MIF 通過調(diào)節(jié)急性幽門螺桿菌感染介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、自噬和凋亡促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期進(jìn)展①

李 娜 王培紅 李俊杰 湯旭山 （新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院消化內(nèi)科，烏魯木齊 830000）

胃癌是全球第四大常見惡性腫瘤，其導(dǎo)致的癌癥相關(guān)病死率全世界范圍內(nèi)位列第三［1］。其中幽門螺桿菌（helicobacter pylori， Hp）感染是胃癌發(fā)展中公認(rèn)的確定因素之一，影響全球約44 億人，是最為常見的感染之一［2-4］。Hp 主要感染胃黏膜上皮細(xì)胞，一旦感染將導(dǎo)致局部胃黏膜組織慢性炎癥反應(yīng)，并誘導(dǎo)慢性胃炎發(fā)生，可進(jìn)展為多步驟的胃癌級聯(lián)反應(yīng)［3］。研究證實，這種慢性炎癥環(huán)境與Hp 感染引起宿主細(xì)胞內(nèi)大量活性氧（reactive oxygen species，ROS）、線粒體損傷、氧化性DNA 損傷密切相關(guān)［5］。自噬是在饑餓、缺氧或其他特定的細(xì)胞應(yīng)激條件下，由一系列自噬相關(guān)基因嚴(yán)格調(diào)控的缺陷蛋白和細(xì)胞器降解和循環(huán)的一個重要細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)過程，而無論在正常細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞中，自噬不僅能維持細(xì)胞存活，也能促進(jìn)細(xì)胞死亡［6-7］。相關(guān)機制研究表明，細(xì)胞自噬具有選擇性，也同時具有非選擇性，其中非選擇性自噬常發(fā)生于饑餓或壓力下，涉及大量細(xì)胞成分破壞，而選擇性自噬，尤其是通過磷酸酶和緊張素同源誘導(dǎo)的假定激酶1（phosphatase and tensin homolog-induced putative kinase 1，PINK1）介導(dǎo)的線粒體自噬清除受損的線粒體對Hp誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷至關(guān)重要［7-9］。同時，Hp 感染也能通過調(diào)控細(xì)胞線粒體自噬以利于自身感染的持續(xù)［9］。巨噬細(xì)胞遷移抑制因子（macrophage migration inhibitory factor， MIF）是一種多功能的促炎因子，既往研究表明其不僅能夠在炎癥反應(yīng)和免疫疾病中起關(guān)鍵作用，還能聯(lián)系炎癥與腫瘤發(fā)生，在多種腫瘤中發(fā)揮促癌作用［10-11］。而在Hp 感染中，有研究發(fā)現(xiàn)Hp能夠直接刺激機體產(chǎn)生大量MIF，且后者在胃黏膜細(xì)胞的異常增殖中具有重要地位，并推測Hp 感染可能部分通過MIF 介導(dǎo)的途徑參與胃癌發(fā)生［12］。近年來國內(nèi)外均有報道，MIF 在胃癌組織中的表達(dá)較正常胃黏膜組織異常增加，進(jìn)一步證實MIF 參與調(diào)控胃癌發(fā)生與進(jìn)展［13-14］。同時，YOON等［15］團隊最新研究顯示，Hp感染誘導(dǎo)的胃黏膜細(xì)胞異常增生與胃癌不同表征可能部分歸因于MIF和自噬。MIF 在Hp 感染誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞自噬中的作用及相關(guān)機制尚不清楚，故本研究通過體外培養(yǎng)Hp感染的胃癌細(xì)胞進(jìn)行探究，以期進(jìn)一步闡明Hp 在胃癌發(fā)生中的相關(guān)機制。

