羊布魯氏桿菌病的診斷和防治

吳登勇

（ 四川省巴中市南江縣正直鎮(zhèn)人民政府，四川 巴中 636634 ）

布魯氏桿菌病簡(jiǎn)稱布病，是由布魯氏桿菌引起的一種慢性的人畜共患傳染病。布病主要感染牛、羊和豬等動(dòng)物，羊種布魯氏桿菌是導(dǎo)致人類感染布病的主要病原[1]。布魯氏桿菌一般通過口咽、上呼吸道、眼結(jié)膜等途徑傳播，雌性動(dòng)物生殖道和乳房也是潛在的感染部位[2]。動(dòng)物對(duì)布病的易感性隨著性成熟度而逐漸提升，母畜的感染概率高于公畜。人類患布病的主要原因是經(jīng)常接觸家畜，可能因接觸病畜的流產(chǎn)物、分泌物、排泄物（糞、尿）等以及被污染的水、土壤、食物、空氣、塵埃，進(jìn)而經(jīng)黏膜、消化道、呼吸道等感染[3]，如獸醫(yī)、畜產(chǎn)品加工屠宰等工作人員患病的可能性明顯高于其他人群[1]。國(guó)外有關(guān)布病的研究起步時(shí)間較早，目前已有14個(gè)國(guó)家和地區(qū)宣布根除了布病，還有一些國(guó)家甚至從未發(fā)現(xiàn)人或牲畜感染布病[4]。20世紀(jì)90年代后，布病的年發(fā)病率明顯升高，其中羊布病疫情主要集中于東歐、地中海、東南亞、非洲等地區(qū)，并呈散發(fā)狀態(tài)[5]。我國(guó)布病主要呈地方性流行，近年來專門成立了疾病防治機(jī)構(gòu)，并通過凈化措施降低了布病的發(fā)病率。但由于活畜流通數(shù)量不斷增加，個(gè)別地區(qū)發(fā)病率呈回升趨勢(shì)，嚴(yán)重危害我國(guó)的畜牧業(yè)的正常生產(chǎn)和發(fā)展[6]。本文以危害性最強(qiáng)的羊布病為研究對(duì)象，簡(jiǎn)述羊布病的臨床表現(xiàn)、感染過程、診斷方法的研究進(jìn)展，提出了相關(guān)防治措施，以期為該病的臨床防治提供參考。

1 羊布病的臨床表現(xiàn)及感染過程

1.1 臨床表現(xiàn)

布病潛伏期存在明顯差異，一般為5周之內(nèi)，也有部分特殊情況潛伏期可達(dá)數(shù)月至一年左右[7]。羊布魯氏桿菌易侵襲子宮而導(dǎo)致流產(chǎn)，流產(chǎn)通常發(fā)生在妊娠后3~4 個(gè)月，病原通常在乳房和脾臟等器官定植，引發(fā)隱性乳房炎而不易被發(fā)覺[1]。大部分流產(chǎn)患羊可在數(shù)月后正常受孕，但整個(gè)羊群中會(huì)出現(xiàn)母畜子宮內(nèi)膜炎、不孕等現(xiàn)象[8]。羊流產(chǎn)后，布魯氏桿菌通常在乳腺和生殖道淋巴結(jié)發(fā)生持續(xù)性感染，通過乳汁和生殖道分泌物排出病菌。與牛布病相比，山羊感染布病的主要臨床癥狀是乳房炎，感染的乳腺出現(xiàn)多結(jié)節(jié)性硬化，乳汁呈水樣，凝結(jié)成塊[1]。山羊的急性感染多數(shù)是在妊娠階段因乳房感染導(dǎo)致，并在泌乳階段通過乳汁排菌，且大多數(shù)會(huì)持續(xù)至下一妊娠階段。綿羊流產(chǎn)后也常通過乳汁排菌，一般不超過2個(gè)月，也有持續(xù)排菌140~180 d的現(xiàn)象。患病公羊主要癥狀為附睪炎或睪丸炎等[9]。

