活血化瘀類中藥現(xiàn)代藥理學(xué)研究進展*

陳希西 ，韓嵩 ，樊根豪 ，張露丹 ，呂春曉 ，黃宇虹

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，天津 300250；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 301617；3.青島黑卓博林置地有限公司，青島 266555）

活血化瘀是中醫(yī)重要的治療原則和理論基礎(chǔ)?；钛鲱愔兴幩幮远酁樾?、苦、溫。味辛則能散能行，味苦則通泄，且均入血分，故能行血活血，消散瘀滯[1]。根據(jù)其功效特點可分為活血止痛藥、活血調(diào)經(jīng)藥、破血消癥藥等[2]。目前國內(nèi)外對于活血化瘀類中藥的研究主要以化學(xué)成分的藥理活性為中心、以靶點為導(dǎo)向，整理多集中于臨床療效和臨床藥理作用，缺少與其功效對應(yīng)的現(xiàn)代藥理學(xué)機制研究的系統(tǒng)歸納總結(jié)。文章對活血化瘀類藥物中與活血止痛藥、活血調(diào)經(jīng)藥和破血消癥藥功效相關(guān)的有效成分的現(xiàn)代藥理學(xué)研究進行歸納總結(jié)，以期為活血化瘀類藥物現(xiàn)代藥理學(xué)研究及臨床組方用藥提供思路和參考。

1 活血止痛藥

本類藥物主要有川芎、延胡索、郁金、姜黃等，這些藥物即入血分，又入氣分，有活血行氣，止痛的功效。

1.1 活血行氣藥理學(xué)作用

1.1.1 影響血小板活化、聚集 川芎、郁金的活性成分可能通過調(diào)控血小板活化聚集等方向的靶點和信號通路發(fā)揮活血行氣的作用。川芎活性成分—四甲基吡嗪（TMP）可以上調(diào)腺苷酸環(huán)化酶（AC）/環(huán)磷酸腺苷（cAMP）信號通路、抑制磷酸化蛋白激酶（p-Akt）蛋白表達，進而抑制P2Y12受體介導(dǎo)的血小板活化[3]。郁金的活性成分則通過干預(yù)促紅細胞生成素（Epo）/促紅細胞生成素受體（EpoR）通路、下調(diào)P-選擇素（CD62P），抑制血小板的活化和聚集，進而發(fā)揮活血化瘀作用的機制[4]。

1.2 止痛藥理學(xué)作用 川芎、延胡索的活性成分可能通過調(diào)控抑制神經(jīng)遞質(zhì)、鎮(zhèn)痛等方向的靶點和信號通路發(fā)揮止痛的作用。TMP可以抑制即刻早期基因（c-fos）/ERK信號通路，阻礙三叉神經(jīng)系統(tǒng)中與疼痛相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)的表達，達到治療偏頭痛的目的[8]。延胡索活性成分THP、紫堇堿（DHC）可以抑制電壓門控鈉離子通道（VGSC）中Nav1.7亞型，發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用[9]。

1.3 其他藥理學(xué)作用

1.3.1 保護神經(jīng) 川芎活性成分和姜黃素可能調(diào)控保護神經(jīng)、改善腦缺血等方向的靶點和信號通路。川芎活性成分—洋川芎內(nèi)酯H（SNH）既可以調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，抑制大鼠嗜鉻細胞瘤（PC12）細胞凋亡，從而發(fā)揮保護神經(jīng)[10]；同時還具有改善腦缺血，保護受損神經(jīng)細胞的作用[11]。與之不同，姜黃的有效成分姜黃素主要通過激活環(huán)AMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）/腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）信號通路保護大鼠神經(jīng)[12]。有研究發(fā)現(xiàn)，其類似物可以顯著降低小鼠大腦中乙酰膽堿酯酶（AChE）和丁酰膽堿酯酶（BChE）水平、增加乙酰膽堿（Ach）水平，說明姜黃素類似物可能通過抑制膽堿酯酶的活性，發(fā)揮保護神經(jīng)和預(yù)防阿爾茨海默?。ˋD）的作用[13]。

1.3.2 其他作用 川芎活性成分可能通過調(diào)控保護支氣管黏膜、抗腫瘤轉(zhuǎn)移等方向的靶點和信號通路發(fā)揮行氣、化瘀的作用。川芎活性成分TMP可以抑制核因子-κB-p65（NF-κB-p65）/腫瘤壞死因子（TNF-α）信號通路保護支氣管黏膜上皮細胞[14]。而其他48個活性成分如藁本內(nèi)酯（AHP）等與肺癌腦轉(zhuǎn)移的血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）等7個核心靶點有較強親和能力，通過實驗驗證川芎可能通過抑制磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）和VEGF通路起到抗肺癌腦轉(zhuǎn)移的作用[15]。