1 材料與方法

1.1 材料 Hp 的J99 標(biāo)準(zhǔn)菌株（北京流行病控制研究所）；胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS 細(xì)胞（武漢普諾賽生命科技有限公司）；RPMI1640、胰蛋白酶（美國Hyclone公司）；胎牛血清FBS（美國Gibco 公司）；兔抗LC3B、p62 多克隆抗體（美國Santa Cruz）；大鼠抗MIF、Parkin、PINK1 單克隆抗體（美國Abcam 公司）；MTT 試劑（美國Sigma 公司）；DCFH-DA 法ROS 檢測試劑盒、Annexin V-FITC/PI 試劑盒、BCA 蛋白定量試劑盒、HRP 標(biāo)記的山羊抗兔或兔抗大鼠二抗（江蘇碧云天生物科技有限公司）；RIPA、蛋白酶抑制劑（武漢博士德生物技術(shù)有限公司）；線粒體mitotracker deep red633 染色試劑（美國Cell Signaling Technology）；TRizol 試劑、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、LipofectamineTMRNAiMAX 試劑盒（美國Thermo 公司）；SYBR Green Master 試劑盒（康為世紀(jì)生物科技股份）；JC-1 法線粒體膜電位檢測試劑盒、FACSCalibur 流式細(xì)胞儀（美國BD 公司）；FITC 標(biāo)記的山羊抗兔二抗（美國Biolegend公司）。

1.2 方法

1.2.1 胃癌細(xì)胞的培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染 使用含10%FBS、1%雙抗的RPMI1640 培養(yǎng)基培養(yǎng)AGS 細(xì)胞，并置于37 ℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱。取對數(shù)生長期AGS 細(xì)胞，胰酶常規(guī)消化后，調(diào)整細(xì)胞密度至2×105個/孔，接種至6 孔板中培養(yǎng)24 h，將培養(yǎng)基更換為Opti-MEM 溶液。參考轉(zhuǎn)染試劑盒RNAiMAX 說明書方法，將si-MIF與si-NC轉(zhuǎn)染入AGS細(xì)胞中，4 h后吸棄轉(zhuǎn)染體系，將培養(yǎng)基更換為含10%FBS 的RPMI-1640常規(guī)培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.2 胃癌細(xì)胞Hp 感染與分組 取200 μl 的Hp均勻涂抹在含10%胰蛋白酶大豆瓊脂與5%羊血和5%Dent抗生素補充劑的培養(yǎng)基包被的培養(yǎng)板上，置于含85%N2、10%CO2與5%O2的37 ℃培養(yǎng)罐中培養(yǎng)3～5 d。收集Hp 菌落，使用含10%FBS 的胰蛋白酶大豆肉湯制成懸液，使用光密度法計算懸液中的細(xì)菌數(shù)量。參考文獻(xiàn)［16］方法，按Hp 細(xì)菌數(shù)與細(xì)胞數(shù)為100∶1的比例將Hp與AGS進(jìn)行共培養(yǎng)，并按處理方式不同將細(xì)胞分為4 組：轉(zhuǎn)染si-NC 的si-NC 組細(xì)胞、轉(zhuǎn)染si-MIF 的si-MIF 組細(xì)胞、Hp 與轉(zhuǎn)染si-NC共培養(yǎng)12 h 的Hp+si-NC 組細(xì)胞和Hp 與轉(zhuǎn)染si-MIF共培養(yǎng)12 h的Hp+si-MIF組細(xì)胞。

1.2.3 MTT 檢測胃癌細(xì)胞的活力 取對數(shù)生長期AGS 細(xì)胞，常規(guī)消化后，按2×104個/孔接種至96 孔板，按1.2.2方法進(jìn)行分組處理后，置于培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)12 h、24 h、36 h、48 h 后加入0.5 mg/ml 的MTT 溶液（20 μl/孔），繼續(xù)培養(yǎng)4 h 后，吸棄上清，每孔加入150 μl DMSO，室溫下充分振蕩后，酶標(biāo)儀490 nm 處檢測吸光度值（OD490）。每組每個時間點設(shè)置5個復(fù)孔，實驗單獨重復(fù)3次。

