杜鵑蘭化學(xué)成分及其生物活性研究

李玉鵬 ，陳興龍 ，袁盛興 ，陳亞娟 ，張榮平 1,

（1）昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院暨云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500;2）云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南省南藥可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500;3）曲靖市第一人民醫(yī)院超聲科，云南 昆明 655000;4）昆明醫(yī)科大學(xué)康復(fù)學(xué)院，云南 昆明 650500）

杜鵑蘭 [Cremastra appendiculata（D.Don）Makino] 為蘭科杜鵑蘭屬植物，該屬植物僅有2 種，另一種為斑葉杜鵑蘭[Cremastra unguiculata（Finet）Finet in Bull ]。杜鵑蘭生于林下濕地或溝邊濕地上，海拔500～2900 m。分布于中國、尼泊爾、不丹、錫金、印度、越南、泰國和日本[1]。國內(nèi)外學(xué)者從該藥用植物分離得到菲類、二氫菲類、聯(lián)芐類、二聚菲、菲醌等結(jié)構(gòu)類型的化合物，藥理研究表明所得化合物具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤活性[2]。為發(fā)現(xiàn)新的活性化合物，筆者對其進(jìn)行了化合物的分離、結(jié)構(gòu)鑒定和化合物生物活性篩選。

1 材料與方法

1.1 研究材料

核磁共振儀: Bruker ASENDAVIIIHD 600 MHz（TMS 為內(nèi)標(biāo)），N-1100 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，葡聚糖凝膠 Sephadex LH-20（20～80 μm，Pharmacia Uppsala），柱層析硅膠（80～100 目，200～300 目，青島海洋化工廠），高效薄層層析硅膠G 板，HPLC（RP-18）半制備柱（10 min×250 mm，YMCPack ODS），有機(jī)溶劑均為工業(yè)純，重蒸后使用；顯色劑為10%硫酸乙醇溶液。三種腫瘤細(xì)胞株A549、MCF-7/S、SKOV-3 由昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院提供，SKOV-3 培養(yǎng)于McCoy’s 5A Medium Modified 含10% Fetal Bovine Serum FBS（premium grade，USA），A549、MCF-7/S 均培養(yǎng)于ATCCformulated RPMI-1640 Medium 含10% Fetal Bovine Serum FBS（premium grade，USA）。

1.2 植物來源

杜鵑蘭藥材于2019 年5 月由昆明植分公司婁安瑞先生采自四川樂山，植物學(xué)名經(jīng)昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院陸露研究員鑒定。標(biāo)本（編號：20190525）保存在昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院。

1.3 研究方法

1.3.1 提取與分離方法杜鵑蘭假鱗莖，切片、陰干（7.53 kg），經(jīng)95%的乙醇提取3 次。將提取液在減壓下濃縮，得到褐色浸膏，加水溶解，經(jīng)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到乙酸乙酯萃取部分為（165.71 g）。將該部分浸膏以80～100 目硅膠拌樣，樣品經(jīng)硅膠柱層析，混合溶劑體系石油醚/ 乙酸乙酯（100∶0、90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、0∶1）洗脫，薄層檢測合并為7 個(gè)部分（Fr.1～7）。

Fr.2（5.90 g）經(jīng)硅膠柱層析，石油醚/EtOAc（25∶1、15∶1、10∶1、5∶1、0∶1）梯度洗脫，薄層檢測合并為5 個(gè)部分（Fr.2.1～2.5），F(xiàn)r.2.1（1.1g）經(jīng)凝膠柱層析（CHCl3/CH3OH 10:90）得到3個(gè)化合物2（15.0 mg），3（7.3 mg）；Fr.2.2（0.5 g）經(jīng)制備薄層層析得到化合物4（7.6 mg）；Fr.2.3（0.7 g）經(jīng)半制備HPLC 得到化合物5（11.5 mg），6（6.5 mg）；Fr.2.5（0.3g）經(jīng)凝膠柱層析（CH3OH/H2O，90∶10）得到化合物1（10.5 mg）。

