Crigler-Najjar綜合征的治療進(jìn)展

張文艷 鄧國(guó)宏

摘要：Crigler-Najjar綜合征（CNS）是一種因膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1（UGT1A1）活性降低或完全缺失所導(dǎo)致的血漿中非結(jié)合膽紅素含量增加的常染色體隱性遺傳病，分為CNS Ⅰ型和Ⅱ型。其中CNS Ⅰ型最為嚴(yán)重，可發(fā)展為核黃疸損壞大腦神經(jīng)系統(tǒng)，甚至威脅到患者的生命。本文介紹了6種CNS治療方法，包括光照療法、血漿置換、藥物治療、肝移植、肝細(xì)胞移植和基因療法；歸納了每種治療技術(shù)的適用患者類(lèi)型、治療效果以及現(xiàn)存的不足之處。光照療法、血漿置換、藥物治療和肝細(xì)胞移植治療技術(shù)可暫時(shí)性地控制患者血清水平，降低患者發(fā)生核黃疸的風(fēng)險(xiǎn)，但不能徹底恢復(fù)UGT1A1酶活性；肝移植是CNS Ⅰ型患者目前唯一的治療方式，但因合適肝臟供體來(lái)源和術(shù)后免疫排斥反應(yīng)等因素受到限制；基因療法在治療CNS等遺傳性疾病領(lǐng)域中最具應(yīng)用前景，能夠?yàn)镃NS患者提供更多的可行性治療方案。

關(guān)鍵詞：Crigler-Najjar綜合征； 光療法； 血漿置換； 藥物療法；??? 肝移植； 細(xì)胞移植； 基因治療

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（81930061）； 西南醫(yī)院重大技術(shù)創(chuàng)新計(jì)劃重大項(xiàng)目（SWH2016ZDCX1007）

Research advances in the treatment of Crigler-Najjar syndrome

ZHANG Wenyan1，2， DENG Guohong2. （1. School of Life Sciences， Chongqing University， Chongqing 404100， China; 2. Department of Infectious Diseases， The First Affiliated Hospital of Army Medical University， Chongqing 400038， China）

Corresponding author：DENG Guohong， gh_deng@hotmail.com （ORCID：0000-0003-1263-7220）

Abstract：

Crigler-Najjar syndrome （CNS） is an autosomal recessive disorder in which the content of plasma unconjugated bilirubin is increased due to the reduction or complete deficiency of the activity of bilirubin uridine diphosphate glucuronosyl transferase 1A1 （UGT1A1）， classified as CNS type I and II. CNS type I is the most severe， which will develop into kernicterus， damage the brain nervous system， and even threaten the life of patients. This article introduces six CNS treatment techniques， including phototherapy， plasma exchange， drug therapy， liver transplantation， hepatocyte transplantation and gene therapy. The applicable patient types， treatment effects and existing deficiencies of each technique were summarized. Phototherapy， plasma exchange， drug therapy and hepatocyte transplantation can temporarily control serum levels and reduce the risk of jaundice， but cannot completely restore UGT1A1 enzyme activity; liver transplantation is currently the only treatment option for CNS type I patients， but is limited by suitable liver donors and post-operative immune rejection. Gene therapy has the most promising application in the treatment of genetic disorders such as CNS， which can provide more viable therapeutic techniques for CNS patients.

Key words：

Crigler-Najjar Syndrome; Phototherapy; Plasma Exchange; Drug Therapy; Liver Transplantation; Cell Transplantation; Genetic Therapy

Research funding：

National Natural Science Foundation of China （81930061） ; Key Project of the Technical Innovation Plan of Southwest Hospital （SWH2016ZDCX1007）