1.2.4 RT-PCR 取轉(zhuǎn)染si-NC 或si-MIF 24 h 后的AGS細(xì)胞，TRIzol法提取細(xì)胞中的總RNA，評估濃度與純度后，參考逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書方法對RNA 進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。按照SYBR Green Master 試劑盒說明書方法進(jìn)行RT-PCR，MIF-F：5′-CGGACAGGGTCTACATCAACT-3′，MIF-R：5′-ACCGTTTATTTCTCCCCACCA-3′；GAPDH-F：5′-AGGTGAAGGTCGGAGTCAAC-3′，GAPDH-R：5′-GGGGTCATTGATGGCAACAATA-3′。以GAPDH 為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt方法分析胃癌細(xì)胞中MIF表達(dá)。上述實驗單獨重復(fù)3次。

1.2.5 各組胃癌細(xì)胞中ROS 水平檢測 取生長狀態(tài)良好的各組AGS 細(xì)胞，常規(guī)消化后取約1×105個細(xì)胞加入10 nmol/L 的DCFH-DA 試劑1 ml，室溫下避光孵育20 min 后流式細(xì)胞儀檢測。實驗單獨重復(fù)3次。

1.2.6 Annexin V-FITC/PI法檢測胃癌細(xì)胞凋亡 收集各組AGS 細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度至1×106個/ml， 取100 μl細(xì)胞懸液按800 r/min 離心5 min，200 μl結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞后置于流式管中，分別加入10 μl的Annexin V-FITC 與5 μl 的PI 溶液，室溫下避光孵育15 min，加入300 μl結(jié)合緩沖液，流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率。實驗單獨重復(fù)3次。

1.2.7 JC-1 染色檢測細(xì)胞線粒體膜電位 收集各組AGS 細(xì)胞，常規(guī)消化后，按JC-1 試劑盒操作說明方法取約5×105個細(xì)胞加入0.5 ml 的JC-1 染色液（10 ng/ml），37 ℃下避光孵育20 min，4 ℃預(yù)冷的染色緩沖液充分洗滌細(xì)胞后，共聚焦顯微鏡在單激發(fā)（488 nm）和雙激發(fā)（530 nm、590 nm）光下觀察拍照并分析。JC-1 單體呈綠色熒光表示線粒體膜電位的耗散，而JC-1 聚合體呈紅色熒光表示膜電位完整。

1.2.8 Western blot 實驗 收集待測AGS 細(xì)胞，使用RIPA 與蛋白酶抑制劑制備細(xì)胞裂解液，BCA 法檢測蛋白濃度，加熱變性后，取約30 μg 等量蛋白樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，并轉(zhuǎn)移至PVDF膜。5%脫脂奶粉室溫封閉1 h 后，加入一抗：MIF （1∶800）、LC3B（1∶500）、p62（1∶500）、PINK1（1∶1 000）、Parkin（1∶1 000） 4 ℃孵育過夜，PBST 洗膜后，加入二抗（1∶3 000）室溫下孵育2 h，PBST 再次洗膜后，使用ECL化學(xué)發(fā)光液檢測目的蛋白表達(dá)，以GAPDH為內(nèi)參，Image J 軟件分析蛋白條帶灰度值。實驗單獨重復(fù)3次。

1.2.9 免疫熒光檢測LC3B 與線粒體的共定位表達(dá) 取各組AGS 細(xì)胞，常規(guī)制備細(xì)胞爬片后，加入500 nmol/L 的線粒體mito tracker 室溫染色30 min，PBS再次洗滌細(xì)胞，預(yù)冷的4%多聚甲醛固定細(xì)胞爬片10 min，0.2%Triton X-100 室溫下進(jìn)行透化細(xì)胞 5 min 后，5%山羊血清于室溫下抗體封閉1 h，加入LC3B抗體（1∶300），4 ℃孵育過夜，然后加入FITC 標(biāo)記的山羊抗兔二抗（1∶1 000）置室溫避光孵育1 h，加入抗熒光猝滅劑封片，熒光顯微鏡下觀察并拍照分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS19.0 與GraphPad Prism 5.0 軟件統(tǒng)計分析及繪圖，所有實驗數(shù)據(jù)使用±s表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），進(jìn)一步兩兩比較使用LSD-t檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Hp 感染對胃癌細(xì)胞中MIF 表達(dá)的影響 Western blot 結(jié)果顯示，與0 h 相比，隨Hp 刺激時間延長，胃癌細(xì)胞中MIF 蛋白表達(dá)逐漸升高（P＜0.05），其中12 h 表達(dá)增加最為明顯，提示Hp 感染以時間依賴性促進(jìn)胃癌細(xì)胞中MIF 表達(dá)，選擇12 h為后續(xù)實驗Hp刺激時間（圖1）。

