)防作用，可術(shù)后減輕疼痛，促進(jìn)傷口恢復(fù)，抑制菌斑形成，減輕種植體周?chē)装Y及氧化應(yīng)激水平，復(fù)方氯己定含漱液在炎癥及氧化應(yīng)激水平控制方面效果更優(yōu)。