2 活血調(diào)經(jīng)藥

本類藥物主要有丹參、紅花、桃仁、益母草、牛膝等，這些藥物大多辛散苦泄，歸肝經(jīng)，入血分，有活血通脈，通經(jīng)的功效。

2.1 活血通脈藥理學(xué)作用

2.1.1 影響血管生成 丹參和桃仁的活性成分可能通過調(diào)控抑制血管生成等方向的靶點和信號通路發(fā)揮其活血通脈的作用。丹參活性成分—丹參酮ⅡA（Tan IIA）可以抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）/β連環(huán)蛋白（β-catenin）和缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）/β-catenin/VEGF通路，抑制血管生成[16]。而桃仁活性成分—苦杏仁苷則通過抑制TGF-β/Smad信號通路，抑制肝星狀細胞（HSCs）活化和肝竇內(nèi)皮細胞（LSECs）去分化以改善血管生成[17]。

2.1.2 防治心腦血管疾病 丹參、紅花和桃仁的活性成分可能通過調(diào)控降低心肌細胞凋亡、改善心肌缺血和改善血脂水平等方向的靶點和信號通路發(fā)揮其活血通脈的作用，從而防治心腦血管疾病。TanⅡA通過抑制Toll樣受體4（TLR4）/髓樣分化因子88（MyD88）/核因子 κB（NF-κB）信號通路[18]和 NF-κB和p38-MAPK信號通路[19]，分別發(fā)揮其減少心肌細胞凋亡，預(yù)防左心室重構(gòu)（VR），進而改善心肌梗死（MI）和預(yù)防動脈粥樣硬化的作用。而丹參另一活性成分—丹參素通過促進PI3K/Akt/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、腫瘤抑制基因p53通路和細胞外信號調(diào)節(jié)酶1/2（ERK1/2）磷酸化，抑制心肌細胞的自噬、減輕心肌細胞損傷和凋亡，改善心肌缺血再灌溉損傷[20]。紅花的活性成分的藥理學(xué)作用機制與丹參有所不同，其活性成分可能通過抑制大鼠肉瘤（Ras）/Raf/MEK/ERK1/2和希佩爾-林道抑癌基因（VHL）/HIF-1α/VEGF通路調(diào)控血管平滑肌細胞的增殖和遷移，進而防治心腦血管疾病[21]。其活性成分之一的西紅花苷可以激活核因子紅細胞2-相關(guān)因子2（Nrf-2）信號通路，上調(diào)Nrf-2的蛋白表達，提高肝臟抗氧化酶活性[22]。而其另一活性成分—羥基紅花黃色素A（HAS）則通過影響PI3K/Akt信號通路發(fā)揮其對腦缺血模型大鼠神經(jīng)保護的作用[23]。桃仁可降低TRIB3基因及Toll樣受體[24]，抑制PI3K/AKT信號通路的激活[25]，改善糖尿病血管纖維化大鼠的動脈纖維化，從而改善糖尿病的動脈病變。其活性成分苦杏仁苷主要通過抑制NF-κB/環(huán)氧合酶2（COX-2）通路，降低冠心病（CHD）模型大鼠炎癥因子表達水平，改善血脂水平[26]。

5.4 病蟲害化學(xué)防治。玉米的主要病蟲害有大小葉斑病、紋枯病、銹病、地老虎、玉米螟、蚜蟲等。①大、小葉斑病?？稍诓『Πl(fā)生期。用70%代森錳鋅粉劑500倍液或75%百菌清粉劑500-800倍液，間隔10-15d連續(xù)噴2-3次。②紋枯病。在大喇叭口期進行防治最為適宜，一般在發(fā)病初期每667m2用30g朗文康兌水60kg噴霧，噴施果穗以下植株部位，連續(xù)2～3次，間隔7d。③銹病。在發(fā)病初期，用20%粉銹寧可濕性粉劑1500倍液噴霧，嚴重時隔15d再噴1次。④地老虎、玉米螟、蚜蟲，噴藥防治。

2.2 通經(jīng)藥理學(xué)作用 益母草主要活性成分益母草堿可能通過調(diào)控改善子宮功能等靶點和通路發(fā)揮活血調(diào)經(jīng)的作用。益母草堿既可以抑制p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/PI3K/AKT信號通路，阻止大鼠子宮蛻膜組織血管生成，促進藥物流產(chǎn)大鼠的蛻膜絨毛組織排出，進而增加子宮出血量[27]；同時又可以與骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合使用，調(diào)控TGF-β/Smad3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，抑制TGF-β與Smad3蛋白的表達，抑制子宮內(nèi)膜纖維化的形成，改善子宮粘連[28]。

