噴施6-BA對不同種植密度白刺葉衰老的影響

靳 維， 王晨林， 任宇辰， 張慧芳， 楊秀清

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，山西 晉中 030801）

細(xì)胞分裂素（CK）是一類由N6-腺嘌呤衍生物組成的小分子植物激素，在植物生長發(fā)育、衰老、抗病、抗逆等生命活動中發(fā)揮重要作用［1］。外源6-芐基腺嘌呤（6-BA）作為人工合成的細(xì)胞分裂素類植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，能夠增加植物體內(nèi)細(xì)胞分裂素水平，抑制和清除自由基，調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)的運輸，促進新陳代謝［2］。研究發(fā)現(xiàn)，6-BA可能通過抑制氧自由基對植物的侵害及膜脂過氧化程度的加深，使甜瓜［3］、棉花［4］葉片保持較高的抗氧化酶活性，延緩葡萄［5］葉片的葉綠素含量和凈光合速率（Pn）的下降，增加老芒麥［6］幼苗葉片可溶性糖、蛋白及游離脯氨酸的含量，抑制草莓［7］葉片細(xì)胞質(zhì)膜透性的增大和丙二醛（MDA）含量的增加，從而延緩這些植物葉片的衰老。研究表明，種植密度對植物葉片衰老的影響也至關(guān)重要。一定范圍內(nèi)種植密度的增加會縮短油菜葉片功能期、降低葉片的光合性能，使其提前衰老，進而造成減產(chǎn)［8］。低密度種植有利于增加燕麥葉片的光合效率、延緩衰老［9］，密植可以加快水稻葉綠素分解和蛋白質(zhì)含量的下降［10］。

唐古特白刺（Nitraria tangutorumBobr.）為蒺藜科白刺屬超旱生灌木，廣泛分布于我國西北荒漠地區(qū)的重要生態(tài)兼經(jīng)濟型樹種［11］。白刺葉蛋白含量高，纖維含量低，是駱駝、山羊等很好的青綠飼料，具有良好的飼用品質(zhì)和較高的飼用價值［12］。白刺葉具有調(diào)節(jié)血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、延緩衰老、抗砷毒和抑制癌細(xì)胞生長等功效，可入藥或炮制藥茶［13-14］，具有很好的開發(fā)前景。由于植物葉片衰老會導(dǎo)致光合速率降低和葉綠素、蛋白等降解反應(yīng)，不僅影響葉片功能性營養(yǎng)物質(zhì)的存儲［15］，也嚴(yán)重影響了枝條營養(yǎng)及成熟果實品質(zhì)的維持［16］。白刺作為葉、枝、果兼用型功能樹種［17］，其葉片生長性狀的好壞決定葉自身品質(zhì)及利用價值的同時，也促進或限制了整個植株的生長，對白刺枝及果實的發(fā)育有重要影響。因此，如何維持白刺生長期葉片光合能力、提高葉滲透調(diào)節(jié)及活性氧代謝能力，有效延緩葉片衰老及保持好的葉生長性狀，以提高葉生長質(zhì)量是目前實現(xiàn)白刺高效種植所關(guān)注的焦點問題之一，對白刺葉及枝、果的開發(fā)利用和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展具有重要意義。

鑒于此，本文研究了不同種植密度白刺外源噴施6-BA后葉光合性能、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量、抗氧化酶活性以及活性氧代謝的動態(tài)變化及其變異規(guī)律，探討6-BA及不同種植密度對白刺葉衰老的影響及作用機理，以期為白刺高效種植及其資源的開發(fā)利用提供實踐依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于山西省晉中盆地太谷區(qū)小白鄉(xiāng)白燕村的林木種質(zhì)示范園（37°25′N，112°25′E）開展。供試材料為唐古特白刺3 a生移植苗。

1.2 試驗設(shè)計

試驗采用兩種（種植密度）×4個（6-BA濃度）×6次重復(fù)雙因子隨機區(qū)組設(shè)計。2020年苗木移植時，設(shè)計兩種不同種植密度進行穴植（3株·穴-1），其中，高密度種植株行距為0.8 m×1.0 m，共計37440 株·hm-2，低密度株行距為1.2 m×1.5 m，共計16650 株·hm-2。種植苗木生長期間配合田間常規(guī)管理。移植第2 a進行6-BA處理，從每個種植密度中隨機選擇72株（24穴）為標(biāo)記植株，設(shè)4個6-BA處理濃度，即0 mg·L-1（CK）、10 mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-1，每處理6次重復(fù)（包括6穴18株）。

