檳榔蒂水提物對3種食用菌菌絲體品質(zhì)及抗氧化活性的影響

包怡紅 賴章飛 馬銀鵬 賈雨彤 潘飛兵 匡鳳嬌

(1.東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江省森林食品資源利用重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150040；3.海南華創(chuàng)檳榔研究院，海南 海口 570100；4.海南口味王科技發(fā)展有限公司，海南 萬寧 571501)

平菇、榆黃蘑、金針菇是消費者比較認可的食用菌，在中國栽培歷史悠久[1-2]，是公認的健康食品[3]。食用菌制種主要有固體培養(yǎng)和液體發(fā)酵兩種，其中液體發(fā)酵具有生長周期短、菌絲活力旺盛等優(yōu)點[4-5]，是獲得大量菌絲體和活性物質(zhì)的常用方法[6]。

目前，利用中藥殘渣或林業(yè)廢棄資源提取物進行液體發(fā)酵以改善食藥用真菌的品質(zhì)，成為該領(lǐng)域研究熱點[7]。研究發(fā)現(xiàn)在發(fā)酵體系中添加外源物質(zhì)如天麻提取物[8]、玉米油[9]等，能促進食藥用菌的菌絲生長和多糖等代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量。周麗思等[10]在培養(yǎng)基中添加不同濃度的忍冬莖水提物，研究其對茶藨子葉狀層菌發(fā)酵菌絲體生長和代謝產(chǎn)物的影響，結(jié)果表明忍冬莖水提物可顯著提高菌絲體中麥角甾醇、總多糖等成分的含量。潘琴等[11]研究了麻櫟木醋液(主要成分為有機酸類、醛類、酮類、酚類等)對8種食用菌菌絲體生長的影響，發(fā)現(xiàn)適宜濃度的麻櫟木醋液對食用菌菌絲體生長有明顯的促進作用，而濃度過高時則抑制其生長。

檳榔(ArecacatechuL.)是棕櫚科植物檳榔的成熟果實，主產(chǎn)于中國海南、臺灣、云南，在廣西、廣東、湖南及福建等省也有少量分布[12]。檳榔含有多種氨基酸、礦物質(zhì)、粗纖維、生物堿和酚類物質(zhì)，具有很高藥用和經(jīng)濟價值[13-14]。作為中國著名四大南藥(檳榔、益智、砂仁、巴戟)之首，檳榔具有抗炎、抗抑郁、抑菌等作用，同時由于酚類化合物的存在而具有較高的抗氧化性能[15-16]。檳榔蒂是檳榔果實加工后的副產(chǎn)物，現(xiàn)多數(shù)企業(yè)直接廢棄，不但造成資源浪費，更因腐爛霉變造成環(huán)境污染。研究通過在平菇、榆黃蘑、金針菇液體發(fā)酵培養(yǎng)基中添加不同濃度檳榔蒂水提物，探討發(fā)酵過程中這3種食用菌菌絲體品質(zhì)、抗氧化活性以及關(guān)鍵酶活性等指標的變化，旨在研究檳榔蒂水提物對3種食用菌菌絲體生長的影響，為進一步開發(fā)新的食用菌栽培基質(zhì)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料與試劑

平菇、榆黃蘑、金針菇菌種：黑龍江省科學(xué)院微生物研究所；

檳榔蒂：海南華創(chuàng)檳榔研究中心；

蘆丁、沒食子酸、齊墩果酸、3，5-二硝基水楊酸、硝酸鋁、硝酸鈉、氫氧化鈉、福林酚、碳酸鈉、苯酚、H2SO4、無水乙醇、葡萄糖、瓊脂粉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂：分析純，上海源葉生物科技公司；

試驗用水：蒸餾水，市售；

馬鈴薯：市售。

1.1.2 主要儀器設(shè)備

電子分析天平：YP2002型，上海佑科儀器儀表有限公司；

酶標儀：RT-6000型，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；

電熱恒溫水浴鍋：DK-98-ⅡA型，天津市泰斯特儀器有限公司；

振蕩培養(yǎng)箱：HZQ-X100型，哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠；

立式壓力蒸汽滅菌器鍋：DY04-13-44-00型，上海東亞壓力容器制造有限公司；

離心機：TD5A型，湖南凱達科學(xué)儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 檳榔蒂水提物制備

