基于國家專利數(shù)據(jù)庫和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討中藥復(fù)方治療潰瘍性結(jié)腸炎的配伍規(guī)律及作用機(jī)制研究*

徐喆，金昱彤，趙澤宇，王瑩，龔博煬，周會芳，邊育紅

（天津中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，天津 301617）

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是一種病因復(fù)雜、難以治愈的慢性炎性腸病，以黏液膿血便、腹瀉、腹痛及里急后重為主要臨床表現(xiàn)，其復(fù)發(fā)率高、極易癌變被世界衛(wèi)生組織列為難治病之一[1-3]。UC嚴(yán)重影響患者的代謝功能，降低患者的生活質(zhì)量，并給社會帶來了沉重的衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。當(dāng)前UC的發(fā)病機(jī)制尚不明確，現(xiàn)有研究認(rèn)為其發(fā)生主要與遺傳、腸道微環(huán)境、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡及感染等因素有關(guān)；臨床上對UC的治療以氨基水楊酸類藥物、腎上腺皮質(zhì)激素類藥物與免疫抑制劑3類藥物為主，但是存在毒副作用大、起效慢等問題[4-5]。

中醫(yī)藥在UC的防治中發(fā)揮了十分重要的作用，針對UC病因、病機(jī)、分期進(jìn)行辨證論治，從而改善臨床癥狀、促進(jìn)黏膜愈合、預(yù)防及治療并發(fā)癥，取得了良好的療效[6-8]。研究表明，多種中藥復(fù)方已被證實(shí)具有良好的治療UC效果，并獲得國家專利，如結(jié)腸復(fù)康顆粒、結(jié)腸炎奇效顆粒、腸清口服液等[9-10]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是虛擬篩選潛在活性物質(zhì)、作用靶點(diǎn)和通路，對藥物作用的機(jī)制和物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行預(yù)測的一種現(xiàn)代化研究手段[11-13]。研究通過挖掘國家專利數(shù)據(jù)庫中治療UC的中藥復(fù)方數(shù)據(jù)，分析其用藥規(guī)律和配伍特點(diǎn)，選取高頻核心藥物，運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選治療UC的核心作用靶點(diǎn)，構(gòu)建作用靶點(diǎn)蛋白互作關(guān)系、中藥-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)，初步探索和闡述中藥復(fù)方專利核心藥物治療UC的藥理學(xué)機(jī)制，為臨床治療UC及中藥新藥研發(fā)提供理論參考，整體研究思路如圖1所示。

圖1 國家專利中藥復(fù)方高頻核心藥物治療UC的作用機(jī)制研究思路Fig.1 Research thinking of action mechanism of national patent Chinese medicinal compound high-frequency core drugs in the treatment of UC

1 材料與方法

1.1 復(fù)方數(shù)據(jù)來源 登錄“國家知識產(chǎn)權(quán)局-中國專利公布公告”網(wǎng)站（http：//epub.sipo.gov.cn/），進(jìn)入“高級查詢”頁面，在高級查詢頁面中專利類型欄同時勾選“發(fā)明公布”與“發(fā)明授權(quán)”，將“潰瘍性結(jié)腸炎AND中藥”作為“名稱”項(xiàng)目進(jìn)行檢索，對檢索結(jié)果進(jìn)行合并、篩選后得到最終數(shù)據(jù)。檢索時間范圍為建庫至2021年12月10日。

1.2 復(fù)方納入與數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化 復(fù)方納入：納入國家專利數(shù)據(jù)庫中治療UC的全部中藥復(fù)方專利及含中藥提取物專利；中藥藥物組成相同但用量不同的專利可重復(fù)錄入，中藥藥物組成及用量相同的專利僅錄入1次。排除外用灌腸復(fù)方和非中醫(yī)藥醫(yī)療類（包括飲品、食品、保健品）專利。

數(shù)據(jù)規(guī)范及處理：依據(jù)2020年版《中國藥典》《中華本草》的藥物名稱進(jìn)行對錄入的中藥名稱進(jìn)行規(guī)范化處理；按照《中藥學(xué)》規(guī)范中藥復(fù)方的藥物功效類別。