Crigler-Najjar綜合征（Crigler-Najjar syndrome，CNS）是一種罕見(jiàn)的常染色體隱性遺傳性疾病，是由膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖（uridine diphosphate，UDP）醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1（UDP-glucuronosyl transferase 1A1，UGT1A1）活性降低或缺乏所導(dǎo)致的非結(jié)合性高膽紅素血癥［1］。CNS分為Ⅰ型和Ⅱ型，前者較后者嚴(yán)重。CNSⅠ型由Crigler和Najjar于1952年首次報(bào)道［2］，因UGT1A1酶活性完全缺失所導(dǎo)致，患者的血清膽紅素水平為20～50 mg/dL，超出正常范圍（0.2～1.2 mg/dL），若未行治療，非結(jié)合膽紅素（unconjugated bilirubin，UCB）在大腦（皮質(zhì)下核）中積累發(fā)展為核黃疸，這是嬰幼兒嚴(yán)重的非結(jié)合性高膽紅素血癥的常見(jiàn)癥狀，可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損傷。Arias［3］于1962年報(bào)道了23例非結(jié)合性高膽紅素血癥患者，對(duì)其中8例患者（年齡18～45歲）的癥狀進(jìn)行描述，總結(jié)了CNS Ⅱ 型的臨床表現(xiàn)。CNS Ⅱ 型患者UGT1A1酶活性未完全缺失，低于正常水平（＜10%），血清膽紅素水平為7～20 mg/dL，出現(xiàn)神經(jīng)損傷的風(fēng)險(xiǎn)較低。CNS Ⅰ 型患者UGT1A1酶活性的完全缺失是由于UGT1A1基因發(fā)生突變，常見(jiàn)突變有缺失、內(nèi)含子剪接供體和受體位點(diǎn)改變、外顯子跳躍插入或在UGT1A1基因內(nèi)形成終止密碼子、錯(cuò)義突變［4-6］；CNS Ⅱ 型患者則是由于UGT1A1基因發(fā)生點(diǎn)突變導(dǎo)致UGT1A1酶的表達(dá)下降［7］。CNS Ⅰ 型和 Ⅱ 型在臨床上的區(qū)別主要是使用苯巴比妥治療后，前者血清膽紅素不下降，而后者可見(jiàn)血清膽紅素水平下降［8］。本文將針對(duì)CNS治療相關(guān)研究進(jìn)展作一綜述。

1 CNS的治療

膽紅素是血紅素的氧化產(chǎn)物，在血液中與清蛋白結(jié)合形成膽紅素-清蛋白復(fù)合體，即UCB。UCB運(yùn)輸至肝臟中，在肝細(xì)胞膜血竇域中膽紅素與清蛋白分離。此時(shí)，膽紅素與肝細(xì)胞內(nèi)的Y蛋白（配體蛋白）或Z蛋白結(jié)合形成膽紅素-Y蛋白或膽紅素-Z蛋白。肝細(xì)胞中的膽紅素-Y蛋白或膽紅素-Z蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，在UGT的作用下與配體蛋白分離，生成葡萄糖醛酸膽紅素，即結(jié)合膽紅素，分泌進(jìn)入膽管系統(tǒng)，隨膽汁排入腸道。依據(jù)膽紅素的代謝過(guò)程，可通過(guò)減少血漿中UCB水平達(dá)到治療CNS的目標(biāo)。目前，CNS主要有以下6種治療方法。

1.1 光照治療 光照治療簡(jiǎn)稱(chēng)光療，是CNS新生兒治療高膽紅素血癥最常用的治療方式之一［9-10］。光療的原理是通過(guò)某種光源照射患者皮膚表面，使血液中非結(jié)合的游離膽紅素經(jīng)光-氧作用后發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，破壞分子內(nèi)氫鍵的形成，轉(zhuǎn)變?yōu)樗苄阅懠t素，易于從膽汁和尿液中排出，從而達(dá)到降低血清膽紅素水平的作用。膽紅素主要吸收400～500 nm的可見(jiàn)光，其中對(duì)425～475 nm波長(zhǎng)的光吸收最強(qiáng)。由于藍(lán)光的波長(zhǎng)正處于425～475 nm，因此，425 nm、475 nm藍(lán)光燈在臨床應(yīng)用最為廣泛。

藍(lán)光治療對(duì)新生兒高膽紅素血癥患者的治療效果高于普通光照治療（如日光燈、鹵燈），當(dāng)CNS Ⅰ 型新生兒患者接受長(zhǎng)時(shí)間的藍(lán)光治療后，可將總膽紅素控制在7～28 mg/dL范圍內(nèi)［11］。但隨著患兒的年齡增長(zhǎng)，其皮膚厚度、色素沉著及體表面積增加，光照治療的效果也隨之降低［6，12-13］，增加了CNS Ⅰ 型患者發(fā)生腦病和核黃疸的風(fēng)險(xiǎn)。此外，光照治療也有不足之處。一方面，患者在家庭進(jìn)行光照治療需安裝相應(yīng)的光療設(shè)備（LED光源和燈箱）及輔助設(shè)備（冷卻設(shè)備），在一定程度上增加了家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；另一方面，患者需接受長(zhǎng)時(shí)間的光照治療，導(dǎo)致生活極大不便，降低了其生活質(zhì)量［11］。