(1)檳榔蒂原料預(yù)處理：將檳榔蒂中雜質(zhì)挑除，曬干后粉碎過60目篩，干燥器中存放備用。

(2)水提物制備：準確稱取檳榔蒂粉末20 g，按料液比1∶20(g/mL)加水浸泡1 h后，在超聲功率300 W、溫度100 ℃條件下提取30 min，10 000 r/min離心10 min取上清液，提取2次合并上清液，將上清液濃縮至100 mL以下，真空冷凍干燥(壓力20 Pa，冷阱溫度-40 ℃，時間24 h)得到檳榔蒂水提物干粉，備用。

1.2.2 檳榔蒂水提物主要成分測定

(1)溶液配制：取2.5 g檳榔蒂水提物干粉，用蒸餾水溶解定容至25 mL，得質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的水提物待測樣液。

(2)多糖含量測定：采用苯酚—硫酸法[17]。

(3)多酚含量測定：采用Folin-酚法[18]。

(4)黃酮含量測定：采用NaNO2-Al(NO3)3比色法[19]。

(5)檳榔堿含量測定：參照劉文杰[20]的方法。

1.2.3 培養(yǎng)基制作

(1)PDA培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g，切成小塊放入燒杯中，加水1 000 mL煮沸30 min，用4層紗布過濾，濾液補充水分到1 000 mL，加入20 g葡萄糖、20 g瓊脂、1 g KH2PO4、0.5 g MgSO4·7H2O，加熱溶解，分裝于試管，121 ℃滅菌30 min。

(2)液體培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g，切成小塊放入燒杯中，加水1 000 mL煮沸30 min，用4層紗布過濾，濾液補充水分到1 000 mL，加入20 g葡萄糖、1 g KH2PO4、0.5 g MgSO4·7H2O，加熱溶解，分裝于250 mL三角瓶中，裝液量100 mL，121 ℃滅菌30 min。

1.2.4 菌種制備

(1)斜面菌種活化：用接種鏟取菌塊(d=4 mm)接入PDA培養(yǎng)基中27 ℃恒溫培養(yǎng)7 d，備用。

(2)液體菌種制備：已活化的斜面菌絲體，接種到裝有100 mL液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，27 ℃恒溫振蕩培養(yǎng)7 d得液體菌種。

1.2.5 菌絲體長速測定 參照盧朝亮等[21]的方法，檳榔蒂水提物添加量分別為1.6，3.2，4.8，6.4，8.0 mg/mL，制作PDA試管斜面培養(yǎng)基，以未添加檳榔蒂水提物的培養(yǎng)基為對照，取菌塊(d=4 mm)接入培養(yǎng)基中，于培養(yǎng)箱中27 ℃恒溫培養(yǎng)。待菌種萌發(fā)，每日在菌絲前端對應(yīng)位置的試管壁上劃線，測其長速，求10 d長速平均值。

1.2.6 發(fā)酵培養(yǎng) 取250 mL三角瓶，配制液體培養(yǎng)基，檳榔蒂水提添加量分別為1.6，3.2，4.8，6.4，8.0 mg/mL，以不加檳榔蒂水提物為空白對照，按接種量5%將液體菌種接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度27 ℃，轉(zhuǎn)速150 r/min的恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d。

1.2.7 菌絲體生物量測定 采用干重法測定。發(fā)酵液以4 000 r/min離心5 min得菌絲球，用無菌水反復(fù)漂洗，于60 ℃烘干至恒重后用分析天平稱菌絲體干質(zhì)量，菌絲體粉碎過60目篩，備用。

1.2.8 菌絲體提取物制備及相關(guān)指標測定

(1)水提液：稱取菌絲體粉末0.4 g，按料液比1∶35(g/mL)加入蒸餾水，超聲功率300 W、70 ℃下提取2 h，5 000 r/min離心10 min，收集上清液定容至20 mL得菌絲體水提液，4 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

(2)醇提液：稱取菌絲體粉末0.4 g，按料液比1∶35(g/mL)加入70%的乙醇溶液，超聲功率300 W、70 ℃下提取2 h，5 000 r/min離心10 min，收集上清液定容至20 mL得菌絲體醇提液，4 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