1.3 數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則與聚類分析 利用IBM SPSS Modeler18.0軟件，基于Apriori算法對已納入的中藥復(fù)方進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，設(shè)置同時滿足支持度≥5.0、置信度≥0.5和提升度≥2的藥對為治療UC的核心藥物。利用IBM SPSS Statistics 24軟件中的組間聯(lián)接聚類算法，對高頻藥物進(jìn)行聚類分析。

1.4 中藥復(fù)方專利高頻核心藥物化學(xué)成分與作用靶點(diǎn)挖掘 通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺數(shù)據(jù)庫[14]（TCMSP，https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）挖掘高頻核心藥物的化學(xué)成分，設(shè)置化合物生物口服利用度（OB）≥30%、類藥性指數(shù)（BL）≥0.18，篩選高頻核心藥物的活性成分和蛋白靶點(diǎn)。此外，通過查閱文獻(xiàn)整理已報(bào)道的高頻核心藥物的化學(xué)成分，通過PubChem 數(shù)據(jù)庫（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）、Swiss ADME數(shù)據(jù)庫[15]（http：//www.swissadme.ch/）和Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫[16]（http：//www.swisstargetprediction.ch/）預(yù)測各主要化合物作用的靶點(diǎn)蛋白，收集probability＞10%的靶點(diǎn)。使用Uniport數(shù)據(jù)庫[17]（https：//www.uniprot.org/）對蛋白進(jìn)行名稱規(guī)范轉(zhuǎn)化操作，去重后即得高頻核心藥物的對應(yīng)靶點(diǎn)基因。

1.5 潰瘍性結(jié)腸炎潛在靶點(diǎn)獲取 以“ulcerative colitis”為關(guān)鍵詞分別在GeneCards數(shù)據(jù)庫[18]（https：//www.Genecards.org/）、人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM，http：//www.omim.org/）和Drugbank數(shù)據(jù)庫[19]（https：//go.drugbank.com/）進(jìn)行檢索，獲取UC相關(guān)靶點(diǎn)。

1.6 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及核心靶點(diǎn)篩選 將高頻核心藥物作用靶點(diǎn)和UC潛在靶點(diǎn)進(jìn)行比對，篩選重復(fù)靶點(diǎn)，得到中藥復(fù)方專利高頻核心藥物治療UC的作用靶點(diǎn)，并導(dǎo)入StringVersion11.5平臺[20]（https：//string-db.org/），選擇物種為“Homosapiens”，構(gòu)建蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)。選取分值＞0.7分的高置信度區(qū)間，并根據(jù)自由度值≥2倍中位數(shù)的靶點(diǎn)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，篩選核心靶點(diǎn)。

1.7 高頻核心藥物-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將高頻核心藥物、化合物成分、治療靶點(diǎn)信息、疾病導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0軟件[21]繪制中藥-成分-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖。

1.8 京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路和基因本體（GO）功能富集分析 為進(jìn)一步研究中藥復(fù)方專利高頻核心藥物治療UC的作用情況，分別使用KOBAS 3.0在線基因富集網(wǎng)站[22]（http：//kobas.cbi.pku.edu.cn/）和Metascape平臺[23]（http：//metascape.org/gp/index.html#/main/step1）對核心靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG信號通路和GO功能富集分析，結(jié)果以P值升序排列。

2 結(jié)果

2.1 專利檢索統(tǒng)計(jì)與分析 通過檢索國家專利數(shù)據(jù)庫，共獲得專利項(xiàng)目220項(xiàng)，納入符合標(biāo)準(zhǔn)的共175項(xiàng)。175項(xiàng)專利涉及藥物576味，納入中藥復(fù)方中最多藥味數(shù)為40，最少的藥味數(shù)為3，用藥頻次總計(jì)2 174次。其中使用頻率≥10次的藥物共49味，占總使用頻次的52.94%，見表1。使用頻次及頻率排在前10位的藥物為甘草、黃連、白術(shù)、黃芪、白及、白芍、黨參、白頭翁、地榆、木香。對頻次≥10次的藥物進(jìn)行功效類別分析，發(fā)現(xiàn)各中藥類別使用頻率排名前3位的為：補(bǔ)虛藥、清熱藥和止血藥，見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。療效上多可補(bǔ)氣健脾、清熱解毒、止血、理氣，該用藥特點(diǎn)與中醫(yī)理論對“久痢”的基本病機(jī)“脾氣虛弱、濕熱蘊(yùn)腸”相符。