圖1 Hp感染促進(jìn)胃癌細(xì)胞MIF表達(dá)Fig.1 Hp infection promotes MIF expression in gastric cancer cells

2.2 Hp 感染對沉默MIF 的胃癌細(xì)胞增殖的影響 RT-PCR 與Western blot 檢測沉默MIF 的轉(zhuǎn)染效率，結(jié)果表明，與si-NC 組相比，si-MIF 組MIF mRNA 與蛋白表達(dá)均顯著降低（P＜0.05），說明si-MIF 轉(zhuǎn)染成功降低了胃癌細(xì)胞中MIF 表達(dá)（圖2A、B）。MTT 檢測結(jié)果顯示，與si-NC 組相比，si-MIF 組增殖能力明顯降低（P＜0.05），Hp+si-NC 組與Hp+si-MIF 組增殖能力顯著升高（P＜0.05）；與Hp+si-NC 組相比，Hp+si-MIF組增殖能力明顯降低（P＜0.05，圖2C）。

圖2 沉默MIF后抑制Hp對胃癌細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用Fig.2 Inhibitory effect of HP on proliferation of gastric cancer cells after silencing MIF

2.3 Hp 感染對沉默MIF 的胃癌細(xì)胞凋亡的影響 Annexin V-FITC/PI 染色結(jié)果顯示，與si-NC 組相比，Hp+si-NC 組與Hp+si-MIF 組凋亡率明顯升高（P＜0.05），si-MIF 組無明顯改變（P＞0.05）；與Hp+si-NC組相比，Hp+si-MIF組凋亡率明顯升高（P＜0.05，圖3）。

圖3 Annexin V-FITC/PI檢測各組胃癌細(xì)胞凋亡率Fig.3 Annexin V-FITC/PI was used to detect apoptosis rate of gastric cancer cells in each group

2.4 Hp 感染對各組胃癌細(xì)胞ROS 水平的影響 DCFH-DA 染色后流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，與si-NC組相比，Hp+si-NC組與Hp+si-MIF組ROS均顯著增加（P＜0.05），si-MIF 組無明顯變化（P＞0.05）；而與Hp+si-NC 組相比，Hp+si-MIF 組ROS 增加趨勢更為明顯（P＜0.05，圖4）。

圖4 各組胃癌細(xì)胞ROS水平的流式檢測Fig.4 Flow cytometry of ROS levels in gastric cancer cells in each group

2.5 Hp 感染對各組胃癌細(xì)胞線粒體膜電位的影響 JC-1染色后熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示，si-NC細(xì)胞線粒體膜電位較高，呈大量JC-1 聚合體，產(chǎn)生紅色熒光，而Hp 感染后胃癌細(xì)胞線粒體膜電位嚴(yán)重去極化，呈JC-1 單體，產(chǎn)生綠色熒光。與si-NC 組相比，Hp+si-NC 與Hp+si-MIF 組線粒體膜電位顯著降低（P＜0.05），si-MIF 組無明顯變化（P＞0.05）；而與Hp+si-NC 組相比，Hp+si-MIF 組膜電位水平降低更為明顯（P＜0.05，圖5）。

圖5 各組胃癌細(xì)胞線粒體膜電位的JC-1檢測Fig.5 Mitochondrial membrane potential of gastric cancer cells in each group were detected by JC-1

