血清miRNA30a水平與高血壓性心臟病左室肥厚的相關(guān)性

買力旦木·艾克拜，瑪依努爾·買買提明，買熱木古·阿布都熱依木

高血壓是引起心臟病的重要危險(xiǎn)因素，但是許多人并未意識(shí)到本身存在血壓升高且未及時(shí)采取治療，或者接受了治療仍無(wú)法控制血壓，導(dǎo)致心臟功能和結(jié)構(gòu)改變，發(fā)展為高血壓性心臟病(HHD)[1-2]。HHD與心力衰竭關(guān)系密切，其病死率較單純的高血壓高3倍，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量，因此及早篩查及治療尤其重要[3-4]。左室肥厚(LVH)是HHD最常見表現(xiàn)，也是發(fā)生心力衰竭、腦卒中、心源性猝死及急性心肌梗死的危險(xiǎn)因素，其病理改變的核心是導(dǎo)致心臟組織異常重構(gòu)，因此逆轉(zhuǎn)LVH是HHD治療的關(guān)鍵切入點(diǎn)[5-6]。微小RNA(miRNAs)是一類小的非編碼RNA，在心肌重塑、增殖及分化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[7]。miRNA30a是研究較多的miRNA，其在心肌細(xì)胞中高表達(dá)，可通過(guò)作用于結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)并影響其表達(dá)參與調(diào)節(jié)心肌纖維化[8]。本研究通過(guò)檢測(cè)血清miRNA30a水平，探討其與HHD左室肥厚的關(guān)系，以期為HHD左室肥厚的臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年10月—2020年10月新疆醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心內(nèi)科收治的高血壓2級(jí)以上病人150例作為研究對(duì)象，其中，單純高血壓病人93例作為高血壓組；高血壓合并LVH病人57例，作為合并LVH組；另選取同期于本院進(jìn)行健康體檢者60人作為對(duì)照組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合《中國(guó)高血壓防治指南(2018年修訂版)》[9]中高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均為原發(fā)性高血壓，入院前未經(jīng)降壓治療；③無(wú)繼發(fā)性糖尿病、高血壓或其他心血管疾?。虎軣o(wú)惡性腫瘤、臟器功能嚴(yán)重受損相關(guān)疾??；⑤臨床資料齊全。

1.3 研究方法

1.3.1 一般檢查 所有入選者均需完善臨床檢查，收集其總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血尿酸(UA)、空腹血糖、肌酐等數(shù)據(jù)并由專人質(zhì)控。

1.3.2 超聲心動(dòng)圖檢查 應(yīng)用DC-N3S彩色多普勒超聲系統(tǒng)(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測(cè)量左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、室間隔厚度(IVSd)和左心室壁厚度(LVPWD)，計(jì)算左心室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)，取3次測(cè)量的平均值為最終結(jié)果。

1.3.3 血清指標(biāo)檢測(cè) 入組病人禁食至少8 h，于次日清晨采集空腹靜脈血3 mL(對(duì)照組在體檢當(dāng)日采集)，4 000 r/min離心10 min后，取其上清液保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、Ⅰ型膠原氨基端肽(PⅠNP)和Ⅲ型膠原氨基端肽(PⅢNP)水平，所用儀器為BK400全自動(dòng)生化分析儀，試劑盒均購(gòu)自美國(guó)R&D公司。

1.3.4 血清miRNA30a水平檢測(cè) 另采取靜脈血3 mL，按照RNeasy Plus Mini Kit試劑盒(購(gòu)自O(shè)MEGA公司)說(shuō)明提取血漿總RNA；采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法在實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀(Bio-Rad公司)上檢測(cè)血漿miRNA30a表達(dá)水平，以2-△△Ct表示miRNA30a的相對(duì)表達(dá)量。

2 結(jié) 果

2.1 3組一般資料比較 合并LVH組和高血壓組病人的收縮壓、舒張壓均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；3組的年齡、性別(男)、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、吸煙、血脂異常、TC、TG、LDL-C、HDL-C、UA、空腹血糖、肌酐比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 3組一般資料比較