表1 175項(xiàng)治療潰瘍性結(jié)腸炎中藥復(fù)方專利高頻藥物（≥10次）Tab.1 The 175 traditional Chinese medicine compound patent high-frequency drugs for the treatment of ulcerative colitis(≥10 times)

2.2 關(guān)聯(lián)規(guī)則與聚類分析 將49味高頻藥物導(dǎo)入IBM SPSS Modeler 18.0軟件中，基于Apriori算法對高頻藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，設(shè)定最低條件支持度百分比≥7，最小規(guī)則置信度百分比≥70，提升度＞1，得出中藥專利復(fù)方治療UC在組方配伍時同時出現(xiàn)且頻率較高的藥對、藥組。關(guān)聯(lián)規(guī)則結(jié)果以“后項(xiàng)→前項(xiàng)”展示，按支持度由高到低排序。

1）設(shè)定最大前項(xiàng)數(shù)為1，進(jìn)行中藥專利復(fù)方治療UC藥物關(guān)聯(lián)二階分析，詳見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。結(jié)果顯示二階關(guān)聯(lián)規(guī)則中支持度最高的為甘草-陳皮。2）設(shè)定最大前項(xiàng)數(shù)為2，進(jìn)行中藥專利復(fù)方治療UC藥物關(guān)聯(lián)三階分析，詳見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。結(jié)果顯示三階關(guān)聯(lián)規(guī)則中支持度最高的為黃連-木香-甘草。3）根據(jù)數(shù)據(jù)挖掘結(jié)果，繪制高頻藥物關(guān)聯(lián)規(guī)則web可視化布局圖。通過線條粗細(xì)來表示藥物配伍關(guān)系的強(qiáng)弱，線條越粗，藥物之間的配伍關(guān)系越強(qiáng)，結(jié)果如圖2所示。4）運(yùn)用IBM SPSS Statistics 24軟件中的組間聯(lián)接聚類算法，對上述49味高頻藥物進(jìn)行聚類分析，結(jié)果見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。

圖2 高頻藥物關(guān)聯(lián)規(guī)則web可視化布局圖Fig.2 Web visual layout diagram of high-frequency drug association rules

2.3 高頻核心藥物作用化合物及靶點(diǎn) 根據(jù)表1，選取頻次排名前6位中藥（甘草、黃連、白術(shù)、黃芪、白及、白芍）為治療UC的高頻核心藥物，該核心藥物與“2.2關(guān)聯(lián)規(guī)則與聚類分析”中所得結(jié)果基本相同。綜合文獻(xiàn)報(bào)道以及各數(shù)據(jù)庫檢索篩選收集所得的結(jié)果，高頻核心藥物的作用化合物及對應(yīng)靶點(diǎn)蛋白數(shù)目見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。其中甘草89種，黃連13種，白術(shù)4種，黃芪18種，白及8種，白芍8種，去除重復(fù)后總計(jì)獲得129個化合物，涉及相關(guān)作用靶點(diǎn)931個。

2.4 UC疾病潛在靶點(diǎn) 經(jīng)GeneCards數(shù)據(jù)庫檢索，得到UC相關(guān)靶點(diǎn)4 837個，按相關(guān)性得分≥10選取后得到186個潛在靶點(diǎn)。在OMIM和Drugbank數(shù)據(jù)庫中分別找到UC相關(guān)靶點(diǎn)182和78個。三者相加即為UC潛在靶點(diǎn)，去除重復(fù)基因，共得到376個疾病靶點(diǎn)。