1.2 感染過程

布魯氏桿菌侵入機(jī)體后，在短時(shí)間內(nèi)侵入附近的淋巴結(jié)，并且被吞噬細(xì)胞所吞噬。由于吞噬細(xì)胞并不能完全殺死布魯氏桿菌，導(dǎo)致布魯氏桿菌在細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生原發(fā)病灶。潛伏期過后，布魯氏桿菌在吞噬細(xì)胞內(nèi)快速繁殖，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞破裂，布魯氏桿菌進(jìn)入血液后導(dǎo)致菌血癥，此時(shí)患病牲畜體溫明顯升高。一部分布魯氏菌進(jìn)入絨毛膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖后，會(huì)在子宮膜和絨毛膜區(qū)域內(nèi)產(chǎn)生擴(kuò)散現(xiàn)象，導(dǎo)致母畜子宮內(nèi)膜炎[10]。未被完全消滅的布魯氏桿菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物和內(nèi)毒素反復(fù)進(jìn)入血液對(duì)機(jī)體的刺激非常明顯，原有的淋巴細(xì)胞受到抗原約束，釋放各種趨化因子和巨噬細(xì)胞活性因子，形成肉芽腫等變態(tài)反應(yīng)性炎癥，或纖維組織增生等其他慢性病變[11]。機(jī)體的內(nèi)臟器官以及神經(jīng)、生殖系統(tǒng)等均會(huì)產(chǎn)生損傷，并且各類增生性改變或炎性滲出情況會(huì)隨著疾病程度產(chǎn)生階段性變化[12]。

2 羊布病的診斷

羊布病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法與牛布病一致，以平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等血清學(xué)方法為主。但上述方法存在特異性不高、操作煩瑣等問題，且多數(shù)不具備鑒別診斷能力，一些方法用于羊病診斷時(shí)效果往往更差。病原分離鑒定是確定動(dòng)物感染狀態(tài)的金標(biāo)準(zhǔn)，但也有學(xué)者認(rèn)為其敏感性較低，更適用于疑似病例的最終鑒別[13]?？傮w而言，布病檢測(cè)過程技術(shù)要求復(fù)雜且分離培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，因此PCR檢測(cè)技術(shù)和免疫酶組化技術(shù)將成為今后一段時(shí)間內(nèi)布病的主要診斷方法[14]。張濤[15]構(gòu)建了原核表達(dá)載體在大腸桿菌中表達(dá)純化，獲得重組表達(dá)的Omp25和Omp31蛋白；并建立了以O(shè)mp25和Omp31蛋白為包被抗原的間接ELISA方法。結(jié)果顯示，該方法與虎紅試管凝集試驗(yàn)（RBPT）結(jié)果符合率為100%，具有良好的穩(wěn)定性及靈敏性。楊旭欣等[16]對(duì)比膠體金免疫層析技術(shù)（GICA）和試管凝集試驗(yàn)（SAT）對(duì)布魯氏菌病血清的檢測(cè)效果，結(jié)果顯示GIGA與SAT的檢測(cè)結(jié)果高度一致。王奔奔等[17]制備布魯菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)蛋白VirB5的高親和性單克隆抗體，能夠快速與病原菌表面蛋白特異性結(jié)合。卜昭陽(yáng)等[18]采用PCR擴(kuò)增羊布氏桿菌16M株vjbR基因，結(jié)果顯示，純化的重組蛋白能夠被羊布氏桿菌陽(yáng)性血清識(shí)別，結(jié)果為羊布病診斷試劑盒的研制及亞單位疫苗的研發(fā)提供了參考。

3 羊布病的防治措施

3.1 免疫預(yù)防

目前，免疫接種是我國(guó)防治布病的有效方法，常用疫苗包括布魯氏桿菌S2疫苗、羊布魯氏菌病活疫苗（M5株）等。馮學(xué)明[19]對(duì)布魯氏菌活疫苗M5株的免疫效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，該疫苗采用注射免疫的效果最好，灌服免疫效果較差，該疫苗具有免疫效果好、保護(hù)率高、免疫持續(xù)期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。張雷等[20]采用陰道途徑對(duì)羊進(jìn)行布病S2疫苗免疫，并與肌肉注射免疫的抗體產(chǎn)生情況進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示，肌肉注射免疫產(chǎn)生抗體的群體抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率、群體抗體效價(jià)以及抗體產(chǎn)生和持續(xù)時(shí)間均優(yōu)于陰道免疫。余銀隆等[21]開展羊菌病活疫苗（S2株）灌服免疫的接種試驗(yàn)，并與羊布病活疫苗（M5株）的免疫結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示，S2株的免疫效果比M5株差，但副反應(yīng)也較輕。