2.2 3組超聲心動(dòng)圖指標(biāo)比較 與對(duì)照組比較，合并LVH組、高血壓組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與高血壓組比較，合并LVH組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 3組超聲心動(dòng)圖指標(biāo)比較(±s)

2.3 3組血清學(xué)指標(biāo)比較 與對(duì)照組比較，合并LVH組、高血壓組MMP-9、PⅠNP、PⅢNP及miRNA30a均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與高血壓組比較，合并LVH組MMP-9、PⅠNP、PⅢNP及miRNA30a均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 3組血清學(xué)指標(biāo)比較(±s)

2.4 血清miRNA30a水平與各指標(biāo)的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析顯示，血清miRNA30a水平與LVEDD、IVSd、LVPWD、LVMI、MMP-9、PⅠNP及PⅢNP均呈正相關(guān)(P<0.05)。詳見表4。

表4 血清miRNA30a水平與各指標(biāo)的相關(guān)性

2.5 血清miRNA30a水平對(duì)HHD病人發(fā)生LVH的預(yù)測(cè)價(jià)值 以血清miRNA30a水平為檢測(cè)指標(biāo)，以病人是否出現(xiàn)LVH為狀態(tài)變量繪制預(yù)測(cè)LVH發(fā)生的ROC曲線。結(jié)果顯示，血清miRNA30a水平預(yù)測(cè)LVH的截?cái)嘀禐?.70，ROC曲線下面積為0.869，敏感度為80.3%，特異度為83.7%。詳見圖1。

圖1 血清miRNA30a水平預(yù)測(cè)HHD病人發(fā)生LVH的ROC曲線

3 討 論

機(jī)體長(zhǎng)期處于高血壓狀態(tài)，循環(huán)阻力會(huì)明顯增大，左心室需要增加收縮強(qiáng)度以克服阻力，才能確保血液進(jìn)入主動(dòng)脈，由此導(dǎo)致左心室代償性出現(xiàn)LVH。LVH發(fā)生的影響因素較多，如機(jī)械因素、氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能損傷、遺傳因素、細(xì)胞凋亡等，但LVH狀態(tài)下的心臟持續(xù)超負(fù)荷，最終可能導(dǎo)致心力衰竭的嚴(yán)重后果[10-11]。HHD正是高血壓長(zhǎng)期發(fā)展的結(jié)果，故盡早發(fā)現(xiàn)其引起的心臟改變并進(jìn)行治療意義重大。超聲心動(dòng)圖因靈敏度高，可直接展現(xiàn)心臟內(nèi)部情況，且年齡、肥胖及胸壁厚度對(duì)其檢查結(jié)果的影響較小，成為臨床LVH診斷的理想檢測(cè)方法[12]。本研究中，3組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表現(xiàn)為：合并LVH組>高血壓組>對(duì)照組，該結(jié)果與臨床HHD臨床表現(xiàn)相符。

早期LVH的主要改變是心肌細(xì)胞肥大、伴隨心肌細(xì)胞凋亡，但隨著病變的進(jìn)展，逐漸發(fā)展為心肌膠原(ECM)替代細(xì)胞凋亡，心功能開始惡化，如出現(xiàn)射血分?jǐn)?shù)降低。ECM中約85%為心臟成纖維細(xì)胞合成的Ⅰ型、Ⅲ型膠原；Ⅲ型膠原的mRNA在心肌纖維化初期表達(dá)增加，而Ⅰ型膠原的mRNA在后期表達(dá)增加，兩者均可促使左心室順應(yīng)性降低，且舒張功能也會(huì)受到影響[13-14]。MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)家族中的成員，具有調(diào)節(jié)ECM合成和降解的作用，可促使纖維膠原降解，從而導(dǎo)致ECM發(fā)生重構(gòu)[13]。本研究中，3組血清MMP-9、PⅠNP及PⅢNP水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表現(xiàn)為：合并LVH組>高血壓組>對(duì)照組，提示發(fā)生LVH的高血壓病人出現(xiàn)心肌纖維化的風(fēng)險(xiǎn)增加，與韓巍等[6]的研究結(jié)論相符，這可能與ECM合成增多并在體內(nèi)不斷沉積，導(dǎo)致心肌纖維化加重有關(guān)。