2.5 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及核心靶點(diǎn)篩選 將高頻核心藥物化學(xué)成分的931個靶點(diǎn)與UC潛在靶點(diǎn)取交集，查找治療靶點(diǎn)共111個，見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。將111個蛋白導(dǎo)入STRING平臺進(jìn)行蛋白互作網(wǎng)絡(luò)可視化，見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。根據(jù)自由度篩選得到23個核心作用靶點(diǎn)，見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。

2.6 構(gòu)建中藥復(fù)方專利高頻核心藥物-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò) 將中藥復(fù)方專利高頻核心藥物6個單味中藥、涉及的129個化合物成分、111個治療靶點(diǎn)和1個UC疾病信息導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0軟件繪制中藥-成分、成分-疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。如圖3所示，網(wǎng)絡(luò)圖共涉及241個節(jié)點(diǎn)和1 400條邊。網(wǎng)絡(luò)模型中節(jié)點(diǎn)的面積越大代表該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的連接度越高。其中八邊形節(jié)點(diǎn)表示單味高頻核心藥物，六邊形節(jié)點(diǎn)表示化合物成分，菱形節(jié)點(diǎn)表示核心靶點(diǎn)，三角形代表潰瘍性結(jié)腸炎疾病。

圖3 高頻核心藥物-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖Fig.3 Network diagram of high-frequency core drugs-components-treatment targets-diseases

2.7 KEGG通路和GO富集分析 將23個核心作用靶點(diǎn)導(dǎo)入KOBAS 3.0網(wǎng)站，通過“KEGG通路富集分析”模塊，得到KEGG通路總計(jì)164條。排名靠前的通路主要有糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化產(chǎn)物（AGE）-晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）信號通路、白介素（IL）-17信號通路、炎癥性腸?。↖BD）信號通路、t細(xì)胞受體信號通路、輔助性T細(xì)胞17（Th17）細(xì)胞分化信號通路等，按P值對排名前20名的通路途徑進(jìn)行展示，繪制富集分析氣泡圖，見圖4。將前20條關(guān)鍵通路和23個核心靶點(diǎn)信息導(dǎo)入Cytoscape軟件繪制關(guān)鍵通路-靶點(diǎn)信息網(wǎng)絡(luò)圖。如圖5所示，網(wǎng)絡(luò)圖共涉及42個節(jié)點(diǎn)和236條邊。網(wǎng)絡(luò)模型中節(jié)點(diǎn)的面積越大代表該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的連接度越高。其中正方形表示關(guān)鍵通路，圓形表示核心靶點(diǎn)。

圖4 高頻核心藥物主要靶標(biāo)基因調(diào)控的相關(guān)通路富集分析氣泡圖Fig.4 Bubble diagram for enrichment analysis of relevant pathways for regulation of main target genes of high-frequency core drugs

圖5 高頻核心藥物治療UC關(guān)鍵通路-核心靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖Fig.5 Network diagram of key pathways-core targets of high-frequency core drugs in the treatment of UC

同時將這23個核心作用靶點(diǎn)蛋白導(dǎo)入Metascape平臺進(jìn)行GO生物過程、細(xì)胞組分以及分子功能富集分析，總計(jì)獲得716條生物過程條目，13條細(xì)胞組分條目，31條分子功能條目。根據(jù)P值進(jìn)行排序，繪制富集分析氣泡圖，見開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）。

3 討論

根據(jù)UC的臨床表現(xiàn)和病變特點(diǎn)，歸屬于中醫(yī)“泄瀉”“久痢”“滯下”等范疇，發(fā)病基礎(chǔ)為素體脾氣虛弱，感受外邪、飲食不節(jié)（潔）、情志失調(diào)為發(fā)病誘因，辨證分型為：大腸濕熱、熱毒熾盛、脾虛濕蘊(yùn)證等，治療總以清熱化濕、健脾益氣為主[3]。目前治療UC多采用分期治療，活動期主要以清熱化濕、調(diào)氣和血為主，臨床多運(yùn)用黃連、黃柏、白及、白芍等藥物，緩解期主要以健脾益氣為主，臨床多運(yùn)用黨參、黃芪、白術(shù)、甘草等藥物。