Fr.3（16.52 g）經(jīng)RP-18 柱色譜（CH3OH/H2O 7∶3），硅膠柱層析CHCl3/ EtOAc（25∶1、20∶1、15∶1、10∶1、5∶1、1∶1、0∶1），薄層檢測合并為3 個(gè)部分（Fr.3.1～3.3），F(xiàn)r.3.1（2.3 g）經(jīng)硅膠柱層析CHCl3/ 丙酮（15∶1）得到化合物7（25.7 mg）和化合物37（31.3 mg）；Fr.3.2（0.52 g）經(jīng)HPLC（CH3OH/H2O，65∶35），得到化合物8（39.8 mg）；Fr.3.3（8.2 g）經(jīng)硅膠柱層析（氯仿/丙酮10∶1）洗脫，經(jīng)Sephadex LH-20（CH3OH/CHCl3，10∶1）進(jìn)行純化，得到化合物9（9.2 mg），10（8.5 mg），11（9.3 mg），12（30.1 mg）。

1.3.2 抗腫瘤活性篩選方法A549、MCF-7/S 細(xì)胞接種于含10%FBS 的RPMI-1640 培養(yǎng)液中，SKOV-3 細(xì)胞接種于含10%FBS 的McCoy’s 5A 培養(yǎng)液中，均在37 ℃，95%濕度，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，1～2 d 傳代1 次，調(diào)整細(xì)胞濃度不超過6×104/mL，取指數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。用MTT 法檢測化合物對A549、MCF-7/S、SKOV-3細(xì)胞增殖的抑制作用。取對數(shù)生長期的A549、MCF-7/S、SKOV-3 細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為6×104/mL，加入96 孔培養(yǎng)板（使其終濃度為6×103/100 μL），接種細(xì)胞之后靜置1 h 再放入細(xì)胞培養(yǎng)箱（避免96 孔板的邊緣效應(yīng)）。24 h 細(xì)胞貼壁之后再加化合物7～12 使其終濃度為200，100，50，25，12.5，6.25 μmol/L，每個(gè)濃度設(shè)5個(gè)平行孔，并設(shè)陽性、陰性、空白及DMSO 對照孔，在37 ℃，95%濕度，5%CO2培養(yǎng)箱中孵育48 h 后加入MTT 20 μL，繼續(xù)孵育4 h 后，以570 nm、630 nm 雙波長檢測OD 值。按公式計(jì)算不同濃度的OD 值均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差，再計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，減少誤差。

2 結(jié)果

2.1 化合物波譜數(shù)據(jù)

化合物1 bisbenzopyran：白色晶體，MF:C14H10O2，MW：210;1HNMR（CD3OD，600 MHz）:δ4.23（2H，dd，J=9.0，6.8 Hz，H-2a，H-2a′），3.84（2H，dd，J=9.0，6.5 Hz，H-2e，H-2e′），3.04（2H，m，H-3，H-3′），4.70（2H，d，J=4.2 Hz，H-4，H-4′），6.95（2H，d，J=1.8Hz，H-5，H-5′），6.80（2H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-7，H-7′），6.82（2H，dd，J=8.0 Hz，H-8，H-8′），3.86（6H，s，-OCH3）.13C NMR（CD3OD，150 MHz）：δC71.2（t，C-2，C-2′），53.9（d，C-3，C-3′），86.1（d，C-4，C-4′），114.4（d，C-5，C-5′），147.7（s，C-6，C-6′），118.6（d，C-7，C-7′），109.6（d，C-8，C-8′），145.9（s，C-9，C-9′），132.4（s，C-10，C-10′），55.0（q，6，6′-OCH3），其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