1.3 試驗處理及指標(biāo)測定

參照朱立保等［3］的方法，在白刺花芽萌動開始至果實脫落（05-05—07-14）期間噴施6-BA，每隔10 d噴施1次，共噴施8次。將不同濃度6-BA 均勻噴施于標(biāo)記植株全部葉片，以水珠落于葉片而不滴下效果為宜。噴施時間為下午15:00—16:00。于第1 次噴施后0 d（t1）、20 d（t2）、40 d（t3）、60 d（t4）、80 d（t5）分別采集白刺各植株外圍中上部葉片，濕紗布包裹置于冰盒內(nèi)帶回實驗室，蒸餾水沖洗后拭干，錫箔紙包裹，液氮速凍，-80 ℃冰箱低溫保存?zhèn)溆?。光合特性?-BA處理40 d（t3）時用LI-6400XT便攜式光合作用儀（LI-COR，Gene Company Ltd USA）測定。每株選取一片位置，大小相同，完全展開的功能葉片，測量時每個葉片記錄3 次數(shù)據(jù)。測定時間為晴朗無風(fēng)的上午9:00—11:00，測定指標(biāo)包括凈光合速率（Pn）、蒸騰速率（Tr）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、胞間CO2濃度（Ci）4 個氣體交換參數(shù)。葉綠素（Chl）含量采用丙酮提取法測定，可溶性蛋白（SP）采用紫外吸收法測定，游離脯氨酸（Pro）采用磺基水楊酸提取法測定，超氧化物歧化酶（SOD）活性采用氮藍(lán)四唑法測定，過氧化物酶（POD）活性采用愈創(chuàng)木酚法測定，過氧化氫酶（CAT）活性采用紫外吸收法測定，丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸（TBA）法測定，過氧化氫（H2O2）含量采用硫酸鈦比色法進行測定［18］。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Excel 2010軟件對數(shù)據(jù)進行匯總及初步處理，SPSS 26.0軟件進行不同種植密度、噴施6-BA濃度及其交互作用對白刺葉各性狀指標(biāo)影響的方差分析，并進行不同種植密度及6-BA 濃度間各指標(biāo)的差異顯著性檢驗，Duncan 法進行多重比較。對8個處理下的指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化處理后進行主成分分析。Origin 2021軟件進行作圖。

其中主成分分析中綜合指標(biāo)權(quán)重按式（1）計算；綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值按式（2）計算；不同處理下白刺葉生理指標(biāo)綜合評價值按式（3）計算綜合評價值［19］。

式中：wj為第j個綜合指標(biāo)在所有綜合指標(biāo)中的重要程度即權(quán)重；rj為各處理下第j個綜合指標(biāo)的貢獻率。

式中：xj為第j個綜合指標(biāo)（j=1，2，…，n）；u(xj)為第j個綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值；xmax和xmin分別為第j個綜合指標(biāo)的最大值與最小值。

式中：D為不同處理下白刺葉生理指標(biāo)綜合評價值。

2 結(jié)果與分析

以采樣日期為重復(fù)觀測值，對種植密度、噴施6-BA 濃度及其相互作用對白刺葉各性狀指標(biāo)的影響進行方差分析的結(jié)果（P值）可以看出（表1），種植密度、噴施6-BA濃度的單獨效應(yīng)對各指標(biāo)的影響差異顯著，而二者的交互作用對各指標(biāo)影響差異不顯著。故本文重點分析了各6-BA濃度處理下不同種植密度、各種植密度基礎(chǔ)上不同6-BA濃度處理白刺葉各性狀指標(biāo)隨發(fā)育時間的動態(tài)變化及變異規(guī)律。

表1 6-BA和密度對白刺葉片衰老特性影響的方差分析Tab.1 Anova of effects of 6-BA and density on senescence characteristics of Nitraria tangutorum