(3)胞內(nèi)多糖測定：精確稱取菌絲體粉末1 g，與蒸餾水以料液比1∶10(g/mL)混合，90 ℃下熱水浸提2 h，4 000 r/min離心15 min取上清液，加入3倍體積99.7%的乙醇，4 ℃沉淀24 h，4 000 r/min離心15 min，沉淀用95%乙醇洗滌，然后用蒸餾水復(fù)溶，定容至50 mL備用。胞內(nèi)多糖測定方法同1.2.2(2)。

(4)菌絲體多酚和黃酮含量測定：分別取1 mL菌絲體乙醇提取液，測定多酚和黃酮含量，測定方法同1.2.2(3)和1.2.2(4)。

(5)三萜含量測定：采用香草醛—冰醋酸法[22]。

1.2.9 抗氧化活性測定

(1)DPPH自由基清除率：參照范俐等[23]的方法略做修改，用無水乙醇配制0.2 mmol/L的DPPH溶液，于試管中依次加入1 mL DPPH溶液、2 mL蒸餾水以及1 mL 菌絲體水提液和醇提液，混勻，于25 ℃水浴鍋中避光反應(yīng)20 min，517 nm下測定吸光值。按式(1)計算DPPH自由基清除率。

Q1=[1-(A1-A2)/A0]×100%，

(1)

式中：

Q1——DPPH自由基清除率，%；

A1——樣品吸光值；

A2——未添加DPPH溶液的樣品吸光值；

A0——空白吸光值。

(2)還原力：采用鐵氰化鉀顯色法[24]。10 mL離心管中分別加入菌絲體水提物和醇提物0.5 mL，加入2.5 mL 磷酸鹽緩沖液(0.2 mol/L，pH 6.6)和1%的鐵氰化鉀溶液1 mL，混勻，于50 ℃水浴鍋反應(yīng)30 min，反應(yīng)完快速冷卻，加入10%的三氯乙酸2.5 mL，混勻，3 000 r/min離心10 min，取2.5 mL上清液，加入2.5 mL蒸餾水和0.1%的三氯化鐵溶液0.5 mL，混勻靜置10 min，于700 nm下測定吸光值。按式(2)計算菌絲體的還原力。

H=A1-A2，

(2)

式中：

H——還原力；

A1——樣品吸光值；

A2——空白吸光值。

(3)ABTS自由基清除率：取5 mL 7 mmol/L的ABTS溶液，加入到100 μL過硫酸鉀溶液中，混勻，于25 ℃ 下避光反應(yīng)12 h，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液稀釋ABTS自由基溶液使其在734 nm下的吸光值為0.7，取1 mL菌絲體水提液和醇提液，加入2 mL ABTS溶液混勻，于25 ℃水浴鍋中避光反應(yīng)20 min，734 nm下測定吸光值。按式(3)計算ABTS自由基清除率。

Q2=[1-(A1-A2)/A0]×100%，

(3)

式中：

Q2——ABTS自由基清除率，%；

A1——樣品吸光值；

A2——未添加ABTS溶液的樣品吸光值；

A0——空白吸光值。

1.2.10 胞外酶活性測定

(1)粗酶液制備：液體發(fā)酵培養(yǎng)接種后每隔24 h吸取發(fā)酵液5 mL，4 000 r/min離心5 min，取上清液即為粗酶液，連續(xù)測定7 d。

(2)淀粉酶活性測定：參照徐秀紅等[25]的方法，根據(jù)葡萄糖標準曲線計算還原糖含量，以在沸水浴中滅活的酶液為對照。酶活力定義：1 mL發(fā)酵液中酶量與底物作用30 min釋放出1 mg葡萄糖為一個活力單位。

(3)纖維素酶活性測定：用pH 4.6、0.1 mol/L的醋酸鹽緩沖液配制0.5%的CMC-Na溶液，取25 mL試管，加入1.5 mL CMC-Na溶液和0.5 mL粗酶液，混勻后，于45 ℃恒溫水浴中反應(yīng)30 min，其后操作同淀粉酶活性測定，于520 nm處測定吸光值，根據(jù)葡萄糖標準曲線計算還原糖含量，以在沸水浴中滅活的酶液為對照。酶活力定義：1 mL發(fā)酵液中酶量與底物作用30 min釋放出1 mg 葡萄糖為一個活力單位。