1.2 血漿置換 血漿置換可有效降低CNSⅠ型患者高膽紅素血癥加重期間的總膽紅素和UCB水平［14］。血漿置換需要先抽取患者的血液，經(jīng)離心去除血漿，重懸紅細(xì)胞，使用供體血漿替換患者自身血漿，再與白蛋白、平衡液重新融合，形成新的血液，回輸患者體內(nèi)，并多次置換以達(dá)到降低膽紅素水平的效果［15］。血漿置換可以快速降低膽紅素水平，將其控制在正常范圍內(nèi)，延長(zhǎng)患者生存時(shí)間，但所需新鮮血漿量大，存在一定的副作用及安全問(wèn)題（如過(guò)敏反應(yīng)、肝炎等），且經(jīng)血漿置換治療后膽紅素水平仍可能升高。

1.3 藥物治療

1.3.1 苯巴比妥 CNSⅡ型新生兒患者因肝生物轉(zhuǎn)化酶系發(fā)育不完全，UGT的酶活性較低，故其肝臟中轉(zhuǎn)化生成結(jié)合膽紅素的能力弱，無(wú)法及時(shí)清除細(xì)胞產(chǎn)生的膽紅素，血漿中的UCB水平增加，形成高膽紅素血癥。苯巴比妥可以通過(guò)增強(qiáng)肝臟中UGT的合成來(lái)降低血清中的UCB含量，這是由于苯巴比妥能夠作用于UGT1A1基因的290 bp（-3 483/-3 194）區(qū)域，該區(qū)域?yàn)楸桨捅韧醉憫?yīng)性增強(qiáng)子模塊（gtPBREM），可由一種名為持續(xù)性激活受體的核受體所激活［16］。Abdul Raffay等［17］報(bào)道了一例罕見(jiàn)的14歲CNSⅡ型患兒，其出生便有黃疸，血清總膽紅素16.1 mg/dL，UCB 15.6 mg/dL，服用苯巴比妥1個(gè)月后，其UCB水平下降至9.5 mg/dL，膽紅素水平得到了有效控制。

1.3.2 奧利司他 奧利司他是一種選擇性胃腸脂肪酶抑制劑，劑量依賴(lài)性地抑制膳食甘油三酯的吸收［18］，常用作減肥藥。在CNSⅠ型患者和Gunn大鼠中，因缺乏UGT，UCB未被葡萄糖醛酸化，不能經(jīng)膽汁排出。研究［19-20］發(fā)現(xiàn)，血漿中的UCB水平高時(shí)，可以從血液中到達(dá)腸腔，極少量的UCB可以分泌到模型鼠的膽汁中，腸道捕獲UCB后通過(guò)糞便排泄可減少UCB腸肝循環(huán)，進(jìn)而降低血漿中UCB的含量。奧利司他能夠誘導(dǎo)血漿中UCB跨黏膜到達(dá)腸腔，降低血漿中UCB含量［21］。在動(dòng)物模型研究［22］中，高脂飲食組和低脂飲食組Gunn大鼠服用奧利司他后，高脂飲食組的治療效果低于低脂飲食組，可能原因是模型鼠攝入大量脂肪時(shí)，糞便中排泄的脂肪量也會(huì)增加，此時(shí)已達(dá)到脂肪捕獲UCB的最大水平，增加脂肪攝入量（糞便排泄量增加）不會(huì)進(jìn)一步降低血漿中UCB的含量。與動(dòng)物模型研究結(jié)果一致，當(dāng)CNS患者飲食中脂肪攝入量和BMI較低時(shí)，經(jīng)奧利司他治療后，這部分患者血清中UCB含量降低。臨床上，應(yīng)根據(jù)不同CNS患者來(lái)確定最佳的奧利司他服用劑量，以此達(dá)到脂肪在腸腔中的最佳分布。此外，在Hafkamp等［23］報(bào)道的16例服用奧利司他治療的CNS患者中，所有患者血漿中UCB含量均下降，其中7例患者血漿UCB水平平均下降21%。然而，奧利司他存在一定的副作用，主要與胃腸道相關(guān)，常見(jiàn)不良反應(yīng)包括腹瀉、胃痙攣和腸胃脹氣等。