2.1 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉光合參數(shù)的影響

圖1為6-BA處理40 d（t3）時白刺葉在不同6-BA濃度和種植密度下的光合參數(shù)凈光合速率（Pn）、蒸騰速率（Tr）、氣孔導(dǎo)度（Gs）及胞間CO2濃度（Ci）值?？梢钥闯?，2 種密度種植下的白刺葉片Pn、Tr、Gs均以20 mg·L-16-BA處理時最高，且顯著高于對照。低密度種植下3 項指標(biāo)分別比對照顯著高37.72%、117.94%、83.18%，高密度種植下3 項指標(biāo)分別比對照顯著高65.43%、100.96%、75.63%。同一濃度6-BA 處理下，3 項指標(biāo)均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度，且Pn、Gs 在CK、Tr的10 mg·L-1、20 mg·L-16-BA處理下差異顯著。葉Ci在20 mg·L-16-BA處理下達最低值，兩種種植密度下的葉Ci 與對照相比，低密度和高密度種植分別顯著降低32.29%和28.73%。相同濃度6-BA處理下的Ci表現(xiàn)為低密度＆lt;高密度，且在20 mg·L-16-BA 處理時差異顯著。這表明，適宜的種植密度以及噴施6-BA可有效促進唐古特白刺葉光合作用的進行。

圖1 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉氣體交換參數(shù)的影響Fig.1 Effects of spraying 6-BA on gas exchange parameters of Nitraria tangutorum with different planting densities

2.2 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉綠素含量的影響

由圖2 可知，兩種密度種植下的唐古特白刺在噴施不同濃度6-BA 后，各采樣期葉綠素（Chl）含量都高于對照，尤其以20 mg·L-16-BA 處理低密度下生長的白刺Chl 含量在各時期都顯著高于對照，t2、t3、t4、t5時期較相同取樣時間對照分別顯著提高23.98%、58.10%、67.38%、20.89%。同時，該處理下Chl 含量在葉發(fā)育前期t2時期升高最快，較t1相對增加52.96%，在葉發(fā)育中后期t3、t4、t5時期下降最慢，較t1相對減少25.53%、6.4%、14.49%。相同濃度6-BA處理下的Chl含量在各采樣期均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度，且在20 mg·L-1處理60 d 時呈差異極顯著性。這表明，適宜的種植密度以及噴施6-BA 在葉發(fā)育前期可有效促進Chl 生成，后期則可有效抑制Chl降解。

圖2 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉綠素含量的影響Fig.2 Effects of spraying 6-BA on chlorophyll content of Nitraria tangutorum with different planting densities

2.3 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉SP和Pro的影響

兩種密度種植下的唐古特白刺在噴施不同濃度6-BA后葉中可溶性蛋白（SP）均在t3時期含量達到最高，之后下降，至t5時期含量最低，與未噴施6-BA對照組隨發(fā)育時間的變化規(guī)律一致（圖3）。其中，僅20 mg·L-16-BA處理下兩種種植密度的白刺葉發(fā)育中后期（t3至t5時期）SP含量較相同取樣時間的對照均顯著提高。該處理下低密度和高密度種植的白刺葉SP 含量在t3時期升高最快，分別較t1相對增加101.96%和111.94%，在葉發(fā)育后期（t4、t5時期）下降最慢，分別較t1相對減少49.85%、61.86%和51.54%、68.82%。由此表明，適宜濃度的6-BA處理在葉生長前期可促進SP合成，在葉生長后期可緩解SP 分解。相同濃度6-BA 處理下的葉SP 含量各發(fā)育期均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度，且在不噴施6-BA（CK）葉發(fā)育前期（t2時期）、10 mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-16-BA處理葉發(fā)育中期及后期（t3及t4、t5時期）呈差異顯著性，表明減小種植密度可一定程度促進葉SP的累積，從而有助于增加其滲透調(diào)節(jié)能力。