(4)木聚糖酶活性測定：用pH 4.6、0.1 mol/L的醋酸鹽緩沖液配制0.5%的木聚糖溶液，取25 mL試管，加入1.5 mL木聚糖溶液和0.5 mL粗酶液，混勻后，于50 ℃ 恒溫水浴中反應(yīng)30 min，其后操作同淀粉酶活性測定，于520 nm處測定吸光值，根據(jù)木糖標準曲線計算還原糖含量，以在沸水浴中滅活的酶液為對照。酶活力定義：1 mL發(fā)酵液中酶量與底物作用30 min釋放出1 mg木糖為一個活力單位。

(5)漆酶活性測定：參照Li等[26]的方法略做修改，配制0.5 mmol/L的ABTS溶液，酶活反應(yīng)體系包含ABTS溶液0.5 mL、0.1 mol/L的醋酸鹽緩沖液(pH 4.6)1 mL，加入酶液0.5 mL啟動反應(yīng)，在反應(yīng)的前5 min內(nèi)每隔30 s記錄一次OD420 nm值變化，以在沸水浴中滅活的酶液為對照。酶活力定義：1 mL發(fā)酵液中酶量與底物(ABTS)作用每分鐘使OD420 nm值改變0.01為一個活力單位。

1.2.11 數(shù)據(jù)處理 每組試驗重復(fù)3次，采用Excel對原始數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，數(shù)據(jù)分析和作圖分別采用IBM SPSS Statistics 22.0和Origin 2021。

2 結(jié)果與分析

2.1 檳榔蒂水提物主要成分

檳榔蒂經(jīng)粉碎提取后得到水提物，主要成分含量測定結(jié)果見表1。水提物中豐富的活性成分可促進真菌菌絲體分泌胞外酶，還可能通過增加真菌細胞壁的通透性，從而有利于營養(yǎng)物質(zhì)的攝取和活性物質(zhì)的生物合成積累[27]。

表1 檳榔蒂水提物主要成分

2.2 檳榔蒂水提物對菌絲長速的影響

由表2可知，隨著檳榔蒂水提物添加量的增加，3種菌種的菌絲長速先呈上升趨勢，與對照組相比較，平菇、榆黃蘑的菌絲長速有顯著提高，金針菇菌絲長速差異不顯著，檳榔蒂水提物添加量為6.4，4.8，3.2 mg/mL時，平菇、榆黃蘑、金針菇的菌絲長速分別達到最高，之后呈下降趨勢，但均高于對照組。這表明3種菌種均可在添加檳榔蒂水提物的培養(yǎng)基中生長，且根據(jù)試驗觀察，檳榔蒂水提物可有效縮短3種菌種的菌絲萌發(fā)時間。

表2 檳榔蒂水提物添加量對菌絲長速的影響?

2.3 檳榔蒂水提物對菌絲體生物量的影響

由表3可知，與對照組相比，檳榔蒂水提物對3種菌種生物量的影響均表現(xiàn)為先上升趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲生物量達到最高值，與對照組相比提高了46.25%，添加量為4.8 mg/mL時，榆黃蘑、金針菇生物量達到最高值，與對照組相比分別提高了14.77%，26.83%，之后生物量開始下降，但仍高于對照組，原因可能是添加少量的檳榔蒂水提物時，其中的糖類、酚類等活性物質(zhì)對菌絲生長有一定促進作用，而過高的添加量會造成液體培養(yǎng)基黏度增加和溶氧量降低，不利于菌絲體生長[28]。此外，還考慮到檳榔蒂水提物中殘留的微小顆粒會富集在菌絲表面，對菌絲生長也有一定抑制作用。

表3 檳榔蒂水提物添加量對菌絲體生物量的影響?