miRNAs是單鏈非編碼RNA，長(zhǎng)度為20～24個(gè)核苷酸，通過(guò)與靶向信使RNA的3′非編碼區(qū)結(jié)合，經(jīng)轉(zhuǎn)錄后對(duì)基因表達(dá)發(fā)揮重要的調(diào)控作用；miRNAs廣泛存在于血清、血漿、尿液、腦脊液和其他體液中。研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs在腦卒中的發(fā)病機(jī)制、病理學(xué)及并發(fā)癥和預(yù)后中發(fā)揮關(guān)鍵作用[15]。因此，這些小分子已成為心腦血管疾病診療的新標(biāo)志物。miRNA30a是miRNAs家族中的重要成員，其表達(dá)與多種組織損傷存在聯(lián)系。過(guò)表達(dá)的miRNA30a會(huì)加重葡萄糖和缺氧導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，而其表達(dá)降低后，可能導(dǎo)致Beclin1介導(dǎo)的自噬作用增強(qiáng)以減弱腦缺血性損傷[16]。楊曉偉等[17]研究發(fā)現(xiàn)，老年急性心肌梗死病人的血清miRNA30a存在高表達(dá)。另有研究發(fā)現(xiàn)，miRNA30a也高表達(dá)于心力衰竭病人血清中，與心功能關(guān)系密切[18]?？梢姡琺iRNA30a在心肌細(xì)胞中廣泛表達(dá)，可能成為預(yù)測(cè)HHD發(fā)生LVH的潛在標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示，高血壓病人較非高血壓者血清miRNA30a水平更高，且合并LVH的病人的血清miRNA30a水平明顯增高，說(shuō)明miRNA30a在LVH高血壓病人血清中出現(xiàn)高表達(dá)。Pearson相關(guān)分析顯示，血清miRNA30a與LVH指標(biāo)LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI呈顯著正相關(guān)，提示其與HHD病人LVH的發(fā)生密切相關(guān)。CTGF廣泛分布于多種組織中，是機(jī)體創(chuàng)傷修復(fù)和纖維化疾病進(jìn)展的重要因子，其表達(dá)水平高低可反映纖維化程度[19]。一項(xiàng)關(guān)于擴(kuò)張性心肌病的研究顯示，miRNA30a可能通過(guò)高表達(dá)抑制CTGF而發(fā)揮作用，參與調(diào)節(jié)心肌纖維化[20]。而本研究中，血清miRNA30a與MMP-9、PⅠNP及PⅢNP均呈顯著正相關(guān)，說(shuō)明其在HHD病人LVH發(fā)生過(guò)程也可能發(fā)揮了類似的功能，但相關(guān)研究較少，仍需更多研究予以證實(shí)。通過(guò)繪制ROC曲線結(jié)果顯示，血清miRNA30a預(yù)測(cè)LVH的截?cái)嘀禐?.70，ROC曲線下面積為0.869，敏感度為80.3%，特異度為83.7%，提示血清miRNA30a對(duì)HHD病人發(fā)生LVH具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，可為HHD病人的早期診斷提供新的切入點(diǎn)。

綜上所述，血清miRNA30a水平與HHD病人LVH發(fā)生相關(guān)，其可能通過(guò)抑制CTGF表達(dá)而調(diào)節(jié)心肌纖維化，可作為預(yù)測(cè)該類病人發(fā)生LVH的潛在標(biāo)志物。但LVH發(fā)生影響因素眾多，本研究未能深入闡明miRNA30a對(duì)其的作用機(jī)制，也并未深入探討各指標(biāo)間的相關(guān)性，存在一定的不足，有待進(jìn)一步深入研究予以證實(shí)。