2.3 其他藥理學(xué)作用

2.3.1 保護神經(jīng) 桃仁、益母草和牛膝的活性成分可能通過調(diào)控營養(yǎng)神經(jīng)、促進神經(jīng)元生長和抑制神經(jīng)凋亡方向的靶點和通路。桃仁活性成分Amygdalin可以激活ERK1/2通路營養(yǎng)神經(jīng)，誘導(dǎo)神經(jīng)突觸生長，發(fā)揮保護神經(jīng)的作用[29]。而益母草活性成分益母草堿可以增強BDNF/TrkB/CREB信號通路，促進體內(nèi)和體外神經(jīng)元生長[30]。另外還可以通過激活Nrf-2/血紅素加氧酶1（HO1）信號通路發(fā)揮血腦屏障保護作用，減輕血腦屏障滲透性，啟動腦梗死模型小鼠梗死后血管新生，維持血腦屏障功能[31]。牛膝活性成分—牛膝多肽K（ABPPk）可以促進體外培養(yǎng)的原代雪旺細胞（SCs）在不同時間的增殖，抑制其凋亡[32]，激活PI3K/AKT和ERK1/2信號通路[33]，幫助周圍神經(jīng)再生和功能恢復(fù)；還可以抑制PI3K/Akt依賴的NADPH 氧化酶（NOX）/活性氧（ROS）通路，降低脂多糖（LPS）激活的BV2小膠質(zhì)細胞中的神經(jīng)炎癥，為神經(jīng)炎癥的干預(yù)和治療提供新的角度[34]。

2.3.2 影響癌細胞 丹參和紅花的活性成分可能通過調(diào)控促進癌細胞凋亡、遷徙等相關(guān)的靶點和信號通路。TanⅡA可以通過激活Jun N端激酶（JNK）通路抑制人喉表皮樣癌細胞和人喉癌細胞活力，促進癌細胞凋亡[35]。近期研究發(fā)現(xiàn)，TanⅡA與順鉑（DDP）組合可能通過PI3K/Akt信號通路抑制細胞增殖、遷移和侵襲，誘導(dǎo)細胞凋亡[36]。丹參另一活性成分—丹參酮Ⅰ（Tan-Ⅰ）既抑制PI3K/Akt/mTOR通路，誘導(dǎo)卵巢癌細胞自噬，同時激活凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3，促進卵巢癌細胞凋亡[37]；又阻礙JAK/STAT3信號通路，下調(diào)p-JAK1/2和STAT3蛋白水平，抑制骨肉瘤（OS）的生長和轉(zhuǎn)移[38]。紅花有效成分—紅花多糖（SPS）通過提高小鼠體內(nèi)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和IL-6的水平，增強免疫調(diào)節(jié)活性；同時發(fā)現(xiàn)SPS可以抑制PI3K/Akt通路抑制腫瘤生長，誘導(dǎo)人非小細胞肺癌細胞的凋亡[39]。

2.3.3 其他作用 紅花和牛膝的活性成分可能通過調(diào)控抑制肺部炎癥通路、改善血液黏稠度等方向的靶點和通路。紅花活性成分Crocin和HAS分別通過抑制大鼠肺中單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1，又稱CCL2）/受體CCR2炎癥通路的表達[40]和調(diào)節(jié)PI3K/AKT/BCL2/BAX通路[41]，發(fā)揮改善肺動脈高壓（PAH）和降低大鼠的血液黏度，改善股骨頭的病理性損傷的作用。牛膝活性成分—牛膝多糖（ABPS）通過抑制TGF-β1/Smad通路，降低血清基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子－1（TIMP－1）、血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）、骨橋蛋白（OPN）水平，提高慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺功能[42]。

3 破血消癥藥

本類藥物主要有莪術(shù)、三棱、水蛭等，藥性峻猛，這類藥物歸肝經(jīng)，入血分，有破血逐瘀的功效。

3.1 破血逐瘀的藥理作用 莪術(shù)和水蛭的活性成分可能通過調(diào)控抗血小板聚集、保護心肌等方向的靶點和通路發(fā)揮其破血逐瘀的作用。莪術(shù)有效成分—莪術(shù)二酮和莪術(shù)醇分別通過抑制AMP-activated protein kinase-vinculin/talin-integrin αIIbβ3 信號通路[43]和激活Nrf2/HO1信號通路[44]，發(fā)揮其抑制血小板聚集和抗凋亡、保護損傷心肌細胞的作用。水蛭有效成分—水蛭素和透明質(zhì)酸酸（HA）則分別通過抑制布魯頓酪氨酸激酶（Btk）介導(dǎo)的未知的IgG復(fù)合物對血小板Fc受體（FcγRIIA）的刺激[45]和被水蛭透明質(zhì)酸酶（LHase）降解[46]，發(fā)揮其降低高自發(fā)性血小板聚集（SPA）及促進血管生成活性的作用。