1.3.3 磷酸鈣 在體外，UCB可與非晶態(tài)磷酸鈣相結(jié)合，Gunn大鼠服用磷酸鈣后，血漿中的UCB與腸內(nèi)磷酸鈣結(jié)合可能刺激其排泄，達(dá)到降低血清UCB含量的作用［24］。有研究［25］發(fā)現(xiàn)，接受光照治療的CNSⅠ型患者在口服磷酸鈣后，其血清膽紅素可降低18%，而CNSⅡ型患者的血清膽紅素并未降低，因此磷酸鈣可作為CNSⅠ型患者光療的輔助劑。

1.4 肝移植 肝移植是目前各種終末期肝病的標(biāo)準(zhǔn)治療手段，關(guān)于肝代謝缺陷導(dǎo)致的疾?。ㄈ鏑NSⅠ型）不會(huì)導(dǎo)致肝結(jié)構(gòu)性損傷，可選擇輔助性肝移植，利用部分正常肝臟輔助患者來(lái)恢復(fù)肝代謝缺陷。

輔助性肝移植是一種保留受體部分或全部肝臟，將正常供體的部分肝臟或全部肝臟植入患者體內(nèi)的一種移植方法。輔助性肝移植根據(jù)手術(shù)方式的不同可分為異位輔助性肝移植和原位輔助性肝移植。異位輔助性肝移植是在不切除患者原有病肝的基礎(chǔ)上，將供體肝臟移植到患者原肝旁。原位輔助性肝移植是切除患者的部分病肝，在切除病肝部位移植入相應(yīng)體積的正常肝臟。輔助性肝移植手術(shù)難度較大，術(shù)后并發(fā)癥多。臨床上，異位輔助性肝移植較少開(kāi)展，主要采用原位輔助性肝移植。Shanmugam等［26］對(duì)1例22歲CNSⅠ型女性患者行左側(cè)肝輔助性部分原位肝移植，術(shù)后5 d患者的膽紅素水平從接受光照治療的26～28 mg/dL恢復(fù)至正常水平，且肝移植18個(gè)月后肝功能檢測(cè)正常。

目前，肝移植仍是CNSⅠ型患者的唯一根治手段［27］，可作為預(yù)防性策略以避免CNSⅠ型相關(guān)嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生。然而，肝移植的臨床應(yīng)用受手術(shù)成本高、合適的肝臟供體來(lái)源及移植后的免疫排斥反應(yīng)和并發(fā)癥等因素限制。此外，肝移植并不能糾正患者已出現(xiàn)的神經(jīng)損傷［28］，患者應(yīng)在腦損傷風(fēng)險(xiǎn)最小的情況下行肝移植。

1.5 肝細(xì)胞移植（hepatocellular transplantation，HCT） HCT作為肝移植的替代方案，相較于肝移植產(chǎn)生的創(chuàng)傷更小，手術(shù)過(guò)程更簡(jiǎn)單，手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)更低［29-30］，可作為肝移植患者等待合適供體器官期間的臨時(shí)治療方式，暫時(shí)性地恢復(fù)肝功能。HCT前，先選擇合適的肝臟外植體，從中分離出肝細(xì)胞，對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，將一定數(shù)量的高質(zhì)量肝細(xì)胞經(jīng)門(mén)靜脈輸入患者體內(nèi)，進(jìn)一步檢測(cè)患者相關(guān)指標(biāo)。

Ambrosino等［31］報(bào)道1例9歲CNS Ⅰ 型男性患兒，其總膽紅素水平為（530±38） μmol/L，伴有發(fā)育遲緩、口齒不清和輕度運(yùn)動(dòng)失調(diào)的核黃疸臨床癥狀，接受HCT的60 d內(nèi)，總膽紅素水平降低，維持在317 μmol/L左右。此外，Khan等［32］報(bào)道1例2歲CNS Ⅰ 型女性患兒，血漿中膽紅素水平高（＞30 mg/dL），但并未觀察到核黃疸癥狀，接受肝祖細(xì)胞移植2個(gè)月內(nèi)膽紅素水平降至16 mg/dL。