化合物2（22E）-ergosta-6，22-dien-3β，5α，8α-triol：黃色固體，MF：C28H46O3，ESI-MS m/z：431 [M+H]+.1HNMR（CDCl3）：δ6.61（1H，d，J=8.3 Hz，H-7），6.25（1H，d，J=8.3 Hz，H-6），5.20（1H，m，H-23），5.18（1H，m，H-22），2.10 and 1.91（2H，m，CH2-4），2.04（1H，m，H-24），2.03（1H，m，H-2β），1.94（1H，m，H-2α），1.86（1H，m，H-20），1.76 and 1.58（2H，m，CH2-12），1.68（1H，m，H-1β），1.61（2H，m，CH2-11），1.58（1H，m，H-9），1.48（1H，m，H-25），1.34（1H，m，CH2-16），1.25（1H，m，H-2α），1.22（2H，m，CH2-15），1.21（1H，m，H-14），1.09（3H，d，J=6.3 Hz，CH3-28），0.92（3H，d，J=6.1 Hz，CH3-21），0.90（3H，s，CH3-19），0.84（3H，d，J=6.5 Hz，CH3-26），0.82（3H，s，CH3-18），0.81（3H，d，J=6.5 Hz，CH3-27）.13CNMR（CDCl3）：δ33.4（t，C-1），30.5（t，C-2），66.8（d，C-3），39.7（t，C-4），82.5（s，C-5），135.8（d，C-6），131.1（d，C-7），79.8（s，C-8），51.5（d，C-9），37.3（s，C-10），20.3（t，C-11），37.3（t，C-12），44.9（s，C-13），51.5（d，C-14），23.8（t，C-15），29.0（t，C-16），56.7（d，C-17），13.2（q，C-18），18.5（q，C-19），40.0（d，C-20），20.3（q，C-21），135.6（d，C-22），131.1（d，C-23），43.2（d，C-24），33.4（d，C-25），20.0（q，C-26），21.0（q，C-27），17.9（q，C-28）。

化合物3 3β-hydroxy-cholesta-5-ene:白色晶體，MF：C27H46O，ESI-MS m/z：389 [M+H]+.1HNMR（CDCl3）：δ5.35（1H，s，H-6），3.54（1H，m，H-3），1.01（3H，s，H-19），0.81～0.92（9H，m，3×CH3），0.68（3H，s，18-CH3）.13CNMR（CDCl3）：δ37.3（t，C-1），31.7（t，C-2），71.8（d，C-3），42.3（t，C-4），140.8（s，C-5），121.7（d，C-6），31.9（t，C-7），31.9（s，C-8），50.2（d，C-9），36.5（s，C-10），21.1（t，C-11），39.8（t，C-12），42.3（s，C-13），56.8（d，C-14），24.3（t，C-15），28.2（t，C-16），56.1（d，C-17），12.0（q，C-18），19.1（q，C-19），36.2（d，C-20），18.8（q，C-21），29.2（t，C-22），23.1（t，C-23），39.8（t，C-24），28.2（d，C-25），23.1（q，C-26），23.1（q，C-27）。

化合物4：β-sistosterol 白色針狀晶體，易溶于氯仿。與標(biāo)準(zhǔn)品β-sistosterol 共薄層層析，在三種溶劑系統(tǒng)均顯一個(gè)點(diǎn)，Rf與β-谷甾醇基本一致。

化合物5 Pinoresinol :白色固體，C20H22O6，1HNMR（CD3OD，600 MHz）:δ6.95（2H，s，H-2′，H-2′′），6.81（2H，d，J=8.0 Hz，H-6′，H-6′′），6.77（2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，H-H-5′′），4.70（2H，d，J=4.2 Hz，H-2，H-6），4.22（2H，dd，J=9.0，6.8 Hz，Hb-4，H-8），3.87（6H，s，-OCH3），3.86（2H，dd，J=9.3，3.7 Hz，Ha-4，H-8），3.03（2H，m，H-1，H-5）.13CNMR（CD3OD，150 MHz）:δ147.7（s，C-3′，C-3′′），145.9（s，C-4′，C-4′′），132.4（s，C-1′，C-1′′），118.6（d，C-6′，C-6′′），114.4（d，C-5′，C-5′′），109.6（d，C-2′，C-2′′），86.1（d，C-2，C-6），71.2（t，C-4，C-8），55.0（d，C-3′，C-3′′）。