兩種密度種植下的唐古特白刺在噴施不同濃度6-BA 后，葉各發(fā)育期脯氨酸（Pro）含量隨6-BA濃度的增加呈先增后降趨勢，10 mg·L-16-BA 處理下各發(fā)育期Pro含量均顯著高于對照。除10 mg·L-16-BA 處理高密度下生長的白刺葉例外，其他處理以及對照組白刺葉在發(fā)育中后期（t3至t5時期）Pro含量均呈下降之后再回升之勢。其中，20 mg·L-16-BA處理下低密度和高密度種植的白刺葉Pro 含量在t4時期均顯著回升，較t3時期分別顯著增加42.41%和38.14%，之后Pro含量逐漸下降。30 mg·L-16-BA處理高密度種植的白刺葉Pro含量在發(fā)育后期一直呈回升趨勢，至t5時期較t3顯著增加15.64%。相同濃度6-BA 處理下的葉Pro 含量各發(fā)育期均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度，且在CK、10 mg·L-1、30 mg·L-16-BA處理下除個別發(fā)育期外均差異顯著。結(jié)果表明，連續(xù)噴施適當(dāng)濃度6-BA 可一定程度緩解Pro 降解并有利于其在葉片中的累積，種植密度可影響白刺葉Pro合成，從而影響葉的生理代謝過程。

2.4 噴施6-BA 對不同種植密度白刺葉MDA 和H2O2的影響

低密度種植下的唐古特白刺在噴施不同濃度6-BA 后，各采樣期葉中丙二醛（MDA）及過氧化氫（H2O2）含量都低于對照（圖4），其中，20 mg·L-16-BA處理低密度下生長的白刺葉MDA 及H2O2含量在各時期都顯著低于對照，MDA在t2、t3、t4、t5時期較相同取樣時間對照分別顯著降低53.51%、35.80%、14.35%、28.17%，H2O2在t2、t3、t4、t5時期較相同取樣時間對照分別顯著降低19.54%、17.94%、33.90%、26.51%。20 mg·L-16-BA處理低密度下生長的白刺葉MDA含量在葉發(fā)育的t2、t3、t4、t5時期較t1時期均有增加，但相較其他處理上升幅度均為最?。辉撎幚硐翲2O2含量在葉發(fā)育的t3時期開始下降，且在t4時期顯著低于t1，隨著葉片成熟并逐漸衰老，t5時期葉H2O2含量呈上升趨勢，但相較其他處理，相對增加值最小，較t1降幅最大，達38.41%。表明噴施該濃度6-BA 可相對有效地抑制葉片衰老過程中活性氧代謝及脂質(zhì)過氧化作用導(dǎo)致的過量MDA 及H2O2的產(chǎn)生。相同濃度6-BA 處理下的葉MDA 及H2O2含量在各采樣期均表現(xiàn)為低密度＜高密度，且在各濃度不同發(fā)育時期均表現(xiàn)出差異顯著性。

圖4 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉MDA及H2O2含量的影響Fig.4 Effects of spraying 6-BA on MDA and H2O2 contents of Nitraria tangutorum with different planting densities

2.5 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉抗氧化酶活性的影響

為減輕氧化應(yīng)激，植物體主要依靠保護酶系統(tǒng)以增強其自由基清除和脂質(zhì)過氧化緩解能力。圖5結(jié)果表明，在葉片發(fā)育的t2、t3時期，各濃度6-BA 處理的SOD活性均呈上升趨勢，且顯著高于t1。至t4、t5時期，10 mg·L-16-BA 處理的SOD 仍呈上升趨勢，20 mg·L-16-BA 處理后t5時期葉SOD活性較對照有所下降。30 mg·L-16-BA處理下兩種密度種植的白刺葉SOD活性在t4、t5時期均降至低于對照。表明噴施適宜濃度6-BA可促進白刺葉生長期間活性氧清除酶活性的提升或抑制酶活性下降，過高濃度6-BA處理則會抑制SOD 活性，加速其分解。2 種種植密度下20 mg·L-16-BA 處理POD 活性最高且顯著高于對照，該處理下t2時POD活性上升最快，分別較t1顯著升高21.11%、34.17%，t5時POD 活性下降最慢，分別較t4降低4.27%、21.48%。低種植密度下各時期CAT 活性均高于對照，且10 mg·L-16-BA 處理各個時期CAT活性顯著高于對照，該處理下兩種種植密度均表現(xiàn)為t2時期升高最快，分別較t1顯著升高196.86%、205.25%，20 mg·L-1、30 mg·L-16-BA 處理t5時期降低最慢，分別較t4降低17.48%、23.05%和26.19%、33.28%。相同濃度6-BA 處理的3 種酶活性均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度，且20 mg·L-1、30mg·L-16-BA處理t5時差異顯著。表明適宜濃度6-BA處理以及適宜的種植密度可以激活白刺葉生長前期抗氧化酶或促進其活性的增加，減緩葉生長后期酶活性下降，有利于催化還原葉H2O2及抑制其MDA 生成，從而有效防止葉片衰老。