研究共納入175項(xiàng)國家專利數(shù)據(jù)庫中治療UC的中藥復(fù)方專利，包含576味藥物，通過藥物頻次分析可知治療UC的高頻藥物共有49味，其中使用頻率排在前6位的中藥分別是：甘草、黃連、白術(shù)、黃芪、白及、白芍。甘草具有補(bǔ)益脾氣、清熱解毒的功效，發(fā)揮抗菌、抗炎、抗?jié)兊榷喾N藥理作用[24]。黃連具有清熱燥濕、瀉火解毒的功效，發(fā)揮抗菌、抗病毒、抗?jié)兊榷喾N藥理作用，現(xiàn)代研究表明：黃連素、黃連提取物小檗堿、黃連總生物堿、黃連水煎液等對UC具有較好的保護(hù)作用[25-30]。白術(shù)具有健脾益氣、燥濕利水的功效，發(fā)揮抗炎、調(diào)節(jié)消化系統(tǒng)等多種藥理作用[31]。黃芪具有補(bǔ)氣升陽、托毒排膿、斂瘡生肌的功效，發(fā)揮抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗纖維化等多種藥理作用[32]。白及具有收斂止血、消腫生肌的功效，發(fā)揮抗菌、抗炎、促進(jìn)創(chuàng)傷愈合等多種藥理作用[33]。白芍具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗的功效，發(fā)揮抗炎、抗氧化等多種藥理作用[34]。6味高頻核心藥物與臨床治療UC藥物一致，黃連、白及、白芍以清熱化濕、調(diào)氣和血為主，黃芪、白術(shù)、甘草以健脾益氣為主。

根據(jù)高頻藥物類別分析，結(jié)果顯示占據(jù)前3類的是補(bǔ)虛藥、清熱藥和止血藥，這與高頻核心藥物前6位分布一致。在治療UC的專利復(fù)方中，常以補(bǔ)虛藥為主，清熱藥和止血藥為輔。根據(jù)高頻藥物聚類分析共得出7個聚類組合，聚3類：黃柏、秦皮、白頭翁、黃連、木香、黨參、白術(shù)、茯苓、白芍、陳皮、防風(fēng)等，藥物組合以清熱解毒藥為主，補(bǔ)虛藥、理氣藥、止血藥為輔。從這類藥物組合來看，可視為白頭翁湯、痛瀉要方與參苓白術(shù)散化裁而來，其功擅清熱解毒、活血止痢、健脾益氣、化濕止瀉，適用于UC熱毒熾盛、肝郁脾虛和脾虛濕阻者。由此得出治療UC的專利復(fù)方尤注重健脾益氣、清熱解毒、化濕止瀉。

選取6味高頻核心藥物，通過在線數(shù)據(jù)庫共篩選出129個化合物，涉及相關(guān)作用靶點(diǎn)931個，挖掘出治療靶點(diǎn)111個、核心靶點(diǎn)23個，構(gòu)建了治療靶點(diǎn)蛋白互作關(guān)系網(wǎng)絡(luò)及高頻核心藥物-成分-治療靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖，將核心靶點(diǎn)導(dǎo)入KOBAS 3.0網(wǎng)站和Metascape平臺進(jìn)行分析，得到KEGG通路共164條，GO生物過程716條，GO細(xì)胞組分13條，GO分子功能31條。