3.2 其他藥理作用

3.2.1 影響癌細胞 莪術(shù)、三棱的活性成分可能通過調(diào)控抑制癌細胞生長、增值和轉(zhuǎn)移等方向的靶點和通路。莪術(shù)醇可以抑制PI3K/AKT信號通路的活動，抑制人卵巢癌細胞生長[47]和胃癌細胞的增殖[48]；同時可以抑制JAK1/STAT3信號通路，抑制肺癌細胞的增殖、侵襲，進而促進肺癌細胞的凋亡[49]。另外還發(fā)現(xiàn)莪術(shù)醇可以調(diào)控miR-152-3p/PI3K/AKT和ERK/NF-κB信號通路，抑制黑色素瘤的增殖和轉(zhuǎn)移[50]。而三棱散水提物可能通過阻斷NF-KB信號通路抑制胃癌細胞增殖，促進其凋亡，從而發(fā)揮抗胃癌作用[51]；其活性成分可能通過影響p53信號通路發(fā)揮抗胃癌的潛在作用[52]。

3.2.2 其他作用 水蛭的活性成分可能通過調(diào)控抗纖維化等方向的靶點和通路。水蛭素可以抑制1-磷酸鞘氨醇（S1PS1P）/S1PR2/S1PR3信號通路，降低蛋白酶激活受體1（PAR1）表達，減弱了近端腎小管上皮（HK-2）細胞纖維化[53]。因此水蛭素可能是一種很有前途的腎間質(zhì)纖維化（RIF）治療劑。

4 討論

隨著現(xiàn)代分子生物技術(shù)、代謝組學(xué)等科研技術(shù)的進步，學(xué)者們對活血化瘀中藥的研究已從宏觀層面轉(zhuǎn)向了細胞、分子等微觀層面。文章以活血化瘀中藥主要功效分類為綱，總結(jié)歸納與其功效對應(yīng)的現(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果，確證了中藥按照功效分類的科學(xué)性。發(fā)現(xiàn)單一中藥的活性成分多樣、功能不同，同一活性成分亦可以影響多條通路，如活血調(diào)經(jīng)藥中丹參的活性成分包括TanⅡA、Salvianic acid A和Tan-Ⅰ等，Salvianic acid A和Tan-Ⅰ均影響PI3K/Akt/mTOR通路，前者改善心肌缺血，后者促進癌細胞凋亡；TanⅡA 可以影響 TGF-β1/β-catenin、HIF-1α/β-catenin/VEGF、NF-κB 和 p38-MAPK 等信號通路，分別發(fā)揮影響血管生成、改善心肌梗死和預(yù)防動脈粥樣硬化等作用，與中藥多靶點、多通路、整體調(diào)控的特點相符。通過對活血化瘀類中藥現(xiàn)代藥理學(xué)作用機制總結(jié)歸納，見表1，并繪制了相關(guān)機制通路圖，見圖1、2，提示活血止痛藥可能主要影響體內(nèi)血小板活化聚集及血管生成，其中VEGF/VEGFR-2通路研究較多；活血調(diào)經(jīng)藥可能主要作用于影響血管生成和防止心腦血管疾病，例如改善腦梗、保護心肌等，其中PI3K/Akt通路和NF-κB靶點研究較多；破血消癥藥可能主要作用于抑制血小板活化和保護心肌。說明VEGF/VEGFR-2、PI3K/Akt通路及NF-κB靶點可能為活血化瘀中藥的潛在靶點，為進一步研究活血化瘀中藥提供新角度。

圖1 活血化瘀藥物有效成分影響血小板活化、聚集和血管生成相關(guān)通路Fig.1 Active components of drugs for promoting blood circulation and removing blood stasis affect platelet activation，aggregation and angiogenesis-related pathways

圖2 活血化瘀藥物有效成分作用保護神經(jīng)、促進癌細胞凋亡和抑制癌細胞轉(zhuǎn)移相關(guān)通路Fig.2 Active ingredients of the drugs for promoting blood circulation and removing blood stasis protect nerves，promote cancer cell apoptosis and inhibit cancer cell metastasis-related pathways

表1 活血化瘀中藥藥理學(xué)作用機制Tab.1 Pharmacological mechanism of traditional Chinese medicine for promoting blood circulation and removing blood stasis

目前對活血化瘀中藥的現(xiàn)代藥理學(xué)研究主要集中于單一藥材活性成分研究，對于中藥復(fù)方在細胞、分子水平上的闡釋較少，這可能與中藥復(fù)方成分復(fù)雜多樣有關(guān)。下一步可以通過現(xiàn)代藥理學(xué)研究方法發(fā)掘中藥復(fù)方作用靶點和通路與單一藥材區(qū)別，驗證中醫(yī)中藥的科學(xué)性和安全性，為中醫(yī)中藥臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和思路。