化合物6 5，4′-dihydroxy-7-（4-hydroxybenzoyl）-3′ -methoxyflavone：黃色粉末，MF：C23H16O8，MW：420；EI-MS，420 [M]+；1HNMR[CD3OD，500 MHz]：δ6.90（2H，d，J=8.6，H-3′′，5′′），7.82（2H，d，J=8.6，H-2′′，6′′），6.57（1H，s，H-3），6.19（1H，s，H-6），6.44（1H，s，H-8），7.45（1H，s，H-2′），6.92（2H，d，J=8.0，H-5′），7.47（1H，d，J=8.0，H-6′），3.95（3H，s，3′-OCH3）;13CNMR [CD3OD，125 MHz]:δ166.3（s，C-2），103.8（s，C-3），183.9（s，C-4），100.1（d，C-4a），163.2（s，C-5），100.1（s，C-6），166.6（s，C-7），95.0（d，C-8），159.4（s，C-8a），123.2（s，C-1′），107.0（d，C-2′），149.1（s，C-3′），152.5（s，C-4′），117.0（d，C-5′），121.7（d，C-6′），117.5（s，C-1′′），129.4（d，C-2′′，6′′），117.0（d，C-3′′，5′′），162.8（s，C-4′′），166.3（s，C-7′′），64.1（q，3′-OCH3），其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

化合物7 4-methoxy-2，3，7-trihydroxyphenanthrene：白色粉末，MF：C15H12O4，MW：256；ESI-MS：m/z 257[M+H]+，1HNMR [（CD3）2CO，600 MHz]：δ7.12（1H，s，H-1），9.38（1H，d，J=9.3，H-5），7.20（1H，d，J=9.3，2.8，H-6），7.29（1H，d，J=2.8，H-8），7.98（1H，d，J=8.7，H-9），7.29（1H，d，J=8.7，H-10），4.07（3H，s，4-OCH3）；13CNMR [（CD3）2CO，125MHz]：δ107.9（d，C-1），155.2（s，C-2），153.2（s，C-3），156.7（s，C-4），121.0（s，C-4a），124.4（s，C-4b），129.1（d，C-5），115.8（d，C-6），159.2（s，C-7），115.9（d，C-8），133.2（s，C-8a），127.3（d，C-9），125.1（d，C-10），125.1（s，C-10a），54.2（q，3-OCH3）。

化合物8 2-hydroxy-4，7-dimethoxyphenanthrene：紫色固體，MF：C16H14O3，MW：254；ESI-MS：m/z 255[M+H]+，1HNMR [（CD3）2CO，600 MHz]：δ9.44（1H，d，J=9.4，H-5），7.64（1H，d，J=8.7，H-9），7.57（1H，d，J=8.7，H-10），7.32（1H，d，J=2.8，H-8），7.19（1H，d，J=9.4，2.8，H-6），6.94（1H，d，J=1.9，H-1），6.85（1H，d，J=1.9，H-3），4.11（3H，s，4-OCH3），3.95（3H，s，7-OCH3）；13CNMR [（CD3）2CO，125MHz]：δ159.5（s，C-4），156.7（s，C-2），155.5（s，C-7），134.8（s，C-10a），133.1（s，C-8a），129.0（d，C-5），127.7（d，C-9），127.1（d，C-10），125.0（s，C-4b），116.2（d，C-6），114.7（s，C-4a），108.7（d，C-8），104.6（d，C-1），99.5（d，C-3），55.1（q，4-OCH3），54.6（q，7-OCH3），其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