3.2 飼養(yǎng)管理及疫病相關(guān)防控措施

布病與原有疫點(diǎn)之間的關(guān)聯(lián)非常明顯，若原有區(qū)域的飼養(yǎng)條件較差且防控措施松動(dòng)，將導(dǎo)致自由交配的配種方式居多，疫情根源無(wú)法在短時(shí)間內(nèi)徹底清除。因此需要根據(jù)疫情根源和原有疫點(diǎn)要求采取地域防控[22]。布病感染與養(yǎng)殖方式之間同樣存在關(guān)聯(lián)性，散養(yǎng)畜牧的陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)，應(yīng)正確認(rèn)識(shí)布病傳播與牲畜流動(dòng)之間的關(guān)聯(lián)，不盲目擴(kuò)大養(yǎng)殖規(guī)模，不盲目外購(gòu)牲畜引種[23]。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)原則，所有羊在隔離條件下完成檢疫。

日常飼養(yǎng)階段應(yīng)完善內(nèi)部飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生，合理規(guī)劃飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，確保飼料能夠促進(jìn)羊群正常發(fā)育，提升機(jī)體抵抗力，減少患病可能性。定期開展預(yù)防性消毒，對(duì)飼養(yǎng)周邊的場(chǎng)地墻壁等使用過氧乙酸或氫氧化鈉漂白粉進(jìn)行消毒[24]。母羊分娩后要將所有的污染物、胎衣、草等進(jìn)行無(wú)公害化處理。出生5月齡以上的羔羊應(yīng)進(jìn)行免疫檢測(cè)，檢測(cè)出陽(yáng)性的種群進(jìn)行全檢，淘汰所有陽(yáng)性畜類。

對(duì)經(jīng)檢測(cè)呈布病陽(yáng)性結(jié)果的牲畜進(jìn)行全方位撲殺，所有排泄物、胎盤等按照無(wú)害化處理流程等進(jìn)行無(wú)害化處理。由于布病本身沒有明顯的治療價(jià)值，發(fā)病后一般不采取治療，而是從檢測(cè)、免疫、消毒等重要防治措施入手，使布病在一定范圍內(nèi)得到徹底控制，不出現(xiàn)新發(fā)疾病的羊乃至新發(fā)人群，控制疾病易感源[25]。

3.3 防控責(zé)任制建設(shè)

在動(dòng)物防疫機(jī)制和布病防控工作方面，需要加強(qiáng)獸醫(yī)隊(duì)伍建設(shè)，配套已有的防疫設(shè)備與防護(hù)設(shè)備，每年組織畜牧獸醫(yī)人員展開專項(xiàng)培訓(xùn)，提升布病的防控技術(shù)水平，盡可能掌握疫情動(dòng)態(tài)以及相關(guān)防控措施等[26]。應(yīng)加大對(duì)養(yǎng)殖群體的疾病防控宣傳力度，通過發(fā)放宣傳手冊(cè)等使養(yǎng)殖戶了解布病的傳播途徑、傳播危害等相關(guān)知識(shí)，自覺配合防疫部門開展疾病防治，不私自進(jìn)行引種[27]。我國(guó)已將布病列為二類人畜共患疾病，對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康產(chǎn)生的危害極為明顯，所以需要根據(jù)《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》等一系列法律法規(guī)要求，在政府部門作為第一領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任人的前提下，規(guī)范區(qū)域內(nèi)的動(dòng)物防疫措施，將布病防控工作責(zé)任落實(shí)到位并明確責(zé)任追究制度和監(jiān)測(cè)力度[28]。此外，衛(wèi)生防疫部門和畜牧養(yǎng)殖部門進(jìn)行有效配合，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)安排衛(wèi)生防疫人員進(jìn)行專項(xiàng)檢測(cè)，及時(shí)通報(bào)的可疑監(jiān)測(cè)結(jié)果，形成人與畜聯(lián)防聯(lián)控格局。抽檢檢測(cè)無(wú)陽(yáng)性出現(xiàn)后，還應(yīng)提前對(duì)牛羊等動(dòng)物進(jìn)行免疫，保障動(dòng)物機(jī)體抵抗力。工作中還可采取人工授精或冷配技術(shù)，杜絕因自然交配而導(dǎo)致的疾病傳播問題[28-30]。

4 結(jié)論

羊布病對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的危害非常明顯，在后續(xù)的布病診斷和防控工作中，應(yīng)控制動(dòng)物產(chǎn)品流通，以降低疾病傳播概率；提升布病的防控技術(shù)，加大疾病危害和防治措施的宣傳，同時(shí)規(guī)范引種制度、報(bào)檢制度、監(jiān)測(cè)制度、檢測(cè)制度、免疫制度，形成多層次全方位的防控框架，為我國(guó)畜牧業(yè)健康發(fā)展和人畜安全提供有力的后勤保障。