2.6 Hp感染對各組胃癌細(xì)胞中線粒體自噬水平的影響 Western blot 檢測結(jié)果顯示，與si-NC 組相比，Hp+si-NC與Hp+si-MIF組LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1、Parkin 蛋白表達(dá)均顯著升高（P＜0.05），p62 蛋白表達(dá)明顯降低（P＜0.05），si-MIF 組上述指標(biāo)無明顯變化 （P＞0.05）；與Hp+si-NC 組相比，Hp+si-MIF 組的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1、Parkin表達(dá)明顯降低（P＜0.05），p62表達(dá)顯著升高（P＜0.05，圖6A）。免疫熒光共定位檢測結(jié)果顯示，LC3B 在Hp 感染的胃癌細(xì)胞線粒體中大量聚集，分析結(jié)果顯示，與si-NC 組相比，Hp+ si-NC 組與Hp+si-MIF 組LC3B 共定位的線粒體數(shù)明顯增加（P＜0.05），si-MIF 無明顯改變（P＞0.05），與Hp+si-NC 相比，Hp+si-MIF 組LC3B 共定位的線粒體數(shù)明顯減少（P＜0.05，圖6B）。

圖6 各組胃癌細(xì)胞線粒體自噬水平Fig.6 Mitochondrial autophagy level of gastric cancer cells in each group

3 討論

Hp是一種革蘭氏陰性菌，世界衛(wèi)生組織將其定義為一類致癌物，而根除Hp 可將胃癌發(fā)病率降低 3 倍［2］。既往對其致癌機制研究表明，Hp 可能通過自身成分，如細(xì)胞毒素基因A 相關(guān)的活性蛋白 （active protein associated with cytotoxin gene A，CagA）和空泡化細(xì)胞毒素A（vacuolating cytotoxin V，VacA）直接或間接導(dǎo)致胃癌發(fā)生，但其在胃癌細(xì)胞自噬中的作用尚不清楚。自噬在胃癌中的雙重作用（包括抑癌與促癌）也讓Hp 感染與胃癌自噬相關(guān)研究仍處于探索中［7］。急性Hp 感染可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，保護胃黏膜免受Hp 入侵及感染擴大，而隨著Hp 持續(xù)感染，細(xì)胞自噬功能出現(xiàn)損傷或缺陷，誘導(dǎo)細(xì)胞毒性物質(zhì)積累，如ROS等，引起DNA突變增加，基因組不穩(wěn)定性，加速胃黏膜細(xì)胞癌癥形成風(fēng)險［17］。而在Hp陽性的胃癌組織中，自噬標(biāo)志蛋白LC3B 顯著高于Hp陰性組，Atg5顯著降低，LC3B與Atg5均能直接預(yù)測MIF 水平，提示MIF 和自噬的相互作用可能參與Hp 相關(guān)胃癌發(fā)生發(fā)展［15］。線粒體自噬作為一種選擇性自噬，能有效降解受損的線粒體，減少大量ROS 釋放及線粒體途徑介導(dǎo)的凋亡發(fā)生，從而利于細(xì)胞存活［18］。本研究結(jié)果表明，Hp感染能促進(jìn)胃癌細(xì)胞MIF 表達(dá)，并通過促進(jìn)細(xì)胞中線粒體PINK1/Parkin 介導(dǎo)的自噬促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，降低Hp 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。