化合物9 4，4′-dimethoxy-[1，1′-biphenanthrene] 2，2′，7，7′-tetrol：紅色油狀物，MF：C30H22O6，MW: 478;ESI-MS：m/z 479 [M+H]+，1HNMR [CD3OD，600 MHz]:δ9.49（2H，d，J=9.30，H-5，5′），7.14（2H，dd，J=9.30，2.7，H-6，6′），7.33（2H，d，J=9.2，H-9，9′），7.03（1H，d，J=9.2，H-10，10′），7.01（2H，s，H-3，3′），7.09（2H，d，J=2.7，H-8，8′），4.18（6H，s，4，4′-OCH3）;13CNMR [（CD3）2CO，125MHz]:δ110.1（d，C-1，1′），159.2（s，C-2，2′），99.0（d，C-3，3′），153.2（s，C-4，4′），115.6（s，C-4a，4a′），124.4（s，C-4b，4b′），129.1（d，C-5，5′），110.7（d，C-6，6′），154.0（s，C-7，7′），115.9（d，C-8，8′），133.2（s，C-8a，8a′），127.1（d，C-9，9′），124.6（d，C-10，10′），134.1（s，C-10a，10a′），54.7（q，4，4′-OCH3），其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

化合物10 4，7，4′，9′-tetramethoxy-[1，1′-biphenanthrene]2，2′，7，7′-tetrol :紅色油狀物，MF: C32H26O8，ESI-MS: m/z 537[M-H]+;1HNMR[（CD3）2CO，600 MHz]:δ6.95（1H，s，H-3），9.32（1H，d，J=9.4，H-5），7.20（1H，dd，J=9.4，2.4，H-6），7.76（1H，d，J=2.4，H-8），6.94（1H，s，H-10），4.15（3H，s，4-OCH3），3.84（3H，s，9-OCH3），7.03（1H，s，H-3′），9.25（1H，s，H-5′），7.24（1H，s，H-8′），7.39（1H，d，J=8.6，H-9′），7.01（1H，d，J=8.6，H-10′），4.24（3H，s，4′-OCH3），4.07（3H，s，6′-OCH3）;13CNMR [（CD3）2CO，150 MHz]:δ109.3（s，C-1），159.4（s，C-2），99.2（d，C-3），159.5（s，C-4），115.5（s，C-4a），125.4（s，C-4b），127.2（d，C-5），122.4（d，C-6），159.4（s，C-7），109.0（d，C-8），127.1（s，C-8a），154.2（s，C-9），101.0（d，C-10），134.6（s，C-10a），55.2（q，4-OCH3），55.1（q，9-OCH3），111.3（s，C-1′），150.0（s，C-2′），99.7（d，C-3′），159.4（s，C-4′），120.7（s，C-4a′），124.9（s，C-4b′），109.3（d，C-5′），147.7（s，C-6′），145.2（s，C-7′），111.3（d，C-8′），127.1（s，C-8a′），126.7（d，C-9′），124.5（d，C-10′），134.2（s，C-10a′），60.5（q，4′-OCH3），55.3（q，6′-OCH3）。

化合物 11 Bavachinine: 黃色粉末，MF:C21H22O4，MW: 338; ESI-MS，361 [M+Na]+;1HNMR [CDCl3，500 MHz]:δ7.30（2H，d，J=8.0，H-3′，5′），6.91（2H，d，J=8.0，H-2′，6′），7.67（1H，s，H-5），6.43（1H，s，H-8），5.36（1H，dd，J=13.0，3.0，H-2），5.27（1H，m，H-12），3.23（2H，d，J=7.5，H-11），3.03（1H，dd，J=17.0，，13.5，H-3a），2.78（1H，d，J=17.0，3.0，H-3b），1.72（3H，s，H-14），1.68（1H，s，H-15），3.85（3H，s，7-OCH3）;13CNMR [CDCl3，125 MHz]:δ80.2（d，C-2），44.3（t，C-3），192.6（s，C-4），127.5（d，C-5），125.5（s，C-6），164.9（s，C-7），99.3（d，C-8），163.1（s，C-9），114.2（s，C-10），28.2（t，C-11），122.1（d，C-12），133.5（s，C-13），18.1（q，C-14），26.2（q，C-15），130.8（s，C-1′），128.3（d，C-2′，6′），116.2（d，C-3′，5′），157.2（s，C-4′），其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