2.4 檳榔蒂水提物對菌絲體多糖、三萜含量的影響

由圖1可知，隨著培養(yǎng)基中檳榔蒂水提物添加量逐漸增高，菌絲體多糖和三萜含量呈先升后降趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲體多糖達到最高值，與對照組相比提高了27.40%，添加量為4.8 mg/mL時，榆黃蘑、金針菇胞內(nèi)多糖與對照組相比分別提高了22.20%，8.71%；菌絲體三萜含量均在檳榔蒂水提物添加量為4.8 mg/mL時最高，與對照組分別提高了95.24%，70.91%，75.00%；說明檳榔蒂水提物的添加對3種食用菌菌絲體多糖和三萜的合成有促進作用，并且與生物量的變化趨勢一致；這是由于菌絲體在快速生長時期，細胞代謝旺盛，相關(guān)酶系活躍，生物量增加的同時，活性物質(zhì)的合成速率加快，含量也隨之增加，與趙小瑞等[29]以當歸、黨參、甘草、黃芪提取物作為激發(fā)因子，研究靈芝液態(tài)發(fā)酵過程中菌絲生長和產(chǎn)三萜的研究結(jié)果相似。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.5 檳榔蒂水提物對菌絲體多酚、黃酮含量的影響

由圖2可知，隨著培養(yǎng)基中檳榔蒂水提物添加量的逐漸增高，多酚和黃酮含量呈先升后降趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲體多酚和黃酮達到最高值，與對照組相比分別提高了72.99%，34.48%，添加量為4.8 mg/mL時，榆黃蘑、金針菇菌絲體多酚與對照組相比提高了33.74%，46.37%，黃酮與對照組相比分別提高了53.30%，37.04%。檳榔蒂水提物中含有豐富的水溶性酚類物質(zhì)，添加不同量的檳榔蒂水提物作為菌絲生長外源代謝前體，有利于菌絲體對酚類物質(zhì)的代謝和轉(zhuǎn)化，與吳俐等[30]考察的油茶枝浸提液對茶薪菇菌絲酚類代謝影響的結(jié)果相似。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.6 抗氧化活性評價

2.6.1 DPPH自由基清除能力 由圖3可知，平菇、榆黃蘑、金針菇菌絲體的水提物和醇提物對DPPH自由基均有一定的清除作用，隨著培養(yǎng)基中檳榔蒂水提物添加量的逐漸增高，菌絲體水提物和醇提物對DPPH自由基的清除能力呈先升后降趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲體水提物和醇提物DPPH自由基清除率分別為55.76% 和65.33%，與對照組相比提高了24.77%和17.27%，檳榔蒂水提物添加量為4.8 mg/mL時，榆黃蘑、金針菇菌絲體清除DPPH能力達到最大；不同提取物對DPPH自由基的清除率大小差異顯著，依次為榆黃蘑醇提物>金針菇醇提物>平菇醇提物>榆黃蘑水提物>金針菇水提物>平菇水提物。

Pw.平菇菌絲體水提物 Yw.榆黃蘑菌絲體水提物 Jw.金針菇菌絲體水提物 Pe.平菇菌絲體醇提物 Ye.榆黃蘑菌絲體醇提物 Je.金針菇菌絲體醇提物

2.6.2 還原力 由圖4可知，平菇、榆黃蘑、金針菇菌絲體的水提物和醇提物對Fe3+具有不同程度的還原能力，隨著培養(yǎng)基中檳榔蒂水提物添加量的逐漸增高，菌絲體水提物和醇提物對Fe3+的還原能力呈先升后降趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲體水提物和醇提物對Fe3+的還原能力達到最大，添加量為4.8 mg/mL時，榆黃蘑、金針菇菌絲體對Fe3+的還原能力達到最大；各提取物對Fe3+的還原能力大小依次為榆黃蘑醇提物>金針菇醇提物>平菇醇提物>榆黃蘑水提物>金針菇水提物>平菇水提物。

Pw.平菇菌絲體水提物 Yw.榆黃蘑菌絲體水提物 Jw.金針菇菌絲體水提物 Pe.平菇菌絲體醇提物 Ye.榆黃蘑菌絲體醇提物 Je.金針菇菌絲體醇提物

2.6.3 ABTS自由基清除能力 由圖5可知，平菇、榆黃蘑、金針菇菌絲體的水提物和醇提物對ABTS自由基均有一定的清除作用，隨著培養(yǎng)基中檳榔蒂水提物添加量的逐漸增高，菌絲體水提物和醇提物對ABTS自由基的清除能力呈先升后降趨勢，檳榔蒂水提物添加量為6.4 mg/mL時，平菇菌絲體水提物和醇提物ABTS自由基清除率達到最大，與對照組相比提高了51.34%和39.74%，添加量為4.8 mg/mL 時，榆黃蘑、金針菇菌絲體清除ABTS自由基能力達到最大；不同提取物對ABTS自由基的清除率大小差異顯著，依次為榆黃蘑醇提物>榆黃蘑水提物>金針菇醇提物>平菇醇提物>平菇水提物>金針菇水提物。