雖然HCT治療CNSⅠ型具有一定的安全性、可行性和有效性，但并不能完全降低CNSⅠ型患者的高膽紅素水平，需要重復(fù)行肝細(xì)胞輸注，且最終均需行肝移植［31，33］。同時(shí)，HCT在所分離肝細(xì)胞的質(zhì)量、細(xì)胞移植效率及移植后患者的免疫反應(yīng)等方面仍存在極大的挑戰(zhàn)，限制了該方法的臨床應(yīng)用。

1.6 基因治療

基因治療是指將機(jī)體存在缺陷的基因經(jīng)生物載體遞送到生物體內(nèi)進(jìn)而恢復(fù)其生物功能，糾正因該基因缺陷所引起的疾病，到達(dá)治療的目的。目前，針對(duì)CNS的基因治療主要有3個(gè)方面：（1）利用生物載體遞送正常的UGT1A1基因序列；（2）以規(guī)律成簇間隔短回文重復(fù)序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）及其相關(guān)蛋白（CRISPR-associated，Cas）為主的基因編輯技術(shù)，進(jìn)行缺失堿基及片段插入；（3）利用脂質(zhì)納米顆粒（lipid nanoparticle，LNP）裝載UGT1A1 mRNA序列，恢復(fù)UGT1A1酶活性。

1.6.1 生物載體介導(dǎo)的基因治療 載體介導(dǎo)的UGT1A1基因編碼區(qū)的遞送策略中，主要是以病毒或含哺乳動(dòng)物特異性啟動(dòng)子的載體為主。病毒載體包括慢病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒（adenovirus associated virus，AAV）等，其中，慢病毒是一種整合型病毒載體，能夠整合到宿主的基因組中，同時(shí)引發(fā)機(jī)體較大的免疫原性［34］；腺病毒不整合到宿主基因組中，其高免疫原性可引起機(jī)體嚴(yán)重的免疫反應(yīng)，需避免重復(fù)給藥［35］；AAV是目前最具潛力的病毒載體，相較于慢病毒和腺病毒，其免疫原性低，具有豐富的血清型，可靶向不同器官，基于AAV血清型8（AAV8）的基因治療已處于臨床試驗(yàn)階段［36］。2018年，Collaud等［37］構(gòu)建了ssAAV8-hUGT1A1載體作為治療CNS的臨床產(chǎn)品，對(duì)Gunn大鼠單次靜脈注射劑量為5.0×1012 vg/kg的ssAAV8-hUGT1A1，其膽紅素水平持續(xù)正常（＞50 d），且當(dāng)單次注射劑量為2.5×1013 vg/kg時(shí)并未引發(fā)鼠體內(nèi)的免疫反應(yīng)，支持在CNS患者中開(kāi)展Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)。哺乳動(dòng)物特異性啟動(dòng)子有巨細(xì)胞病毒、延伸因子-1α、磷酸甘油酸激酶、載脂蛋白E、TBE、細(xì)胞色素P450家族成員2E1等，其中肝臟特異性較強(qiáng)的啟動(dòng)子是巨細(xì)胞病毒、延伸因子-1α和TBE［38］。將病毒遞送載體和肝臟特異性的哺乳動(dòng)物啟動(dòng)子相結(jié)合，可提升UGT1A1基因的表達(dá)水平。

1.6.2 基因編輯 除了由工程化的可編程的內(nèi)切酶（例如鋅指核酸酶、轉(zhuǎn)錄激活樣因子）介導(dǎo)的基因編輯技術(shù)外，來(lái)源于細(xì)菌的抗病毒防御系統(tǒng)即CRISPR/Cas9系統(tǒng)的出現(xiàn)，擴(kuò)展了基因編輯技術(shù)在哺乳生物中的應(yīng)用。

CRISPR/Cas9技術(shù)是利用單導(dǎo)向RNA作為向?qū)蛄?，將Cas9蛋白招募至目的區(qū)域，發(fā)揮分子剪刀功能，進(jìn)而對(duì)靶序列進(jìn)行切割，以達(dá)到基因編輯的目的。de Caneva等［39］利用雙AAV遞送CRISPR/Cas9和無(wú)啟動(dòng)子人UGT1A1的互補(bǔ)DNA序列到UGT1-/-小鼠中，可恢復(fù)UGT1A1基因編碼的酶功能。