化合物12 3-hydroxy-phenpropionic acid-（2′-methoxy-4′-carboxy-phenol）ester ：紅色晶體，MF:C17H16O6，MW: 316;ESI-MS: m/z 317[M+H]+;1HNMR [（CD3）2CO，600 MHz]:δ6.69（1H，M，H-2），6.61（1H，dd，J=7.9，1.9，H-4），6.93（1H，t，J=7.9，H-5），6.91（2H，m，H-6），2.79（2H，t，J=8.0，H-7），2.06（2H，t，J=8.0，H-8），7.60（1H，s，H-3′），7.57（1H，d，J=8.0，H-5′），6.92（1H，d，J=8.0，H-6′），3.93（3H，s，2′-OCH3）;13CNMR [（CD3）2CO，125MHz]:δ143.2（s，C-1），115.1（d，C-2），161.7（s，C-3），112.6（d，C-4），130.0（d，C-5），119.5（d，C-6），29.3（t，C-7），37.7（t，C-8），170.0（s，C-9），151.2（s，C-1′），147.2（d，C-2′），114.6（d，C-3′），122.0（s，C-4′），124.0（d，C-5′），115.1（d，C-6′），54.4（q，2′-OCH3），166.7（s，-COOH）。

2.2 化合物7～12 抗腫瘤活性篩選結(jié)果

對化合物7～12 進(jìn)行了人體肺癌細(xì)胞株（A549）、人體乳腺癌藥物敏感細(xì)胞株（MCF-7/S）、人體卵巢癌細(xì)胞株（SKOV-3）抑制活性，見表1。

表1 化合物7～12 對3 種細(xì)胞株的細(xì)胞毒活性IC50（μmol/L）Tab.1 Cytotoxic activities of compounds 7～12 on three cell lines IC50（μmol/L）

研究結(jié)果如上表，研究發(fā)現(xiàn)化合物9 和10對MCF-7/S 細(xì)胞株顯示了很好的抑制活性，其IC50分別為2.16，5.09 μmol/L，以上作用強(qiáng)于陽性對照品DDP。

3 討論

藥用植物杜鵑蘭分離鑒定化合物結(jié)構(gòu)類型為：化合物1 為吡喃酮類二聚體[3]，化合物3～4 為甾體化合物[4?8]，化合物5 為木脂素類化合物[9]，化合物6 為黃酮類化合物[10]，化合物7～10 為菲類化合物[7?15]，化合物11 為二氫黃酮類化合物[16?17]，化合物12 為酯類化合物[16?17]?？鼓[瘤活性測試結(jié)果表明化合物9 和10 對MCF-7/S 細(xì)胞株顯示了很好的抑制活性。該研究為杜鵑蘭的開發(fā)和利用提供了基礎(chǔ)研究。

近年來，國內(nèi)學(xué)者Wang Y 等[18]從杜鵑蘭中分離得到化合物Blestriarene A，Blestriarene B，使用 MTT 方法評估化合物對 A549 和 Bel7402 細(xì)胞系的細(xì)胞毒性，以bufalin 作為陽性對照。在檢測的化合物中，兩個(gè)化合物對A549 細(xì)胞株表現(xiàn)出較弱的細(xì)胞毒活性（IC50分別為47.5、48.2 l M）。劉量等[19]從杜鵑蘭分離出5 種新的雙菲cremaphenanthrenes A-E 以及6 個(gè)已知的雙菲，對所獲得的化合物都在體外測試了對結(jié)腸（HCT-116）、宮頸（Hela）和乳腺癌（MDA-MB-231）癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性活性，所得二聚菲化合物均對三種細(xì)胞株表現(xiàn)出中等或弱的細(xì)胞毒性?！吨袊幍洹分惺蛰d的中藥材山慈菇，為蘭科植物杜鵑蘭、獨(dú)蒜蘭或云南獨(dú)蒜蘭的干燥假鱗莖。隨著對山慈菇及其提取物生物活性研究的不斷深入，其抗腫瘤、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)、抗菌、抗痛風(fēng)、降脂降糖、提高造血功能及增強(qiáng)免疫等藥理作用受到廣泛關(guān)注；山慈菇還常與其他中藥組成復(fù)方，在呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等疾病的治療方面療效確切，具有很好的臨床應(yīng)用前景[20～22]。