圖5 噴施6-BA對不同種植密度白刺葉SOD、POD、CAT活性的影響Fig.5 Effects of spraying 6-BA on SOD,POD and CAT activity of Nitraria tangutorum with different planting densities

2.6 白刺葉衰老各性狀指標(biāo)的主成分分析及綜合評價

對白刺的8 個衰老性狀指標(biāo)進行主成分分析，按累積貢獻率大于85%的標(biāo)準(zhǔn)，將原來8 個單項指標(biāo)轉(zhuǎn)換為4個新的相互獨立的綜合指標(biāo)（成分）。相關(guān)矩陣的主成分分析結(jié)果見表2，4個主成分累計方差貢獻率達89.971%，可代替上述8 個衰老性狀指標(biāo)對不同種植密度和6-BA處理進行評價。根據(jù)式（1）計算綜合指標(biāo)權(quán)重分別為0.427、0.350、0.152、0.071。

表2 各性狀主成分的特征向量及貢獻率Tab.2 Eigenvectors and percentage of accumulated contribution of principal components

根據(jù)式（2）、（3）計算綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值u（xj）和綜合評價值D（表3），并根據(jù)D值大小進行排序。其中，低密度種植下噴施20 mg·L-16-BA 時D值最大，表明白刺葉綜合生長最佳，抗衰老能力最強，噴施30 mg·L-16-BA時D值最小，表明白刺葉綜合生長最弱，抗衰老能力最差。

表3 不同處理隸屬函數(shù)值及綜合評價值Tab.3 The value of membership function and comprehensive evaluation under different treatment

3 討論

3.1 種植密度和6-BA處理對白刺光合特征及葉綠素的影響

植物積累有機物的光合作用過程主要由葉綠素參與完成，葉綠素的動態(tài)變化和植物葉片光合參數(shù)可以反映植物的生長和衰老過程［20］。本研究中，20 mg·L-16-BA 處理低密度下種植的白刺葉Pn、Tr及Gs 最高，Ci 最低，說明低密度種植和噴施20 mg·L-16-BA 可有效促進唐古特白刺葉光合作用的進行。結(jié)果分析可知，20 mg·L-16-BA 處理低密度下種植的白刺葉片Gs顯著增加，這使得葉肉細(xì)胞的光合活性提高，從而導(dǎo)致Pn、Tr 的提高。Ci 降低是葉肉細(xì)胞光合活性增大乃至光合速率增高的結(jié)果［21］。白刺作為長命植物，其葉光合速率的提升可有效延長葉片持綠期，進而延緩葉片衰老。研究表明，植物衰老的進程受到機體嚴(yán)格控制［22］，葉片衰老肉眼可見的顏色變化與葉片內(nèi)光合色素的含量有很大的關(guān)系。在本試驗中，20 mg·L-16-BA處理的Chl含量最高，且表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度。說明低密度種植和噴施適宜濃度6-BA有利于維持白刺葉片葉綠體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定和促進Chl 合成，通過改善和促進葉片光合代謝從而抑制其衰老過程。在栽培密度較小的環(huán)境里，植物個體的生長空間較大，受其他植株遮蔽的影響較小，有利于光合作用的有效進行［23］。植物在適宜的生境下充分利用光資源，達到最大限度利用現(xiàn)有資源和拓展生態(tài)位的生存策略［24］。趙莉等［25］、徐皓［26］的研究中也證明不同濃度6-BA 處理百合和蠶豆葉片均能提高Chl含量，并且延緩Chl降解；低密度種植，葉片光照面積增大，減少“光饑餓”的發(fā)生，降低Chl的分解，從而使Chl含量保持在較高水平，有效延長葉片的持綠期，延緩葉衰老進程。