分析蛋白互作關(guān)系網(wǎng)絡(luò)可知，高頻核心藥物治療UC的核心靶點(diǎn)包括信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（SATA3）、腫瘤壞死因子（TNF）、IL-6、IL-1β、絲氨酸/蘇氨酸激酶 1（AKT1）、JUN、腫瘤蛋白 P53（TP53）等。STAT3介導(dǎo)細(xì)胞對生長因子的反應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄的激活，與IL-6、JAK2共同調(diào)控免疫與炎癥反應(yīng)，研究表明：中藥調(diào)控IL-6/JAK2/STAT3信號通路，抑制炎癥介質(zhì)與細(xì)胞因子的活化，防治UC具有良好療效[35-36]。TNF-α是炎癥性腸病病理進(jìn)程中的關(guān)鍵細(xì)胞因子，可表達(dá)黏附分子、凝血因子，啟動細(xì)胞毒性和凋亡等過程，中藥可顯著降低TNF-α水平，緩解UC的發(fā)生發(fā)展[37-38]。IL-1β與TNF-α同為促炎因子，主要由單核-巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生，可促進(jìn)B細(xì)胞分化和分泌抗體，進(jìn)一步刺激T細(xì)胞分化IL-2和干擾素γ的產(chǎn)生，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，多種中藥復(fù)方可顯著降低IL-1β水平，促進(jìn)黏膜組織修復(fù)[39-40]。TP53是與腫瘤相關(guān)的一種抑癌基因，其編碼產(chǎn)生的p53蛋白與細(xì)胞周期的調(diào)控、細(xì)胞凋亡和衰老等相關(guān)，通過抑制細(xì)胞的生長，從而預(yù)防癌癥的發(fā)生發(fā)展[41-42]。這些核心蛋白靶點(diǎn)主要參與了免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng)等過程。

結(jié)合KEGG通路和GO功能富集分析結(jié)果表明，高頻核心藥物可能通過AGE-RAGE、IL-17、IBD、Th17細(xì)胞分化等信號通路發(fā)揮作用，核心靶點(diǎn)蛋白主要參與了細(xì)胞遷移的正向調(diào)節(jié)、細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號通路、細(xì)胞間黏附的正向調(diào)節(jié)、細(xì)胞活化、炎癥反應(yīng)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復(fù)合物、細(xì)胞因子受體結(jié)合等過程，從而影響UC的發(fā)生發(fā)展，起到治療UC的作用。IL-17是由Th17產(chǎn)生的炎癥因子，可促進(jìn)T細(xì)胞的激活和刺激細(xì)胞間黏附分子1（ICAM-1），進(jìn)而引發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)[43]；調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）屬CD4+T細(xì)亞群，分泌IL-10，誘導(dǎo)和維持機(jī)體的免疫耐受，在人體自身免疫平衡中扮演重要角色，調(diào)節(jié)兩者保持動態(tài)平衡，共同維持腸黏膜免疫穩(wěn)態(tài)[44-45]。這與課題組的前期研究結(jié)果一致，黃連主要成分小檗堿通過調(diào)節(jié)結(jié)腸中的腸道微生物群來調(diào)節(jié)Treg/Th17平衡以治療UC[27]。

但本研究仍存在一定局限性，基于專利數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)挖掘方法僅簡單地統(tǒng)計(jì)分析出用藥頻次，未能充分考慮中醫(yī)辨證論治的特點(diǎn)，且部分專利的藥物用量未知，醫(yī)家的用藥經(jīng)驗(yàn)不一。此外，獲得了可能的關(guān)鍵蛋白靶點(diǎn)及其作用的信號通路，未能進(jìn)一步采用體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證其預(yù)測的準(zhǔn)確性，缺乏實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)支撐。因此，這些局限性仍需在今后的研究中進(jìn)一步完善和補(bǔ)充。

4 小結(jié)

本研究通過數(shù)據(jù)挖掘的方法對國家專利數(shù)據(jù)庫中治療UC專利復(fù)方的用藥規(guī)律進(jìn)行深入總結(jié)分析，分析其用藥特點(diǎn)和配伍規(guī)律，選取高頻核心藥物，借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選主要活性成分和核心作用靶點(diǎn)，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)、中藥-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)和信號通路的富集分析，初步闡明高頻核心藥物多組分、多靶點(diǎn)治療UC特點(diǎn)，為臨床醫(yī)師遣方用藥提供了一定理論依據(jù)，也為中藥治療UC的基礎(chǔ)研究提供了預(yù)測思路。