既往研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌中Hp 可能通過多種途徑促進(jìn)細(xì)胞增殖，如在胃癌組織中Hp 感染或Hp 的DNA 水平與Toll 樣受體9 上調(diào)相關(guān)，進(jìn)一步體外研究發(fā)現(xiàn)，敲除TLR9 能顯著抑制胃癌細(xì)胞MKN45 與AGS 增殖［19］。而XU 等［20］研究中發(fā)現(xiàn)，Hp 感染能顯著抑制miR-195 的表達(dá)，在胃癌細(xì)胞SGC-7901 中過表達(dá)miR-1915 能夠靶向抑制晚期糖基化終產(chǎn)物特異性受體的蛋白水平從而減弱細(xì)胞增殖能力。在胃黏膜細(xì)胞中，XIA 等［12］發(fā)現(xiàn)MIF 在Hp 介導(dǎo)的胃黏膜細(xì)胞增殖中起重要作用，MIF 抗體能有效阻滯Hp的上述促進(jìn)現(xiàn)象。而鑒于Hp CagA 等毒素的存在，大量研究表明Hp 能顯著促進(jìn)細(xì)胞凋亡［21］。本實驗中，課題組同樣發(fā)現(xiàn)Hp 感染能顯著促進(jìn)AGS 細(xì)胞增殖與凋亡，下調(diào)MIF的表達(dá)能明顯降低Hp對細(xì)胞的增殖與凋亡的促進(jìn)作用。此外，馬驥等［22］在胃癌細(xì)胞系SGC-7901 中利用siRNA 沉默MIF 的研究表明，下調(diào)MIF 表達(dá)能顯著抑制SGC-7901細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡，在本研究中課題組僅觀察到下調(diào)MIF能降低AGS 增殖能力，并未發(fā)現(xiàn)其對細(xì)胞凋亡的影響，可能與胃癌細(xì)胞系種類不同有關(guān)。

線粒體是維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的重要細(xì)胞器，不僅通過能量產(chǎn)生，還能通過控制信號級聯(lián)調(diào)節(jié)細(xì)胞死亡、分化和衰老［9］。同時，在線粒體產(chǎn)生能量的過程中，還會產(chǎn)生以ROS 為主的副產(chǎn)物，但在正常情況下線粒體內(nèi)的ROS 是由內(nèi)源性抗氧化物酶系統(tǒng)進(jìn)行有效控制，而在外源刺激存在時，胞質(zhì)中出現(xiàn)的ROS 能進(jìn)一步觸發(fā)線粒體膜通透性的轉(zhuǎn)變，進(jìn)而誘導(dǎo)線粒體進(jìn)一步釋放ROS，造成蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和DNA 的氧化損傷，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡［18］。而在線粒體功能受損時，膜電位出現(xiàn)下降，PINK1在線粒體外膜大量積累，而Parkin 是一種E3 泛素連接酶，其能被線粒體外膜中的PINK1 所募集，進(jìn)而催化線粒體膜表面的相關(guān)蛋白發(fā)生泛素化，而泛素化的線粒體能夠被自噬相關(guān)蛋白p62 所識別，促進(jìn)其與溶酶體膜表面的LC3B 等同源蛋白進(jìn)行結(jié)合，誘導(dǎo)線粒體發(fā)生自噬，從而選擇性地清除受損的線粒體，抑制損傷擴大和凋亡發(fā)生［23］。本研究結(jié)果顯示，Hp感染能增加胃癌細(xì)胞中的ROS，降低線粒體膜電位水平，而沉默胃癌細(xì)胞中MIF表達(dá)能顯著加劇Hp的這種作用，Western blot 實驗結(jié)果表明，沉默MIF 可能通過抑制PINK1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬水平發(fā)揮上述作用，免疫熒光染色進(jìn)一步證實Hp 能夠促進(jìn)LC3B 在線粒體中的定位，而沉默MIF 顯著降低LC3B 在線粒體中的熒光強度，提示Hp 感染可能通過MIF 介導(dǎo)的線粒體自噬水平促進(jìn)其持續(xù)感染。MIF的上述作用與其在二手煙誘導(dǎo)的心肌收縮功能障礙的小鼠模型中的作用一致，均能通過促進(jìn)線粒體自噬功能在疾病中發(fā)揮重要作用［24］。

綜上所述，本實驗表明Hp 感染能促進(jìn)胃癌細(xì)胞MIF 表達(dá)，并通過促進(jìn)細(xì)胞中線粒體PINK1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬水平保護線粒體功能，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，降低Hp 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，沉默胃癌細(xì)胞中MIF 表達(dá)能顯著削弱Hp 的上述作用。本研究進(jìn)一步揭示了Hp 在胃癌中的作用機制，而靶向MIF 的深入探究有望成為Hp 相關(guān)胃癌的治療靶點。