3.2 種植密度和6-BA處理對白刺滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響

不同的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)在應(yīng)對不同環(huán)境下累積狀況不同，其保護細(xì)胞的功能也有較大的差異［27］。SP 是維持植物體正常生理活動的重要滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。一般認(rèn)為，植物衰老時葉片的SP含量會隨著光合性能的降低和酶類物質(zhì)活性的改變而逐漸降低［28］。本研究中，噴施20 mg·L-16-BA 在葉生長前期可顯著促進SP 合成，后期可有效緩解SP 降解。較低的種植密度也相對有利于葉中SP的累積。但當(dāng)6-BA濃度為30 mg·L-1時，出現(xiàn)了SP 合成抑制，即“高抑低促”。張海娜［29］的研究也表明，適宜濃度的6-BA處理能夠增加小麥、棉花葉片中的SP 含量。SP 參與植物的各項生命代謝活動，可以緩解植物衰老進程中膜系統(tǒng)的損傷［30］，其含量變化可間接確定膜系統(tǒng)受損程度和體內(nèi)代謝水平及發(fā)育狀態(tài)［31］。Pro 具有良好的水溶性，作為親和性的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)維持著細(xì)胞內(nèi)外的滲透平衡，甚至可能直接影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，對生物大分子的結(jié)構(gòu)與穩(wěn)定性起一定保護作用［32］，減慢SP、Chl等的降解。試驗中，Pro和SP變化趨勢大致相同，連續(xù)噴施適當(dāng)濃度6-BA 可一定程度緩解Pro 降解并有利于其在葉片中的累積。較低種植密度也有利于白刺葉Pro 合成。這表明，適宜種植密度和6-BA 處理可通過促進SP 和Pro 等生物大分子合成［33］，調(diào)節(jié)葉片內(nèi)的滲透平衡，在延緩白刺葉衰老中具有重要調(diào)控作用。

3.3 種植密度和6-BA 處理對白刺活性氧代謝的影響

低水平的活性氧不會對細(xì)胞膜產(chǎn)生毒害作用，但當(dāng)活性氧積累過多則會引起細(xì)胞膜脂過氧化加劇，造成氧化脅迫，加劇衰老。本試驗中20 mg·L-16-BA處理低密度下生長的白刺葉MDA及H2O2含量在各時期都顯著低于對照。20 mg·L-16-BA處理低密度下生長的白刺葉MDA 及H2O2含量在葉發(fā)育后期（t5時期）呈上升趨勢，但相較其他處理，相對增加值最小。進一步研究葉片活性氧代謝相關(guān)保護酶（SOD、POD、CAT）活性的變化發(fā)現(xiàn)，10 mg·L-1和20 mg·L-16-BA 處理可激活白刺葉生長前期抗氧化酶或促進其活性的增加，減緩葉生長后期酶活性下降。低密度種植下3 種酶活性相對高密度較好。SOD、POD、CAT作為植物體內(nèi)抗氧化清除機制中的相關(guān)抗氧化物酶［34］，能夠清除其外界環(huán)境影響和自身衰老所產(chǎn)生的自由基，減緩氧化損傷［35］，維持植株正常生長。上述研究結(jié)果表明，適宜的種植密度和6-BA 處理可以通過改變保護酶活性有利于催化還原葉H2O2及抑制其MDA 生成，緩解白刺葉生長過程中自由基的積累，減輕膜脂過氧化作用，保持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，從而有效延緩和防止葉片衰老［8］。

4 結(jié)論

20 mg·L-16-BA處理和低密度種植白刺可顯著提高葉光合速率和降低胞間CO2濃度，該處理對白刺葉衰老相關(guān)生理特性的改善還表現(xiàn)為在葉發(fā)育的t1至t3時期可有效促進Chl和SP合成，t4、t5時期可有效緩解Chl、SP、Pro降解和抑制MDA、H2O2含量增加。10 mg·L-1和20 mg·L-16-BA處理可促進白刺葉生長前期抗氧化酶SOD、POD、CAT 活性的增加，減緩葉生長后期酶活性下降。相同濃度6-BA處理的3 種酶活性均表現(xiàn)為低密度＆gt;高密度。主成分及隸屬函數(shù)分析綜合表明，20 mg·L-16-BA處理低密度下種植的白刺葉片抗衰老能力最強。因此，噴施6-BA和減小種植密度為緩解白刺葉衰老、實現(xiàn)白刺高效種植及資源有效開發(fā)利用的重要技術(shù)措施。