1.6.3 mRNA-LNP基因治療 除了利用病毒載體進(jìn)行核酸遞送外，非病毒載體如聚陽(yáng)離子聚乙烯亞胺（polyethylenimine，PEI）、LNP及受體介導(dǎo)的核酸遞送也極具吸引力。肝臟選擇性地表達(dá)去唾液酸糖蛋白受體，將DNA連接到其配體上，肝臟特異性地吸收，但易被溶酶體降解，破壞DNA［40］。利用PEI遞送UGT1A1基因的嵌合寡核苷酸序列，可恢復(fù)Gunn大鼠體內(nèi)酶的表達(dá)［41］，但PEI包裝的核酸分子量為5～25 kDa，分子量越大，細(xì)胞毒性也越大［42］。此外，針對(duì)CNSⅠ型模型鼠Gunn大鼠，利用LNP遞送修飾后的UGT1A1 mRNA，可恢復(fù)UGT1A1酶活性，降低Gunn大鼠高膽紅素水平［43］，表明當(dāng)hUGT1A1-改良mRNA-LNP注射劑量為0.5 mg/kg，每4周給藥一次時(shí)，可有效降低Gunn大鼠的總膽紅素水平，為臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2 總結(jié)與展望

不同的CNS治療方法均可有效控制血清膽紅素水平在正常范圍內(nèi)，但也均存在一定的局限性。藍(lán)光治療能夠迅速降低CNS新生兒患者高膽紅素水平，但每日治療時(shí)長(zhǎng)為10～12 h，甚至全天，且效果隨著患兒的成長(zhǎng)而降低；血漿置換一般作為CNS Ⅰ 型患者膽紅素加重期的治療手段，雖然能夠短時(shí)間內(nèi)快速降低膽紅素水平，但需要大量新鮮血漿和多次置換，術(shù)后也存在有一定的副作用和安全問(wèn)題；苯巴比妥、磷酸鈣等藥物一般與光照治療聯(lián)合應(yīng)用，可有效降低膽紅素水平，但由于藥物療效存在一定的個(gè)體間差異，每種藥物的治療效果及安全性有待進(jìn)一步明確；肝移植是CNS的唯一根治方法，但并不能逆轉(zhuǎn)已發(fā)生的神經(jīng)系統(tǒng)損傷，臨床應(yīng)用也受多因素限制；HCT作為等待供肝期間的臨時(shí)替代治療方案，可暫時(shí)性恢復(fù)UGT1A1酶活性，降低膽紅素水平，但患者需多次接受肝細(xì)胞輸注，且該術(shù)式仍有諸多亟待解決的問(wèn)題；基于AAV8-hUGT1A1 互補(bǔ)DNA的基因治療目前已處于 Ⅰ/Ⅱ 期臨床試驗(yàn)階段（NCT03466463、NCT03223194）［44］；利用LNP進(jìn)行hGT1A1 mRNA遞送，雖然未見(jiàn)引發(fā)炎癥反應(yīng)，但在長(zhǎng)期治療過(guò)程中存在一定的局限性（需要多次給藥）［45］。

基因治療是遺傳性疾病最具潛力的治療方式，若基于AAV的基因治療順利通過(guò)臨床試驗(yàn)，CNS的治療可能發(fā)生決定性改變；CRISPR/Cas9的基因編輯技術(shù)雖未在小鼠實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到脫靶現(xiàn)象，但脫靶率也是該技術(shù)應(yīng)用到臨床上的局限所在，隨著更精準(zhǔn)切割的Cas蛋白的發(fā)現(xiàn)和更高效的CRISPR預(yù)測(cè)工具的開(kāi)發(fā)，CRISPR技術(shù)在CNS治療中的應(yīng)用前景令人期待。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：張文艷負(fù)責(zé)課題設(shè)計(jì)，撰寫(xiě)論文；鄧國(guó)宏負(fù)責(zé)擬定寫(xiě)作思路，指導(dǎo)撰寫(xiě)文章并最后定稿。

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收稿日期：

2022-08-14；錄用日期：2022-10-14

本文編輯：邢翔宇