Pw.平菇菌絲體水提物 Yw.榆黃蘑菌絲體水提物 Jw.金針菇菌絲體水提物 Pe.平菇菌絲體醇提物 Ye.榆黃蘑菌絲體醇提物 Je.金針菇菌絲體醇提物

2.7 檳榔蒂水提物對酶活性的影響

隨著液體發(fā)酵進程的推進，菌絲分泌胞外酶，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)不斷被菌絲營養(yǎng)代謝轉(zhuǎn)化利用，促進菌絲生長。根據(jù)3種菌種菌絲生物量、活性成分含量以及抗氧化活性的結(jié)果，平菇選擇添加6.4 mg/mL的檳榔蒂水提物、榆黃蘑和金針菇選擇添加4.8 mg/mL的檳榔蒂水提物，分別測定3種菌種液態(tài)發(fā)酵過程中淀粉酶、纖維素酶、木聚糖酶和漆酶的活性變化。

2.7.1 淀粉酶活性變化 由圖6可知，3種菌種的淀粉酶活性變化規(guī)律基本一致，初始1～3 d時，淀粉酶活性升高，菌種顆粒周圍開始長出白色菌絲，在培養(yǎng)第3天酶活性達到最高，隨著培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)慢慢被利用，酶活性開始下降，培養(yǎng)4～5 d時，菌絲長至一定時期斷落至菌液中形成新的萌發(fā)點，此時酶活又有所上升，達到另一個高點，隨著營養(yǎng)物質(zhì)徹底被吸收利用，酶活性開始下降。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.7.2 纖維素酶活性變化 由圖7可知，培養(yǎng)1～3 d時，3種菌種纖維素酶活性呈上升趨勢，第3天達到最高，之后酶活性開始下降，培養(yǎng)至第6天達到另一個高點，變化規(guī)律與淀粉酶基本一致；3種菌種相比，酶活性差異不顯著，金針菇的纖維素酶活性從第3天后一直呈下降趨勢，未出現(xiàn)第二個高點，可能與不同菌種自身特性有關(guān)。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.7.3 木聚糖酶活性變化 由圖8可知，培養(yǎng)1～3 d時，3種菌種木聚糖酶活性呈上升趨勢，第3天達到最高，之后酶活性開始下降，培養(yǎng)至第6天達到另一個高點，變化規(guī)律與淀粉酶基本一致。3種菌種相比，酶活性差異不顯著，金針菇的纖維素酶活性從第3天后一直呈下降趨勢，未出現(xiàn)第二個高點。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.7.4 漆酶活性變化 由圖9可知，3種菌種漆酶初始活性偏低，隨著培養(yǎng)時間的增加，漆酶活性開始上升，第3天達到最大活性，之后漆酶活性開始下降，平菇和榆黃蘑在培養(yǎng)第6天漆酶活性再次上升，之后隨著培養(yǎng)的進行，開始呈下降趨勢，檳榔蒂水提物的添加只改變了3種菌種的酶活性大小，對酶活性變化趨勢影響不大。

小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)

3 結(jié)論

在一定濃度范圍內(nèi)，檳榔蒂水提物能促進平菇、榆黃蘑、金針菇菌絲體生長，添加過量的檳榔蒂水提物對菌絲體生長有抑制作用。在最適添加濃度下，3種菌絲體的多糖、三萜、多酚、黃酮含量與對照組相比有顯著提高(P<0.05)。隨著檳榔蒂水提物添加量的增加，3種菌絲體的水提物和醇提物抗氧化活性均有顯著提高(P<0.05)，其活性大小依次為榆黃蘑>金針菇>平菇；檳榔蒂水提物能在一定程度上提高3種食用菌生長代謝相關(guān)酶的活性，但對酶活性變化趨勢的影響不顯著。

檳榔蒂水提物添加到食用菌液體培養(yǎng)體系中，可以提高菌絲體的生物量、活性成分含量以及抗氧化能力，但檳榔蒂水提物促進菌絲體生長的具體成分尚不明確，還需進一步研究。